全 文 ：·研究原著 · 文章编号:1000-2790(2009)04-0340-04
鹅绒藤对小鼠抗惊厥作用的观察
彭晓东 1 ,闫乾顺 2 ,闫　琳1 ,王　锐 1 ,郑　婕 1 ,金少举1 ,周　茹 1 ,杨卫东 3 ,彭建中1　
(宁夏医科大学:1药理学教研室 , 2化学教研室 , 3实验动物中心 , 宁夏 银川 750004 )
收稿日期:2008-04-24;　接受日期:2008-09-19
基金项目:宁夏高等学校科研项目 [ 2002] ;宁夏医科大学特殊人材科
研启动项目 [ 2006]
作者简介:彭晓东.硕士 , 副教授.Tel:(0951)6980123　Email:pengxd
@nxmu.edu.cn
Anticonvulsant eficacy of Chinese
MateriaMedicaCynanchum Chinese
R.Brinmice
PENGXiao-Dong1 , YANQian-Shun2 , YANLin1 , WANGRui1 ,
ZHENGJie1 , JINShao-Jv1 , ZHOU Ru1 , YANGWei-Dong3 ,
PENGJian-Zhong1
1DepartmentofPharmacology, 2Departmentof Chemistry,
3ExperimentalAnimalsCenter, NingxiaMedicalUniversity,
Yinchuan750004, China
【Abstract】AIM:Tostudytheanticonvulsantefficacyofthewa-
terandthechloroformextractfromthewholeplantoftheCynan-
chumChineseR.Br.METHODS:Theanticonvulsantactivityof
theextractswasevaluatedbythemaximalelectroshock(MES)
testandthemetrazolseizuretest(MET).Theminimalneurotox-
icityoftheextractswasmeasuredbytherotorodtest.Theinde-
pendentactivitytestandthehypnoticsynergismtestofunder
thresholdhypnoticdosageofpentobarbitalwereemployedtoevalu-
atethecentralpharmacologicalefectoftheextracts.RESULTS:
ThewaterextractexhibitedsignificantprotectiveefectinMET
andproducedED50 valueof2.34g/kg, whilethechloroformex-
tractproducenoprotectiveeffectintheseizuremodel.Onthe
otherhand, thechloroformextractproducedprotectiveefectsin
MESandtheED
50
valuewas1.34 g/kg, butthewaterextract
producednoprotectiveefectinthesamemodel.Theextractsex-
hibitedsignificantdose-dependentinhibitoryeffectsonthesponta-
neousmotoractivityinmiceaftertheintraperitonealadministra-
tion.Bothextractspromotedthehypnoticeffectofunderthreshold
hypnoticdosageadministrationofpentobarbital.Thewaterextract
producedED50 valueof2.36g/kgandthechloroformextractpro-
ducedED50 valueof0.75 g/kg.Comparedwithphenytoin, the
twoextractsproducednoneurotoxicityintheexperimental
process.CONCLUSION:Boththewaterandthechloroformex-
tractsfrom CynanchumChineseR.Brproducesomeinhibitory
effectsonCNS, thoughthetwoextractsareofdiferentanticonvul-
santpropertiesindifferentseizuremodelsinmice.Cynanchum
ChineseR.Brhasawiderapplicationinclinictreatmentofepi-
lepticseizures.
