全 文 ：中 国 药 科 大 学 学 报
J o u r n a l o f C h in a P h a rm a e e u t ie a l U n iv e r s i ty 1 9 9 4; 2 5 ( 4 )
: 19 9一 2 0 1 19 9
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e le a e e a e )
, t o ge th e r w i t h t h e k n o w n m a t t e u e i n o l ( 盯 ) . T h e s t r u e t u r e o f i s o m a t t e u e i n o l ( I ) w a s d e t e r m in de
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5
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f l a v a n o n e ; i s o m a t t e u e i n o l ; m a t t e u e i n o l
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C i n a l h
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t h e is o l a t i o n a n d S t r u C t u r a l e l u C id a t i o n o f a n
e w
f la v a n o n e e o m P o u n d l
, n a m e d i s o m a t t e u e in o l
,
t o g e th e r w it h t h e k n o w n e o m P o u n d l
,
m a t t e u
-
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1
.
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1
.
R I = R
Z
= O H
,
R 3 = R
,
= H ;
VI
.
R t 一 R ? = O C H 3 , R 3一 R 魂= H
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.
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C N M R
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( 1 6 2 0 e m
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,
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.
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-
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e s e r i
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-
n o s ti e s h i f ts s t r o n g l y s u g g e s t e d t h e P r e s e n e e o f
5
,
7
一
d ih y d r ox y s y s te m i n 1
.
T h
e
f la v a n o n e n u
-
e le u s w a s a l s o e o n f i r m e d b y t h e P r o t o n n u e le a r
m a g n e t i e r e s o n a n e e (
`
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,
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w h i e h th e s i g n a l s d u e t o C
一
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一
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.
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,
3
.
2 8 ~ 3
.
3 7 Pp m ( I H
,
d d
,
J 一 1 1 a n d
1 7 H z ) a n d 5
.
5 9 ~ 5
.
7 0 PP m ( I H
,
d d
,
J = 3
a n d 1 1 H z )
.
T h
e `
H N M R s ep
e t r u m f u r t h e r
s h o w
e d t h e P r e s e n e e o f t w o a r o m a t i e m e t h y l 5 19
-
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.
0 7 a n d 2
.
0 9 P Pm )
, a n d o n e m e t h o x y l
s ig n a l ( 3
.
8 9 P Pm )
.
T h e s ig n a l s o f f o u r a r o m a t
-
i e p r o t o n s w
e r e i n t h
e r e g i o n s o f 7
.
1 0 PPm
( I H
,
d
,
J = 8 H z
,
C
, ` 一 H )
,
7
.
5 4 ~ 7
.
6 5 pp m
( I H
,
d d
,
J 一 7 a n d 8 H z , C S , 一 H ) , 7 . 5 6 p p m
( I H
,
b r
.
s , C
Z` 一 H )
,
7
.
5 0 P P m ( I H
,
d
,
J 一 7
H z
,
C
6` 一 H ) a n d w h ie h w e r e d i f f
e r e n t f r o m t h e
P a t t e r n o f Z`
一
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-
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2 ]
.
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.
8 9 P P m ( O C H
3
) w a s i r
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,
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e s i g n a ls a t 6 7
.
5 6 a n d 6 7
.
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-
e r s i g n a l s o f a r o m a t i e P r o t o n s w e r e n o t e n
-
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,
w h i e h s h o w e d th a t t h e
一
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-
t a e h e d t o 3`
一
P o s i t i o n
.
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一
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,
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一
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一
1 3 4
,
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.
T h
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2 15 2 ( 1 0 0% )
.
T h e
a r r a n g e m e n t o f s u b s t it u e n t s in t h e B
一 r i n g w a s a l
-
5 0 s u p p o r t e d b y t h
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C N M R s P
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.
F o r
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e r e n o e o n j u g a t io n b e t w e e n A a n d B
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,
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e s u b s t i t u t io n P a t t
e r n i n t h e B
一 r i n g h a d
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C N M R e h e m i e a l s h i f ts o f A
-
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.
