全 文 ：山银花与其伪品华西忍冬的生药学比较研究
刘来正　赵桂珍　王满恩　冀小君　程侯莲　李宝霞
(山西生物应用职业技术学院中药系 , 山西 太原　030031)
[摘　要] 目的:为山银花与其伪品华西忍冬的鉴别提供依据。方法:性状鉴定 、 显微鉴定 、 薄层色谱法鉴定和高效液相色谱
法鉴定及含量测定。结果:华西忍冬与山银花的性状和显微特征明显不同;薄层色谱法 , 华西忍冬比山银花多一个斑点并且原点
处荧光明显亮于山银花;高效液相色谱法 , 正品在保留时间 5.550 、 8.692 、 9.889 、 13.463共有 4个峰明显可见, 而华西忍冬仅在
保留时间 8.692处的峰明显 , 在保留时间 15.751处 , 华西忍冬有 1个凸点 , 而正品没有 , 二者区别明显。按照高效液相色谱法含
量测定:华西忍冬绿原酸含量低于国家药品标准最低限量。结论:华西忍冬不应作为山银花使用 , 属于山银花的新伪品。
[关键词] 山银花;华西忍冬;生药鉴定
　　中图分类号:Q949.781.2 文献标识码:A
　　山银花为忍冬科植物灰毡毛忍冬 Lonicera
macranthoides Hand.-Mazz 、 红腺忍冬 Lonicera hy-
poglauca Miq.或华南忍冬Lonicera confusa DC.的干
燥花蕾或带初开的花 。具有清热解毒 , 凉散风热
的作用 , 用于治疗痈肿疔疮 , 喉痹 , 丹毒 , 热毒
血痢 , 风热感冒 , 温热发病[ 1] 。笔者发现 , 我院
2007年从安徽某中药饮片有限公司购进的 “山银
花” , 批号为 061022 , 产地为山西的药材 , 性状与
药典所述有别 , 经刘来正副教授鉴定 , 其来源为
忍冬科植物华西忍冬 Lonicera webbiana Wall.ex
DC., 的干燥花蕾[ 2 ～ 3] , 是山银花近期出现的一
种新伪品。为了辨识真伪 , 确保药材质量 , 避免
今后再发生误采误收误用情况 , 保证患者用药安
全 , 作者对该伪品从性状 、 显微 、 理化和成分含
量方面与正品进行了比较研究 , 为山银花的真伪
鉴别提供科学依据。
1　仪器 、 材料与试剂
LC-2010AHT高效液相色谱仪 , 紫外检测器
(日本岛津公司), Diamonsil C18 (2) (250×
4.6mm , 5μm)色谱柱;DMBA300-数码生物显微
镜;160X-双目立体显微镜;紫外光灯;酒精灯;
解剖针;电吹风 。
灰毡毛忍冬 (购自湖南隆回金银花科技开发
公司 , 经刘来正副教授鉴定), 华西忍冬 (我院
2007年从安徽某中药饮片有限公司购进 , 批号为
061022 , 产地为山西省 。), 绿原酸对照品 (中国
药品生物检定所 , 批号 0753-20011), 羧甲基纤
维素钠为黏合剂的硅胶G 薄层板 (青岛市基亿达
硅胶试剂厂)。
甲醇 、醋酸丁酯 、 甲酸 (均为分析纯), 蒸馏
水 , 乙腈 (为色谱纯), 10%硫酸乙醇试剂;水合
氯醛试液 , 稀甘油试液等。
2　方法和结果
2.1　性状鉴定
2.1.1　山银花
灰毡毛忍冬 、 红腺忍冬和华南忍冬参见文献
[ 1] 。
2.1.2　华西忍冬
本品多双生 , 单个花蕾呈短棒状 , 长 0.5 ～
1.2cm , 上部直径约 0.2cm , 下部直径约 0.1cm 。
花萼淡绿色 , 被短柔毛 。萼齿微小 , 顶钝 , 波状
或尖;花冠淡棕黄色 , 筒部棕色 , 疏被短柔毛;
花冠二唇形 , 裂缝约占花冠全长的 2/3 , 花冠筒
部约占 1/3。基部较细 , 具浅囊 , 向上突然扩张;
雄蕊 5 , 约与花冠等长 , 花丝和花柱下半部有柔
毛。质脆易碎 。气微清香 , 味微苦。
2.2　显微鉴定
2.2.1　山银花表面制片鉴别特征
灰毡毛忍冬 、红腺忍冬 (又称菰腺忍冬)和
华南忍冬参见文献 [ 4] 。
2.2.2　华西忍冬表面制片鉴别特征
(1)腺毛较多。多数花冠较疏 , 少数较密;
花萼和小苞片腺毛主要分布在边缘及上部 , 中下
