全 文 ：云南农业大学学报 Journal of Yunnan Agricultural University，2013，28 (6) :845 － 850 http:/ /xb. ynau. edu. cn
ISSN 1004 － 390X;CODEN YNDXAX E-mail:xb@ ynau. edu. cn
收稿日期:2012 － 12 － 04 修回日期:2013 － 08 － 30 网络出版时间:2013 － 11 － 13 04∶55
* 基金项目:现代农业产业技术体系建设专项资金资助 (CAＲS －23) ;云南省应用基础研究计划项目 (2011FZ089)。
作者简介:王蕊 (1988 －) ，女，云南昆明人，在读硕士研究生，主要从事食品安全与质量控制研究。
E-mail:ruiwang88@ 126. com
＊＊通信作者Corresponding author:肖蓉 (1965 －) ，女，四川宜宾人，教授，主要从事保健食品及其开发研究。
E-mail:xiaorong91515@ 163. com
网络出版地址:http: / /www. cnki. net /kcms /detail /53. 1044. S. 20131113. 1655. 201306. 845_003. html
DOI:10. 3969 / j. issn. 1004 － 390X (n). 2013. 06. 015
普洱茶对酒精性脂肪肝大鼠脂质过氧化的影响*
王 蕊1，侯 艳2，杨兰兰3，罗 瑜1，高明艳4，肖 蓉1＊＊
(1． 云南农业大学 食品科学与技术学院，云南 昆明 650201;
2． 云南农业大学 龙润普洱茶学院，云南 昆明 650201;
3． 云南省昆明市动物疫病预防控制中心，云南 昆明 650000;
4． 云南农业大学 动物科学技术学院，云南 昆明 650201)
摘要:为探讨普洱茶 (熟茶)对酒精诱发的酒精性脂肪肝大鼠脂质过氧化的影响;将 60 只Wistar大鼠随机分
为阴性对照组、阳性对照组、保肝药物组、普洱茶 (熟茶) (低、中、高)剂量组，每组 10 只。试验大鼠采
用液体饲料饲喂，每天定时经口灌胃受试样品，普洱茶组给予不同剂量普洱熟茶，低、中、高剂量组灌胃剂
量分别为 0. 5，1. 0，2. 0 g /kg，药物组灌胃 KXL药品，灌胃剂量为 0. 15 g /kg，阴性对照组、阳性对照组每天
均灌胃 2 mL蒸馏水，60 d后牺牲试验大鼠，测定大鼠血清及肝脏组织中活性氧 (ＲOS)、超氧化物歧化酶
(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH-PX)活性及丙二醛 (MDA)含量。与阳性对照组比较，普洱茶高剂量
组大鼠血清及中、高剂量组大鼠肝脏匀浆 ＲOS 活性显著降低 (P ＜ 0. 05) ;普洱茶中、高剂量组大鼠血清
SOD及 GSH-PX活性显著升高 (P ＜ 0. 01) ;普洱茶高剂量组大鼠肝脏匀浆 GSH-PX 活性，及中、高剂量组
肝脏组织 SOD活性显著升高 (P ＜ 0. 05，P ＜ 0. 01) ;普洱茶低、中、高剂量组血清及高剂量组大鼠肝脏组
织中 MDA含量显著下降 (P ＜ 0. 05，P ＜ 0. 01) ;普洱茶 (熟茶)能够有效抑制酒精性脂肪肝大鼠的脂质过
氧化反应。
关键词:普洱茶;酒精性脂肪肝;脂质过氧化;大鼠
中图分类号:Ｒ 151. 41 文献标志码:A 文章编号:1004 － 390X (2013)06 － 0845 － 06
The Effects of Fermented Pu-erh Tea on the Lipid
Peroxidation in Alcoholic Fatty Liver Ｒats
WANG Ｒui1，HOU Yan2，YANG Lanlan3，LUO Yu1，GAO Mingyan4，XIAO Ｒong1
(1. College of Food Science and Technology，Yunnan Agricultural University，Kunming 650201，China;
2. College of Longrun Pu-erh Tea，Yunnan Agricultural University，Kunming 650201，China;
3. Center for Animal Disease Control and Prevention，Kunming 650000，China;
4. College of Animal Science and Technology，Yunnan Agricultural University，Kunming 650201，China)
