全 文 ：hydroxysafloryelowAonexperimentalcerebralischemiainrats
[J].ActaPharmSin(药学学报), 2005, 40(12):1144-1146.
[ 4] 　WEIXB, LIUHQ, SUNX, etal.HydroxysafloryelowApro-
tectsratbrainsagainstischemia-reperfusioninjurybyantioxidant
action[ J].NeurosciLet, 2005, 38(6):58-62.
[ 5] 　CHUD, LIUW, HUANGZ, etal.Pharmacokineticsandexcre-
tionofhydroxysafloryelowA, apotentneuroprotectiveagentfrom
saflower, inratsanddogs[J] .PlantaMed, 2006, 72(5):418-
423.
[ 6] 　Ch.P(2005)VolⅡ(中国药典 2005年版 .二部)[ S] .2005:
103-104.
[ 7] 　OUSY, BAOHY, LANZD.Thestudyadvancementinphar-
macologicactionofferulicacidanditsderivate[ J] .JChinMed
Mater(中药材), 2001, 24(3):220-221.
[ 8] 　GULP, SHENGJ, QIUJG, etal.Determinationofferulicacid
inHonghuadangguimixturebyHPLC[ J] .PharmJChinPLA
(解放军药学学报), 2004, 20(6):468-469.
[ 9] 　CHUY, SONGHT, CHENDW, etal.Extractingprocessfor
saffloweryelowinCarthamustinctorius[ J] .ChinTraditHerb
Drugs(中草药), 2006, 37(8):1161-1164.
(收稿日期:2009-05-04)
基金项目:科技部资助项目(2005DKA21004);国家十一五攻关课题(2006BAIO09B02-6)
作者简介:许亮 ,男 ,博士研究生　　研究方向:药用植物资源研究与品质评价　　＊通讯作者:康廷国 ,男 ,教授 ,博士生导师　　研究方向:中
药鉴定与品质评价　　Tel:(0411)87586028　　E-mail:kangtg@lnutcm.edu.cn
牛蒡与毛头牛蒡染色体核型比较分析
许亮 ,王冰 ,窦德强 ,康廷国＊ ,卢淑君(辽宁中医药大学 ,辽宁 大连 116600)
摘要:目的　对药用植物牛蒡和毛头牛蒡进行染色体核型比较研究。方法　采用常规制片方法 , 结合显微摄影对 2种药用植
物的染色体进行检测分析。结果　牛蒡与毛头牛蒡的染色体数目相同均为 2n=36, 核型均为 “ 2B”型。 牛蒡染色体相对长度
组成为 2n=36=6L+6M2 +16M1 +8S, 核型公式是 K(2n)= 2X=36=18m+18sm。 毛头牛蒡染色体相对长度组成为 2
n=36=6L+4M2 +20M1 +6S, 核型公式是 K(2n)= 2X=36 =20m+16sm。 结论　牛蒡与毛头牛蒡染色体数目清晰 , 核型明
确 , 为 2种药用植物的细胞学研究提供了数据。
关键词:牛蒡;毛头牛蒡;染色体数目;染色体核型
中图分类号:R284　　　文献标识码:A　　　文章编号:1001-2494(2010)04-0251-05
ComparativeAnalysisofChromosomeKaryptypeofArctiumlappaandArctiumtomentosum
XULiang, WANGBing, DOUDe-qiang, KANGTing-guo＊ , LUShu-jun(CollegeofMedicine, LiaoningUniversityofTradi-
tionalChineseMedicine, Dalian116600, China)
ABSTRACT:OBJECTIVE　TostudychromosomekaryptypeofArctiumlappaandArctiumtomentosum.METHODS　Sectionscom-
binedwithmicrographwereusedtoanalyzechromosomekaryotype.RESULTS　 ThenormaldiploidofArctium lappaand
A.tomentosumwere2n=36.Thetwobelongedto“ 2B”typeaccordingtoStebbingskaryotypeclassification.A.lappachromosomerela-
tivelengthwas2n=36=6L+6M2 +16M1 +8SandkaryotypeformulawasK(2n)=2X=36=18m+18sm.A.tomentosumwas2n=
36=6L+4M2 +20M1 +6SandK(2n)=2X=36=20m+16sm.CONCLUSION　Twomedicinalplantschromosomenumberand
chromosomekaryotypeareclear, andprovidedataforthecytologicalstudy.