【Keywords】cynanchumchineseR.Br;anticonvulsants;inde-
pendentactivity;hypnoticsandsedatives
【摘　要】目的:观察鹅绒藤全草水提物和氯仿提取物的抗惊
厥作用.方法:采用小鼠超强电休克惊厥(MES)和戊四氮惊
厥(MET)法研究提取物对实验性惊厥的影响;自主活动仪法
观察提取物对小鼠自主活动的影响;转轮法测定提取物对小
鼠的最小中枢神经系统毒性;采用协同阈下剂量戊巴比妥钠
催眠实验 , 观察提取物对镇静催眠药物的协同作用.结果:鹅
绒藤水提物可以对抗戊四氮惊厥(ED50 =2.34 g/kg), 鹅绒藤
氯仿提取物在试验剂量范围内无作用.鹅绒藤氯仿提取物可
以对抗最大电休克(ED50 =1.34g/kg), 而水提物无对抗最大
电休克的作用.两种提取物对阈下剂量戊巴比妥钠(30mg/kg,
ip)的催眠效应有协同作用 , 水提物作用的 ED50为 2.36 g/kg,
氯仿提取物作用的 ED50为 0.75 g/kg.两种提取物对实验小
鼠自主活动有剂量依赖性抑制作用.在本实验条件下 , 两种
提取物未呈现出中枢神经系统毒性.结论:鹅绒藤全草水提
物和氯仿提取物可以对抗不同的小鼠实验性癫痫模型.鹅绒
藤抗癫痫作用广泛 , 同时具有中枢抑制作用.
【关键词】鹅绒藤;抗惊厥药;自主活动;催眠药和镇静药
【中图号】R96　　　【文献标识码】A
0　引言
鹅绒藤 (Cynanchum ChineseR.Br)系萝藦科
(Asclepiadaceae)鹅绒藤属(CynanchumL.)植物 ,民
间以其根及茎的乳汁入药[ 1] ,宁夏产鹅绒藤的根 、茎
正丁醇提取物有较强的抗超强电休克惊厥(maximal
electroshockseizure, MES)和抗戊四氮惊厥 (metrazol
seizuretest, MET)作用 ,但毒性较大 ,治疗指数(Ther-
apeuticIndex, TI)偏低[ 2] .同属植物青羊参 (Cynan-
chumOtophylumSchneid)氯仿提取物经药理及临床
研究证实 ,对癫痫有较好的治疗作用 ,已广泛用于临
床 [ 3 -5] .本研究我们采用小鼠 MES和 MET模型 ,观
察宁夏产鹅绒藤全草水提物和氯仿提取物的抗实验
性癫痫作用.同时 , 采用自主活动实验和阈下剂量
戊巴比妥钠催眠作用的协同实验 ,观察两种提取物对
实验小鼠中枢神经系统的影响 ,以期为开发利用鹅绒
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藤这样的地区性中草药提供进一步的药理学依据.
1　材料和方法
1.1　材料　ICR清洁级小鼠 ,雌雄各半 ,体质量 18
～ 24 g, 宁夏医学院实验动物中心提供 , 合格证:
SCXK(宁)2005 ～ 0001.鹅绒藤全草在秋季采集于宁
夏银川南郊 ,经我院化学教研室吴玉德教授鉴定为萝
藦科(Asclepiadaceae)鹅绒藤属 (CynanchumL.)植
物鹅绒藤(CynanchumChineseR.Br).戊四氮 、苯妥
英钠 、地西泮 、戊巴比妥钠均为 Sigma公司产品.分
别以生理盐水配制成溶液待用.YLS-4C转棒式疲劳
仪和 YLS-1A多功能小鼠自主活动记录仪购自山东
医学科学院设备站.生理药理多用仪由蚌埠医学无
线电二厂生产.
1.2　方法
1.2.1　提取物制备　采集的鹅绒藤全草经清洗 、晾
晒 、粉碎备用.水提物制备时 ,备用原料加入蒸馏水
浸泡过夜;加热煮沸 ,回流 2 h;放置 3 h后抽滤;滤液
经减压蒸馏 ,得黑褐色浸膏.每克浸膏相当于 3.4 g
原生药.实验时以生理盐水配置相应百分浓度的溶
液 ,冷藏备用.制备氯仿提取物时 ,备用原料加入氯
仿 ,加热回流 3 h, 冷抽滤 ,滤液经减压蒸馏 ,得墨绿
色提取物.原料共提取 3次 ,每克提取物相当于
23.7g原生药.因难溶于水 ,实验时以 4 mL/L吐温
80(polyoxyethylenesorbitanmonooleate, tween80)配制
成不同浓度的混悬液 ,冷藏备用.