Abstract:We investigated the effects of Fermented Pu-erh tea on the lipid peroxidation in alcoholic
fatty liver rats. Sixty Wistar rats were divided into negative control group，positive control group，drug
group，low，medium and high dose of the Fermented Pu-erh tea groups and ten rats in each group，the
liquid feed was used as rat food. low、medium and high dose of groups were given daily oral adminis-
trations of Fermented Pu-erh tea，which yielded dose of 0. 5，1. 0，2. 0 g /kg (body weight) ，drug
group was given daily oral administrations of 0. 15 g /kg (body weight)dose of drug ，The negative
and positive control group were given oral administrations of distilled water． After 60 days of treatment，
the rats were sacrificed，Biochemical parameters including serum and liver tissue levels of reactive oxy-
gen species (ＲOS) ，superoxide dismutase (SOD) ，glutathion peroxidase (GSH-PX)and malondial-
dehyde (MDA)were tested． The results showed that compared to the positive control group，the serum
levels of ＲOS in high does group of the Fermented Pu-erh tea and the liver tissue levels of ＲOS in me-
dium and high does groups of the Fermented Pu-erh tea are significantly decreased (P ＜ 0. 05) ;the
serum levels of SOD and GSH-PX in medium and high does groups of the Fermented Pu-erh tea are
significantly increased (P ＜ 0. 01) ，The liver tissue levels of GSH-PX in high does group of the Fer-
mented Pu-erh tea and SOD in medium and high does groups of the Fermented Pu-erh tea are signifi-
cantly increased (P ＜ 0. 05，P ＜ 0. 01) ;the serum levels of MDA in low，medium and high does
group of the fermented Pu-erh tea and the liver tissue levels of MDA in high group of the Fermented
Pu-erh tea are significantly decreased (P ＜ 0. 05，P ＜ 0. 01) ;Fermented pu-erh tea can effectively
restrain the lipid peroxidation in the alcoholic fatty liver rats．
Key words:Pu-erh tea;alcoholic fatty liver;lipid peroxidation;rats
普洱茶是云南特色茶叶，具有汤色红浓明亮、
香气独特陈香，滋味平正醇和的特点，深受广大
消费者青睐［1］，现代研究证实，普洱茶具有降
