全 文 :第 33 卷 第 6 期 大 连 大 学 学 报 Vol.33 No.6
2012 年 12 月 JOURNAL OF DALIAN UNIVERSITY Dec. 2012
扁担杆正丁醇提取物的抗炎镇痛作用
杨春光,高 松,欧阳檐秀
(大连大学 医学院, 辽宁 大连 116622)
摘 要:应用化学方法制备扁担杆正丁醇提取物。采用热板法观察提取物对小鼠的镇痛作用,用二甲苯致小
鼠耳郭肿胀法观察其抗炎作用。结果显示高浓度扁担杆正丁醇提取物有明显镇痛作用,并且能明显抑制二甲
苯引起的小鼠耳郭肿胀。
关键词:扁担杆;抗炎;镇痛
中图分类号:R285.5 文献标识码:A 文章编号:1008-2395(2012)06-0086-03
收稿日期:2012-02-27
基金项目:大连大学 2011 创新教育基金项目(2011087)。
作者简介:杨春光(1971-),男,博士,讲师,研究方向:心血管药理、中药药理。
扁担杆(Grewia biloba G. Don)主要分布于
江西、湖南、浙江和广东等省[1]。中国《中药大
辞典》中记载其全株和枝叶能去风除湿、理气消
痞[2]。在中国南方部分地区,扁担杆属植物被作
为民间草药使用,用来治疗皮肤脓胞疮等细菌感
染。在非洲和亚洲一些国家地区,部分扁担杆属
植物被作为民间草药使用,具有抗菌消炎作用[3,4]。
现代药理实验表明,扁担杆提取液具有抗菌、抗
疟疾等作用[5,6],但对其抗炎镇痛作用的研究较少。
本文以小鼠为研究对象,观察扁担杆正丁醇提取
物的抗炎镇痛作用。
1 材料与方法
1.1 试剂与仪器
扁担杆药材(大连大学医学院中药教研室高
松鉴定);正丁醇(上海禾丰药业有限公司);盐
酸曲马多(武汉华美华科技有限公司);地塞米
松磷酸钠注射液(江苏长青农化股份有限公司);
Heidolph LABOROTA-4000 型旋转蒸发仪(国华
电 子 有 限 公 司 ); 电 子 分 析 天 平 BP211D
(Startorius);YLS-6B 智能热板仪(淮北正华生
物仪器设备有限公司)
1.2 药材的提取与分离
将扁担杆干燥枝 100 g,用 75%乙醇在室温
下浸泡 12 h 后加热回流提取 3 次,滤过,合并滤
液,减压浓缩得浸膏约 10 g,将其混悬于水中,
用正丁醇少量多次提取至有机相没有颜色,减压
浓缩并干燥得浸膏粉。把浸膏粉用生理盐水配成
1 g/mL(生药),一共 100 mL。在分别取 25 mL、
12.5 mL、5 mL 稀释至 100 mL 容量瓶中,分别得
高浓度(25%)、中浓度(12.5%)、低浓度(5%)药液。
1.3 动物分组
挑选痛域在 5~30 s 的雌性小鼠 50 只(由大
连大学实验动物中心提供),体重 20±2 g,随机
分 5 组,分别为高浓度给药组、中浓度给药组、
低浓度给药组、正常对照组、阳性对照组各 10
只。给药组小鼠每 10g 体重分别灌胃高,中,低
浓度药液的容积是 0.2 mL;正常对照组灌胃同体
积生理盐水,以上各组连续给药 3 d,每天 1 次;
阳性对照组小鼠每 10 g 体重腹腔注射酸曲马多
0.15 mg,实验前给药 1 次。
1.4 热板法测定小鼠痛域值
在末次给药前和给药后 15 min、30 min、60
min 使用 55±0.5 ℃热板分别测各组小鼠第一次舔
后足时间,跳跃 1 次(含)以上者剔除,痛阈超
过 60 s 者按 60 s 计。计算痛阈提高百分率,痛阈
提高百分率=(给药后痛阈值—给药前痛阈值)
/给药前痛阈值×100%。
第 6 期 杨春光 等:扁担杆正丁醇提取物的抗炎镇痛作用 87
1.5 对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响
选小鼠 30 只,随机分 3 组,即对照组、地
塞米松组和高浓度给药组。对照组和高浓度给药
组分别灌胃给予生理盐水和高浓度扁担杆正丁
醇提取物,小鼠每 10g 体重给药体积 0.2 mL,连
续给药 3 d,每天 1 次。地塞米松组实验前小鼠
每 10 g 体重腹腔注射药液 0.1 mL。末次给药 30
min 后于小鼠右耳两面均匀涂二甲苯 20 μL,30
min 后处死小鼠,将小鼠两耳齐根剪下,用直径
6 mm 的打孔器将小鼠双耳相同部位打孔,分别
称重。左右耳片重量差值为肿胀度,计算肿胀抑
制率,肿胀抑制率=(生理盐水组平均肿胀度——
给药组平均肿胀度)/生理盐水组平均肿胀度
×100%。
1.6 统计分析
所有数据以 x ±s 表示,采用 SPSS11.0 统计
软件进行单因素方差分析和 t 检验,P < 0.05 认为
有显著性差异。
2 结果
2.1 对热板法所致小鼠疼痛的影响
