全 文 :第 32卷 第 3期
2004 年 8 月
贵州 林业 科 技
Guizhou Forestry Science and Technology Vol.32 , No.3
Aug., 2004
凤丫蕨组培快繁技术初报
韦景枫 匡世秀 陶文丞 刘 桃
(安顺市林科所)
摘要:以凤丫蕨带孢子的叶片作为外殖体 , 用 MS 、 1/ 2MS 作为基本培养基 , 并添加不同浓
度的植物激素等等 , 进行组培快繁试验 , 结果筛选到孢子萌发培养基为:1/2MS+活性炭 3g/ L+
蔗糖 20g/L+琼脂 8g/ L, GGB 诱导培养基为:MS+6-BA0.5mg/ L+NAA0.1mg/L , GGB 增殖及分
化培养基为:MS+6-BA0.1mg/L+NAA0.5mg/L , 生根培养基为:1/2MS。
关键词:凤丫蕨;孢子;组织培养
中图分类号:S722.37 文献标识码:B
凤丫蕨为裸子蕨科凤丫蕨属 , 植株高 60 ~ 80cm , 根状茎粗壮横伸 , 密被棕色鳞片 。喜
阴湿环境 , 明亮的散射光对其生长有利 。叶片宽阔 , 青翠碧绿 , 极具园艺价值 , 适宜室内盆
栽观赏。
1 材料和方法
1.1 试验材料
凤丫蕨采于兴义温凉山地的阴湿处 , 在安顺市林科所试验场培育一年后备用。
1.2 外殖体消毒方法
取孢子成熟的叶片作为外殖体 , 用洗洁精泡洗 2次后 , 用自来水冲洗 30分钟 , 75%酒
精浸泡30S , 用无菌水冲洗 3次后 , 再用 0.1%的升汞液浸泡 8min , 取出用无菌水冲洗 6次
后 , 然后把它剪成 0.5cm 的小块接种于孢子萌发培养基上。
1.3 试验方法
用MS作为基本培养基 , 分别添加不同浓度的 6-BA 、 NAA 、 蔗糖 、 琼脂和活性炭 。
pH5.8 ~ 6.0 , 培养温度 25℃±3℃, 光照 12小时 , 光强1000LX。
2 结果与分析
2.1 孢子萌发
孢子萌发培养基为:1/2MS+活性炭 3g/L+蔗糖 20g/L+琼脂 8g/L。凤丫蕨带孢子的叶
收稿日期:2004-01-07
*该文属 “九·五” 贵州省林业科学技术研究课题 “几种观赏蕨的快速繁殖” 中的一种蕨类。
作者简介:韦景枫 (1964—), 女 , 贵州安顺 , 毕业于西南林学院 , 工程师 , 主要从事生物技术研究。
片接种下去后 , 到第 59天孢子才陆续萌发 , 然后逐渐长成单个的叶片。
2.2 6—BA和 NAA对 GGB诱导的影响
在无菌条件下把成团的单叶分成同等大小接种在 GGB诱导培养基上 , 每种配方接 10
瓶 , 以MS 作为基本培养基 , 添加不同浓度的 6—BA和 NAA , 蔗糖 30g/L , 琼脂 8g/L , 30d
后观察统计 , 从表 1看 , 随着NAA浓度的提高 GGB 诱导率降低 , 以 MS+6-BA0.1mg/L+
NAA0.1mg/L较好 , 而当 NAA2.0mg/L 时有 4 瓶长出了根。从表 2 看 , 各种配方都形成了
GGB , 但随着 6-BA提高 , GGB形成越多越小 , 下一步增分化出的苗细弱。综合表 1 、表 2
结果 , 以MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L培养基最好 , GGB诱导率高 , 下一步增殖分化
出的苗粗状整齐 。
表 1 相同浓度的 6-BA和不同浓度的 NAA对 GGB 诱导的影响
6-BA
/mg·L -1
NAA
/mg·L-1
GGB
/瓶
长根
/瓶
0.1 0.1 7 0
0.1 0.5 4 0
0.1 1.0 0 1
0.1 2.0 0 4
表 2 相同浓度的 6-BA和不同浓度的 NAA对 GGB 诱导的影响
6-BA
/mg·L -1
NAA
/mg·L-1
GGB
/瓶
GGB数量
/个
0.5 0.1 10 12
1.0 0.1 10 19
1.5 0.1 10 28
2.0 0.1 10 34
注:GGB的数量为 10瓶的平均数
2.3 GGB的增殖与分化
将诱导成功的 GGB 在无菌条件下分割成约 0.1cm 大小的小块 , 接种到 MS+BA0.1mg/L
+NAA0.05mg/L培养基上 , 7d之后观察 , 接种在增殖培养基上的GGB细块除少数分割太小
褐化死亡外 , 90%的细块成活并继续膨大 , 半个月 , 分化出 5 ~ 6个GGB , 有的GGB开始长
叶。
2.4 1/2MS 、 MS培养基对生根的影响
当原球茎分化出高 1 ~ 1.5cm的小苗时接入生根培养基 , 14d后开始长根 , 30d统计生根
