全 文 ：大蝎子草干、鲜品水提物的抗炎镇痛作用实验研究*
＊
吴林菁1，2，徐旖旎2，姜 丰1，2，苏 菊1，2，周 雪1，2，陶 玲1，2，沈祥春2＊＊，
张嫩玲2，张 旭2
(1．贵州医科大学 中药药剂学教研室，贵州 贵阳 550025;2．贵州医科大学 天然药物资源优效利用重点实验室，贵州 贵阳 550025)
［摘 要］目的:研究大蝎子草干、鲜品水提物的抗炎及镇痛作用。方法:取健康昆明种小鼠随机分为模型组
(蒸馏水)，阳性对照组(阿司匹林，0. 3 g /kg)，大蝎子草干品水提物高、中、低剂量组及大蝎子草鲜品水提物高、
中、低剂量组共 8 组;采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀及皮肤毛细血管通透性实验，评价大蝎子草干、鲜品水提物的
抗炎作用;采用醋酸致小鼠扭体反应与小鼠热板致痛实验动物模型评价其镇痛作用。结果:与模型组比较，大
蝎子草干、鲜品水提物均能显著减轻小鼠耳廓肿胀度(P ＜ 0. 01)，提高小鼠的痛阈值(P ＜ 0. 01)及减少醋酸致小
鼠扭体反应的次数(P ＜ 0. 01) ，大蝎子草鲜品水提物还能明显抑制二甲苯致小鼠皮肤毛细血管通透性(P ＜
0. 01，P ＜ 0. 05)，且大蝎子草鲜品水提物抗炎、镇痛效果优于干品水提物。结论:大蝎子草干、鲜品水提物均具
有抗炎及镇痛作用，且大蝎子草鲜品水提物作用优于大蝎子草干品水提物。
［关键词］大蝎子草;抗炎;镇痛;风湿性疾病;小鼠
［中图分类号］Ｒ961 ［文献标识码］A ［文章编号］1000-2707(2016)10-1185-04
DOI:10． 19367 / j． cnki． 1000-2707． 2016． 10． 015
Experimental Study on Anti-inflammatory and Analgesic Function
of Dry and Fresh Aqueous Extract of Girardinia diversifolia
WU Linjing1，2，XU Yini2，JIANG Feng1，2，SU Ju1，2，ZHOU Xue1，2，TAO Ling1，2，
SHEN Xiangchun2，ZHANG Nengling2，ZHANG Xu2
(1． Department of Pharmaceutics of Chinese Materia Medica，Guizhou Medical University，Guiyang 550025，Guizhou，China;2． Key
Laboratory of Optimal Utilization of Natural Medicine Ｒesources，Guizhou Medical University，Guiyang 550025，Guizhou，China)
［Abstract］Objective:To investigate the anti-inflammatory and analgesic function of dry and fresh a-
queous extract of Girardinia diversifolia． Method:80 healthy Kunming originated mice with equal
number of both genders，randomly divided into model group (distilled water)，positive control group
(Aspirin 0． 3 g /kg) ，high，medium and low dose groups of dry and fresh aqueous extract of Girardin-
ia diversifolia (8 groups，10 mice each) ;to evaluate the dry and fresh aqueous extract of Girardinia
diversifolia on anti-inflammatory effects by Xylene induced mouse ear swelling and skin capillary per-
meability，and evaluating the analgesic effects by the animal model experiments of acetic acid induced
writhing response and with pain caused by hot plate in mice． Ｒesults:Compared with the model
group，the dry and fresh aqueous extract of Girardinia diversifolia could significantly reduce the ear
