全 文 ：第 卷第 期
年 月
新疆大学学报 自然科学版 、 ,
,
罗布麻和大叶白麻染色体核型分析
常 洁 , 计巧灵 , 姜 丽 , 邢思雷
新疆大学 生命科学与技术学院 , 新疆 乌鲁木齐
摘 要 本文采用不同的预处理方法 、盐酸解离时间及染色条件 , 对罗布麻 珊。。 珑讹她。 和大叶白麻
尸 , 。、二 九。。己二 乞乞 离体根尖染色体分裂相的数目 、染色体收缩程度 、分散度以及
着色深度进行了研究 对罗布麻和大叶白麻的核型进行了对比分析 结果表明 最佳的处理方法为
子轻基喳琳室温下处理根尖 卡诺液固定 盐酸 ℃下解离根尖 改良石炭酸品红染色
后压片 罗布麻根尖染色体的核型公式 。 对 认大叶白麻根尖染色体的核型公
式 。 。
关键词 罗布麻 大叶白麻 染色体 核型
中图分类号 文献标识码 文章编号 各
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引 言
罗布麻 夕 , 。。。 。 。。 属夹竹桃科罗布麻属 , 大叶白麻 , 。二。 。己 。、、
属夹竹桃科白麻属 ,为多年生宿根草本植物 罗布麻全草人药 ,有很高的药用价值 ,性微
寒 ,味苦 、甘 《中华人民共和国药典 》 年版 阐述其功能主治为 “平肝安神 , 清热利水 , 用于肝阳眩
晕 ,心悸失眠 , 浮肿尿少 ,高血压 , 神经衰弱 , 肾炎浮肿巾 罗布麻和大叶白麻适应土壤贫脊 , 一般植物
难以成活的盐碱 、荒漠地带和恶劣环境 ,是改良盐碱地的特殊植物物种叫 罗布麻的茎皮纤维是很好的纺
织原料 , 被上海纺织界誉为 “野生纤维之王 ” ,是 世纪保健纤维肺 青海省农科院野生植物资源研究所
已完成了罗布麻人工育苗技术研究 ,在柴达木盆地育苗 万余株 ,建立了罗布麻人工繁育基地川 目前有
, 收稿日期 , 一基金项目 国家自然科学基金 和新疆教育厅重点科研项目 资助
作者简介 常洁 一 女 , 硕士研究生 , 研究方向为细胞生物学
通讯作者 计巧灵 , 女 , 教授 , 硕士生导师 , 研究方向 植物学
第 期 常洁 , 等 罗布麻和大叶白麻染色体核型分析
关罗布麻的研究主要集中在生物学方面 形态解剖 、生理 、生化等特性 、资源分布研究 、引种驯化 、纺织
利用 纤维性能 、剥皮技术 、罗布麻与其他纺织纤维的混纺 、保健纺织品 、成分分析 对黄酮类化合物 、强
心贰类 、多种氨基酸 、芸香贰 、懈皮素等有效成分的测定 、比较等 和药理 制药 、中药材 、药物鉴定 、各种
药物对动植物的试验研究 为了将罗布麻和大叶白麻作为供体 , 对栽培亚麻进行体细胞杂交育种研究 ,
有必要先弄清罗布麻和大叶白麻的染色体核型 这项工作是后续亚麻杂交育种研究的基础 , 也是罗布麻
和大叶白麻人工驯化 、栽培的基础
材料与方法
· 材 料
供试罗布麻种子采自新疆精河县 大叶白麻采自新疆巴州地区尉犁县
方 法
预处理与固定
选取饱满的种子放人衬有湿纱布的培养皿中 ,加盖 ,置于 ℃恒温箱中培养 ,及时补充水分 , 待胚
根长到 一 。 长时 ,清晨 一 切下胚根进行不同的预处理 ,部分材料在 水中处理 另
一部分材料在室温下放人 一经基唠琳中 , 处理 所有材料用卡诺固定液 无水乙醇 冰乙酸 固定 , 置于 酒精中 下保存备用
解离
分别取固定后的根尖材料 , 经蒸馏水漂洗多次 , 分组进行解离 置于 ℃恒温水浴预热的 盐
酸中分别解离 、 、 、 、 和 , 取出材料 , 经蒸馏水漂洗 次以上 ,漂洗时 , 将根尖至于蒸馏水
中浸泡 一 , 直到蒸馏水呈中性为止
染色与压片
将解离处理后的根尖再分组 ,分别用改良石炭酸品红 、苏木精 、吉姆萨染液染色不同时间 , 按常规压
片法对根尖进行染色体压片
镜检
将各种处理根尖的压片随机选取 片 ,置于 倍的 显微镜下观察 ,对分裂相的多少 、染色体
分散度 、染色体长度 、着色深度等情况进行分析比较 ,挑出分裂相较多 、染色体较分散 、染色体长度较长 、
着色较深的片子 ,记录它们的处理方法
从最佳处理方法得到的压片中随机选取 个染色体着色深 、分散良好 、长度较长的分裂相用
。型数码生物显微镜进行染色体拍照 、计数 ,用染色体照相及后期数据处理软件
对染色体长度进行测量 根据李憋学 `及 的标准进行染色体核型分析 ,分别测量
和计算各条染色体的相对长度 、长短臂长 、臂比值等 ,依此参数进行同源染色体配对 ,并对染色体进行分
类 根据每对染色体的相对长度 , 由长至短顺序排列并编号 同时根据同源染色体相对长度的平均值做出
