全 文 ：·制剂与技术· 2013 年 2月第 10卷第 5期
中国医药导报 CHINA MEDICAL HERALD
云南雪胆 （Hemsleya sinesis Cogn of Yunnan）为葫芦
科（Cucurbitane）雪胆属（Hermleya）植物的干燥块根，具有
清热 、解毒 、消肿止痛的功效，民间用来治疗肝炎 、气管
炎、胰腺炎、慢性子宫颈炎、带状疱疹、肿瘤等 [1-5]。 云南地
不容（Stephania yunnanensis H.S.Lo）为防己科（Meniserma-
ceae）千金藤属（Stephania）植物的干燥块根，具有清热、解
毒、镇静、止痛、理气等功能，民间用于治疗风湿骨痛、胃
痛、毒蛇咬伤等 [6-7]。云南雪胆和云南地不容均为云南著名
的传统中草药，民间使用较为广泛，二者均为干燥块根，
从外形上看极其类似，很容易混淆，给人们的使用带来诸
多不变。 因此，建立一种快速检测方法，以区分两种药材
是非常必要的。
超高效液相-质谱联用（UPLC-MS）作为一种新的检测
技术，广泛用于各种分析检测领域，它可以同时获得液相
色谱和质谱图， 根据离子流信息计算出化合物的分子量，
分析各种离子碎片可以确定化合物的结构式，从而在样品
不纯时便能知道其主要成分，这对于天然产物的研究极为
重要。 本研究采用 UPLC-MS 对云南雪胆和云南地不容进
行检测， 从而建立一种鉴别两种药材的快速检测方法，为
研究和使用两种药材提供一定依据。
1 材料与仪器
云南雪胆和云南地不容药材购自云南省药材公司（分
别产自云南西双版纳和云南文山）， 经大理学院药学院周
浓副教授鉴定为葫芦科雪胆属植物雪胆 Hemsleya sinesis
Cogn of Yunnan 和防己科千金藤属植物云南地不容
Stephania yunnan ensis H.S.Lo 的干燥块根； 标准品左旋四
氢巴马汀 Tetrahydropalmatine 和雪胆甲素 Cucurbitacin Ⅱa
购于中国科学院上海药物研究所国家重点实验室；实验试
剂均为色谱纯， 实验用水为纯净水。 电子分析天平（Star-
torius CPA225D）； 液相色谱 /单极四级杆质谱仪（Waters，
ACQUITY SQD LC/MS System）；C18 反 相 柱 （Waters，AC-
QUITY UPLC BEH C18，1.7 μm，2.1 mm×100 mm）。
2 方法与结果
2.1 供试品的制备
分别将云南雪胆和云南地不容块状根粉碎，各取 5 g置
于 250 mL 茄形瓶中，加入 95%乙醇各 125 mL，于 80℃下
水浴加热 2 h，滤去残渣，分别将提取液减压蒸干至无醇味。
分别将提取物用甲醇溶解置于 10 mL 容量瓶中，加甲醇稀
释至刻度，摇匀。溶液经 0.45 μm微孔滤膜过滤，即得供试品。
2.2 UPLC 条件
检测样品采用超高效液相色谱仪 （Waters，ACQUITY
UPLC H-class core system）， 配有超高效液相紫外检测器
（Waters，ACQUITY UPLC TUV Detector）， 色谱柱采用 C18
超高效液相-质谱联用鉴定云南雪胆
和云南地不容的研究
杨 艳 1 陈旭冰 2 陈光勇 2 刘光明 2
1.云南省大理州人民医院，云南大理 671000；2.大理学院药学院，云南大理 671000
[摘要] 目的 用超高效液相-质谱联用（UPLC-MS）鉴定云南雪胆和云南地不容。 方法 通过 UPLC-MS 检测云南
雪胆和云南地不容，得到其主要成分的质谱图，通过分析各离子峰得到分子量。 结果 云南雪胆的主要成分是
雪胆甲素，云南地不容的主要成分是左旋四氢巴马汀，检测结果与文献报道结果一致，两种药材得到鉴别。 结
论 采用 UPLC-MS 检测天然产物，可以在不分离纯化的前提下，快速确定其主要成分，方法可靠，结果准确。
[关键词] 云南雪胆；云南地不容；UPLC-MS
[中图分类号] RTS254.7 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2013）02（b）-0112-02
Ultra performance liquid combined with mass spectrometry in identifica-
tion of Yunnan Hemsleya Amabilis and Stephania Yunnanensis
YANG Yan1 CHEN Xubing2 CHEN Guangyong2 LIU Guangming2
1.Dali Autonomous Prefecture People′s Hospital, Yunnan Province, Dali 671000, China; 2.School of Pharmacy, Dali
College, Yunnan Province, Dali 671000, China
[Abstract] Objective To identify Yunnan Hemsleya Amabilis and Stephania Yunnanensis by using ultra performance
liquid-mass spectrometry (UPLC-MS). Methods Through the detection of Yunnan Hemsleya Amabilis and Stephania
Yunnanensis by UPLC-MS, the mass spectrogram of their main components was obtained and the molecular weight
was obtained through analyzing each ion peak. Results The main content of Yunnan Hemsleya Amabilis was cucur-
bitacin and the main content of Stephania Yunnanensis was L-tetrahydropalmatine, which was consistent with the lit -
erature and reports, thus the two herbs had been identified. Conclusion In the detection of natural products, UPLC-
MS can quickly determine the main components under the premise of non-separation and non-purification and it is
reliable and accurate.