部极少或无 。头部类球形 、 长圆形或类三角形 ,
第 29卷　第 6期
2009年　12月
农 业 与 技 术
Agriculture&Technology
Vol.29　No.6
Dec.2009 ·46　·
直径 26.1 ～ 61.4μm , 侧面观约 4 ～ 16个细胞 , 排
列成 2 ～ 4层 , 多数为 2层 , 4层者少见 , 内含黄
色 、黄棕色分泌物 , 柄部 1 ～ 3个细胞 , 多数为 2
个细胞 , 长12 ～ 66μm , 直径 12 ～ 28.9μm。
(2)厚壁非腺毛较多 。多数花冠较疏 , 少数
密布;花萼和小苞片非腺毛主要分布在上部及边
缘 , 中下部极少或无。绝大多数为单细胞 , 也可
见2 ～ 3个细胞的 , 长短不一 , 长 30.1 ～ 915.3μm ,
直径 8.3 ～ 43.9μm , 壁厚 5.7 ～ 20μm , 基部多数
膨大 , 孔沟 、纹孔稀疏或不明显 , 先端钝圆或略
尖 , 有的弯曲成钩状 , 胞壁极厚 , 基部较薄 , 向
上渐增厚 , 甚至全面增厚 , 胞腔不明显 , 表面密
布疣状突起 , 个别可见螺旋状纹理 。
(3)薄壁非腺毛 , 主要分布在花冠内表面花
丝着生部位附近 , 绝大多数为单细胞 , 可见 2 ～ 3
个细胞的 , 细长壁薄 , 长 117.5 ～ 1779μm , 直径
6.3 ～ 40.2μm , 壁厚 1.3 ～ 6μm 。
(4)草酸钙簇晶 , 花萼和小苞片中下部极多 ,
花冠和花柱相对较少 , 雄蕊的花丝内少数可见 。
簇晶都较小 , 直径 7.6 ～ 55.1μm 。
(5)花粉粒 , 在粉末中极多 , 淡黄色 , 黄色 ,
类圆三角形 , 细胞壁较薄 , 具有细密短刺状和颗粒
状雕纹 , 萌发孔沟三个 , 直径 44.1 ～ 73μm (图1)。
图 1　华西忍冬 Lonicera webbiana 花蕾
2.3　理化鉴定
2.3.1　薄层色谱法[ 1]
分别取灰毡毛忍冬粉末和华西忍冬粉末各
0.2g , 分别加甲醇 5mL , 放置 12小时 , 滤过 , 二
者滤液作为供试品溶液 。另取绿原酸对照品 , 加
甲醇制成每 1mL 含 1mg 的溶液 , 作为对照品溶
液。照薄层色谱法 (中国药典 2005版一部附录Ⅵ
B)试验 , 分别吸取供试品溶液 10μL 、 对照品溶
液 10μL , 分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合
剂的硅胶 G 薄层板上 , 以醋酸丁酯 -甲酸-水
(7∶2.5∶2.5)的上层溶液为展开剂 , 展开 , 取出 ,
晾干 , 置紫外光灯 (365nm)下检视 。结果见图
2。然后用 10%的硫酸乙醇溶液喷洒薄层 , 用电
热吹风加热烘烤干后 , 再置紫外光灯 (365nm)
下检视 , 结果见图 3。
图 2
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图 3
2.3.2　高效液相色谱法[ 1]
(1)对照品溶液的制备。精密称取绿原酸对
照品 10.0mg , 置 25mL 棕色容量瓶中制成对照品
贮 备 液 , 分 别 量 取 1.0mL 、 1.2mL 、 1.4mL 、
1.6mL 、 1.8 mL 、 2.0mL 贮备液置 10mL 棕色容量
瓶中 , 加 50%甲醇稀释至刻度 , 摇匀 , 即得系列
标准品溶液。
(2)供试品溶液的制备。取灰毡毛忍冬粉末
(过四号筛)0.5g , 精密称定 , 置具塞锥形瓶中 ,
精密加入 50%甲醇 50mL , 称定重量 , 超声处理
(功率 250W , 频率 35 kHz)30 分钟 , 放冷 , 再称
定重量 , 用50%甲醇补足减失的重量 , 摇匀 , 滤
过 , 精密量取续滤液 5mL , 置 25mL 棕色量瓶中 ,
加 50%甲醇至刻度 , 摇匀 , 即得。
同法制得华西忍冬供试品溶液备用。
(3)色谱条件。Diamonsil C18 (2)(250×4.6