1.2.2　急性毒性实验　小鼠随机分组[ 6] ,体质量 18
～ 22 g, 雌雄各半 ,每组均为 12只 ,共 132只.鹅绒
藤水提物剂量为 8.0 , 9.2, 10.6, 12.0, 14.0g/kg,共 5
组 ,鹅绒藤氯仿提取物剂量为 2.1, 2.5, 3.0 , 3.6,
4.4, 5.3 g/kg,共 6组.分别 ip不同剂量的供试药
品 ,以 72 h内的死亡只数为指标 ,统计结果 ,计算
LD50和 95%可信区间.
1.2.3　中枢神经系统毒性测定　采用转轮法 (the
rotorodtest)测定供试样品对小鼠的最小中枢神经系
统毒性 [ 7-8] .随机挑选小鼠 200只 ,体质量 18 ～ 22
g,雌雄各半.旋转仪的转棒直径为 3.0 cm, 筛选转
棒转速为 16 r/min.观察 10 min, 剔除掉落 3次者.
连续训练 3d, 1次 /d,上午 9∶00开始.第 4日实验.
药物实验时小鼠每组 16只 ,雌雄各半.阴性对照组
每只 ip0.4 mL生理盐水(NS)或吐温 80,鹅绒藤水
提物供试剂量为 10.0 , 3.3, 1.1, 0.37g/kg共 4组 ,按
1 /3等比递减配制.鹅绒藤氯仿提取物供试剂量为
4.0, 1.0 , 0.25 , 0.07 g/kg共 4组 ,按 1 /4等比递减配
制.阳性对照组苯妥英钠 80 mg/kg.各组均 ip30
min后实施测定 [ 8] .观察以转棒转速为 16 r/min, 10
min内掉落 3次者为阳性反应指标 ,计算阳性率.并
与苯妥英钠组比较 ,判断供试提取物是否具有中枢神
经系统毒性.
1.2.4　提取物对正常动物自主活动的影响　依文献
[ 9-10]实验 ,选用体质量 18 ～ 22 g小鼠 250只 , 雌
雄各半.预试训练观察 5min内的自主活动数(先适
应 2 ～ 3 min,每次 5只同时实验 ,下同).预试结束
后 ,同笼饲养.连续训练 3 d, 1次 /d,上午 9∶00开始.
第 4日实验.在 3d训练中 ,以小鼠的平均自主活动数
为 5min内(200±21)次为标准 ,剔除不合格的小鼠.
测定自主活动时 ,每组 14只 ,雌雄各半.阴性对照组
每只 ip0.4mL生理盐水(NS)或吐温 80(下同),鹅绒
藤水提物供试剂量组为 0.10, 0.21, 0.41, 0.82g/kg共
4组.鹅绒藤氯仿提取物供试剂量组为 0.006, 0.010,
0.024, 0.120g/kg共 4组.分别 ip样品 , 30 min后开
始实验 ,各组均观察 5min内的自主活动数.
1.2.5　抗戊四氮惊厥试验　依照文献 [ 6] , ip给药
30 min后(ip地西泮 7.5 mg/kg为阳性对照组),均
皮下注射 (sc)百分之百惊厥剂量的戊四氮 (100
mg/kg), 观察给药后小鼠竖尾 ,阵孪和强直各项发生
时的潜伏期.以药物能否防止强直性惊厥为指标判断
能否对抗 PTZ惊厥 ,并计算 ED50和 TI(LD50 /ED50)值.
1.2.6　最大电休克试验　依照文献 [ 6] ,采用 35 ～
40 V/0.5 s参数进行筛选小鼠 ,发生后肢强直者用于
实验.ip给药 30 min后(ip苯妥英钠 50 mg/kg为阳
性对照组),同参数实验 ,以后肢强直症状不发生为
抗 MES的阳性反应 ,并计算 ED50和 TI值.