[Key words] Yunnan Hemsleya Amabilis; Stephania Yunnanensis; UPLC-MS
[通讯作者] 陈光勇（1974-），男，侗族，贵州剑河人，副教授，硕士生导
师，主要从事药物化学的研究。
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2013 年 2月第 10卷第 5期 ·制剂与技术·
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反相柱（Waters，ACQUITY UPLC BEH C18，1.7 μm，2.1 mm×
100 mm），柱温 45℃。 乙腈为色谱纯（Merck，gradient grade
for liquid chromatography），水为纯净水。 展开剂采用乙腈-
水，从 10%（V/V）到 100%乙腈梯度洗脱，时间为 6 min[8]。
2.3 UPLC-MS 检测
采用液质联用仪（ACQUITY SQD LC/MS System）进行
检测，单四极杆质谱检测器，ESCI 离子源，电喷雾所用气
体为氮气。
2.4 检测结果
云南雪胆和云南地不容经 UPLC-MS 检测， 结果见图
1、2。 图 1A中，所含主要成分保留时间为 2.56 min，在负离
子谱（图 2A）中观察到负离子峰如下：561.5（[M-H]-），607.5
（[M+COOH]-），1169.8（[2M+COOH]-）。 在正离子谱（图 2B）
中观察到正离子峰如下：503.4 （[M-AcO]+），1147.6 （[2M+
Na]+）。很容易确定其分子量为 562.5，与文献报道雪胆中所
含主要成分雪胆甲素的分子量一致，所以确定该药材为雪
胆。 图 1B 中，所含主要成分保留时间为 1.83 min，在正离
子谱（图 2C）中观察到离子峰如下：356.3（[M+H]+），357.3
（[M+2H]2+），确定其分子量为 355.3，与文献报道云南地不
容所含主要成分左旋四氢巴马汀的分子量一致，确定该药
材为云南地不容（云南地不容没有负离子谱）。将供试品的
保留时间、质谱图与标准品的保留时间、质谱图进行对照，
保留时间一致，质谱图一致，证明该方法准确无误。
A.云南雪胆 UPLC 图
B.云南地不容 UPLC 图
图 1 云南雪胆和云南地不容 UPLC 图
3 讨论
超高效液相色谱（ultra performance liquid chromatogra-
phy，UPLC）系指一种采用小颗粒填料色谱柱 （粒径小于
2 μm）和超高压系统（压力大于 105 kPa）的新型液相色谱
技术，能显著改善色谱峰的分离度和检测灵敏度，同时大
大缩短分析周期，因此特别适用于微量复杂混合物的分离
和高通量研究。 2004 年 3 月，Waters 公司率先推出了第一
台商品化的超高效液相色谱系统（acquity，UPLC TM）。 自
问世以来，超高效液相色谱发展很快，现已成功应用于农
药残留物检测、水质和环境监测、化妆品质量控制、药物及
制剂的分析检测和质量控制、中药复杂组分分析及代谢组
学等领域 [9-10]。 云南雪胆所含主要成分雪胆甲素的保留时
间为 2.56 min，通过负离子和正离子谱，可确认云南雪胆
的分子量为 562.5。 云南地不容主要成分左旋四氢巴马汀
的保留时间为 1.83 min，通过正离子谱，可确认其分子量
为 355.3，与相关文献报道基本一致，从而可快速对上述两
种外形较为相似的中药材进行快速鉴别。 本实验采用 U-
PLC-MS 检测云南雪胆和云南地不容， 对其主要成分的质
谱图进行分析，并对主要离子峰进行归属，确定分子量，从
而鉴别两种药材。 天然产物的品种繁多，许多药材外形极
其类似，容易混淆，采用 UPLC-MS 检测，可以在不分离纯
化的前提下，快速确定其主要成分，从而鉴定药材，方法可
靠，结果准确。
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（收稿日期：2012-10-24 本文编辑：卫 轲）
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