swelling(P ＜ 0． 01) ，increasing the pain threshold(P ＜ 0． 01)and reducing the number of acetic acid-
induced writhing reaction in mice(P ＜ 0． 01) ，the fresh aqueous extract of Girardinia diversifolia also
5811
第 41 卷 第 10 期
2016 年 10 月
贵 州 医 科 大 学 学 报
JOUＲNAL OF GUIZHOU MEDICAL UNIVEＲSITY
Vol． 41 No． 10
2016． 10
* *［基金项目］贵州省科技厅国际合作项目［黔科合外 G 字(2012)7041］;贵州省中医药管理局课题项目(QZYY2012 － 46) ;贵州省中医药管理局课题项目
(QZYY2013 － 92);贵阳市科技局现代药业计划项目(2012204) ;贵阳市科技局大学生创新课题［黔科合同 2012(2)］;贵州省高等教育科技创新团队［黔教合
人才团队字(2014)31］;贵州省科技创新团队［黔科合人才团队(2015)4025 号］;贵州省高层次创新型人才百层次人才［贵州省科技厅黔科合人才(2015)4029
号］;贵州省大学生创新创业训练计划项目(201610660031)
＊＊通信作者 E-mail:shenxiangchun@ 126． com
网络出版时间:2016 － 10 － 17 网络出版地址:http:/ /www． cnki． net /kcms /detail /52． 5012． Ｒ． 20161017． 1445． 026． html
significantly inhibited Xylene-induced mouse skin capillary permeability(P ＜ 0． 01，P ＜ 0． 05)，and
the anti-inflammatory and analgesic function of the fresh aqueous extract of Girardinia diversifolia was
better than the dry aqueous extract． Conclusion:The dry and fresh aqueous extract of Girardinia di-
versifolia have anti-inflammatory and analgesic effects，and the fresh aqueous extract of Girardinia di-
versifolia is superior to the dry aqueous extract of Girardinia diversifoliat．
［Key words］Girardinia diversifolia;anti-inflammatory;analgesia;rheumatic disease;mice
大蝎子草为荨麻科蝎子草属植物大蝎子草 Gi-
rardiniadiversifolia (Link)Friis． 的全草或根，具有
祛风解表、利气消痰、清热解毒之功效，民间常选用
大蝎子草的鲜品治疗风湿性关节炎及类风湿性关
节炎等疾病［1］，而现代药物的研究和开发中，为了
利于储藏保存，大多是选择其干品，但这个过程中
药效成分和含量可能发生改变，对其鲜品和干品在
治疗风湿等疾病方面是否存在药效差异，目前尚无
相关研究。抗炎与镇痛是风湿病治疗中最主要的
内容之一［2 － 3］。课题组前期研究发现，大蝎子草水
提部位具有明显的抗炎镇痛作用［4 － 7］。因此，本实
验从药用的合理利用方面考虑，采用经典抗炎、镇
痛模型，比较大蝎子草干品和鲜品水提物的抗炎和
镇痛药理作用，对合理利用大蝎子草治疗风湿病提
供科学参考依据。
1 材料、仪器及方法
1． 1 药材
大蝎子草药材采自贵州省贵阳市花溪区，经贵
州医科大学龙庆德副教授鉴定为蝎子草属植物大
蝎子草 Girardiia diversifolia (Link)Friis． 的地上部
分。
1． 2 动物
健康昆明种小鼠，雌雄各半，体质量 18 ～ 22 g，
由贵州医科大学实验动物中心提供，合格证号
SCXK(黔)2012 － 0001。
1． 3 仪器与试剂
BS223S电子分析天平(北京赛多利斯仪器有
限公司)，YLS － 6B 智能热板仪(淮北正华生物仪
器设备有限公司)，HH － 601 恒温水浴箱(江苏金
坛环宇科学仪器厂)，BL806A 榨汁机(广东科嘉霖
电器制造有限公司)，722 光栅分光光度计(上海第
三分析仪器厂)。阿司匹林(批号 D1316056，阿拉
丁化工公司)，伊文思蓝(批号 F20020913，中国医
药集团上海化学试剂公司进口分装)，二甲苯、甲
酰胺、冰醋酸均为国产分析纯。
