全 文 ：兴安毛连菜染色体的核型分析
王 冰 王 飞 刘 丽 尹海波 沙 明 李 冲
(辽宁中医学院 , 沈阳 1 10 0 3 2 )
摘要 目的 : 研究分析兴安毛连菜 iP cr is da o icr a 染色体的核型 。 方法 : 采用常规制片方法 , 并结合显微摄影 。
结果 :兴安毛连菜体细胞染色体数目 Z n 二 l。 ;核型公式 (K Z n) 二 10 二 Z m 十 s sln ,染色体相对长度组成为 Z n = 10
二 Z L 十 Z M : + 4 M . 十 2 5 , 属于 “ 3 A ” 型 。 全组染色体总长是 12 . 51 林m , 长臂总长 8 . 36 林m , 核型不对称系数为
6
.
83 %
。 染色体总体积 1 . 71 协时 。 结论 :兴安毛连菜染色体的数目及形态清晰 , 可为进一步的深人研究打下基
础 。
关键词 兴安毛连菜 染色体数 目 核型 染色体体积
兴安毛连菜 尸衣isr d 。 刃u icr a iF shc 为菊科植物 ,
又名粘叶子草 , 主要分布于东北及内蒙古地区 ,生于
山坡 、林缘 、 田边或路边 〔 ’ 〕 。 根可收敛止泻 ;全草可
泻火解毒 、祛痰止痛 ,用于无名肿痛 ;花序可宣肺止
血 、化痰平喘〔’ 〕 。 本种的细胞学研究在文献中未见
到报道 。
1 材料与方法
兴安毛连菜种子于 2 0 01 年 9 月采于辽宁千山 ,
凭证标本存于辽宁中医学院药用植物教研室 。
实验按常规方法 〔’ 〕· ,选取饱满的兴安毛连菜的
种子用培养皿 ,在 2 一 26 ℃ 的恒温箱中培养 。 当胚
根长至 1 . 0 一 1 . 5 c m 时 ,上午 9 一 H 点取材 , 在室温
下用 0 . 巧% 或 0 . 20 % 秋水仙碱液暗处理 3 h ,反复
清洗干净 ,用卡诺固定液固定 2 一 巧 h ,转人 70 % 乙
醇中 ( 4 ℃左右 )保存 。
解离前先用蒸馏水清洗约 10 m in ,转人恒温的
6 0℃ 的 I N 盐酸解离液中解离 6 m in ,洗去残留的盐
酸 ,然后切取 1 一 2 m m 根尖 ,放在白瓷盘中 ,用混合
酶液 ( 1 , 5% 纤维素酶 一 l , 5 % 果胶酶 , 1 : l) 在室温下
解离 2 0 一 30 m in , 洗净残留的酶液 ,加卡宝 (石炭酸
品红 )染色液染色 18 h 以上 。 制片时先用 45 % 的冰
醋酸分色 2 一 3 m in ,选择染色体分散 、 核相较好 , 符
合分析要求的 ,用冰冻法封片。 揭片后于 37 ℃ 恒温
干燥 ,滴加二甲苯透明 , 中性树胶封片 。
选择染色体形态清晰并分散良好的中期细胞进
行显微摄影及分析 。 取 3 一 5 个细胞的染色体 , 各测
量 5 次 ,取平均值制成染色体参数表格和核型模式
图 。 各组染色体排列顺序以染色体总长为准 , 依次
排列 。 细胞核型分析参照 eL va n 等〔4〕以染色体臂比
来确定着丝点位置和郭幸荣等 〔’ 〕以染色体相对长
度系数将染色体分成 4 组的染色体分类标准 。 采用
了 st e b b in s 〔` 〕的按核型中最长染色体与最短染色体
之比及臂比大于 2 的染色体所占的比例和 rA an 。 〔7〕
中药材第 26 卷第 5 期 20 03 年 5 月
提出的长臂总长与全组染色体总长之比的核型不对
称系数 ( A S . K % )来确定 染色体核型不对称程度 。
染色体体积采用 D e 一 ve s co vi 等 〔` 〕的计算方法 。
2 结果
2
.
1 染色体数 目 选择 50 个染色体分散良好的
细胞观察计数 , 其中 49 个细胞染色体数目为 10 条 ,
占计数细胞总数的 98 % ,因此确定兴安毛连菜体细
胞染色体数 目为 Z n 二 10 ,见图 1 。 观察中未发现染
色体非倍性体细胞 ,也未发现 B 染色体及随体 。
_ , 勺娜 , 口 匆肠 气盼
尹图 , 兴安毛连菜体细胞分裂中期 (示染色体 Z n = 10)
2
.
2 染色体相对长度组成及核型分析 兴安毛连
菜的染色体平均长度为 .2 50 林m ,技郭幸荣等的分
类标准 , 5 对染色体可分成 4 组 ,第 1对为 L 组 ,第 2
对为 M : 组 ,第 3 、 4 对为 M , 组 , 第 5 对为 S 组 。 染
色体相对长度组成为 Z n = 10 = Z L + Z M : + 4 M ; +
2 5
, 见表 l 。
根据 eL va n 等的染色体分类标准 , 兴安毛连菜
的 5 对染色体具中部着丝点的为第 1 对 ,具近中部
着丝点的为第 2 、 3 、 4 、 5 对 ,其核型公式是 K ( Z n) =
1 0 = Z m + 8 s m
。
兴安毛连菜染色体组染色体总长为 12 . 5 1林m ,
长臂总长为 8 . 36 卜m , 根据 A ar on 的计算方法 , 核型
不对称系数 ( AS . K% )为 6 83 % , 对称程度较高 。
DOI : 10. 13863 /j . i ssn1001 -4454. 2003. 05. 003
5对染色体长度变化范 围在 1. 87 林m 一 3 . 2 1林 m 间 ,
最长染色体与最短染色体之比是 1 . 72 : l ,臂比值变
化范围是 1 . 47 一 2 . 4 4 ,其中 4 对染色体臂比大于 2 ,
为全组染色体的 80 % , 根据 tS eb ib n s 的核型分类标
准 ,兴安毛连菜的核型属于 “ 3 A ” 型 。 见表 1 及图 2 、
3
。
表 1 兴安毛连菜染色体参数
染色体编号 染
色体长度 ( 仆m )
长臂 + 短臂
相对长度系数
臂比
( IJ S )
分类
L e v a n K u o
对度相劝长郎
3
.