脂、减肥、降压、抗动脉硬化;防癌、抗癌;养
胃、护胃;健牙护齿;消炎、杀菌、治痢;抗衰
老等作用［2 － 6］，但普洱茶对酒精性脂肪肝 (ALD)
的研究鲜见报道。近年来，酒精已成为病毒性肝
炎后导致肝损害的第二大病因，酒精性肝病的致
病因素单一，但其发病机制较为复杂，目前尚不
完全清楚［7 － 8］。脂肪肝发病机制的 “二次打击”
学说认为氧应激和脂质过氧化是脂肪肝及肝纤维
化发生的基础机制。有研究表明普洱茶中的活性
成分茶多糖和茶多酚可阻断或减慢脂质过氧化的
进行［9］。因此，本试验采用酒精诱导形成酒精性
脂肪肝大鼠，同时持续给予不同剂量的普洱茶
(熟茶)水浸提取物进行干预，60 d 后牺牲试验
动物，测定血清及肝组织中的 ＲOS，SOD，GSH-
PX活性及 MDA含量，探索普洱茶对酒精性脂肪
肝的抗脂质过氧化作用，为普洱茶作为防治肝脏
疾病的药物原料或保健食品的开发研究提供科学
依据。
1 材料与方法
1. 1 材料
1. 1. 1 普洱茶样品
龙润普洱茶熟茶 (2007 年 10 月) :云南云县
天龙生态茶叶有限责任公司生产 (产品标准号:
DB53 /103—2007) ;版纳普洱熟茶 (2007 年 7
月)云南省农业科学院茶叶研究所，西双版纳普
洱茶研究院 (产品标准代号:DB53 /103) ;帕卡
普洱熟茶 (2007 年 5 月)云南省思茅茶树良种
场，中国普洱茶研究院 (产品标准代码:DB53 /
103)。将上述茶样按 1 ∶ 1 ∶ 1 等量混合制成受试
茶样。
1. 1. 2 药品
市售某保肝药物 KXL。
1. 1. 3 主要仪器与试剂
L-3280 半自动生化分析仪:上海科华实验系
统有限公司生产;Epppendorf-4910 单道微量可调
移液器:德国 Epppendorf 公司;ＲOS 试剂盒:北
京奇松生物科技有限公司;SOD，GSH-PX 及
MDA试剂盒:南京建成生物工程研究所。
1. 1. 4 实验动物
SPF级 Wistar 雄性大鼠 (180 ～ 220 g) ，由北
京维通利华实验动物技术有限公司提供 ［批号:
SCXK (京)2012—0001］。
1. 1. 5 动物饲料
由北京华阜康生物科技股份有限公司提供，
动物饲料营养成分及能量组成如表 1。
1. 2 方法
1. 2. 1 茶汤制备方法
普洱茶 (熟茶)磨碎后制备茶汤，制备方法
参照文献 ［5］。提取的茶汤终浓度为 1 g /mL，灭
菌后置于 4℃冰箱保存待用。
648 云南农业大学学报 第 28 卷
表 1 动物饲料营养成分及能量组成表
Tab. 1 Nutritional composition and energy of feed
阴性对照组
negative control group
试验组
experimental group
营养成分 /% nutrition 营养成分 /% nutrition
蛋白质 protein 17 蛋白质 protein 28. 8
脂肪 fat 18 脂肪 fat 30. 5
纤维素 fiber 4. 3 纤维素 fiber 7. 3
灰分 ash 3. 2 灰分 ash 5. 5
碳水化合物 carbohydrate 55. 4 碳水化合 carbohydrate 25. 8
热量 / (kcal·L －1)caloric 热量 / (kcal·L －1)caloric
蛋白质 protein 151 蛋白质 protein 151
脂肪 fat 359 脂肪 fat 359
碳水化合物 carbohydrate 490 碳水化合 carbohydrate 135
总量 total 1 000 酒精 alcohol 355
总量 total 1 000
1. 2. 2 动物分组与处理
参照中华人民共和国卫生部 2003 年颁布的
《保健食品检验与评价技术规范》和国际公认动
物模型，根据所评价的功能性试验动物要求，选
用外形符合健康标准，体重在 180 ～ 220 g 之间的
SPF级 Wistar雄性大鼠 60 只为试验对象。观察喂
养 3 d后，剔除不合格鼠，按体重随机分为阴性
对照组、阳性对照组、KXL 药物组，普洱茶 (熟
茶)低、中、高剂量组，每组 10 只，共 60 只。
阴性对照组每天饲喂阴性对照组液体饲料，其他
各组大鼠均饲喂试验组饲料，每天定时经口灌胃
受试样品。普洱茶组给予不同剂量普洱熟茶
(低、中、高剂量分别为人体推荐摄入量的 5，
10，20 倍，即 0. 5，1. 0，2. 0 g /kg) ，药物组灌
胃 KXL 药品 (0. 15 g /kg)［10］，一次经口灌胃
2 mL /d，阴性对照组、阳性对照组每天均灌胃 2
mL蒸馏水。每天记录大鼠摄食量及生长状况，