1.2.7　对阈下戊巴比妥钠催眠作用的协同实验　参
照文献 [ 6] ,实验分为阴性对照组及鹅绒藤水提物供
试剂量组(3.3, 2.5, 1.9, 1.4g/kg),鹅绒藤氯仿提取
物供试剂量组(0.97, 0.81, 0.67, 0.56 g/kg).在 ip
给药 30min后复经由腹腔注射阈下催眠剂量戊巴比
妥钠(30 mg/kg, 3 g/L溶液按 0.01 mL/g给药 ,室温
25℃),以小鼠翻正反射消失为指标 ,观察鹅绒藤提
取物对阈下戊巴比妥钠催眠作用的影响.
统计学处理:LD50及 ED50按 Litchfield法计算.
阴性 、阳性对照组与各实验剂量组间进行单因素方差
分析(One-wayAnalysisofVariance, ANOVA)及 Dun-
net′sttest检验比较差异.率的比较采用 Fisher确切
概率法(Fisher′sexacttest)比较 , P<0.05为有统计
学差异.结果全部采用 GraphPadInStat(InstantBio-
statisticsVersion3.06 )软件实施分析.
2　结果
2.1　鹅绒藤水提物和氯仿提取物对小鼠的毒性　ip注
341第四军医大学学报(JFourthMilMedUniv)2009, 30(4)　htp://journal.fmmu.edu.cn
射鹅绒藤水提物和氯仿提取物的小鼠半数致死量 LD50
分别为 9.91(9.16 ～ 10.72)和 3.88(3.37 ～ 4.46)g/kg.
2.2　鹅绒藤水提物和氯仿提取物对小鼠中枢神经系
统毒性　鹅绒藤水提物和氯仿提取物在供试剂量范
围和各自的 LD50剂量 ,未表现出中枢神经系统毒性
反应.对照药物苯妥英钠的阳性率为 60%.
2.3　鹅绒藤水提物和氯仿提取物对小鼠自主活动的
影响　鹅绒藤水提物 、氯仿提取物在实验剂量范围
内 ,对实验小鼠自主活动有剂量依赖性的抑制作用
(表 1).
表 1　鹅绒藤提取物对小鼠自主活动的影响 (n=14, x±s)
组别 剂量(g/kg) 自主活动次数(次)
对照组 - 206±22
4mL/L土温 80组 - 211±13
鹅绒藤水提物组 0.100 176±51a
0.210 137±43a
0.410 71±27b
0.820 34±21b
鹅绒藤氯仿提物组 0.006 208±21
0.010 124±36c
0.024 90±21c
0.120 49±16d
aP<0.05, bP<0.01vs对照组;cP<0.05, dP<0.05vs4mL/L土温 80组.
2.4　鹅绒藤水提物和氯仿提取物对小鼠 MET惊厥
试验的影响　鹅绒藤水提物对抗小鼠强直性惊厥反
应发生的 ED50为 2.34 g/kg(95%可信区间:2.03 ～
2.73 g/kg).鹅绒藤氯仿提取物在供试剂量范围内 ,
对 MET惊厥观察指标没有影响.所以 ,对抗 MET惊
厥 ,鹅绒藤水提物作用明显 ,剂量范围内存在量效关
系;鹅绒藤氯仿提取物在试验剂量范围内没有作用
(表 2).
表 2　鹅绒藤水提物的抗戊四氮惊厥试验结果
组别 剂量(g/kg)
强直数 /实验
总数(只)
惊厥百分率
(%)
对照组 - 10/10 100
水提物组 1.10 10/10 100
1.60 9 /10 90
2.10 4 /10 40a
2.76 4 /10 40a
3.64 2 /10 10b
地西泮组 7.50×10-3 1 /10 10b
aP<0.05, bP<0.01vs对照组.
2.5　鹅绒藤水提物和氯仿提取物对小鼠 MES试验
的影响　鹅绒藤水提物在供试剂量范围内 ,对观察指
标没有影响.其氯仿提取物在实验剂量范围内对抗
MES惊厥的 ED50为 1.34 g/kg(95%可信区间:1.23
～ 1.46 g/kg).两者存在差别(表 3).