KEYWORDS:Arctiumlappa;Arctiumtomentosum;chromosomenumber;chromosomekaryotype
　　菊科牛蒡属植物我国有 2种 [ 1] ,为牛蒡(Arcti-
um lappaL.)和毛头牛蒡 (Arctium tomentosum
Mil.),均具有药用价值 ,牛蒡的干燥成熟果实为牛
蒡子 ,是一味临床常用中药 ,具有疏散风热 、宣肺透
疹 、解毒利咽的功效 ,用于治疗风热感冒 、咳嗽痰多 、
麻疹 、风疹 、咽喉肿痛等。牛蒡子应用历史悠久 ,始
载于 《名医别录 》称为 “恶实 ”,牛蒡的根 、叶一并入
药称为 “牛蒡根 ”、“牛蒡叶”。毛头牛蒡分布于新疆
天山 ,为新疆特有药用植物 [ 2] 。染色体是遗传物质
的载体 ,对染色体的细胞学研究具有重要的意义 ,在
对牛蒡和毛头牛蒡的染色体数目进行分析的基础
上[ 3] ,本实验对其核型进行比较分析 ,为牛蒡属 2种
·251·中国药学杂志 2010年 2月第 45卷第 4期　　　 　 　　　　　　　　　 ChinPharmJ, 2010February, Vol.45No.4
药用植物的染色体鉴别提供参考。
1　材料与方法
1.1　材料
牛蒡的果实 2007年采于辽宁沈阳市苏家屯区
白清乡南大山 ,毛头牛蒡果实 2007年采于新疆乌鲁
木齐南山 ,由本校王冰教授鉴定 ,凭证标本存于辽宁
中医药大学药学院药用植物教研室。
1.2　方法
采用常规制片方法[ 4-5]进行 ,将牛蒡与毛头牛蒡
的果实放在 24 ～ 28 ℃的恒温培养箱中培养 。当胚
根长至 1.0 ～ 1.5 cm时 , 在室温下用 0.10%和
0.15%秋水仙碱液分别暗处理 3, 3.5, 4 h。用卡诺
固定液固定 2 ～ 15 h,再转入体积分数 70%乙醇中
(4℃左右)保存。将清洗的材料转入预热恒温 60
℃的 1 mol·L-1盐酸解离液中分别解离 ,用混合酶
液(1.5%纤维素酶 -1.5%果胶酶 =1∶1)在室温下解
离 1 ～ 2 h后 ,低渗液处理 30 min,改良的石碳酸品
红染色液染色 , 45%的冰醋酸分色 ,压片方法将细胞
分散 , 采用冰冻制片法制片。置于 OlympusBX50
摄影显微镜下观察 ,选择染色体分散良好 、数目清晰
者摄影 ,并做进一步分析。根据数量统计要求 ,对每
个样品进行 50个染色体分散良好 、数目清晰的细胞
进行染色体数目统计 ,并对其核型进行比较分析。
染色体核型分析采用 Levan等 [ 6]以染色体臂
比来确定着丝点位置和 Kuo等 [ 7] 以染色体相对
长度系数将染色体分成 4组的染色体分类标准 。
采用了 Stebbins[ 8]的按核型中最长染色体与最短
染色体之比及臂比大于 2的染色体所占的比例
和 Arano[ 9]提出的长臂总长与全组染色体总长之
比的核型不对称系数(AS.K%)来确定染色体核
型不对 称程度 。染色体 体积采用 de-Vescovi
等 [ 10]的计算方法 。
2　结果与讨论
2.1　染色体数目
对牛蒡和毛头牛蒡的制片进行观察 ,每种统
计 50个染色体分散良好的细胞 ,牛蒡染色体数
目为 2n=36 , 见图 1 , 毛头牛蒡染色体数目为
2n=36,见图 2。
2.2　染色体相对长度组成及核型分析
牛蒡的染色体平均长度为 1.54 μm,毛头牛蒡的
染色体平均长度为 1.73 μm。按 Kuo等[ 7]的分类标
准 ,牛蒡的 18对染色体分成 4组 , 1 ～ 3对为 L组 ,
　　
4 ～ 6对为 M2组 , 7 ～ 14对为 M1组 , 15 ～ 18对为 S
组 ,染色体相对长度组成为 2n=36=6L+6M2 +
16M1 +8S。毛头牛蒡的 18对染色体分成 4组 , 1 ～ 3
对为 L组 , 4 ～ 5对为 M2组 , 6 ～ 15对为 M1组 , 16 ～ 18
