全 文 ：书收稿日期:2012-05-08; 修订日期:2012-11-05
基金项目:国家自然科学基金( No． 30660095) ;
新疆教育厅重点科研项目( No． XJEDU2006I08)
作者简介:李玉薇( 1986-) ，女( 汉族) ，新疆昌吉人，现为新疆大学生命科
学分枝术学院在读硕士研究生，主要从事植物生物技术研究工作．
* 通讯作者简介:计巧灵( 1956-) ，女( 汉族) ，新疆阿克苏人，现任新疆大
学教授，硕士学位，主要从事植物细胞工程研究工作．
罗布麻和大叶白麻中芦丁与绿原酸含量的比较
李玉薇，王 芳，邓 倩，计巧灵*
(新疆大学生命科学与技术学院，新疆 乌鲁木齐，830046)
摘要:目的 比较两个产地、三个采集期的罗布麻和大叶白麻中芦丁与绿原酸含量，以此为依据评判大叶白麻是否可完全
替代罗布麻入药，并为两种植物人工栽培场地的选择提供参考。方法 采用 HPLC法对大叶白麻和罗布麻的同一生境和
不同生境、相同采集期和不同采集期以及不同器官中芦丁和绿原酸含量进行比较。结果 在本实验条件下，就芦丁含量
而言，精河产地在初花期和盛花期采摘罗布麻叶最佳。就绿原酸含量而言，库尔勒产地在结荚期采摘罗布麻叶最佳。结
论 大叶白麻不能完全替代罗布麻入药。
关键词:罗布麻; 大叶白麻; 芦丁; 绿原酸; 高效液相色谱
DOI标识:doi: 10． 3969 / j． issn． 1008-0805． 2012． 12． 010
中图分类号:R284． 2 文献标识码:A 文章编号:1008-0805( 2012) 12-2971-03
Comparison of Rutin and Chlorogenic Acid Contents in Apoacynum Venetum and Poacy-
num hendersonii
LI Yu-wei，WANG Fang，DENG Qian，JI Qiao-ling*
( College of Life Science and Technology ，Xinjiang University，Urumqi，830046，China)
Abstract: Objective To compare rutin and chlorogenic acid contents in Apoacynum venetum and Poacynum hendersonii from two
areas at three periods，so to decide that whether the P． hendersonii can completely replace the A． venetum used as medicine．
Methods HPLC method was used to determine the contents of rutin and chlorogenic acid in A． venetum and P． hendersonii growing
in the same or areas ，the same or different periods as well as their different organs． Results Under this experimental conditions ，
as far as rutin content，leaves of A． venetum picked on early flowering and flowering stages of Jinghe origin were the best． For chlo-
rogenic acid content，leaves of A． venetum picked on podding stage of Jinghe origin were the best． Conclusion The P． hendersonii
can not replace A． venetum entirely used as medicine．
Key words: Apoacynum venetum L． ; Poacynum hendersonii ( Hook． f． ) Woodson; rutin; chlorogenic acid; HPLC
据《中国植物志》［1］记载，国内罗布麻有两属三种，即罗布麻
属的罗布麻 Apoacynum venetum Linn．，别名红麻;白麻属有两种，
即大叶白麻 Poacynum hendersonii (Hook． f．)Woodson 和白麻 P．
pictum (Schrenk)Baill。罗布麻入药历史已逾千年，并多次被《中