表 3　鹅绒藤氯仿提取物抗最大电休克试验结果
组别 剂量(g/kg)
强直数 /实验
总数(只)
惊厥百分率
(%)
对照组 - 10/10 100
氯仿提取物组 0.66 10/10 100
0.75 9/10 90
0.88 8/10 80
1.00 5/10 50a
1.40 2/10 20b
1.60 2/10 20b
苯妥英钠组 5.0×10-2 1/10 10b
aP<0.05, bP<0.01vs对照组.
2.6　鹅绒藤水提物和氯仿提取物对小鼠阈下巴比妥
钠催眠作用实验的影响　鹅绒藤水及氯仿提取物自
身无催眠作用 ,但能够增强阈下剂量戊巴比妥钠对小
鼠的催眠作用.水提取物的 ED50为 2.36(1.94 ～
2.87)g/kg,约为 1 /4LD50剂量.氯仿提取物的 ED50
为 0.75(0.66 ～ 0.85)g/kg,约为 1/5 LD50剂量.
3　讨论
本研究结果表明 ,两种全草提取物均可抑制正常
小鼠的自主活动 ,以及增强阈下剂量巴比妥钠的催眠
作用.提示鹅绒藤全草水及氯仿提取物均有中枢抑
制作用.鹅绒藤水提物可以对抗 MET惊厥 ,剂量范
围内存在量效关系 , TI为 4.2;鹅绒藤氯仿提取物在
试验剂量范围内对 MET惊厥没有对抗作用.鹅绒藤
氯仿提取物可以对抗 MES,作用在实验剂量范围内
存在量效关系.TI为 2.9;鹅绒藤水提物没有作用.
两种提取物抗惊厥特性存在差别.同时 ,本研究我们
采用转轮法 ,观察了宁夏鹅绒藤两种提取物对中枢神
经系统毒性 ,结果表明 ,两种提取物在实验剂量范围
内没有中枢神经系统毒性方面的作用 ,其抗实验性惊
厥的作用与中枢神经系统毒性无关.
文献报道 , 同属植物青羊参的氯仿提取物对
MES惊厥动物模型无效 ,但可以协同苯巴比妥和苯
妥英钠的抗 MES作用.同时证实青羊参氯仿提取物
对 MET惊厥无效 [ 4] .同属的另外两种植物西藏牛皮
消和豹药藤及青羊参各自总甙提取物对 MES惊厥无
效 [ 5] .
宁夏产鹅绒藤氯仿提取物对 MET惊厥没有对抗
作用 ,这一点与青羊参氯仿提取物对 MET惊厥无效
相同[ 4] .同时 ,宁夏产鹅绒藤氯仿提取物可以对抗
MES惊厥 ,这与青羊参氯仿提取物及其总甙 ,以及西
藏牛皮消 、豹药藤的总甙对 MES惊厥无效有着不同
342 第四军医大学学报(JFourthMilMedUniv)2009, 30(4)　http://journal.fmmu.edu.cn
的抗惊厥特点[ 5] .与宁夏产鹅绒藤的根 、茎正丁醇提
取物有较强的抗 MET惊厥作用特点相同[ 2] ,其全草
水提物可以对抗 MET惊厥.不同之处在于 ,其全草
水提物对 MES无效 , 而其根 、茎正丁醇提取物有
效 [ 2] .我们推测 ,随着植化提取条件的变化 ,宁夏产
鹅绒藤的抗惊厥活性可能有相应的改变 ,即提取系统
极性相对小的正丁醇提取物有较强的抗 MET和 MES
惊厥的作用 ,而极性相对大的鹅绒藤水提物可以对抗
MET惊厥 , 脂溶性提取物 (氯仿提取物 )可以对抗
MES惊厥.所以 ,我们认为鹅绒藤属植物提取物的极
性影响其抗惊厥的性质.
【参考文献】
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编辑　王雪萍
·经验交流· 　文章编号:1000-2790(2009)04-0343-01
中药洗剂加贝复济喷雾剂治疗肛瘘术
后 29例
杨红武　
(西安市灞桥区人民医院外科 , 陕西 西安 710024)
收稿日期:2008-11-10;　接受日期:2008-12-24
作者简介:杨红武 .主治医师.Tel:(029)83612632
【关键词】中药洗剂;贝复济喷雾剂;肛瘘;伤口愈合
【中图号】R574.8　　　【文献标识码】B
1 　临床资料　 2001-01/2005-12我科收住肛瘘患者 54例.