1． 4 大蝎子草干品、鲜品水提物的制备
称量一定质量的大蝎子草鲜品，采取自然晾干
方式处理，1. 0 g干品相当于 5. 0 g鲜品;精密称取大
蝎子草干品 100 g，于 7 500 mL蒸馏水中，水温 60 ℃，
用榨汁机提取 4 min，过滤，滤液浓缩至 0. 25 g /
mL，得高剂量(5 g /kg)大蝎子草干品水提物，再稀
释两次，依次各稀释 1 倍，得中剂量(2. 5 g /kg)和
低剂量(1. 25 g /kg)大蝎子草干品水提物。再精密
称取大蝎子草鲜品 100 g，于80 mL蒸馏水中，用榨
汁机提取 4 min，过滤，得 1. 25 g /mL浓度的高剂量
(25 g /kg)大蝎子草鲜品水提物，再稀释两次，依次
各稀释 1 倍，得中剂量(12. 5 g /kg)和低剂量
(6. 25 g /kg)大蝎子草鲜品水提物［8］。
1． 5 抗炎作用
1． 5． 1 二甲苯致小鼠耳廓肿胀 取健康昆明种小
鼠 80 只，雌雄各半，按体质量随机分为 8 组，每组
10 只。分别为模型组(蒸馏水)，阳性对照组(阿司
匹林，0. 3 g /kg)，大蝎子草干品水提物高、中、低剂
量组，大蝎子草鲜品水提物高、中、低剂量组，小鼠每
天灌胃给药 1次，连续 7 d。末次给药 40 min后，于
每只小鼠右耳片两面均匀涂布二甲苯 0. 02 mL 致
炎，左耳不涂，作为对照，同时立即于尾静脉注射
1%伊文思蓝 10 mL /kg。20 min 后将小鼠颈椎脱
臼处死，用直径 8 mm的打孔器在左右耳片同一部
位打下圆耳片，在分析天平上称重，右耳与左耳重
量之差为耳廓肿胀度。并计算肿胀抑制率:肿胀抑
制率(%) =(模型组平均肿胀度 －给药组平均肿
胀度)/模型组平均肿胀度 × 100%［9］。
1． 5． 2 伊文思蓝标准曲线的制作 精密称取伊文
思蓝粉末 0. 01 g，用甲酰胺溶解并定容至 100 mL，
配成 100 mg /L 的溶液，再分别精密吸取 0. 25、
0. 5、1、2、4、6、8 mL该溶液于 10 mL容量瓶中并再
次用甲酰胺定容。采用分光光度计，以 620 nm 为
检测波长，1 cm光径测定其吸光度(A)，甲酰胺调
零，以吸光度 A 对伊文思蓝的浓度(C)作回归曲
线得 A =0. 102 92C － 0． 011 07，r = 0. 999 9，伊文
思蓝浓度在 2． 5 ～ 80 mg /L与吸光度值呈良好的线
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贵 州 医 科 大 学 学 报 41 卷
性关系［9］。
1． 5． 3 小鼠皮肤毛细血管通透性 将 1． 5． 1 项下
致炎右耳片剪成数片浸入 2 mL甲酰胺中，38 ℃水
浴 48 h将染料渗出，1 500 r /min离心 10 min，上清
液于 620 nm 处测定吸光度值，按“1． 5． 2”项标准
曲线计算伊文思蓝的含量［9］。
1． 6 镇痛作用
1． 6． 1 热板致痛 实验前筛选合格雌性小鼠，每
次放 1 只在预热至(55. 0 ± 0. 5)℃的恒温热板仪
上，记录小鼠自放在热板上到出现因热刺激而舔后
足所需的时间，作为该鼠的痛阈值，凡舔后足时间
小于 5 s或大于 30 s 或跳跃者淘汰不用。小鼠出
现舔后足反应后，迅速将其取下，以免烫伤。间隔
30 min，重复测定痛阈值，取两次痛阈值平均值作
为该鼠的给药前基础痛阈值，并以平均值不超过
30 s为合格。选取合格小鼠 80 只，按“1． 5． 1”项分
组并给予相应处理。于末次给药 40 min 后再次测
定痛阈值，用药后小鼠痛阈大于 60 s者，终止实验
并计以 60 s，计算痛阈提高百分率:痛阈提高百分
率(%)=(给药后平均痛阈值 －给药前平均痛阈
值)/给药前平均痛阈值 × 100%［10］。
1． 6． 2 冰醋酸致小鼠扭体反应 取健康昆明种小
鼠 80 只，分组与给药同“1． 5． 1”项，于末次给药
40 min后，腹腔注射 0. 8%冰醋酸 10 mL /kg，观察
并记录 15 min内小鼠的扭体次数并计算镇痛抑制
率，镇痛抑制率(%) =(模型组平均扭体次数 －
给药组平均扭体次数)/模型组平均扭体次数 ×
100%［10］。
1. 7 数据统计分析
所有数据结果以均数 ±标准差(x ± s)表示，实
验数据采用 SPSS 17. 0 统计软件进行分析，用
student’s t-test 进行组间差异比较，P ＜ 0. 05 为差
异有统计学意义。
2 结果
2. 1 对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响
与模型组比较，连续给药 7 d 后，大蝎子草干、
鲜品水提物高、中、低剂量组均能显著减轻小鼠耳
廓肿胀度(P ＜ 0. 01)，以大蝎子草鲜品水提物各剂
量组对小鼠耳廓肿胀的抑制作用为优，其中鲜品高
剂量组作用最好 (小鼠耳廓肿胀抑制率为
