全 文 ：第 1 2卷第 3期
V o l
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1 2 N o
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3
重庆师范学 院学报 ( 自然科 学版 )
J o u rna l o fC h n og q ing Tea e h e rs C o l leg e( Na t u ra S le ie n ce Ed it in o)
1 95 9年 9月
S e P
.
1 9 95
重庆市黄葛树过氧化物酶同工酶研究 关 `
刘 承 泽
(重庆师范学院生物系 ,重庆 , 6 3 0 0 4 7)
吴 月 华 孙 玉 生
(重庆市园林管理局 ,重庆 , 6 3 0 0 1搜)
摘 要 利用 P A G E 对重庆市黄葛树 的叶柄进行过氧化物酶同工 酶分析 , 初步结
果表 明 , 植株枝条伸展性与叶柄过氧化物酶同工酶谱显著相关 。 根据酶谱特征 ,作
者认为可 将黄葛树分 为三种类型 。
关键词 黄葛树 ,过氧化物酶同工酶
中图法分类号 Q 5 5 4 . 6 ; Q 9 4 9
黄葛树 ( F i e u s v i r e n s A i t . v a : s u b la n e e o at at (碱 q . ) e o r n o r )是桑科榕属马尾榕 (或称笔管
榕 )的一个变种 lj[ 。 该属植物在我国约产 1 20 种 . 是我国亚热带地区的广布树种 。 它适应性
强 、 极易繁殖 、 且绿化性能良好 .是重庆主要绿化行道树种之一 ,于 1 9 8 6 年被政府定为市树 。
我们在研究中发现 ,该种植物具有在叶形 、 枝形方面 明显差异的 6 个类型 。 对其进行过氧化
物酶同工酶分析 , 以期为选育优良绿化类型提供科学依据 。
1 材料与方法
电泳样品采 自预定植株当年生枝条梢部以下 搜一 6 片叶的叶柄 。 先用 自来水冲洗 ,再依
次用蒸馏水 、 重蒸水洗净 , 高压灭菌纱布吸干 , 不锈钢剪刀 剪碎 。 称取 19 , 加重蒸馏水 3nlr , 置
预冷的研钵中 , 加少许石英砂研磨至无纤维状 。 4 0 0 0 r / m in 离心 15 m i n ,上清液加 40 % 蔗糖作
为样品液 。
电泳 采用 垂直 板 聚丙烯 酞胺不连续 高 pH 系统 , 浓 缩 胶浓度 为 2 . 5% , 核 黄素—
T EM E D ( N
,
N
,
N `
,
N ` 四 甲基乙二胺 )光化学催化聚 合 。 分离胶农度为 7 % , 用过硫酸按—T EM E D 化学催化聚合 。 电泳条件为 2 m A c/ m , 3一 h4 。 电泳结束后 , 取出凝胶 , 经抗坏血酸
— 联苯胺染 色 、 照相 。 量取 6 个类型各个区带的 R f 值 、 照相 。
2 结果和讨论
, 该课题由重庆市园林局申报 , 四川省林业所下达项 目的子课题 。 由市园林局资助完成 。
参加实验室及野外工作有许平 、 邓俊林 、 袁源 、 任杨等同志 。
收稿 1 9 9 5 一 0 5一 2 9
第 21卷第 3期
V ol
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12 N o
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重庆师范学 院学报 (自然科 学版 )
Ju o rna l o fC h n og qi n g Tea e h e rs C ol l e g e ( Na tu ra l Sei e n ceEi d ti n o)
1 95 9年 9月
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1 9 95
