全 文 ：黄葛树染色体核型分析
杨俊年 , 黄隆为 , 徐丽兰　(重庆三峡学院生物系 , 重庆 404000)
摘要　试验采用去壁低渗火焰干燥法对黄葛树进行染色体核型分析 ,结果表明:黄葛树的染色体数目为 2n=30;核型公式为 2n=30=
1st+9sm+5m;染色体相对长度组成为 2n=30=5L+3M2 +2M1 +5S,属于“3B”型;染色体组总长度是 21.37μm,长臂总长为 14.13μm,对称程度较低。
关键词　黄葛树;染色体;核型分析
中图分类号　S793.9　　文献标识码　A　　文章编号　0517-6611(2009)32-15767-02
KaryotypeAnalysisoftheChromosomeofFicuslacor
YANGJun-nianetal　(DepartmentofBiology, ChongqingThreeGorgesColege, Chongqing404000)
Abstract　KaryotypeanalysisofthechromosomeofFicuslacorbythemethodofwalpermeabilitytotheflame-drying.Theresultsshowed
thatthenumbersofchromosomesare2n=30;thekaryotypeformulawas2n=30=1st+9sm+5m, therelativelengthofthechromosome
groupwas2n=30=5L+3M2 +2M1 +5Sbelongingto“3B” type.ThetotallengthofGenomewas21.37μm, totallengthofthelongarmwas
14.13μm, thedegreeofsymmetrywasrelativelow.
Keywords　Ficuslacor;Chromosome;Karyotypeanajysis
基金项目　重庆三峡学院校级课题(2005-SXXYRC-0021)。
作者简介　杨俊年(1974-),男 ,甘肃永登人 ,硕士 ,讲师 ,从事植物资
源保护与利用研究。
收稿日期　 2009-07-20
　　黄葛树(Ficuslacor)[ 1]是桑科榕属马尾榕的一个变种 ,
属常见的落叶阔叶乔木。它适应性强 、易繁殖且绿化性能优
良 ,既是树冠庞大的风景树 ,又是保坎 、防坍 、护岸的速生 、优
良树种 ,属我国川江流域低海拔地区特有树种 ,于 1986年被
定为重庆市市树 [ 2-3] 。目前对其他树种的染色体核型分析
较多 ,黄葛树的核型分析尚未见报道 [ 4-15] 。笔者通过开展对
黄葛树的核型分析 ,以期了解黄葛树染色体的数目 、形态及
其他相关信息 ,这对探索其物种遗传机制 、亲缘关系和进化 、
远缘杂种的鉴定都具有重要价值。
1　材料与方法
1.1　材料　试验材料为重庆三峡学院 9年龄黄葛树 ,染色
体材料来自生长旺盛的幼嫩叶片。
1.2　试验方法 　采用去壁低渗火焰干燥法 [ 16]进行制片 。
将所选取幼嫩叶片放入浓度为 0.2%的秋水仙素溶液中 ,放
置 12 ～24h之后用浓度 0.075mol/LKCl进行前低渗 20 ～30
min。预处理后用卡诺氏固定液在 4℃条件下固定 4 ～ 12 h,
将固定好的材料用蒸馏水反复冲洗后 ,放入盛有预热 60 ℃
的浓度 1 mol/LHCl溶液中酸解 4 ～ 5 min,再用蒸馏水冲洗
干净。之后用浓度 2%纤维素酶和浓度 0.5%果胶酶混合酶
液 ,在 37℃酶解 10min,再用蒸馏水进行后低渗。切取叶片
的侧边组织约 1 mm放在载玻片中央 ,用 Giemsa染色 10
min,着色后用蒸馏水洗干净并加盖玻片 ,在酒精灯上微热后
在显微镜下先用低倍镜观察 ,找到分散良好 、处于分裂中后
期的细胞后 ,再用高倍镜观察 ,选取染色体分散良好的视野
进行数码拍照 。
1.3　测定项目与方法 　细胞核型分析按照我国 1984年 8
月第一届全国植物染色体学术讨论会上由李懋学等制定的
《关于植物核型分析的标准化问题的标准 》[ 17]对染色体进行
计数 、配对 、排列 、测量 、计算 、核型分类 。参照文献 [ 18]方法
根据染色体臂比来确定着丝粒位置以及染色体的对称性;参
照文献 [ 19]的分类方法进行分类。
2　结果与分析
2.1　染色体的形态和数目　选择 50个染色体数目清晰的
分裂中期细胞对染色体进行计数 ,结果发现所有黄葛树染色
体数均为 30条 ,从而确定黄葛树染色数目为 2n=30(图 1)。
图 1　黄葛树染色体数目与形态
Fig.1　ThenumbersofchromosomemorphologyofFicuslacor
2.2　染色体的长度组成　用显微镜对染色体在相同放大
倍数下进行拍照 ,然后将照片放大成相同的尺寸打印 ,再剪
下染色体 、排队 ,随后对染色体的长度进行测量 ,即可测得染
色体的绝对长度 。再根据染色体绝对长度计算出染色体其
他参数(表 1)。