国药典》收载［2，3］，具有很高的药用价值，但由于近年来的过度采
挖，罗布麻资源量的骤减将限制其进一步利用。大叶白麻比罗布
麻的分布量大［4］，近年来，由于人们对大叶白麻药用价值有一定
的认识，常常将大叶白麻作为罗布麻的替代品入药［5，6］，但人们
对罗布麻的研究要比大叶白麻多得多，且早得多，究竟大叶白麻
能否完全替代罗布麻入药仍未定论，这就需要对这两种植物主要
药效成分及其含量进行深入细致研究。
芦丁是重要的黄酮类化合物，具有抗氧化［7］、调节血糖［8，9］、
抗病毒［10］等生理活性。绿原酸是一种作用较强的酚型抗氧化
剂［11 ～ 13］，此外，还具有抗病毒［14，15］、抗肿瘤［16，17］、心血管保护［11］
等功能，目前我国抑菌抗病毒药物的质量主要以绿原酸含量作为
一个重要指标［15，18］，芦丁和绿原酸均是罗布麻和大叶白麻的主
要药效成分。本文利用高效液相色谱法对不同产地、不同采集期
的罗布麻和大叶白麻中的芦丁和绿原酸含量进行了比较研究，为
大叶白麻能否作为罗布麻的替代品入药寻找理论依据。
1 器材
1． 1 仪器 高效液相色谱仪(岛津 LC － 10ATVP泵，SPD － 10AVP
紫外检测器，CTO － 10AVP柱温箱，2010 化学工作站) ;超声波清
洗器(上海杰理科有限公司) ;0． 22 μm微孔纤维素滤膜;恒温箱;
离心机(Sorvallpico and Fresco) ;纯净水;电子天枰(型号 AL104，
METTLER TOLEDO) ;实验室常规仪器设备。
芦丁(MUST － 11040302)和绿原酸(110753 － 200413)标准品
购于中国药品生物制品检定所;甲醇(Gelest 公司)为色谱纯;其
余试剂均为分析纯。
1． 2 材料 样品采用罗布麻和大叶白麻的叶、花、茎、果实;采集
地为新疆巴州地区尉犁县(北纬 41°07． 030，东经 86°27． 726，海
拔 867m 左右)和新疆博尔塔拉蒙古自治州精河县(北纬
44°33． 603，东经 83°01． 103，海拔 173m 左右) ，采摘期为罗布麻、
大叶白麻的初花期(6 月 23 ～ 28 日 )、盛花期(8 月 6 ～ 11 日)及
结荚期(9 月 6 ～ 8 日 )。材料在室温下自然干燥，粉碎过 40 目
筛备用。
2 方法
2． 1 色谱条件 流动相:甲醇(A)－ 0． 4%磷酸(B) (V /V)=
52． 5∶ 47． 5;流速 0． 5 ml /min ;进样量 10 μl;柱温为室温;检测
波长为 360 nm。
2． 2 对照品溶液的制备 精密称取芦丁和绿原酸对照品各 10
mg，分别置于 10 ml棕色容量瓶中，加 80%甲醇溶解并定溶，摇
匀，即得 1 mg /ml的芦丁和 1 mg /ml 的绿原酸对照品混合溶液。
经 0． 22 μm滤膜过滤后备用。
2． 3 供试品溶液的制备 分别精密称取已粉碎的干燥罗布麻和
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LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2012VOL ． 23 NO． 12 时珍国医国药 2012 年第 23 卷第 12 期
书大叶白麻的叶、花、茎、果皮各 0． 1 g，分别加入 80%甲醇 1． 5 ml，
在提取功率 60Hz，温度为 50℃时超声提取 2 次，每次 30 min，以
12． 000r /min离心 10 min，合并两次上清液，经 0． 22 μm滤膜过滤
备用。
2． 4 标准曲线的制备 分别精密吸取两种对照品溶液各五份
(0． 10，0． 50，1． 00，1． 50，2． 00 ml) ;分别用 80%甲醇定容至 10
ml，以 80%的甲醇作为空白对照，按照上述色谱条件测定。以色
谱峰面积(Y)对浓度(X)作图，计算回归方程。
3 结果与分析
高效液相色谱检测芦丁和绿原酸标准品的色谱图如图 1。
罗布麻花样品液的 HPLC见图 2。
1．为芦丁 2．为绿原酸
图 1 芦丁和绿原酸对照品液 HPLC图谱
1．为芦丁 2．为绿原酸
图 2 罗布麻花样品液 HPLC图谱
3． 1 线性范围的考察 芦丁的线性方程为 Y = 523． 13X － 1． 627 0
(r = 0． 999 5)线性范围为 0． 01 ～ 0． 2 mg /ml;绿原酸的线性方程
为 Y = 239． 83X － 0． 575 7(r = 0． 998 2)线性范围为 0． 01 ～ 0． 2
mg /ml。标准曲线见图 3 ～ 4。
图 3 芦丁标准曲线
3． 2 方法学考察
3． 2． 1 精密度试验 精密吸取“2． 2”项中的对照品溶液，在上述