47. 83%)，大蝎子草干品水提物各剂量组对小鼠
耳廓肿胀的抑制作用次之。见表 1。
表 1 大蝎子草干、鲜品水提物对二甲苯致
小鼠耳廓肿胀的影响(x ± s，n = 10)
Tab． 1 The effects of dry and fresh aqueous extract
of Girardinia diversifolia on Xylene induced
mouse ear swelling
组别
剂量
(g /kg)
肿胀度
(mg)
肿胀抑制率
(%)
模型组 0. 023 ± 0. 002 6 －
阿司匹林组 0. 30 0. 010 ± 0. 002 4(1) 56. 52
大蝎子草干品水提物组 1. 25 0. 016 ± 0. 002 4(1) 30. 43
2. 50 0. 015 ± 0. 003 7(1) 34. 78
5． 00 0. 014 ± 0. 003 0(1) 39. 13
大蝎子草鲜品水提物组 6. 25 0. 015 ± 0. 002 8(1) 39. 78
12. 50 0. 013 ± 0. 004 3(1) 43. 48
25． 00 0. 012 ± 0. 003 8(1) 47. 83
(1)与模型组比较，P ＜ 0. 01
2. 2 对小鼠皮肤毛细血管通透性的影响
二甲苯刺激能引起耳部皮肤毛细血管通透性
增加，使尾静脉注入的伊文思蓝渗出到耳部，测定
耳部炎性渗出液的吸光度值可反映毛细血管通透
性。与模型组比较，连续给药 7 d 后，大蝎子草鲜
品水提物高、中、低剂量组能显著抑制小鼠皮肤炎
症渗出(P ＜ 0. 01，P ＜ 0. 05)，降低皮肤毛细血管通
透性，其中鲜品高剂量组伊文思蓝平均浓度为
6. 02 mg /L，在大蝎子草水提物中抑制作用最好，阿
司匹林组也有明显抑制作用(P ＜ 0. 01)，耳片组织
渗出的伊文思蓝平均浓度为 5. 02 mg /L;而大蝎子
草干品水提物各剂量组耳片组织伊文思蓝量渗出
较多，提示大蝎子草干品有一定炎症抑制作用，但
作用不明显。见表 2。
表 2 大蝎子草干、鲜品水提物对小鼠皮肤毛
细血管通透性的影响(x ± s，n = 10)
Tab． 2 The effects of dry and fresh aqueous extract of
Girardinia diversifolia on skin capillary permeability
组别
剂量
(g /kg)
吸光度 /A
伊文思蓝
浓度(mg /L)
模型组 0. 153 ± 0. 081 12. 89 ± 6. 43
阿司匹林组 0. 30 0. 053 ± 0. 028(2) 5. 02 ± 2. 18(2)
大蝎子草干品水提物组 1. 25 0. 096 ± 0. 030 9. 65 ± 7. 93
2. 50 0. 084 ± 0. 019 8. 40 ± 2. 40
5． 00 0. 112 ± 0. 100 7. 45 ± 1. 50
大蝎子草鲜品水提物组 6. 25 0. 066 ± 0. 030(1) 6. 66 ± 2. 12(1)
12. 50 0. 078 ± 0. 014(1) 6. 94 ± 1. 14(1)
25． 00 0. 074 ± 0. 027(1) 6. 02 ± 2. 34(2)
与模型组比较，(1)P ＜ 0. 05，(2)P ＜ 0. 01
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10 期 吴林菁等 大蝎子草干、鲜品水提物的抗炎镇痛作用实验研究
2. 3 对热板致小鼠疼痛反应的影响
与模型组比较，各组小鼠给药前痛阈差异无统
计学意义，连续给药 7 d后，大蝎子草干、鲜品水提
物各剂量组小鼠的痛阈值均延长(P ＜ 0. 01)，且大
蝎子草鲜品水提物高、中剂量组小鼠的痛阈值比干
品水提物各剂量组高，大蝎子草鲜品水提物高剂量
组对热板致小鼠疼痛反应的痛阈值与给药前比较
时间延长最多，其痛阈提高百分率为 47. 87%(P ＜
0. 01)。见表 3。
表 3 大蝎子草干、鲜品水提物对小鼠热板法
痛阈的影响(x ± s，n = 10)
Tab． 3 The effects of the dry and fresh aqueous
extract of Girardinia diversifolia on mice
hot plate pain threshold
组别
剂量
(g /kg)
痛阈值(s)
给药前 给药后
痛阈提
高(%)
模型组 21. 00 ± 0. 91 20. 20 ± 1. 81
阿司匹林组 0. 30 20. 65 ± 0. 82 27. 30 ± 1. 77(1) 32. 20
大蝎子草干品水提物组 1. 25 20. 85 ± 1. 58 28. 30 ± 3. 06(1) 21. 27
2. 50 21. 40 ± 1. 90 27. 10 ± 1. 79(1) 26. 64
