全 文 ：青海科技 2007年第3期
QST
研究与开发
(3) 就干旱月而言,用“ 土壤─作物”系统法标
准判断得出的重旱概率要比用 Z指数法标准判断得出
的重旱概率高 1.3倍,而两者判断得出的中旱概率基
本一致。采用“ 土壤─作物”系统法的标准判断,重
旱为3年一遇、中旱约 1.9年一遇;采用 Z指数法的
标准判断,重旱为7年一遇,中旱约2.1年一遇。
(4) 从季节性干旱产生的年代进行比较,27次
“ 土壤─作物”系统法判断的中旱、重旱中,20世纪
60、70、80、90年代分别发生了 4、7、6、9次 (另
有1次发生在21世纪初),表明南方红壤丘岗区抵御
季节性干旱的能力在不断下降,农业生态系统的抗逆
性能在不断退化。
参考文献:
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大叶白麻 (Poacynumhendersoni(Hook.f)
Woodson.),夹竹桃科白麻属,多年生草本。大叶白麻
是一种优质的纺织纤维材料,现作为罗布麻的一种代
用品广泛应用于药用保健业,作为药用有着延缓衰
老、降压、降脂、抗感冒、镇静安神等功效[1-7]。青海
省柴达木盆地分布有丰富的天然大叶白麻资源,据统
计大叶白麻在柴达木地区占地约26.67万hm2[8],是全
国最大的天然大叶白麻生长区之一。本实验采用试管
系统预试法对柴达木盆地大叶白麻叶化学成分进行系
统预试,并对其总黄酮提取工艺进行研究。
1 材料与仪器
大叶白麻叶采自青海省柴达木盆地,经青海省农
林科学院野生植物资源研究所鉴定为原植物;芦丁标
准品 (99.0%):上海友思生物技术有限公司;ZF7C三
用紫外分析仪:上海康华生物仪器制造厂;SCB-10型
超声波萃取器:德阳四创科技有限公司;T6新世纪紫
外可见分光光度计:北京普析通用有限责任公司;BS
224S电子天平:德国Sertorious公司。化学预试及提取
所用试剂均为分析纯。
2 试验方法
2.1 预试样液制备
取干燥大叶白麻叶粉碎后过20目筛,用于制备以
下不同提取液。
(1) 冷水提取液 (A):取大叶白麻叶粉2g,加入
20mL水,室温浸泡过夜,滤取10mL滤液供检试氨基
酸、多肽和蛋白质等。
(2) 热水提取液 (B):冷水提取液余液及残渣在
50～60℃水浴上温浸0.5h抽滤,滤液供检试糖、多糖,
皂甙、甙类、酚类,有机、鞣质等成分。
(3)乙醇提取液(C):取大叶白麻叶粉5g,加无水乙
醇约50mL,水浴回流15min,过滤滤液浓缩至1/2,供检
试黄酮、蒽醌、香豆素,强心甙、内脂、甾体萜类等。
(4) 酸性乙醇提取液 (D):取大叶白麻叶粉5g,
加无水乙醇约50mL,水浴回流15min,浓缩至浆状以
2%HCl10mL溶解成酸性溶液,供检试酚类、有机酸、
生物碱等。
(5) 乙醚提取液 (E):取大叶白麻叶粉5g,加乙
醚50mL,水浴回流20min,过滤,供检试内脂和挥发
柴达木盆地大叶白麻叶
化学预试及总黄酮提取研究
王 宁1,赵 明1,2
(1.青海省农林科学院野生植物资源研究所,青海 西宁 810016;2.青海大学,青海 西宁 810016)
摘 要:采用试管法对柴达木盆地大叶白麻叶化学成分进行系统预试,并通过正交试验对总黄酮提取工艺进行研
究。结果发现,大叶白麻叶中含有酚类、鞣质、糖及其甙、黄酮及其甙、强心甙、内酯、香豆素及其甙、挥发油等成
分。总黄酮最佳提取工艺为D3C2B2A1,即温度60℃、乙醇浓度70%、料液比1∶40、时间1h。
关键词:大叶白麻叶;化学预试;总黄酮;提取工艺;柴达木盆地
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油等。
(6) 甲醇提取液 (F):乙醚处理过的材料,用甲
醇20mL回流提取10min,趁热过滤,供检试黄酮甙、
蒽醌甙、强心甙等。
2.2 试管系统预试法[9,10]
2.3 芦丁标准曲线制备[11]
精确称取芦丁标准品做标准液,用NaNO2、AlCl3、
NaOH作为显色剂,用紫外分光度计于510nm测定吸光
度A,并作出标准曲线,回归方程A=9.5071C+0.0095,
R2=0.9925。
2.4 总黄酮提取及得率计算
准确称取2.0g大叶白麻叶粉末 (60目) 置于烧杯
中,根据实验设计分别选用不同浸泡时间、料液比、
乙醇浓度、温度进行总黄酮提取。提取液过滤定容
后,取2mL于25mL容量瓶中。按照测定芦丁标准曲线
方法测定吸光度A。总黄酮得率按下列公式计算:
基金项目:青海省重大科技攻关项目 (2006-N-138)
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总黄酮得率 (%)=
C×V×25×100
W×2×1000
式中:C—根据回归方程计算得到的总黄酮浓度(mg·
mL-1);25和V—稀释倍数;2—取2mL待测液;W—大
叶白麻叶质量 (g)。
2.5 正交试验设计
分别选取浸泡时间、料液比、乙醇浓度、温度四
个因素,按表1设计4因素3水平的正交试验。确定9组