其中高位肛瘘 4例 , 低位肛瘘 50例 , 采用单日住院为治疗组
29(男 18, 女 11)例 , 年龄 17 ～ 52(平均 34.5)岁 , 病程 1.5 ～
7.0(平均 4.2)a;双日住院为对照组 25(男 15,女 10)例 , 年龄
22 ～ 49(平均 35.5)岁 ,病程 1 ～ 6(平均 3.8)a.54例患者诊
断符合肛瘘标准分类 [ 1].治疗方法 [ 2]:患者采用骶管麻醉或
硬膜外麻醉 , 采取截石位.低位肛瘘采用一次性切除或切开 ,
肛门齿线内口处用 7号丝线贯穿结扎.高位肛瘘采用橡皮筋
挂线术.手术后 5 ～ 14 d, 结扎线或橡皮筋脱落 , 若术后结扎
线或橡皮筋 14d未自行脱落 , 用剪刀将结扎线或橡皮筋内的
组织剪断.术后肛肠科常规治疗 ,使用敏感抗生素 3 ～ 5 d, 饮
食宜清淡 , 忌食辛辣刺激性食物 , 保持大便通畅.对照组用中
药(五倍子 、大黄 、荆芥 、黄柏 、槐角 、苍术 、莲房 、苦参各 30
g)[ 3]煎汤约 1000 mL, 先熏洗后坐浴 , 每次 15 ～ 20 min, 然后
用红霉素软膏换药 , 1 ～ 2次 /d;治疗组中药熏洗后用贝复济
喷雾剂直接喷于创面 , 或在创面处覆盖适当大小的消毒纱布 ,
用药液均匀喷湿纱布(以药液不溢出为准), 适当包扎即可 , 1
～ 2次 /d.结果:治疗组服药缓解疼痛 3例 ,肌肉注射缓解疼
痛 2例;对照组服药缓解疼痛 4例 , 肌肉注射缓解疼痛 2例 ,
治疗组创面水肿 、出血 、分泌物明显低于对照组 , 疗效更好
(表 1).
表 1　两组肛瘘创面愈合时间 (d)
组别　　　　 n 愈合时间
平均
时间 组别　　　　 n
愈合
时间
平均
时间
治疗组　　　 对照组　　　
　高位单纯性 2 24 ～ 30 27 　高位单纯性 2 30～ 35 32
　低位单纯性 20 12 ～ 24 18 　低位单纯性 18 18～ 30 24
　低位复杂性 7 16 ～ 28 22 　低位复杂性 5 25～ 30 28
2　讨论　中医认为 , 肛门为足太阳膀胱经所主.湿热郁火 ,
流经肛门 , 气血累结 ,化热肉腐成脓 , 内穿肠 , 外穿臀 , 湿热缠
绵不解 , 溃口不敛即成瘘.毒邪与气血凝聚 , 则管壁坚硬 , 余
毒未尽 , 疮口流脓.肛瘘术后经常需要敞开创面 , 中药洗剂 ,
借助热力作用 , 刺激肛门局部皮肤皮下血管扩张 , 促进血液和
淋巴循环 , 改善新陈代谢.还可以清热解毒 , 消肿散结 , 怯腐
生肌 , 消炎止疼 ,从而加速创面愈合.
贝复济喷雾剂是一种多功能细胞生长因子 , 对来源于中
胚层和外胚层的细胞(如上皮细胞 、真皮细胞 、成纤维细胞 、血
管内皮细胞等)具有促进修复和再生的作用.实验表明 , 贝复
济可以促进毛细血管再生 , 改善局部血液循环 , 加速创面愈
合 , 从而主动促进创面修复 ,全面提高创面愈合质量.
【参考文献】
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编辑　黄良田
343第四军医大学学报(JFourthMilMedUniv)2009, 30(4)　htp://journal.fmmu.edu.cn