试验观察期为 60 d，结束后即牺牲试验大鼠。
1. 2. 3 测定指标与方法
试验第 60 天，大鼠 12 h 禁食不禁水，股动
脉采血，分离血清。同时，摘取肝组织，制备
10%的肝脏匀浆。测定血清及肝脏组织中 ＲOS，
SOD，GSH-PX活性及 MDA 含量，检测方法参照
试剂盒说明书进行。
1. 2. 4 数据统计方法
采用 SPSS17. 0 软件进行方差分析。
2 结果与分析
2. 1 普洱茶对酒精性脂肪肝大鼠体重的影响
表 2 显示，与阴性对照组相比，阳性对照组
大鼠体重和体重净增值显著下降 (P ＜ 0. 01) ，
说明摄入酒精以后会造成体重的下降。与阳性
对照组相比，普洱茶高剂量组大鼠体重显著降
低 (P ＜ 0. 01) ，这可能与普洱茶具有减肥作用
有关。
表 2 普洱茶对Wistar大鼠体重的影响 (mean ± SD)
Tab. 2 Effects of fermented Pu-erh tea on the body weight in Wistar rats g
组别 group 0 d 60 d 净增值 augmenter
阴性对照组 negative control group 221. 87 ± 12. 36 a 426. 20 ± 32. 87 cC 176. 90 ± 18. 25 dD
阳性对照组 positive control group 220. 57 ± 10. 35 a 334. 30 ± 18. 40 bB 115. 91 ± 15. 12b BC
保肝药物组 drug group 222. 74 ± 12. 71 a 335. 28 ± 26. 80 bB 121. 97 ± 17. 22 bcBC
普洱茶低剂量组 low dose group of Pu-erh tea 222. 69 ± 12. 09 a 342. 06 ± 22. 47 bB 137. 11 ± 9. 53 cC
普洱茶中剂量组 medium dose group of Pu-erh tea 220. 94 ± 12. 93 a 316. 19 ± 29. 52 abAB 107. 94 ± 14. 67 bB
普洱茶高剂量组 high dose group of Pu-erh tea 220. 66 ± 12. 82 a 295. 11 ± 34. 92 aA 77. 53 ± 22. 19 aA
注:同列含相同小写字母的表示差异不显著，(P ＞ 0. 05) ;不含相同小写字母表示差异显著 (P ＜ 0. 05)。同列含相
同大写字母的表示差异未达到极显著水平 (P ＜ 0. 01) ;不含相同大写字母的表示差异极显著 (P ＜ 0. 01) ;下同。
Note:Same lowercases in same column indicate no difference (P ＞ 0. 05) ，different lowercases indicate significant difference
(P ＜ 0. 05) ，Same majuscule in same column indicate no very significant difference (P ＞ 0. 01) ，different majuscule indicate the
difference is very significant (P ＜ 0. 01) ;the same as below.
2. 2 普洱茶对 Wistar 大鼠血清、肝脏组织 ＲOS
活性的影响
表 3显示，与阴性对照组相比，阳性对照组大
鼠血清和肝脏组织 ＲOS 活性显著上升 (P ＜ 0. 05，
P ＜0. 01)。与阳性对照组相比，普洱茶高剂量组和
药物组大鼠血清 ＲOS 活性显著下降 (P ＜ 0. 05，
748第 6 期 王 蕊，等:普洱茶对酒精性脂肪肝大鼠脂质过氧化的影响
P ＜0. 01) ;普洱茶中、高剂量组和药物组大鼠肝脏
组织 ＲOS活性显著下降 (P ＜0. 05)。
表 3 普洱茶对Wistar大鼠 ＲOS活性的影响
Tab. 3 The active influence of fermented
Pu-erh tea on ＲOS in Wistar rats u /mL
组别
group
血清活性氧
the serum
level of ＲOS
肝脏组织活性氧
the liver tissue
level of ＲOS
阴性对照组 negative control group 27. 51 ±2. 50 abAB 63. 55 ±4. 75 ab
阳性对照组 positive control group 36. 25 ±5. 58 dCD 73. 70 ±8. 53 c