2 1 二 1
.
9 1 + 1
.
3 0
2
.
8 2 二 2
.
00 + 0
.
8 2
2
.
3 6 二 1
.
6 1 + 0
.
7 5
2
.
2 5 二 1
.
5 8 + 0
.
6 7
1
.
8 7 二 1
.
26 + 0
.
6 1
2 5
.
66
2 2
.
5 4
] 8
.
86
17
.
99
14
.
9 5
1
.
2 8
1
.
13
0
.
9 4
0
.
9 0
0
.
7 5
1
.
4 7
2
.
4 4
各称必扮妊 ” “ 2
.
3 6
2
,
0 7
m L
Srn M Z
Sm M I
Sm M I
S m S
表 2 兴安毛连菜的染色体体积
染色体编号 染色体宽度
( 林m )
染色体长度
( 协m )
染色体体积
( 林m , )
图 2 兴安毛连菜染色体核型图 1 1. 22 3 . 2 1 3 . 7 5
2 1
.
1 3 2
.
8 2 2
.
83
1
.
0
0
.
5
1
.
0 5
1
.
0 0
2
.
3 6
2
.
2 5
2
.
04
1
.
7 7
5 0
.
9 5 1
.
87 1
.
32
艺 12 . 5 1 1 1. 7 1
参 考 文 献
淞沙奋沐海\飞刘ù
2 、
1
口 日 ’ 就朱氮黔植物志下册 ’ 沈阳 : 辽宁科学技术出
染 色苗、 、 2 ’ ` ’ 2 张洪魁 ,等 中国中药资源志要 北京 : 科学 出版社 ,
199 4 : 13 2 3
2
. 。 、 篡煮嘿赞竺翼鹭暴染色体体 3 器寡· 4黔色体及染色体技术 · 北京 : “ 学串版
积计算公式得出各对染色体体积 , 体积变化范围 4 L e v a 。 A , 。 , 欲 . N o m e n e la e t u er of r 。 e n tor m e 、 。 p o s i t i。 。 。 n
1
.
3 2 一 3
.
7 5 林m , 间 , 全组染色体总体积为 1 1 . 7 1 。 h r o m o s o m e s . H e er d i t a s , 1 9砚 , 5 2 : 20 1
林m , ,见表 2 。 5 K u 。 s n , e t aJ . K a叮 o ty p e a n 滋y s is of s o m e fo r m o s an 盯 m n o -
3 讨论 s p e mr s · T a iw an i a , 19 7 2 , 17 : 66
染色体是遗传的物质基础 , 是细胞生命的控制 6 5 , e bb i n s GL Ch or m o s o m e e v o lu ` io n i n h ig h e r p l an `s · oL n -
者 。 植物染色体的数 目 、 形态等是最稳定的细胞学 do ” : dE w ar d rA on ld, 197 1: 8
特征之一 。 染色体的核型 、类型等也是表明该种系 7 Aar n o H· C y` o lo g ic a l , “ `u d i e s in s u b af m il y c a dr u o id e a e
统演化位置以及和相近种亲缘关系的重要依据 。 在 _ ( e om oP ist ae ) of J叩an ix · oB ` M ag l l% 3, 76 : 32
对中草药港行深介研究的同 .时, 对每种曹用植竺要’ “ 篇篡.糕黑eot 器戮摆蹂 a aln ys is O t色体进行系统的研兄在中药的鉴足 · 良种培育及驯 (20 02 一 09 丫 16 收稿 )化等方面具有重要意义 。
K a yr
o t y P e A n ia y s i s o f P i c isr da
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s y s t e m a t ie a l ly s t u d y iP
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s e h e hor mo
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me k娜 o ty p e . M e th o ds : S e e t i o n s e o lnb in e d w i th m i-
e or g ar p h w e r e u s e d t o a n a ly s e e h or m o s o m e
.
R
e s u l t s : C hor m o s o m e n u m b e r o f n o mr
a
l d ip lo i d w a s Zn = 10
,
k娜 o t y p e fo mr u la w a s K
( Z
n
) = 10 = Z m + 8
s m
, th e 此 la t i v e l e n gt h w a s Zn “ 10 = Z L + Z M : + 4 M l + 2 5 , w h i e h b e lo n g e d t o “ 3 A ” t yp e . hT e t o t a l le n gt h o f
e
h or m o s o m e gor
u p s w a s 12
.
5 1 协 m , th e t o tal l e n gt h o f l o n g amr
s w a s s
·
3 6 卜m , t h e A S . K % w as 66 . 83 % . T h e t o tal v o l u m e of e hor m o -
s o m e w a , 2 1
.
7 1 卜m , . e o n e l u s i o n : 尸交瓦: 血。 u瓦e a 。 h or m o s o m。 n u m b e r a n d mo 印助一o ig e a l e har a e et r w e er e l e ar .
k e y w o r d s icP isr da
: u
cn
a
F i
s e h : Chor m o s o m e n u m b e r ; K a叮 o ty p e ; Chor m o s o m e v o lu m e
中药材第 26 卷第 5 期 2 003 年 5 月