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中药骨碎补与混伪品普通凤丫蕨的鉴别研究



全 文 :国药鉴别
收稿日期:2015-09-26; 修订日期:2016-01-20
基金项目:河南省高等学校青年骨干教师资助项目
(No. 2011GGJS - 193);
河南牧业经济学院博士启动基金(No. 5040611)
作者简介:程茂高(1975-),男(汉族),河南光山人,河南牧业经济学院制
药工程学院实验师,硕士学位,主要从事中药资源开发与利用研究工作.
中药骨碎补与混伪品普通凤丫蕨的鉴别研究
程茂高,乔卿梅,韦小敏,杨 瑾,李苗青
(河南牧业经济学院制药工程学院,河南 郑州 450046)
摘要:目的 对中药骨碎补与其混伪品普通凤丫蕨进行对照鉴别,以期为中药骨碎补的质量控制提供参考。方法 通过从
基源鉴别、性状鉴别、显微特征和薄层色谱鉴别四个方面对骨碎补和普通凤丫蕨进行研究。结果与结论 骨碎补和普通
凤丫蕨在基源植物的叶型、叶柄,根状茎的断面特征,维管束数目与排列方式,鳞片着生方式及是否有锯齿,标识成分柚
皮苷含量等方面均存在较大差异。
关键词:骨碎补; 普通凤丫蕨; 基源鉴别; 性状鉴别; 显微鉴别; 薄层色谱鉴别
DOI标识:doi:10. 3969 / j. issn. 1008-0805. 2016. 05. 041
中图分类号:R282. 5 文献标识码:A 文章编号:1008-0805(2016)05-1132-02
骨碎补为水龙骨科植物槲蕨 Drynaria fortunei(Kunze.)J.
Sm.的干燥根茎。该药性温,味苦,具有疗伤止痛,补肾强骨,消
风祛斑(外用)等功效,常用于跌扑闪挫,筋骨折伤,肾虚腰痛,筋
骨痿软,耳鸣耳聋,牙齿松动等证的治疗[1,2]。研究表明,药材市
场上骨碎补的混伪品主要是骨碎补科植物华南骨碎补、大叶骨碎
及水龙骨科植物崖姜、中华槲蕨等植物的根茎[3 ~ 6]。笔者从一些
中药材收购市场上发现也有以普通凤丫蕨 Coniogramme interme-
dia Hieron的根状茎混入骨碎补销售的,但目前尚未见两者的真
伪鉴别研究。为此,本文将从基源鉴别、性状鉴别、显微特征和薄
层色谱鉴别四个方面对中药骨碎补与其混伪品普通凤丫蕨进行
对照鉴别,以期为中药骨碎补的质量控制提供更全面的参考依
据。
1 材料、仪器与试剂
1. 1 材料 骨碎补,购置于亳州药材市场,经鉴定为水龙骨科植
物槲蕨 Drynaria fortunei(Kunze)J. Sm. 的干燥根茎。普通风丫
蕨,采自于河南洛阳栾川县龙峪湾国家自然保护区,经鉴定为裸
子蕨科普通风丫蕨 Coniogramme intermedia Hieron。
1. 2 仪器 石蜡切片机(KD - 1508A),生物显微镜成像系统
(motic ba310 - c)等。
1. 3 试剂 58 ~ 60℃熔点的石蜡,15%氢氟酸溶液,甘油 -乙醇
固定液,番红染液,固绿溶液,I - KI溶液等,均为国产分析纯。
2 方法
采用核对文献资料,观察药材原植物的形态特征进行基源鉴
别;采用观察骨碎补和普通凤丫蕨根状茎的形状、大小、色泽、质
地、断面特征等进行性状鉴别;采用石蜡切片法和粉末鉴定法,对
骨碎补和普通风丫蕨根状茎进行组织构造对比和后含物种类对
比,并利用生物显微镜成像系统进行拍摄。以柚皮苷为对照品,
采用薄层色谱法对骨碎补和普通风丫蕨进行定性鉴别。
3 结果
3. 1 基源鉴别[7]
3. 1. 1 槲蕨 根状茎肉质粗壮,扁平长条状,有分枝,密被披针形
棕黄色鳞叶。叶二型,不育叶基生,圆形,长(2 -)5 ~ 9cm,宽(2
-)3 ~ 7cm,基部心形,浅裂至叶片宽度的 1 /3,边缘全缘,黄绿色
或枯棕色,厚干膜质。能育叶叶片长 20 ~ 45cm,宽 10 ~ 15 (-
20)cm,深羽裂到距叶轴 2 ~ 5mm处,裂片 7 ~ 13 对,互生,稍斜向
上,披针形,长 6 ~ 10cm,宽(1. 5 -)2 ~ 3cm,边缘有不明显的疏
钝齿,顶端急尖或钝;叶脉两面均明显;叶干后纸质,仅上面中肋
略有短毛。叶柄长 4 ~ 7 (- 13)cm,具明显的狭翅。孢子囊群圆
形,椭圆形,叶片下面全部分布,沿裂片中肋两侧各排列成 2 ~ 4
行,成熟时相邻 2 侧脉间有圆形孢子囊群 1 行,或幼时成 1 行长
形的孢子囊群,混生有大量腺毛。
3. 1. 2 普通风丫蕨 根状茎肉质粗壮,圆柱形,被卵状披针形鳞
片。叶同型,卵状三角形或卵状长圆形,二回羽状(基部二回羽
状,上部一回羽状),小羽片阔披针形,尾状渐尖头,基部近圆形;
叶脉分离,侧脉二回分叉,顶端的水囊线形,略加厚,伸入锯齿,但