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s a m e 1 3C N M R e h e m i e a l s h i f t s i n A
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-
Po u n d 班 d i d ( s e e T a b Z ) [ 3 〕 . S i n e e t h e ` 3 C N M R
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s h i f t s o f B
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i n e o m Po u n d 1 w e r e
e o m Po u n d lV ( T a b
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2 0 0 J o u r n al oCf h in aP h r am e a。 。 t i e al Un i v e r s i t y Vo l
.
2 5
2 ) [
3〕 , w e e o n e l u d e d t h a t t h e m e t h o x y l in B 一 r i n g
o f e o m P o u n d 1 w a s P r e s e n t a t t h e C
一
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.
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.
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.
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.
6 5一 7 . 5 4 dd , J ~ 7 , 8 6 . 84一 7 . 0 2 m
C 。` 一 H 7 . 5 0d , J一 7 6 . 84一 7 . 0 2 m
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.
5 9一 5 . 7 0 dd , J 一 1 1 . 3 6 . 07
C 3一 H a 3
.
2 8一 3 . 3 7 dd , J ~ 1 7 , 11 2 . 9 4一 3 . 4 8
C 3
一
H e 2
.
8 9一 3 . 4 8 d , J = 1 7 , 3 2 . 9 4一 3 . 4 8
C 6
一
C H 3 2
.
0 75 2
.
35 5
C 启一C H s 2
.
0 95 2
.
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.
13 C N M R e h e m ica l
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C
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2 7 7
.
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.
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.
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C 一 3 4 2
.
3 t 4 2
.
7 t 42
.
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C 一 4 19 6
.
7 5 19 7
.
85 1 98
.
1 5
C 一 5 16 2
.
7 5 16 3
.
05 1 59
.
55
C 一 6 10 2
.
95 10 3
.
45 1 1 1
.
25
C
一
7 15 8
.
65 16 0
.
25 1 6 5
.
45
C
一
8 10 1
.
6 5 10 3
.
25 1 0 9
.
65
C 一 9 15 7
.
55 15 9
.
05 1 5 8
.
55
C 一 1 0 10 3
.
65 10 4
.
35 1 0 5
.
2 5
C 一 1 , 12 9
.
3 5 12 7
.
0 5 1 2 7
.
9 5
C 一 2 ` 12 8
.
ld 15 4二8 5 15 6 . 05
C 一 3` 1 59
.
5 5 1 1 6
.
4d 11 0
.
6d
C 一 4 , 一 1 1 4
.
l d 1 29
.
g d 12 9
.
3d
C 一5
,
1 28
.
s d 1 20
.
7 d 12 1
.
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C 一6
` 1 2 6
.
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.
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.
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C `一 C H 3 8
.
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.
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.
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一
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.
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C 吕一C H 3 7 . s q 7
.
4q 7
.
g q
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.
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C 3`一 O C H 3 5 5
.
3q
C o m P o u n d E w a s i d e n t if ied
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e k n o w n
f la v a n o n e m a t t e u e i n o l b y d i r e e t e o m Pa r i s o n w i t h
t h e a u t h e n t i c sa m P l e o n m e l t i n g Pio n t
,
m ix e d
m e l ti n g p o i n t
,
th i n la y e r e h r o m a t o g r a Ph y ( h i g h
e f f e e t s il ie a g e l G F p l a te ) a n d I R s讲 e t r u m [` ] .
E x Pe r lm e n t a l P a rt
M e l t i n g Po in ts w e r e d e t e rm in e d o n P HM K
7 9 / 2 2 1 2 m i e r o m e l t in g a p p a r a t u s a n d w e r e
r e e o r d e d u n e o r r e e t e d
.
U V s Pe e t r a w e r e d e te r
-
m in e d w i th a d d it i o n o f d ia g n os t i e r e a g e n t s b y
s t a n d a r d p r o e e d u r e s [
5 ] o n a s h im a d z u U v 2 1 0 0
r e e o r d i n g s P e e t r o Ph ot o m e t e r
.