色谱条件下重复进样 5 次，其芦丁及绿原酸峰面积的 RSD 分别
为 0． 79%和 1． 25%，说明该方法精密度良好。
3． 2． 2 重复性试验 精密称取罗布麻的花 5 份，每份 0． 1 g，依照
“2． 3”项中方法制备，在上述色谱条件下进行分析，计算峰面积
的 RSD值，芦丁 RSD为 2． 69%，绿原酸 RSD为 2． 98%，说明该方
法重复性良好。
3． 2． 3 稳定性试验 罗布麻花制成供试品溶液后，每隔 2 h 按
上述色谱条件测定芦丁和绿原酸的峰面积，芦丁峰面积 RSD
为1． 8%，绿原酸峰面积 RSD 为 2． 3%，结果表明样品在 16 h
内稳定。
图 4 绿原酸标准曲线
3． 2． 4 加样回收率试验 称取已知含量的罗布麻花的样品 3 份，
加入适量芦丁和绿原酸的标准品溶液，按照样品的测定方法测
定，计算回收率。芦丁、绿原酸加样回收试验结果见表 1。
表 1 芦丁、绿原酸加样回收试验结果
标准
品
加标样测定
C /mg·ml －1
标品本底值
C /mg·ml －1
样品本底值
C /mg·ml －1
实际值
C /mg·ml －1
回收率
(%)
回收率
平均值
RSD
(%)
芦丁 0． 0493 0． 0243 0． 0254 0． 0240 0． 9876
0． 0503 0． 0237 0． 0261 0． 0243 1． 0257 0． 9965 0． 0259
0． 0498 0． 0247 0． 0257 0． 0241 0． 9763
绿原酸 0． 0212 0． 0262 0． 0029 0． 0242 0． 9227
0． 0216 0． 0242 0． 0025 0． 0221 0． 9137 0． 9239 0． 0118
0． 0270 0． 0253 0． 0021 0． 0237 0． 9355
3． 3 同采集期、同产地罗布麻和大叶白麻不同器官中芦丁含量
的比较 罗布麻与大叶白麻不同器官芦丁、绿原酸的含量比较
如图 5 ～ 6 所示。由图 5 可知，罗布麻不同器官中芦丁含量由
大到小依次为叶 ＞ 茎 ＞ 花 ＞ 种皮，其叶中的含量最高，达到
4． 3%;经方差分析，罗布麻四种不同器官间的芦丁含量均有
显著性差异(P ＜ 0． 05) ;大叶白麻不同器官芦丁的含量由大
到小依次为叶 ＞花 ＞种皮 ＞茎;经方差分析，在大叶白麻花与
种皮间无显著性差异，其他器官彼此间均存在显著性差异(P
＜ 0． 05) ;从图中可看出，罗布麻叶和茎中芦丁的含量均高于
大叶白麻中的，花中的芦丁含量略低于大叶白麻花中的，而罗
布麻种皮中芦丁含量远远低于大叶白麻的;方差分析得出，罗
布麻与大叶白麻花中的含量差异不显著，两者其他器官中芦
丁含量均存在显著性差异(P ＜ 0． 05)。
a，b表示不同器官间的差异性，* 表示两种植物间的差异性
图 5 罗布麻与大叶白麻不同器官 芦丁含量比较
a，b表示不同器官间的差异性，* 表示两种植物间的差异性
图 6 罗布麻与大叶白麻不同器官绿原酸含量比较
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时珍国医国药 2012 年第 23 卷第 12 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2012VOL． 23 NO． 12
书3． 4 同采集期、同产地罗布麻和大叶白麻不同器官中绿原酸含
量的比较 根据图 6 所示，罗布麻不同器官中绿原酸含量由大到
小依次为花 ＞叶 ＞茎 ＞种皮，其中花的含量最高，到达 2． 2%，经
方差分析，在四种器官中彼此间的绿原酸含量差异均显著(P ＜
0． 05) ;大叶白麻不同器官中绿原酸含量由大到小依次为花 ＞叶
＞种皮 ＞茎，经方差分析，大叶白麻中绿原酸含量在四种不同器
官间均存在显著性差异(P ＜ 0． 05)。从图中显示出，罗布麻叶、
花、茎中绿原酸的含量均分别高于大叶白麻中的，罗布麻与大叶
白麻在相应部位中绿原酸含量均具有显著性差异(P ＜ 0． 05)。
3． 5 不同产地、不同采集期的罗布麻叶中芦丁含量的比较 在不
同产地、不同采集期的罗布麻叶中，芦丁含量变化趋势如图 7 所
示，图中精河产罗布麻叶中芦丁含量随采集时间的推移呈下降趋
势，在初花期达到最大值，含量为 4． 2%，而库尔勒产地罗布麻叶
中，芦丁含量变化则呈现出先上升后下降的趋势，经方差分析，在
各采集期，精河产罗布麻叶中芦丁含量均具有显著性差异，库尔
勒产地的在初花期与结荚期间无显著性差异，在其他时期间则存
在显著性差异(P ＜ 0． 05)。图中还显示在初花期和盛花期，精河
产地的罗布麻叶中芦丁含量高于库尔勒产地的，经方差分析，两