　　经测量分析 ,可将黄葛树的 30条染色体配为 15对 ,染
色体平均长度为 1.424μm。将 15对染色体分成 4组 ,第 1 ～
5对为长染色体(L),第 6 ～ 8对为中长染色体(M2),第 9 ～
10对为中短染色体(M1),第 11 ～ 15对为短染色体(S)。根
据 Levan等 [ 19]的染色体分类标准 ,黄葛树的 15对染色体具
近中部着丝点的是第 1、2、3、5、6、8、9、11、13对染色体 ,具近
端部着丝点的是第 4对 ,具中部着丝点的是第 7、10、12、14、
15对染色体。染色体组总长度是 21.37 μm,长臂总长为
14.13 μm。染色体长度变化范围在 0.6 ～ 2.3 μm,最长染色
体与最短染色体之比是 3.83∶1.00,染色体的臂比值变化范
围在 1.21 ～5.92;臂比大于 2的染色体有 10对 ,为全组染色
体的 71.4%。
安徽农业科学 , JournalofAnhuiAgri.Sci.2009, 37(32):15767-15768 责任编辑　张彩丽　责任校对　况玲玲
DOI :10.13989/j.cnki.0517-6611.2009.32.136
表 1　黄葛树染色体参数
Table1　ChromosomeparametersofFicuslacor
编号Code
染色体长度∥μmChromoso-melength
染色体相对长度∥%Chromosomere-lativelength
长臂μmLongarm
短臂μmShortarm
臂比Ratio类型Type
1 2.30 10.8 1.48 0.72 2.06 sm
2 2.14 10.0 1.53 0.61 2.51 sm
3 2.09 9.6 1.51 0.58 2.60 sm
4 1.97 9.2 1.49 0.48 3.10 st＊
5 1.80 8.4 1.23 0.57 2.16 sm
6 1.62 7.6 1.21 0.41 3.00 sm
7 1.52 7.1 0.83 0.69 1.20 m
8 1.47 6.9 0.99 0.48 2.06 sm
9 1.39 6.5 0.88 0.51 1.72 sm
10 1.26 5.9 0.75 0.51 1.47 m
11 0.98 4.6 0.68 0.30 2.27 sm
12 0.92 4.3 0.49 0.43 1.14 m
13 0.68 3.2 0.43 0.25 1.72 sm
14 0.62 2.9 0.32 0.30 1.06 m
15 0.60 2.8 0.31 0.29 1.07 m
　注:“＊”,不包括随体的长度。
　Note:“＊” isnotincludedthelengthofsatelite.
2.3　染色体核型图　根据染色体绝对长度 、相对长度 、臂
比 、随体的形状和大小等进行排列 ,按染色体由长到短重新
编号 ,由左向右贴在纸上 ,结果见图 2。
图 2　染色体核型图
Fig.2　ThechartofchromosomeKaryotype
2.4　染色体核型模式图　核型模式图用绘图纸和坐标纸
绘制。横座标为染色体序号 ,纵坐标为染色体的相对长度 。
绘染色体时 ,长臂在下 ,短臂在上(图 3)。
图 3　染色体核型模式图
Fig.3　ThepaternofchromosomeKaryotype
2.5　核型公式及分类　根据上述分析得出黄葛树核型公
　
式为:2n=30=1st+9sm+5m,染色体的臂比值变化范围在
1.06 ～ 3.10。臂比大于 2的染色体有 8对 ,为全组染色体的
53.33%,染色体相对长度组成为 2n=30=5L+3M2 +2M1 +
5S,根据 Stebbins的核型分类标准 ,属于 “3B”型 ,对称程度
较低。
3　讨论
(1)黄葛树作为一种优良的绿化树种 ,不仅可以美化环
境 ,还可以保土固岸 ,对它的应用已经非常广泛 ,但其核型分
析方面的研究尚未见报道 ,试验首次报道了黄葛树染色体核
型。核型分析是判断植物分类与演化地位的重要依据之一 ,
从该角度出发对前人的形态分类研究结果在细胞水平上进
行了补充。当然 ,对黄葛树进行完整而系统的研究 ,还需要
从生理生化指标以及分子生物学等方面获取更多遗传信息。
因此 ,试验仅从一个侧面为该物种分类及演化的研究提供基
础数据 。
(2)良好的染色体制片受多种因素影响。预处理和取材
均是关键的环节 [ 16] ,对于得到大量中期分裂相至关重要。
试验通过不同浓度秋水仙素预处理进行比较 ,认为浓度
0.2%秋水仙素预处理 12 ～ 24 h效果较好;对大量叶片不同
部位取材进行试验后发现 ,叶片的侧边组织相对细胞较大 ,
染色体易于分散 ,适宜作核型分析的细胞较多 。
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15768 　　　　　　　　　　安徽农业科学　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　2009年