mm , 5μL)色谱柱;柱温 30℃;以乙腈-0.4%磷
酸溶液 (12　88)为流动相;流速为1.00mL/min;
检测波长为 327nm;理论板数按绿原酸峰计算不
低于 10000。色谱图见图 4 、 5 、 6。
(4)标准曲线的制备 。分别取系列对照品溶
液 5μL进样 , 测定。以绿原酸质量为横坐标 , 峰
面积为纵坐标进行线性回归 , 得回归方程:Y=
(2E+07)X+2118.8 (r=0.9994), 结果表明绿原
酸浓度在 0.04 ～ 0.08mg/ml 范围与峰面积呈良好
的线性关系。
(5)含量测定。分别精密量取绿原酸对照品
溶液和供试品溶液各 5μL , 注入液相色谱仪 , 测
定并计算供试样品中绿原酸含量 。正品山银花绿
原酸含量为 3.60%;华西忍冬绿原酸含量为
0.97%。
(6)重现性试验 。取华西忍冬供试品 6 份进
行含量测定 , 结果 , RSD=1.13%, 表明本法重
现性较好 。
(7)加样回收率试验 。精密称取华西忍冬供
试品 0.5g , 分别精密加入对照品 4mg 、 5mg 、 6mg ,
按含量测定项下方法进行测定 , 计算加样回收率 。
结果 , 平均回收率为 94.61%, RSD=1.24% (n
=9)。
图 4　标准品　绿原酸
Vol.29　No.6 农 业 与 技 术 　　2009年 12月 ·48　·
图 5　正品　灰毡毛忍冬
图 6　华西忍冬
3　结　论
3.1　性状鉴定
华西忍冬与山银花的主要不同是:花蕾一般
长均在1.2cm以下 , 花冠筒长明显短于花冠裂片 ,
花丝下半部有柔毛;而正品花蕾一般长均在
1.6cm以上 , 花冠筒均长于花冠裂片 , 花丝下半
部均无柔毛。
3.2　显微鉴定
山银花腺毛头部圆盘形 、 倒圆锥形 、或类球
形 , 顶端平或微凹 , 直径可达 100μm 以上 , 与腺
头相接处有的为 2细胞并列;腺毛头部盾形者 ,
直径可达 100μm 以上 , 柄极短 , 侧面观不易见;
华西忍冬的腺毛头部类球形 、 长圆形或类三角形 ,
直径都在 70μm以下 , 与腺头相接处 1个细胞 。
3.3　理化鉴定
3.3.1　薄层色谱法鉴别
华西忍冬原点处荧光明显比正品强;用显色
剂处理后 , 华西忍冬在紧靠原点上方又呈现出一
个新的明亮斑点 , 而正品无。
3.3.2　高效液相色谱法
(1)高效液相色谱法鉴别。正品在保留时间
5.550 、 8.692 、 9.889 、 13.463 处有 4个峰明显可
见 , 而华西忍冬仅在保留时间 8.692处的峰明显 ,
与正品峰面积之比为 1　3.7;其余 3处与正品峰
面积之比分别为 1　11.06 、 1　13.46 、 1　5.43 ,
这3 处华西忍冬峰面积均太小;而在保留时间
15.751处 , 华西忍冬与正品峰面积之比 2.75/1 ,
华西忍冬有 1个凸点 , 而正品没有 , 高效液相色
谱图二者区别明显 。
(2)含量测定。按照高效液相色谱法测定结
果:正品山银花绿原酸含量为 3.60%, 符合 《中
国药典》 绿原酸含量不低于 1.5%的规定;而华
西忍冬绿原酸含量为 0.97% , 低于 《中国药典》
绿原酸最低限量 , 不可作为山银花直接药用 , 属
于山银花的新伪品 。
参考文献
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[ 2] 刘天慰 ,岳建英.山西省植物志(第四卷)[ M] .北京:中国科学
技术出版社 , 286-289
[ 3] 徐炳声 ,胡嘉琪 ,王汉津.中国植物志(第七十二卷)[M] .北京:
科学出版社 , 143-259
[ 4] 徐国钧 ,徐珞珊.中药材粉末显微鉴定[ M] .北京:人民卫生出
版社 , 1986:354-355;348-349;346-347.
作者简介:刘来正 (1954-), 男 , 山西生物应用职业技术学院副教授 。研究方向:中药鉴定。
·49　· 2009年 12月　　 农 业 与 技 术 Vol.29　No.6