重庆市黄葛树过氧化物酶同工酶研究 关 `
刘 承 泽
(重庆师范学院生物系 ,重庆 , 6 3 0 0 4 7)
吴 月 华 孙 玉 生
(重庆市园林管理局 ,重庆 , 6 3 0 0 1搜)
摘 要 利用 P A G E 对重庆市黄葛树 的叶柄进行过氧化物酶同工 酶分析 , 初步结
果表 明 , 植株枝条伸展性与叶柄过氧化物酶同工酶谱显著相关 。 根据酶谱特征 ,作
者认为可 将黄葛树分 为三种类型 。
关键词 黄葛树 ,过氧化物酶同工酶
中图法分类号 Q 5 5 4 . 6 ; Q 9 4 9
黄葛树 ( F i e u s v i r e n s A i t . v a : s u b la n e e o at at (碱 q . ) e o r n o r )是桑科榕属马尾榕 (或称笔管
榕 )的一个变种 lj[ 。 该属植物在我国约产 1 20 种 . 是我国亚热带地区的广布树种 。 它适应性
强 、 极易繁殖 、 且绿化性能良好 .是重庆主要绿化行道树种之一 ,于 1 9 8 6 年被政府定为市树 。
我们在研究中发现 ,该种植物具有在叶形 、 枝形方面 明显差异的 6 个类型 。 对其进行过氧化
物酶同工酶分析 , 以期为选育优良绿化类型提供科学依据 。
1 材料与方法
电泳样品采 自预定植株当年生枝条梢部以下 搜一 6 片叶的叶柄 。 先用 自来水冲洗 ,再依
次用蒸馏水 、 重蒸水洗净 , 高压灭菌纱布吸干 , 不锈钢剪刀 剪碎 。 称取 19 , 加重蒸馏水 3nlr , 置
预冷的研钵中 , 加少许石英砂研磨至无纤维状 。 4 0 0 0 r / m in 离心 15 m i n ,上清液加 40 % 蔗糖作
为样品液 。
电泳 采用 垂直 板 聚丙烯 酞胺不连续 高 pH 系统 , 浓 缩 胶浓度 为 2 . 5% , 核 黄素—
T EM E D ( N
,
N
,
N `
,
N ` 四 甲基乙二胺 )光化学催化聚 合 。 分离胶农度为 7 % , 用过硫酸按—T EM E D 化学催化聚合 。 电泳条件为 2 m A c/ m , 3一 h4 。 电泳结束后 , 取出凝胶 , 经抗坏血酸
— 联苯胺染 色 、 照相 。 量取 6 个类型各个区带的 R f 值 、 照相 。
2 结果和讨论
, 该课题由重庆市园林局申报 , 四川省林业所下达项 目的子课题 。 由市园林局资助完成 。
参加实验室及野外工作有许平 、 邓俊林 、 袁源 、 任杨等同志 。
收稿 1 9 9 5 一 0 5一 2 9
重庆师 范学院学报 (自然科 学版 ) 第 12 卷
2 W止 一; 又 0 10 %
e
.
, we o
式中 , 。 : 类型 A 酶谱的酶带数 ; b : 类型 B 酶谱的酶带数 ; W : 月 、 B 两类型间相同酶带数 。
而不相似值则为 1 0 一 C , 计算结果列于表 3 ,其 中 , 酶谱间相似 系数列于该矩阵表的左
下方 ,不相似值列于表的右上方 。
上述结果表明在黄葛树的 6 个类型叶柄中共有 R f 值不同的 19 条酶带 。 其 中 , R f 值
.0 3 5
,
.0 42
,
.0 6 6
·
0
.
7 7 为 5 个类型所共有 , 可以看作本变种的特征酶带 。
从相似系数计算的结果可以看到 , 在类型 1 、 2 、 3 相互间酶谱相似 系数均在 75 % 以上 ,
具有 6 种类型中最大的酶谱相似性 。
表 3 6 种类型黄葛树过氧化物酶同工酶谱的相似系数与不相似值
类型编号 一 2 3 滩 5 6
! 2 2 2 5 8 7 8 0 8 7
2 7 8 1 4 8 6 5 6 5 4 不
3 7 5 8 6 9 2 6 2 6 4 相
4 1 3 一, 8 弓2 4 5 似
5 2七 4刁 3 8 3 8 7 3 值
6 } 3 4 6 3 6 5 5 2 7
2
.