保肝药物组 drug group 25. 90 ±3. 86 aA 62. 99 ±14. 69 ab
普洱茶低剂量组 low dose group
of Pu-erh tea
32. 81 ±3. 63 cdBCD 71. 09 ±1. 31 bc
普洱茶中剂量组medium dose group
of Pu-erh tea
36. 92 ±0. 76 dD 61. 84 ±3. 73 ab
普洱茶高剂量组 high dose group
of Pu-erh tea
31. 03 ±2. 50 bcABC 60. 18 ±3. 34 a
2. 3 普洱茶对大鼠血清 GSH-PX 和 SOD 活性、
MDA含量的影响
表 4 显示，与阴性对照组相比，阳性对照组
大鼠血清 GSH-PX，SOD 活性显著下降 (P ＜
0. 01) ;MDA含量显著上升 (P ＜ 0. 01)。与阳性
对照组相比，普洱茶中、高剂量组大鼠血清 GSH-
PX和 SOD活性显著升高 (P ＜ 0. 01) ;普洱茶低、
中、高剂量组及药物组大鼠血清 MDA 含量显著
降低 (P ＜ 0. 01)。
2. 4 普洱茶对大鼠肝脏匀浆 GSH-PX 和 SOD 活
性、MDA含量的影响
表 5 显示，与阴性对照组相比，阳性对照
组大鼠肝脏匀浆 GSH-PX 活性显著下降 (P ＜
0. 01) ;SOD 活性有所下降，但差异不显著
(P ＞ 0. 05) ;MDA 含量显著升高 (P ＜ 0. 05)。
与阳性对照组相比，普洱茶高剂量组和药物组
大鼠肝脏匀浆 GSH-PX 活力显著升高 (P ＜
0. 05，P ＜ 0. 01) ;普洱茶中、高剂量组大鼠
肝脏匀浆 SOD 活性显著升高 (P ＜ 0. 01) ;普
洱茶高剂量组大鼠肝脏匀浆 MDA 含量显著下
降 (P ＜ 0. 01)。
表 4 普洱茶对Wistar大鼠血清 GSH-PX和 SOD活性、MDA含量的影响
Tab. 4 The active influence of fermented Pu-erh tea on serum GSH-PX，SOD and MDA in Wistar rats
组别 group GSH-PX / (u·mL －1) SOD / (u·mL －1) MDA/ (nmol·mL －1)
阴性对照组 negative control group 1844. 75 ± 98. 29 cC 511. 50 ± 8. 26 dD 3. 24 ± 0. 40 aA
阳性对照组 positive control group 1677. 97 ± 34. 30 abAB 322. 54 ± 15. 95 aA 5. 77 ± 0. 30 bB
保肝药物组 drug group 1743. 34 ± 53. 77 bcB 331. 58 ± 21. 17 aAB 3. 35 ± 0. 81 aA
普洱茶低剂量组 low dose group of Pu-erh tea 1647. 46 ± 37. 91 aA 360. 75 ± 28. 62 abABC 3. 58 ± 0. 53 aA
普洱茶中剂量组 medium dose group of Pu-erh tea 2119. 61 ± 69. 50 dD 417. 03 ± 48. 94 cC 3. 95 ± 0. 15 aA
普洱茶高剂量组 high dose group of Pu-erh tea 2078. 53 ± 50. 64 dD 383. 49 ± 41. 45 bcBC 3. 66 ± 1. 16 aA
表 5 普洱茶对大鼠肝脏组织 GSH-PX和 SOD活性、MDA含量的影响
Tab. 5 The active influence of fermented Pu-erh tea on liver tissue levels of GSH-PX，SOD and MDA in Wistar
组别 group GSH-PX / (u·mg －1) SOD / (u·mg －1) MDA / (nmol·mg －1)
阴性对照组 negative control group 2 865. 18 ± 624. 30 dC 243. 59 ± 32. 27 abAB 0. 69 ± 0. 25 aAB
阳性对照组 positive control group 1 799. 74 ± 220. 40 aA 216. 73 ± 7. 38 aA 1. 07 ± 0. 31 bB
保肝药物组 drug group 2 624. 69 ± 631. 31 cdBC 229. 84 ± 44. 13 aA 0. 85 ± 0. 30 abAB