IR s Pe e t r a i n K B r
d i s k w e r e r u n o n a S h im a d z u IR 4 0 0 s Pe e t r o m e
-
t e r
.
N M R s ep e t r a w e r e ta k e n i n D M S O
一
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B r u k
e r AM 5 0 0 a n d B r u k e r A C F 3 0 0 s ep
e t r o m e
-
t e r a n d w i t h T M S a s in te r n a l s t a n d a r d
.
I 3
C N M R
s Pe e t ar w e r e t a k e n b y u s i n g t h e D E P T te e h n o l于
g y
.
M S s Pe e t r a w e r e at k e n o n a V G Z A B H S
m a S s ep c t r o m e te r
·
E x t r a e t i o n a n d eS aP r a t i o n
T h e Pl a n t w a s e o ll e e t e d f r o m Q i n g L in g
M o u n扭 i n in Sh a n x i rP o v i n e e , C h in a a n d a u t h e n -
t i ca t
e d b y B o t a n ie T a x o n o m is t
,
P r o f
.
Y i n g t a n g
·
X i e
,
N o r t h w e s te r n U n iv e r s i t y
.
T h e d r i e d w h o le
Pl a n t m a t e r ia l w a s e x t r a e te d w it h b o i li n g E t 0 H
f o r 2 0 h
.
T h e E t O H e x t r a e t w a s e o n e e n t r a e te d
t o 3 0 m l a n d e o o le d t o r o m t e m P e r a t u r e t o g i v e
a y e l l o w s o li d
.
T h e s o li d w a s e h r o m a t o g r a P h e d
o n Po ly a m i d e e o l u m n u s i n g CH C 13
一
C H C 13
一
M e 0 H
( 2 0
: 1
一
1 0
: 1
一
1 : l ) a s e lu e n t s
.
T h e f r a e t io n o f
C H C 13 e l u e n st g a v e th e c o m P o u n d 1
.
T h e c o m
-
p o u n d 1 w a s o bat i n e d f r o m C H C 13
一
M
e 0 H ( 2 0
:
l ) e lu e n st a n d w a s Pu r i f i e d b y r e e r y s t a l l iz a t io n
w it h 9 5写 E t 0 H .
C o m Po u n d l : Pa le y e l l o w e r y s ta l ( M e
-
o H )
,
m p
.
13 9 ~ 1 4 1
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C
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( 0
.
7 1
, a e e to n )
.
U V 入奈分H n m ( 10 9 。 ) 2 9 5
( 4
.
2 1 )
,
3 4 2 ( 3
.
5 4 )
. 入濡分H 一 M e o N a n m 2 4 5 , 3 3 7 ;
入黯O H 一 N a 0 A eX n m 2 9 5 , 3 3 6 ; 入禁言分H 一 N a o A c 一 H 3 B o 3 n m
2 9 3
,
3 3 5 ; 久盘分H 一 A ,c ,3 n m 3 13 , 3 9 5 ; 入沈分H 一 A ,c , 3 ,` c ,
n m 3 1 4
,
3 9 2
.
IR
v淤互e m 一 ` 3 2 0 0 ( O H ) , 16 2 0
( e o n j u g a t e d C = O )
,
1 6 0 0
,
1 5 8 0 ( a r o m
.
C =
C )
,
1 1 6 0
,
1 1 2 0
,
1 0 2 2
,
9 0 0
,
7 6 0
,
6 9 0
.
M S
m /
:
(% ) 3 1 4
.
3 3 3 8 ( M +
,
C
, : H ,: o 。 , 5 1% )
,
2 8 4 ( 18
.
2 )
,
2 0 8 ( 1 5
.
5 )
,
1 8 0 ( 5 2
.
3 )
,
15 2
( 10 0 )
,
7 7 ( 2 3
.
3 )
.
e o m p o u n d l : e o zo r le s n e e d l e s ( 9 5写 E t -
o H )
,
[
a 〕舒一 3 1 . 6 0 ( 0 . 5 4 , a e e to n ) , m p . 17 2
一 1 7 4 ` C , m m P . 1 7 1 一 1 7 3℃ ; I R 端二 e m 一 `
3 12 0 ( O H )
,
1 6 2 0 ( e o n j u助 t e d C = 0 ) , 1 6 0 0 ,
1 58 0
,
1 5 10 ( a r o m
.