2 讨论
(力关于酶谱的稳定性 同工酶是基因的直接产物 , 酶谱组成一般地能够反映一个物种
的基因组成 。 因而同工酶分析已应用到多 个领域 。 但其应用价值首先就决定于酶谱的稳定
性 。我们关于鳞毛藏过氧化物酶同工酶的工作证明 , 在注意采样时样品中同工酶的组织特异
性 和生长发育 阶段特异性的同时 , 严格控制实验条件 , 则取得稳定的酶谱资料是完 全可能
的 [3〕 。
在进行本项研究中 , 经过试验 ,我们发现 , 采集试验样品时 ,宜采集整个当年生枝条 , 带
回实验室后常温保存 , 再取叶柄进行提取液处理 。 这样 . 上下午取样试验都可以得到完全重
复的酶谱 。 但在不同季节的酶谱重复性 , 尚待进一步工作加以考察 。
( 2) 关于种以下单位应用同工酶间题 国外有关载培植物种以下单位分类有很多报道 。
如 爪尸` , 闭等分析了乙醇脱氢酶 、 酸性磷酸酶 、 淀粉酶等 同工酶鉴定 1 13 个大豆品种间的酶
谱差异 。 试验结果表明 ,各品种均有各 自特异酶谱 .可以用于品种鉴定 。 国内也有较多报导 ,
如上海生物化学研 究所周光宇圈关于水稻 胚醋酶同工酶的研究证明这是一个快速 、 灵敏鉴
定杂交水稻种系纯度的好方法 。 其它如胡志昂困在杨属植物中应用过氧化物酶同工酶 ,发现
叶柄的该同工酶可以鉴定种 、 亚种 、 变种 。 张志毅等川与德国科学家 合作采用 10 多种酶的同
工酶研究了整个分布区内的 86 株毛 白杨 ,结果表明可以分 出 79 个同工酶基因型 , 说明种内
丰富的遗传多样性 。我们的工作证明在黄葛树这个变种内 ,过氧化物酶同工酶谱的差异正好
反映了该变种的遗传多样性 。
( 3) 关于酶谱与叶形 、 枝形相关性 特异性酶谱与某种性状的相关研究引起研究者的浓
厚兴趣 。 例如南京农业大学的徐朗 aj[ 利用等 电聚焦电泳分析过氧化物酶及其同工酶与小麦
抗赤霉病性的关系 。 结果发现种子过氧化物酶 比活力大小及其等电点 10 . 3酶带颜色的深浅
与品种的抗病性正相关 ;抗病品种接种穗的过氧化物酶同工酶等电点 6 . 3 , 9 . 5 和 10 . 3 三条
第 3 期 刘承泽等 : 重庆市黄葛树过氧化物酶同工酶研究 ,
酶带的颜色深 . 感病品种的浅或消失 ,与品种的抗病性呈正相关 。 这就为早期鉴定和筛选抗
病品种提供了一种简捷 、 快速的方法 。 类似例子在棉花枯萎病图 , 水稻 白叶枯病抗性 品种筛
选中也能见到 。在我们的试验中 ,酶谱似与叶形无相关性 , 即不同叶形可有非常近似的酶谱 ,
但与枝条伸展情况显著相关 。 编号 l 、 2 、 3 都是垂性枝条 ,但叶形不同 , 其相互间酶谱的相似
系数都在 75 %以上 。 其主带均为 4 条 , fR 值完全相同 。 编号 4 、 5 同为水平性枝条 ,其主带也
相近 。 编号 6 为向上性枝条 ,与以上样品有较大区别 。 (参 见本文表 l ,表 2 , 图 1 ) 。 结合枝条
伸展情况和酶谱相似性 , 我们认为可将黄葛树分 为三种类型 。 即编号 1 、 2 、 3 为一种类型 ,垂
性枝条 ; 编号 4 、 5 为第二种类型 ,具有水平伸展枝条 ;第三种类型为编号 6 , 具向上性枝条 。
参 考 文 献
贵州植物志 湖南植物名录 厦门植物园植物名录
江洪 . 王琳 . 相木属植物过氧化物酶同工酶的研究 . 植物分类学报 , ! 986 , 2刁、刁) : 2 5 3~ 2 59
L i u hC
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ce ed in gs o f ht e i n t e r n a t沁 n a l S y m lx ` iu m o n s y s et m a t i e P et r id o l o g y . C id n a cS i e n e e a n d T ec h n o l o g y P r e s , 19 8 9 .
2 9 9~ 3 0 8
G o r m a n M B
,
K i n g Y T
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V a r ie t y
一5 1只兄一f iC E lec t r o P h o r e t i e V a r i a n 匕 。 f f o u r oS y比 a n E n z y m es . C r o P S e i e n e e , 19 7 7 ,
{ 7 ( 6 )
:
9 6 3~ 9 6 5
周光宇 . 遗传育神的生化指标— 同工酶分析 . 上海农业科技 , 19 7 9 ( 3 ) : ! ~ 刁胡志昂 . 杨属植物的同工过氧化物酶 . 植物分类学报 . 1洲 1 . ! 9( 3 ) : 2引 ~ 29 5
张 志毅 . 毛白杨无性系同工酶基 因标记的研究 、 北京林业大学学报 , 19 9 2 , l刁( 3 ) : 9 ~ !刁
徐朗 . P O D 及其同工酶与小麦抗赤苟病性的关系 . 植物病理学报 , ! 9 ! , 2 ! (难) : 2 8 5~ 2 90
沈基益 . 棉花感染枯萎病后过氧化物酶同工酶的变化 . 植物学报 , ! 97 8 , 2。 (2 ) : 10 8 ~ 日 3
A S t u d y o f P e r o x i a d s e l s o z y m e s o f t h e F ie u s
V i r e n s
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V a r S u b l a n e e o at t a ( M i q
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