个产地间的罗布麻叶中芦丁含量均有显著性差异(P ＜ 0． 05)。
3． 6 不同产地、不同采集期的罗布麻叶中绿原酸含量的比较 图
8 为在不同产地、不同采集期罗布麻叶中绿原酸含量变化趋势，
精河产罗布麻叶中绿原酸含量随采集时间的推移呈现先下降后
上升的趋势，而库尔勒产地的含量则恰恰相反，呈先上升后下降
的趋势;经方差分析，在各采集期，精河产地罗布麻叶中绿原酸含
量均具有显著性差异，库尔勒产地则在初花期与结荚期间无显著
性差异(P ＜ 0． 05)。图 8 还显示仅在盛花期时，精河产地的罗布
麻叶中绿原酸含量低于库尔勒产地的，经方差分析，在盛花期和
结荚期时，两个产地间的罗布麻叶中绿原酸含量均具有显著性差
异，而在初花期无显著性差异(P ＜ 0． 05)。
a，b表示不同器官间的差异性，* 表示两种植物间的差异性
图 7 不同地点不同采集期罗布麻叶中芦丁含量对比
a，b表示不同器官间的差异性，* 表示两种植物间的差异性
图 8 不同地点不同采集期罗布麻叶绿原酸含量对比
3． 7 不同产地、不同采集期的大叶白麻叶中芦丁含量的比较 图
9 显示精河产地大叶白麻叶中芦丁含量在盛花期出现最大值，其
次是初花期，而库尔勒产地大叶白麻叶中芦丁含量在三个时期变
化范围较小;经方差分析，精河产地大叶白麻叶中芦丁含量在各
个采集期间均具有显著性差异，库尔勒产地则在初花期与盛花期
间无显著性差异(P ＜ 0． 05)。从图中还可知，在初花期、盛花期，
精河产地大叶白麻叶中芦丁含量均高于库尔勒产地的，经方差分
析，这两个产地在各采集期大叶白麻叶中的芦丁含量均具有显著
性差异(P ＜ 0． 05)。
3． 8 不同产地、不同采集期的大叶白麻叶中绿原酸含量的比较
由图 10 可知，精河产地大叶白麻叶中绿原酸含量随采集时间
的推移呈上升趋势，而库尔勒产地大叶白麻叶中绿原酸含量
则呈先上升后下降的趋势;经方差分析，在精河和库尔勒产地
采集的大叶白麻叶中，绿原酸含量在各个采集期间均具有显
著性差异(P ＜ 0． 05)。从图中还可知，只有在盛花期时，库尔
勒产地的大叶白麻叶中绿原酸含量才高与精河产地的，经方
差分析，这两个产地在各采集期大叶白麻叶中的绿原酸含量
均具有显著性差异(P ＜ 0． 05)。
a，b表示不同器官间的差异性，* 表示两种植物间的差异性
图 9 不同地点不同采集期大叶白麻叶中芦丁含量对比
a，b表示不同器官间的差异性，* 表示两种植物间的差异性
图 10 不同地点不同采集期大叶白麻叶绿原酸含量对比
4 讨论
本实验中就芦丁含量而言，不同器官相比，两种植物均是叶
中的含量最高，但罗布麻叶中的含量是大叶白麻叶中的 2． 2 倍;
罗布麻花中的含量是大叶白麻花中的 0． 9 倍;罗布麻茎中的含量
是大叶白麻茎中的 1． 8 倍;罗布麻种皮中的含量是大叶白麻种皮
中的 0． 2 倍。
就绿原酸含量而言，不同器官相比，两种植物均是花中的含
量最高，但罗布麻花中的含量是大叶白麻花中的 2． 1 倍;罗布麻
叶中的含量是大叶白麻叶中的 1． 4 倍;罗布麻茎中的含量是大叶
白麻茎中的 1． 5 倍;罗布麻种皮中的含量是大叶白麻种皮中的
0． 3 倍。
对在不同采集期及不同采集地罗布麻与大叶白麻叶中芦丁、
绿原酸的含量进行了比较。从实验结果看出，就芦丁含量而言，
在初花期和盛花期，精河产地罗布麻叶中的含量分别是库尔勒产
地的 2． 8 倍和 1． 5 倍，而在结荚期，精河产地罗布麻叶中的含量
是库尔勒的 0． 7 倍;在初花期和盛花期，精河产地大叶白麻叶中
芦丁含量分别是库尔勒产地的 1． 4 倍和 1． 8 倍，而在结荚期，精
河产地的含量是库尔勒产地的 0． 9 倍。就绿原酸含量而言，在初
花期和结荚期，精河产地罗布麻叶中的含量分别是库尔勒产地的
1． 1 倍和 1． 7 倍，而在盛花期，精河产地的含量比库尔勒产地的
低 0． 5 倍;在初花期和结荚期，精河产地大叶白麻叶中的含量分
别是库尔勒产地的 1． 6 倍和 1． 9 倍，而在盛花期，精河产地的含
量库尔勒产地的 0． 8 倍。
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LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2012VOL ． 23 NO． 12 时珍国医国药 2012 年第 23 卷第 12 期
书从同种植物不同采集期芦丁含量考虑，初花期罗布麻叶最高，
而盛花期大叶白麻叶中最高;两种植物相比，仍是罗布麻叶优于大
叶白麻叶。从同种植物不同采集期绿原酸含量考虑，罗布麻叶优
于大叶白麻叶。总体而言，大叶白麻不能完全替代罗布麻入药。