C = C )
,
12 4 0
,
1 1 6 0
,
1 1 2 0
,
1 0 2 0
,
9 4 0
,
8 2 0
,
7 6 0
,
7 4 0
.
A e k n o w le d ge m
e n t : W e a r
e
g r a te f u l to
P r of
.
L i u Y o n g l o n g
,
I n s t i t u t
e o f M
e
d i c in a l
P la n t eD
v e lo Pm e n t
,
C h i n e se A e a d e m y o f M e d i
-
ca l S
e ie n e e s
,
f o r a sa m Ple o f m a t t e u e i n of
.
L I N , Z h o u R H , J i a n g J Q
.
S t u d i e s o n Ph y t oc h e m i亡a l c l a S i f i
ca t i
o n o n o n
oc lae
c e a e i n C h i n a
. 口创施而 , 19 9 2 , 12 ( l ) : 3 3
M o h r i K
, T a k e m o t o T
, K o n d o Y
.
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东方英果蔽中的一个新双氢黄酮
蒋建勤 周荣汉 孟正木 李 娜 ’
(中国药科大学植物化学教研室 ,南京 2 1 0 009 ; ’江苏省植物研究所 ,南京 2 1 0 01 4)
从陕西秦岭产东方荚果蔗中分得二个双氢黄酮类化合物 , 经光谱方法鉴定为 5 , 了一二经基一 6 , 8一二甲基一 31 -
甲氧基一双氢黄酮 ( I )和荚果蔽素 ( I ) 。其中 I 为未曾报道的新化合物 ,命名为异荚果旅素 。
关键词 东方荚果蔗 ; 球子蔗科 ; 双氢黄酮 ; 5 , 7 一二经基一 6 , 8 一二甲基 一 3 , 一甲氧基 一双氢黄酮 ; 荚果蔗素 ;
异荚果截素
重组 白细胞介素 亚 的反相色谱分离分析
研究生 : 许 茜 导师 : 吴如金 许祥裕
`中国药科大学药物分析教研室 )
重组白细胞介素 I (r I L 一 2) 是采用重组 D N A 技术在工程菌大肠杆菌中高效表达的基因工程产品 ,其分子
量为 15 5 0 道尔顿 ,由 13 个氨基酸组成的蛋白质 。等电点 ( p l ) 6 . 7一 8 . 2 , 一级结构中 ,第58 , 105 , 125 位上为半胧
氨酸 (C ys h) ,它们可两两结合形成二硫键 , 对 I L 一 2的三级结构与天然活性有极大的影响 。 5 8一 ,器结合体因其三级
结构与夭然 I L 一 2相似而具活性 ,而二硫键错配的 51 0 5一 ,与和 5 8一 , 2s 结合体则因正常的三级结构被破坏而不显活
性 。 实验证明 , 二硫键错配的 rI L 一 2不仅形成抗原性 , 在临床治疗中导致不良反应的发生 ,而且抑制正常 I L 一 2发
挥生物活性 。为确保用药安全和高疗效 , rI L一 2产品中二硫键错配的异构体应尽可能除去 , 以得到高比活低副作
用的高质量产品用于临床 。本课题以南京军区军事医学研究所防护室制备的 : I L 一 2半成品为研究对象 , 采用反
相液相色谱 ( R PL c) ,进行了以下工作 :
1
. 建立 R P L c 条件分离 rI L一 2半成品 。
2
. 各色谱峰的识别 。
3
. 质量回收率和 活性回收后的比活测定 。
4
.
:
IL
一
2半成品纯度检测 。
此外 ,通过比较五批 r I L 一 2半成品的 R P L c 色谱图 ,评价了阳离子交换纯化的 lr L 一 2产品的稳定性 ;对所建立
R PL c 方法的精密度 ,检测限 , 线性范围等分析效能的参数进行了评价 。