不到齿缘。叶干后草质到纸质,上面暗绿色,下面较淡并有疏短
柔毛。叶柄长 24 ~ 60cm,禾秆色或饰有淡棕色斑点,无狭翅,叶
片和叶柄近等长。孢子囊群沿侧脉分布达离叶边不远处。
3. 2 性状鉴别
3. 2. 1 骨碎补 呈扁平长条状,多弯曲,有分枝。表面棕褐色或
暗褐色,两侧及上表面均具突起的圆形叶痕,少数有叶柄残基和
须根残留。体轻,质脆,易折断,断面纤维性,红棕色,有 10 ~ 20
个黄色点状的维管束排列成环状。
3. 2. 2 普通凤丫蕨 呈长条状,多弯曲,有分枝。表面暗褐色或
黄褐色,两侧及上表面均具突起的圆形叶痕,有叶柄残基和须根
残留。质脆,易折断,断面较平坦,灰褐色,有 2 ~ 3 个大型的白色
弧形维管束排列成近似环状。
3. 3 显微鉴别 采用煮沸、水浸泡、15%氢氟酸溶液浸泡等方法
将干燥的骨碎补药材和普通风丫蕨的根状茎进行软化处理,再进
行石蜡切片[8];采用粉末鉴定法,对骨碎补和普通风丫蕨根状茎
上的鳞片进行显微构造观察,结果如图 1 和图 2。完整的骨碎补
横切面为扁圆形,基本薄壁细胞不规则形,维管束 10 ~ 20 个,椭
圆形,管胞多角形,周韧维管束(图 1 中 A)。鳞片披针形,长 7 ~
12mm,宽 0. 8 ~ 1. 5mm,基部盾状着生,边缘着生睫毛状锯齿(图
1 中 B)。普通风丫蕨根状茎完整的横切面为圆形,基本薄壁细
胞圆形或椭圆形,维管束 2 ~ 3 个,管胞近圆形,周韧维管束,维管
束呈弧形片状,通常情况下两片较大的维管束一端连在一起,与
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时珍国医国药 2016 年第 27 卷第 5 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2016 VOL. 27 NO. 5
另外较小的维管束片段相对排列呈近似环状(图 2 中 A)。鳞片
卵状披针形,长 1 ~ 6mm,宽 0. 3 ~ 1. 0mm,基部着生,全缘(图 2
中 B)。通过后含物中淀粉粒形态观察发现:骨碎补药材粉末中
的淀粉粒极少,圆形或椭圆形,30 ~ 50μm;普通凤丫蕨根茎中有
大量的淀粉粒,多为单粒,圆形或椭圆形,40 ~ 80μm。
A -横切面部分截图 B -鳞片
图 1 骨碎补显微结构
A -普通风丫蕨横切面截图 B -普通风丫蕨鳞片
图 2 普通风丫蕨显微结构
3. 4 薄层色谱鉴别 取普通风丫蕨根状茎粉末 0. 5g,加甲醇
30ml,加热回流 1h,放冷,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇 1ml 溶解,
作为供试品溶液。另取骨碎补对照品药材 0. 5g,同法制成对照
药材溶液。再取柚皮苷对照品,加甲醇制成每毫升含 0. 5mg 的
溶液,作为对照品溶液。按照薄层色谱法试验[2],吸取上述供试
液,对照药材溶液和对照品溶液各 4μl,分别点于同一硅胶 G 薄
层板上,以甲苯 -乙酸乙脂 -甲酸 -水(1∶ 12∶ 2. 5∶ 3)的上
层溶液为展开剂,展开,取出,晾干,喷以三氯化铝试液,置紫外光
灯(365nm)下检视,结果见图 3。在供试品色谱图中,在柚皮苷对
照品的斑点位置处,普通风丫蕨无斑点,骨碎补有一相同颜色的
斑点。
4 小结
骨碎补作为伤科中药,常用于治疗跌打损伤、软组织损伤、骨
折之证。但目前市场上骨碎补的混伪品比较多,普通风丫蕨就是
其中之一。本试验通过对比槲蕨(骨碎补)与普通风丫蕨的叶
形、叶裂、叶柄有无狭翅等特征从基源上进行了鉴别;通过观察二
者根状茎断面的颜色、点状维管束的数目等从性状上进行了鉴
别;通过对药材软化再进行组织横切,观察维管束的形状、数目、
排列方式,鳞片的形状、鳞片边缘是否有锯齿,药材粉末中是否有
淀粉粒等显微特征对骨碎补和混伪品普通风丫蕨进行了显微鉴
别;薄层色谱法则是以柚皮苷为骨碎补标识性成分,进一步从定
性的角度对二者进行了比较鉴别。
1.柚皮苷 2.普通风丫蕨 3.骨碎补
图 3 薄层色谱图
通过上述 4 个方面的比较鉴别,能够从不同角度将中药骨碎
补和普通风丫蕨区别开来,无论对基层药材采收者、收购者还是
使用者来说,都可以从中借鉴,为中药骨碎补的质量控制提供依
据,以确保广大患者用药安全、稳定、有效。
参考文献:
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LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2016 VOL. 27 NO. 5 时珍国医国药 2016 年第 27 卷第 5 期