5． 00 20. 45 ± 0. 76 24. 80 ± 2. 30(1) 35. 73
大蝎子草鲜品水提物组 6. 25 20. 00 ± 1. 91 28. 70 ± 3. 97(1) 29. 93
12. 50 19. 95 ± 1. 79 29. 50 ± 3. 75(1) 43. 50
25． 00 21. 55 ± 2. 01 28. 00 ± 2. 75(1) 47. 87
(1)与模型组比较，P ＜ 0. 01
2. 4 对冰醋酸致小鼠扭体反应的影响
连续给药 7 d 后，小鼠腹腔注射 0. 8%冰醋酸
溶液，大蝎子草干、鲜品水提物各剂量组均能显著
减少小鼠的扭体次数，与模型组比较，差异有统计
学意义(P ＜ 0. 01)。阿司匹林组(56. 43%)镇痛抑
制作用最好，大蝎子草鲜品水提物高(50. 00%)、
中(46. 97%)剂量组次之，且镇痛作用均优于干品
水提物各剂量组。见表 4。
3 讨论
根据民间治疗风湿关节炎习用鲜品的特点，本
实验运用二甲苯致小鼠耳廓肿胀、皮肤毛细血管通
透性增高两类急性非特异炎症模型评价大蝎子草
干、鲜品水提物对急性炎症早期的影响，以经典的
热板法和冰醋酸致痛扭体法两种疼痛模型评价其
镇痛作用，初步探讨大蝎子草干、鲜品对风湿病的
治疗作用。实验结果表明，大蝎子草干、鲜品水提
物对二甲苯致小鼠耳廓肿胀均有明显抑制作用，其
表 4 大蝎子草干、鲜品水提物对冰醋酸致小鼠
扭体反应的影响(x ± s，n = 10)
Tab． 4 The effects of the dry and fresh aqueous
extract of Girardinia diversifolia on acetic
acid-induced writhing response in mice
组别
剂量
(g /kg)
扭体数
(次)
抑制率
(%)
模型组 26. 4 ± 3. 92
阿司匹林组 0. 30 11. 5 ± 2. 72(1) 56. 43
大蝎子草干品水提物组 1. 25 13. 2 ± 2. 66(1) 25. 76
2. 50 16. 1 ± 3. 73(1) 39. 02
5． 00 19. 6 ± 3. 66(1) 45. 08
大蝎子草鲜品水提物组 6. 25 16. 6 ± 3. 44(1) 37. 12
12. 50 14. 0 ± 2. 00(1) 46. 97
25． 00 14. 5 ± 3. 50(1) 50. 00
(1)与模型组比较，P ＜ 0. 01
中大蝎子草鲜品水提物对肿胀的抑制作用明显优
于大蝎子草干品水提物;大蝎子草鲜品水提物能够
显著抑制二甲苯致皮肤毛细血管通透性增高的作
用，而大蝎子草干品水提物作用不明显。大蝎子草
干、鲜品水提物对热、化学刺激疼痛实验模型均有
显著的镇痛作用，且大蝎子草鲜品水提物作用为
优。综上，大蝎子草干、鲜品水提物均具有抗炎、镇
痛作用，与其祛风解表、清热解毒之功效相关，且大
蝎子草鲜品水提物作用优于大蝎子草干品水提物，
证明大蝎子草鲜品水提物更有利于风湿、类风湿炎
症及疼痛的缓解，这对进一步研究大蝎子草具有重
要意义。
运用鲜药治病，是中医的特色治疗之一，常见
的有鲜竹沥、藕汁等。新鲜中药具有药鲜汁醇，气
味具纯的特点，它保持了药物的自然性能，具有活
性好、成份全、无污染、见效快的优点;与西药相比
较，鲜品中药具有无毒性、不易伤胃、不易反复、抗
药性小等优势［11 － 12］。以上实验结果证实，民间采
用大蝎子草鲜品治疗风湿性关节炎、类风湿性关节
炎等疾病可以最大程度地发挥其药效，使疾病能够
得以很好的控制，关于鲜品抗风湿的活性成分及作
用机制有待进一步深入研究。
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(下转第 1192 页)
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贵 州 医 科 大 学 学 报 41 卷
分必要。本文采用 PB 和 β-NF作为联合诱导剂有
助于毒物、致癌物及药物等外源化合物的毒理、药
理作用机制的研究，为体外代谢研究提供相关基础
数据及一定的参考依据。
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(2016－08－17 收稿，2016－09－23 修回)
中文编辑:刘 平;英文编辑:刘
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华
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(2016－06－07 收稿，2016－09－21 修回)
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贵 州 医 科 大 学 学 报 41 卷