高浓度组和曲马多组小鼠痛域提高百分率
在给药后 30 min 和 60 min 有明显增加(表 1)。
高浓度组和曲马多组小鼠痛域提高值与对照组
比有显著性差异(表 2)。
表 1 各组痛阈提高百分率
组别
动物数
(只)
给药后不同时间痛阈提高值(s)
15min 30min 60min
低浓度组 10 10 -1 14
中浓度组 10 10 8 12
高浓度组 10 10 11 19
曲马多组 10 10 16 30
对照组 10 10 2 7
表 2 给药后各组痛阈提高值
组别
动物数
(只)
给药前痛阈值(s)
给药后不同时间痛阈提高值(s)
15min 30min 60min
低浓度组 10 13.4±5.0 -0.2±3.4 2.2±7.9 2.6±7.8
中浓度组 10 14.6±6.7 1.2±4.9 3.8±2.9 2.3±4.1
高浓度组 10 10.2±3.3 6.2±7.6 10.7±3.4* 13.6±3.3*
曲马多组 10 14.7±5.3 8.3±6.1 15.1±4.9* 23.2±6.3*
对照组 10 17.0±4.7 0.6±2.4 1.7±8.0 1.2±2.2
注:与对照组比较*P<0.05
2.2 对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响
实验结果显示,扁担杆正丁醇提取物高浓度
组对二甲苯致小鼠耳廓肿胀有较好的抑制作用
(表 3)。
表 3 扁担杆正丁醇提取物对小鼠耳廓肿胀的影响
组别 肿胀度(mg) 抑制率(%)
高浓度组 5.8±3.6* 37.5
地塞米松组 4.5±3.7* 49.4
对照组 8.9±4.6 -
注:与对照组比较*P<0.05
3 讨论
多个中药古籍中都记载扁担杆具有祛风除
湿的功效。目前研究发现,扁担杆提取液具有抗
菌、抗疟疾、抗肿瘤等作用,但对扁担杆抗炎镇
痛的有关活性成分研究少见报道。热板法是最常
用的镇痛实验模型,二甲苯致小鼠耳廓肿胀实验
是抗炎药物筛选常用的非特异炎症模型。炎症是
具有血管系统的活体组织对局部损伤所发生的
一种以防御为主的组织反应,其基本病理变化为
局部组织、细胞的变质、渗出和增生三种变化。
在一般的炎症过程中,早期以变质和渗出为主,
局部症状有红、肿、热、痛和功能障碍[7]。本研
究采用热板法和二甲苯致小鼠耳廓肿胀实验来
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观察扁担杆正丁醇提取物的镇痛抗炎作用。实验
结果发现,高浓度的扁担杆正丁醇提取物能提高
小鼠痛域值,而且对二甲苯致小鼠耳廓肿胀有明
显抑制作用。正丁醇为亲脂型溶剂,可以提取中
药成分中极性较大的部分,包括游离生物碱、苷
元、挥发油等,扁担杆正丁醇提取物中哪种成分
发挥抗炎镇痛作用还需要进一步探讨。
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Anti-inflammatory and Abirritation Effects of N-butanol Extract from
Grewia Biloba
YANG Chun-guang, GAO Song, OUYANG Yan-xiu
(Medical College of Dalian University, Dalian 116622, China)
Abstract: N-butanol Extract from Grewia biloba was prepared in this paper. The hot-plate procedure test in
mice were used for the study of abirritation effect. The mice auricle swelling method was adopted in
anti-inflammatory experiment by using xylene. The results showed that the high concentration of N-butanol
Extract from Grewia biloba could relieve the pain caused by hot plate. It also showed the obvious inhibitory
effects on auricle swelling by using xylene in mice.
Key words: Grewia biloba; anti-inflammatory; abirritation