不同的试验,筛选最佳提取方案。
3 实验结果
3.1 系统预试结果
试验内容及结果见表2。由表2可看出,大叶白麻
叶中含有酚类、鞣质、糖及其甙、黄酮及其甙、强心
甙、内酯、香豆素及其甙、甾体、挥发油物质。
3.2 总黄酮提取正交试验结果
表3为正交试验安排与结果。由表3R值可看出,
4个因素对大叶白麻叶总黄酮提取影响的顺序依次为:
温度D>乙醇浓度C>料液比B>浸泡时间A。在本试
验条件下,根据提取量分析,确定总黄酮最佳提取工
艺为D3C2B2A1,即温度60℃、乙醇浓度70%、料液比
1∶40、时间1h。
4 讨论
本试验对柴达木盆地大叶白麻叶化学成分进行了
系统预试,初步确定了化学成分,并对总黄酮提取工
艺进行了研究。柴达木盆地大叶白麻资源丰富,有着
极大的开发利用前景[8,12]。本实验可为开发大叶白麻药
用成分资源研究提供基础数据。
参考文献:
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大黄属植物全世界约60种,我国多达45种,主
要分布于西北至西南一带,除 2～3种外,均有药用
价 值 [1]。 大 黄 作 为 常 用 中 药 , 来 源 于 蓼 科
(Polygonaceae)大黄属 (RheumLinn.) 植物,药用部分
为根及根茎。《 中国药典 (2005)》 中,大黄为蓼科
植物掌叶大黄 (Rh.palmatumLinn.)、唐古特大黄
(Rh.tanguticumMaxim.ex.Balf.) 或药用大黄 (Rh.
oficinaleBail.) 的干燥根及根茎。大黄具有泻火解
毒、攻积化瘀、散解止血的功效,有导泻、抗病原微
生物、利胆、保肝、降血脂、止血、活血、抗肿瘤、
调节免疫等多重药理学作用。有关大黄的研究多集中
于药典收载的三种[2]。对常见的同属植物的混杂品也
有许多研究,如华北大黄 (Rh.franzenbachiMünt.)、
河套大黄 (Rh.hotaoenseC.Y.ChengetT.C.Kao)、藏
边大黄 (Rh.emodiWal.)和天山大黄 (Rh.witrochi
Lundstr.),但对该属其他品种的研究和报道很少。歧
穗大黄 (Rh.przewalskiA.L!s.)为非正品大黄,但在
藏药中列为藏药大黄的中品,其功效品质稍逊于上品
的掌叶大黄和唐古特大黄[3],主要分布于青海、四川、
甘肃以及新疆西南部的昆仑山地区,是青藏高原和我
国特有种,主要生长于海拔高度为3000～5900m的高
山流石坡、沟谷石缝、河谷阶地、高寒草原砾地、沙
砾滩地、砾石山坡、高山山前冲积扇,干旱河滩地等
生境[4,5]。本文应用 HPLC分析方法,对歧穗大黄的 5
种蒽醌进行定量分析,旨在扩大大黄属药用资源,并
为歧穗大黄天然资源的进一步开发利用提供科学依
据。
1 实验部分
1.1 实验材料
歧穗大黄采自青海省境内三个样点,经中国科学
院西北高原生物研究所卢学峰博士鉴定为歧穗大黄
(Rh.przewalskiA.Ls.)。样点自然生境条件见表1。
1.2 仪器与试剂
Waters515型高效液相色谱仪,配备 W2996二极
管阵列检测器 (DAD)、高压二元梯度泵、六通阀进样
系统、柱温箱。色谱数据采集与处理由Empower色谱
工作站完成。HS3120型超声波清洗器,微型粉碎机,
脱气抽滤装置。
试剂:甲醇 (色谱纯,山东禹王实业有限公司);
甲醇 (分析纯,天津市百世化工公司化学试剂厂);
磷酸 (优级纯,北京红星化工厂);超纯水 (实验室
自制)。
标准品:大黄素,中国药品生物制品检定所,批
号110756-200110;芦荟大黄素,中国药品生物制品
检定所,批号110795-200504;大黄酸,中国药品生
物制品检定所,批号0757-200206;大黄酚,中国药
品生物制品检定所,批号110796-200309;大黄素甲
醚,中国药品生物制品检定所,批号0758-200206。
青海歧穗大黄中蒽醌含量的HPLC测定
李锦萍 1,陈桂琛 2,卢学峰 2
(1.青海师范大学生命与地理学院,青海 西宁 810008;
2.中国科学院西北高原生物研究所,青海 西宁 810001)
摘 要:目的 测定青海歧穗大黄中 5种蒽醌含量。方法 采用反相高效液相色谱法,色谱柱为 WatersXTera
RP185μm4.6mm×150mmcolumn;流动相 甲醇∶水∶磷酸 =83∶17∶0.04;流速 1.0mL·min-1;柱温 30℃;检测波长
254nm。结果 5种成分达到基线分离,芦荟大黄素(r=0.9999)、大黄酸(r=0.9992)、大黄酚(r=0.9999)、大黄素(r=0.9998)线
性范围为 1.0～16.0μg;大黄素甲醚 (r=0.9996) 的线性范围为 0.50～8.0μg;大黄素与大黄酚的平均回收率为 98.81%
和99.27%。结论 不同生境青海歧穗大黄蒽醌类含量有较大差异。
关键词:歧穗大黄;蒽醌含量;RP-HPLC;青海
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