普洱茶低剂量组 low dose group of Pu-erh tea 2 259. 08 ± 391. 31 abcABC 261. 70 ± 44. 48 abAB 0. 85 ± 0. 09 abAB
普洱茶中剂量组 medium dose group of Pu-erh tea 2 084. 44 ± 121. 21 abAB 320. 30 ± 62. 87 bB 0. 81 ± 0. 24 abAB
普洱茶高剂量组 high dose group of Pu-erh tea 2 474. 94 ± 289. 34b cdABC 320. 07 ± 85. 05 bB 0. 63 ± 0. 12 aA
3 讨论
乙醇可以通过多条途径导致氧化应激。乙醇
代谢的过程中，产生大量的还原型烟酰胺腺嘌呤
二核苷酸 (NADH) ，增加了呼吸链中的电子流，
导致了活性氧自由基 (ＲOS)的大量产生，从而
加剧了氧化应激。国内外学者普遍认为酒精代谢
过程中产生的氧自由基是造成 ALD肝损伤的重要
环节［11］。由各种原因导致的 ＲOS 生成过多而蓄
积时将导致 ＲOS与多聚不饱和脂肪酸作用启动细
848 云南农业大学学报 第 28 卷
胞内脂质过氧化反应，与生物膜的磷脂、酶和膜
受体相关的多聚不饱和脂肪酸的侧链及核酸等大
分子物质反应形成脂质过氧化产物，从而使细胞
膜的流动性和通透性、细胞的结构和功能发生改
变［12］，另外 ＲOS 具有极强的氧化攻击特性，可
直接攻击细胞器、DNA及具有重要功能的蛋白信
号因子，导致肝细胞损伤。本研究结果显示，与
阴性对照组比较，酒精性脂肪肝大鼠体内 ＲOS 显
著升高，给予普洱茶和 KXL药物后，ＲOS 显著降
低，提示普洱茶可抑制 ＲOS 产生，这可能与普洱
茶中含有茶多酚和茶多糖有关，因为茶多酚可清
除体内过量自由基，避免生物大分子损伤，茶多
糖可捕捉脂质过氧化链式反应中产生的活性氧，
减少链式反应的长度，阻断或减慢脂质过氧化地
进行［9］。
机体为避免受到内源性或外源性 ＲOS 的损
伤，在进化过程中形成了一整套代谢的抗氧化系
统，主要由酶和抗氧化剂组成。SOD 是生物体内
最为重要的抗氧化酶之一，是清除 ＲOS 的第一道
防线［13］。机体内清除氧自由基的物质或酶类有
SOD，GSH-PX等，这些酶类使自由基的生成与降
解处于动态平衡。测定这些物质或酶类的浓度或
活性可评价机体抗氧化能力和氧化损伤程度，以
及它们的互动关系对机体的影响［14］。ＲOS 对机体
造成的最大损害是导致脂质过氧化［15］。研究发
现，氧应激和脂质过氧化是各种原因引起脂肪肝
形成和进展的共同机制［16 － 19］，长时间的氧化应激
导致 SOD，GSH-PX 水平的下降，脂质过氧化终
产物 MDA 含量增加。本研究显示，与阴性对照
组比较，酒精性脂肪肝大鼠体内血清及肝脏组织
中 SOD和 GSH-PX 活力显著下降，且 MDA 含量
显著升高，提示，酒精性脂肪肝的形成伴随严重
的脂质过氧化反应，给予普洱茶 (熟茶)后，试
验大鼠血清及肝脏组织中的 SOD 和 GSH-PX 活力
较阳性对照组显著升高，KXL 药物组也可以升高
试验大鼠血清和肝脏组织中的 SOD 和 GSH-PX 活
力，同时，普洱茶及药物组血清及肝脏组织中
MDA含量较阳性对照组均显著降低。这说明普洱
茶可能通过提高清除自由基的 SOD 和 GSH-PX 的
活性，进一步提高机体抗氧化的能力，进而增强
了脂质代谢的能力，减缓了脂毒性，提高了机体
防御和消除自由基的能力，降低机体脂质过氧化
的程度，从而预防和减轻了酒精性脂肪肝的发生
或发展。
有研究表明，普洱茶抗脂质过氧化作用的环
节可能有很多，其中的主要有效成分茶多酚氧化
还原电位较低，能提供质子与体内自由基结合，
来清除体内过量自由基。避免生物大分子损伤，
并能抑制细胞色素参与亲电子代谢物的形成［20］。
此外，普洱茶中已经证实有黄酮以及黄酮配糖体
等黄酮类化合物的存在［21 － 22］;黄酮类化合物是很
强的抗氧化剂［23］;除此之外，普洱茶还包含了
VC，VE等抗氧化物质，这些物质相互作用，减
少了机体氧化损伤，共同防治脂质过氧化反应，
从而防治了酒精性脂肪肝的形成和恶化。
4 结论
综上所述，本批次普洱茶 (熟茶)在本试验
条件下，可通过降低酒精性脂肪肝试验大鼠血清
和肝脏组织中的 ＲOS 活性和 MDA 含量，以及增
加 SOD和 GSH-PX的活性，从多方面有效抑制酒
精性脂肪肝大鼠的脂质过氧化反应。
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058 云南农业大学学报 第 28 卷