对为 S组 , 染色体相对长度组成为 2n=36=6L+4M2
+20M1 +6S。根据 Levan等的染色体分类标准 ,牛蒡
的 18对染色体具中部着丝点的为第 1, 2, 3, 7, 8, 12,
15, 16, 17对 ,具近中部着丝点的为第 4, 5, 6, 9, 10, 11,
13, 14, 18对 , 其核型公式是 K(2n)= 2X=36 =
18m+18sm。毛头牛蒡的 18对染色体具中部着丝点
的为第 1, 2, 3, 6, 8, 10, 11, 16, 17, 18对 ,具近中部着丝
点的为第 4, 5, 7, 9, 12, 13, 14, 15对 ,其核型公式是
K(2n)=2X=36=20m+16sm。
牛蒡染色体组染色体总长为 27.74 μm,长臂总
长为 17.37 μm,根据 Arano的计算方法 ,核型不对
称系数为 62.62%。 18对染色体长度变化范围在
1.02 ～ 2.86 μm间 ,最长染色体与最短染色体之比
是 2.80∶1,臂比值变化范围是 1.11 ～ 2.52,其中 5
对染色体臂比大于 2 ,为全组染色体的 27.78%,根
·252· ChinPharmJ, 2010February, Vol.45No.4　　　　　　　　　　　　　 中国药学杂志 2010年 2月第 45卷第 4期
据 Stebbins的核型分类标准 ,属于 “ 2B”型 。毛头牛
蒡染色体组染色体总长为 31.11 μm,长臂总长为
19.29 μm,根据 Arano的计算方法 ,核型不对称系数
为 62.01%。 18对染色体长度变化范围在 1.14 ～
2.93 μm间 , 最长染色体与最短染色体之比是
2.57∶1,臂比值变化范围是 1.16 ～ 2.66, 其中 5对
染色体臂比大于 2,为全组染色体的 27.78%,根据
Stebbins的核型分类标准 ,属于 “2B”型 。牛蒡的染
色体参数 、核型及核型模式图分别见表 1和图 3, 4。
毛头牛蒡的染色体参数 、核型及核型模式图分别见
表 2和图 5, 6。
牛蒡与毛头牛蒡的染色体数目相同均为 2n=
36,根据 Stebbins的核型分类标准 , 核型相似均为
“2B”型。毛头牛蒡核型不对称系数比牛蒡略小 ,毛
头牛蒡染色体组染色体总长比牛蒡的长 3.37 μm,
毛头牛蒡比牛蒡的核型更原始。
2.3　染色体体积
根据 de-Vescovi等 [ 10] 的染色体体积计算公式
计算出牛蒡与毛头牛蒡各对染色体体积 。牛蒡染色
体体积变化范围在 0.11 ～ 1.27 μm3间 ,全组染色体
总体积为 9.83 μm3。毛头牛蒡染色体体积变化范
围在 0.44 ～ 1.5 0μm3间 , 全组染色体总体积为
表 1　牛蒡的染色体参数
Tab.1　A.lappachromosomeparameter
No. Length(L+S)/μm Relativelength/% I.R.L L/S CategoriesLevan Kuo
1 1.51+1.36=2.87 10.32 1.86 1.11 m L
2 1.45+0.97=2.42 8.73 1.57 1.48 m L
3 1.38+0.99=2.37 8.54 1.54 1.38 m L
4 1.32+0.56=1.88 6.78 1.22 2.34 sm M2
5 1.10+0.55=1.65 5.96 1.07 1.98 sm M2
6 1.16+0.46=1.62 5.83 1.05 2.52 sm M2
7 0.90+0.60=1.50 5.40 0.97 1.51 m M1
8 0.90+0.53=1.43 5.17 0.93 1.69 m M1
9 0.94+0.46=1.40 5.06 0.91 2.04 sm M1
10 0.95+0.41=1.36 4.91 0.88 2.29 sm M1