率。从表 3看 , 1/2MS培养基为 95%, MS培养基为 80%, 结论是1/2MS生根率比 MS高。
表 3 1/2MS、 MS 培养基对生根的影响
种 类 株 数 长根数 生根率
1/2MS 20 19 95%
MS 20 16 80%
2.5 移栽
将培养瓶盖打开 , 静置室内通风处练苗 2 ~ 3d , 将试管小苗移出 , 用流水将小苗基部琼
脂冲洗干净 , 移入经过消毒过的基质中 , 定期给小苗施1/2MS 营养液 。从表4可看出 , 以珍
333 期 韦景枫等:凤丫蕨组培快繁技术
珠岩和腐质土配成的基质成活率为 54%, 而以锯木和腐质土配成的基质成活率为 63%。说
明以锯木加腐质土进行炼苗较好。
表 4 不同基质的凤丫蕨炼苗成活率
基 质 炼苗株数 死亡数/株 30d成活率%
10d 20d 30d
50%珍珠岩+50%腐质土 200 30 34 28 54
50%锯木+50%腐质土 200 26 21 17 68
3 结论
以凤丫蕨带孢子的叶片作为外殖体 , 经过孢子萌发 , GGB 诱导 , GGB增殖分化和生根
几个阶段就可培养出凤丫蕨试管苗 , 建立起无性繁殖体系 , 为以后凤丫蕨工厂化育苗提供了
技术依据 。
参 考 文 献
1.熊丽 、 吴丽芳.观赏花卉的组织培养与大规模生产.北京:化学工业出版社 , 2002.
2.韦三立.花卉组织培养.北京:中国林业出版社 , 2001.
3.黄誉江 、 彭军东.观赏蕨类的栽培及应用研究.中国林副特产 , 1998 , (3):20 ~ 21.
4.程治英.桫椤的快速繁殖与种质保存技术.云南植物研究 , 1991 , 13 (2):181 ~ 188.
5.邵莉楣.观赏蕨类的栽培与用途.北京:金盾出版社 , 1994.
(上接第 18页)
Investigation And Protection strategies of Wildlife
Resources of Furong River In Guizhou Province
Gu Jiaofeng Wang Deliang
(College of Life Science , Cent ral South Forestry University , Zhuzhou Hunan , 412006)
Abstract:With the study of the state of wildlife resources in Yutan hydropower , the wildlife re-
sources of Furong river was investigated during the period from Oct.to Nov., 2003.In two months ,
257 species belonged to 78 families were recorded.Among of them , 44 species belonged to Mammalia ,
114 to Aves , 25 to Reptilia , 21 to Amphibia and 53 to Pieces.According to the geological division ,
this area is mainly belonged central China , Oriental kingdom , but there are some species came from
south and westsouth of China.To eco-geological division , this area is beloned forest-shrub-grass-farm-
land wildlife group in subtropical.After the area fulfills water , some habitats will be changed , this will
lead to vicissitudes of animal communities , and the diversity of fishes will decline.
Keywords:Furong River , Yutand hydropower , wildlife resources , protective strategy
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