核型模式图
结果与分析
不同的预处理方法对罗布麻和大叶白麻根尖细胞有丝分裂的影响
观察发现 ,根尖的预处理是提高中期分裂相频率的重要因素 ,与染色体图像清晰度密切相关 但两种
预处理方法对改变细胞质的粘度 、抑制和破坏纺锤体的形成 、影响染色体收缩和分散度不同 室温下 ,将
根尖浸在 一经基喳琳溶液中处理 , 获得了较好的效果 , 中期分裂相较多
不同解离时间对制片的影响
盐酸解离时间是制备良好染色体片的另一关键因素 表 , 解离时间太短 , 根尖不软 , 会使压片困
难 ,细胞分散度低 ,不利于观察 解离时间太长 ,会使根尖太软 ,不宜后续操作 本实验发现 ,根尖在 ℃
盐酸中恒温解离 制片效果最理想
不同染色液的染色效果
试验表明 , 不同染色液对罗布麻和大叶白麻根尖的染色效果差别明显 , 吉姆萨染液使染色体呈深蓝
新疆大学学报 自然科学版 年
色 , 但轮廓不太清晰 苏木精染液染色较浅 改良石炭酸品红染色效果较好 , 特别是过夜染 后 , 染色
体着色深 ,呈玫红色 ,轮廓较清晰 ,细胞质着色浅 ,反差明显 ,染色体无变形 图 ,图 ,易于核型分析
染色体数目
经过染色体数目统计 罗布麻和大叶白麻染色体数目均为 条的细胞分别占计数细胞总数的
和 , 因此确定罗布麻和大叶白麻的细胞染色体数目均为 条
表 不同解离时间对染色体制片的影响
解离时问 细胞分散度 着色程度
十
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注 “ ”由少到多表示程度的加深
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、…一””,”图 罗布麻根尖染色体 、核型及其模式图
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图 大叶白麻根尖染色体 、核型及其模式图
染色体核型
分析罗布麻和大叶白麻的染色体类型 , 罗布麻的中部着丝粒 染色体为 对 , 近中部着丝粒 染
色体为 对 , 近端部着丝粒 染色体为 对 , 端部着丝粒 染色体为 对 , 罗布麻根尖染色体的核型公式
为 二 。 表 大叶白麻的近中部着丝粒 染色体为 对 , 近端部着
第 期 常洁 ,等 罗布麻和大叶白麻染色体核型分析
丝粒 染色体为 对 , 端部着丝粒 染色体为 对 , 大叶白麻根尖染色体的核型公式为 二
表
罗布麻根尖染色体参数
编号
表
长臂十短臂二长度 伽 相对长度 臂比值 类型
七绷
表 大叶白麻根尖染色体参数
编号 长臂 短臂 长度 拼
十
十
十
十
相对长度 类型臂比值
平鑫本
表 罗布麻和大叶白麻的核型组成
种类
罗布麻
大叶白麻
核型公式
二 十
最长 最短 臂比 的比率 核型类型
讨 论
本试验发现 ,种芽的长势 、取材时间和预处理是关键 根尖太短 , 细胞里的淀粉粒多 , 不易解离和压
片 根尖太长 , 细胞壁厚 , 分裂相少 , 长度为 一 最适 不同植物的细胞周期及分裂高峰期不同 ,
取材时间也不同 经多次试验 , 最终发现两种根尖最适的取材时间是上午 、 之间 , 能得到较多
的分裂相 本试验选用 一经基喳琳液对根尖预处理 ,得到了较好的效果 , 降低了细胞质勃度 ,
阻止了纺锤体活动 , 使中期分裂相较多 ,且使中期染色体排列在赤道板上保持相应的位置 , 对染色体
收缩影响较小 , 染色体轮廓清晰 , 易于染色 而冰水冷冻处理周期太长 , 两种麻的根尖染色体分散不好
秋水仙碱是常用的预处理药品 ,但为剧毒物质 ,不同的植物或者器官往往要求不同的浓度和处理时间 ,需
要进行多种实验探索 ,且药品本身价格昂贵 ,故未在本试验中使用
据陈彦云等 报道 , 罗布麻的染色体为 条 , 与本研究结果差异很大 陈彦云等人的文章中染色体
图片不清晰 ,无法参照 本试验得出了较清晰的染色体图片和不同的结果 , 相比较而言更具有参考价值
从表 核型分析发现 , 罗布麻根尖染色体为 二 。 。 亡 认大叶白麻根尖染色体
为 。 艺 云根据 ,`的核型分类 , “ , ,核型较 “ ,,核型不对称性增强 , 所
以罗布麻比大叶白麻染色体更具对称性 下转第 页
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参考文献
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