11 0.85+0.47=1.32 4.76 0.86 1.82 sm M1
12 0.69+0.56=1.25 4.49 0.81 1.23 m M1
13 0.77+0.43=1.20 4.32 0.78 1.79 sm M1
14 0.76+0.40=1.16 4.20 0.76 1.88 sm M1
15 0.68+0.47=1.15 4.14 0.75 1.45 m S
16 0.68+0.42=1.10 3.96 0.71 1.62 m S
17 0.64+0.39=1.03 3.72 0.67 1.66 m S
18 0.70+0.32=1.02 3.69 0.66 2.19 sm S
表 2　毛头牛蒡的染色体参数
Tab.2　A.tomentosumchromosomeparameter
No. Length(L+S)/μm Relativelength/% I.R.L L/S CategoriesLevan Kuo
1 1.72+1.21=2.93 9.41 1.69 1.42 m L
2 1.45+1.26=2.71 8.71 1.57 1.16 m L
3 1.42+1.19=2.61 8.38 1.51 1.20 m L
4 1.40+0.65=2.05 6.58 1.18 2.14 sm M2
5 1.21+0.55=1.76 5.65 1.02 2.23 sm M2
6 0.97+0.76=1.73 5.55 1.00 1.29 m M1
7 1.24+0.47=1.71 5.50 0.99 2.66 sm M1
8 1.04+0.62=1.66 5.33 0.96 1.70 m M1
9 1.18+0.44=1.62 5.22 0.94 2.62 sm M1
10 0.94+0.63=1.57 5.03 0.91 1.51 m M1
11 0.91+0.60=1.51 4.85 0.87 1.50 m M1
12 0.94+0.52=1.46 4.70 0.85 1.80 sm M1
13 0.92+0.54=1.46 4.70 0.84 1.72 sm M1
14 0.97+0.43=1.40 4.50 0.81 2.29 sm M1
15 0.84+0.49=1.33 4.28 0.77 1.71 sm M1
16 0.80+0.48=1.28 4.13 0.74 1.65 m S
17 0.65+0.54=1.19 3.82 0.69 1.20 m S
18 0.69+0.45=1.14 3.67 0.66 1.53 m S
·253·中国药学杂志 2010年 2月第 45卷第 4期　　　 　 　　　　　　　　　 ChinPharmJ, 2010February, Vol.45No.4
14.86 μm3。毛头牛蒡的染色体总体积比牛蒡的大
5.03μm3 ,见表 3。
3　讨　论
中药鉴别包括基源 、性状 、显微 、理化等多个方
面 ,植物类中药的基源鉴别就是对药材的原植物进
行鉴别分析 ,包括原植物的形态学 、细胞学 、解剖学
等特点的鉴别比较。细胞学中染色体的数目 、核型
是一项重要的生物学特征 ,染色体是遗传物质的载
体 ,染色体的研究对于药用植物的分类 、亲缘关系的
远近 、基源植物的鉴别 、种质资源的评价 、优良品种
的培育及驯化等方面具有重要的意义。牛蒡与毛头
表 3　牛蒡与毛头牛蒡的染色体体积
Tab.3　A.lappaandA.tomentosumchromosomevolume
No. A.lappa A.tomentosumWidth/μm Length/μm Volume/μm3 Width/μm Length/μm Volume/μm3
1 0.75 2.86 1.27 0.74 2.93 1.27
2 0.72 2.42 1.00 0.84 2.71 1.50
3 0.78 2.37 1.13 0.81 2.61 1.33