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收稿日期:2012-04-15; 修订日期:2012-09-25
基金项目:国家自然科学基金( No． 81173581) ; 广东省广州市白云区科技计划项目( No． 2011 － KZ － 61)
作者简介:严愉妙( 1985-) ，女( 汉族) ，广东惠州人，现为南方医科大学硕士研究生，硕士学位，主要从事钩藤属植物药学及药理学研究工作．
* 通讯作者简介:莫志贤( 1958-) ，女( 汉族) ，广西人，现任南方医科大学教授，博士研究生导师，博士学位，主要从事中药药理学研究工作．
广东 4 种钩藤中毛钩藤碱
及总碱含量的 HPLC、UV测定
严愉妙1，罗超华1，方丽华2，雷晓林2，刘 伟1，莫志贤1*
(1．南方医科大学中医药学院，广东 广州 510515; 2．东方药林药业有限公司，广东 广州 510515)
摘要:目的 建立 UV、HPLC测定广东 4 种钩藤植物的总碱以及毛钩藤碱含量的方法，比较不同物种、不同部位间有效成
分的含量变化。方法 采用 HPLC梯度洗脱法测定毛钩藤碱含量，以 Hypersil ODS C18 ( 4． 6 mm × 200 mm，5 μm) 为色谱
柱，甲醇 －水( 含 0． 50%三乙胺，冰乙酸调 pH 5． 35) 为流动相，梯度洗脱，进样体积 10． 00 μl，柱温为 40． 00℃，245 nm 波
长下检测分析; 以 UV测定总碱含量，检测波长为 245 nm。结果 毛钩藤碱在 0． 02 ～ 0． 40 μg 范围内线性关系良好，r =
0． 999 5，平均回收率分别为 96． 830 %，RSD = 1． 600% ; 总碱含量在不同物种、不同部位里存在差异性，其线性范围为2． 00
～ 10． 00 μg /ml，r = 0． 998 4。结论 该法准确，操作简便、快速，重复性较好，精密度较高，可用于对钩藤属植物不同物种、
不同部位的总碱以及有效成分毛钩藤碱含量测定。
关键词:总碱; 毛钩藤碱; 高效液相色谱法; 紫外 －可见分光光度法
DOI标识:doi: 10． 3969 / j． issn． 1008-0805． 2012． 12． 011
中图分类号:R284． 2 文献标识码:A 文章编号:1008-0805( 2012) 12-2974-03
HPLC and UV Determinations of Hirsutine and Total Alkaloids in Four Species Plants of
Uncaria Genus in Guangdong Province
YAN Yu-miao1，LUO Chao-hua1，FANG Li-hua2，LEI Xiao-lin2，LIU Wei1，MO Zhi-xian1*
( 1． College of Traditional Chinese Medicine，Southern Medical University Guangzhou，Guangdong 510515，Chi-
na; 2． Oriental Medicine Lin Co．，Ltd．，Guangzhou，Guangdong 510515，China)
Abstract: Objective To establish a method for UV and HPLC determinations of total alkaloids and Hirsutine in Uncaria genus
and compare their contents among different parts of Uncaria in Guangdong province． Methods Determination of Hirsutine by
HPLC，chromatographic column Hypersil ODS( 4． 6 mm × 200 mm，5 μm) ，the mobile phase was Methanol － water ( containing
0． 50% triethylamine，glacial acetic acid adjusted pH5． 35) with gradient elution，the injection volume was 10． 00 μl and the col-
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时珍国医国药 2012 年第 23 卷第 12 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2012VOL． 23 NO． 12