4 0.68 1.88 0.69 0.87 2.05 1.21
5 0.69 1.65 0.62 0.69 1.76 0.66
6 0.72 1.62 0.65 0.68 1.73 0.62
7 0.74 1.50 0.64 0.78 1.71 0.81
8 0.67 1.44 0.50 0.80 1.66 0.83
9 0.64 1.40 0.46 0.83 1.62 0.88
10 0.60 1.36 0.38 0.82 1.57 0.82
11 0.70 1.32 0.50 0.76 1.51 0.69
12 0.49 1.25 0.23 0.67 1.46 0.52
13 0.65 1.20 0.40 0.77 1.46 0.68
14 0.35 1.17 0.11 0.97 1.40 1.04
15 0.69 1.15 0.43 0.76 1.33 0.61
16 0.32 1.10 0.09 0.67 1.28 0.45
17 0.60 1.03 0.29 0.68 1.19 0.44
18 0.72 1.02 0.42 0.76 1.14 0.51
∑ 27.74 9.83 31.11 14.86
·254· ChinPharmJ, 2010February, Vol.45No.4　　　　　　　　　　　　　 中国药学杂志 2010年 2月第 45卷第 4期
牛蒡的染色体数目相同为 2n=36,牛蒡的染色体核
型为 “ 2B”与前人报道一致[ 11] 。毛头牛蒡的染色体
核型亦为 “2B”为首次报道。二者亲缘关系较近 ,同
科同属 ,药用价值相似 ,均含有较高的牛蒡苷 ,是天
然产物牛蒡苷的重要药用资源 。在中药牛蒡子使用
中 ,毛头牛蒡的果实是其常见的伪品之一 ,从染色体
核型来看二者均为 “2B”型 ,但毛头牛蒡的核型不对
称系数为 62.01比牛蒡的 62.62略小 ,更接近 50,毛
头牛蒡的核型稍原始 。毛头牛蒡的染色体总长和长
臂总长比牛蒡略大 ,而染色体体积比牛蒡的大 5.03
μm3 ,毛头牛蒡 18对染色体中 m型有 10对 , 占
55.56%, sm型有 8对 ,占 44.44%,而牛蒡 18对染
色体中 m型有 9对 ,占 50%, sm型有 9对占 50%。
这些染色体的长度 、体积 、核型不对称系数等指标可
以作为牛蒡与毛头牛蒡细胞学染色体鉴别的重要依
据 ,为牛蒡的正确使用 ,品种鉴别提供参考 。
REFERENCES
[ 1 ] 　TheChineseAcademyofSciencesFolraofChinaEditorialCom-
mitee.FloraofChina(中国植物志)[M].Vol78, Beijing:Sci-
encePress, 1987:57-58.
[ 2 ] 　ChinaNationalGroupCorp.ofTraditionalandHerbalMedicine.
CompendiumofChineseMedicinalMaterialResources(中国中药
资源志要)[M].Beijing:SciencePres, 1994:1247.
[ 3 ] 　XUL, DOUDQ, WANGB, etal.Analysischromosomeofarcti-
uminChina[ J] .JChinMedMater(中药材), 2009, 32(3):
337-339.
[ 4 ] 　WANGB, LIN, GUXJ, etal.KaryptypeanalysisofDoelinge-
riascaberchromosome[ J] .ChinPharmJ(中国药学杂志),
2006, 41(10):732-734.
[ 5 ] 　ZHUW.PlantChromosomeandTechnology(植物染色体及染
色体技术)[M].Beijing:SciencePres, 1982:42-92.
[ 6 ] 　LEVANA, FREDGAK, SANDBERGAA.Nomenclacturefor
centromericpositiononchromosome[ J] .Hereditas, 1964, 52
(2):201-220.
[ 7 ] 　KUOSR, WANGTT, HUANGTC.Karyotypeanalysisof
someformosangymnosperms[ J].Taiwania, 1972, 17(1):66-
80.
[ 8 ] 　STEBBINSGL.ChromosomeEvolutioninHigherPlants[ M].
London:EdwardAronld, 1971:88-105.
[ 9 ] 　ARANOH.Cytologicalstudiesinsubfamilycarduoideae(com-
positae)ofJapanIX[J].BotMag, 1963, 76(1):32-39.
[ 10] 　DE-VESCOVIMA, SZIKLAO.Campartivekaryotypeanalysis
ofDouglasfir[J].SilvaeGenet, 1975, 24 (2-3):48.
[ 11] 　LIL, LIUD, YANGJM, etal.StudyonchromosomeofArcti-
umlappa[ J] .JShangdongColTraditChinMed(山东中医学
院学报), 1996, 20(3):208-210.
(收稿日期:2009-05-08)
基金项目:国家药典委员会课题(YS-200)
作者简介:肖远灿 ,男 ,硕士　　研究方向:药物分析与植物化学　　＊通讯作者:魏立新 ,男 , 博士　　研究方向:藏药成分及药理作用研究　
　Tel:(0971)6143668　　E-mail:lxwei@nwipb.ac.cn
藏药材印度獐牙菜质量标准研究
肖远灿 1 ,魏立新 1＊ ,杨红霞1, 2 ,杜玉枝 1(1.中国科学院西北高原生物研究所 ,青海省青藏高原特色生物资源研究重点实验室 ,西宁
810008;2.中国科学院研究生院 ,北京 100049)
摘要:目的　建立印度獐牙菜药材的质量标准。方法　采用薄层色谱法鉴别印度獐牙菜药材中獐牙菜苦苷 、龙胆苦苷和芒果
苷成分;以高效液相色谱法测定该 3种成分的含量。色谱柱为 ZorbaxEclipseXDB-C
18
(4.6 mm×250 mm, 5 μm),流动相为
甲醇-水(0.1%冰醋酸)线性梯度洗脱 , 甲醇体积分数从 22%经 18 min至 32%并保持 5 min,流速为 1.0 mL· min-1 , 柱温为
25 ℃,检测波长为 243nm。结果　印度獐牙菜药材中獐牙菜苦苷 、龙胆苦苷和芒果苷的薄层色谱鉴别特征明显 , 专属性强;药
材中獐牙菜苦苷 、龙胆苦苷和芒果苷的含量测定线性范围分别为 0.06 ～ 2.00 μg(r=0.999 7), 0.09 ～ 2.90 μg(r=0.999 7)和
0.05 ～ 1.65μg(r=0.999 8), 平均回收率(n=9)分别为 103.76 % (RSD=1.34 %), 99.43 % (RSD=1.60%)和 96.22%
(RSD=1.30%)。结论　所建立的印度獐牙菜定性定量测定方法简单准确 , 能够为印度獐牙菜药材的质量控制提供有效
数据。
关键词:印度獐牙菜药材;獐牙菜苦苷;龙胆苦苷;芒果苷;薄层色谱法;高效液相色谱法
中图分类号:R284　　　文献标识码:A　　　文章编号:1001-2494(2010)04-0255-04
QualityControlofTraditionalTibetanMedicineSwertiachirayita
XIAOYuan-can1 , WEILi-xin1＊ , YANGHong-xia1, 2 , DUYu-zhi1(1.NorthwestPlateauInstituteofBiology, ChineseAcad-
·255·中国药学杂志 2010年 2月第 45卷第 4期　　　 　 　　　　　　　　　 ChinPharmJ, 2010February, Vol.45No.4