全 文 ：山 地农 业生 物学 报　28(5):429 ～ 431, 2009
Journal of Mountain Agriculture and Biology
大蝎子草提取物抗风湿活性的初步研究＊
郑庆霞 ,李洪庆＊
(贵州大学 贵州省生化工程中心 ,贵阳　550025)
摘　要:本研究以抗炎镇痛为指标 , 探讨大蝎子草提取物的抗风湿作用。 用石油醚 、乙酸乙酯 、正丁醇对大蝎子
草 95%乙醇提取物进行分段萃取 , 再用小鼠急性耳廓肿法 、棉球肉芽肿法考察各萃取部位的抗炎活性;小鼠热
板法 、醋酸扭体法考察各萃取部位的镇痛活性。结果表明 , 乙酸乙酯萃取部位具有显著的抗炎和镇痛活性 , 能明
显抑制二甲苯所致的小鼠急性耳廓肿胀 、小鼠棉球肉芽肿;可使醋酸所致的扭体次数明显减少 , 并使小鼠热板法
痛阈明显提高。
关键词:大蝎子草;抗炎;镇痛;抗风湿;活性部位
中图分类号:R965.2　　　文献标识码:A　　　文章编号:1008-0457(2009)05-0429-03
EfectsofGirardiniadiversifoliaextractsonAnti-rheumatismActivity
ZHENGQing-xia, LIHong-qing＊(CenterofBiochemicalEngineeringinGuizhouProvince, GuizhouUniversity,
Guiyang550025, China)
Abstract:TheefectofGirardiniadiversifoliaextractswasinvestigatedusinganti-inflammatoryandanalgesicindexin
thepresentworks.Theextractof95% ethanolfromGirardiniadiversifolia(Link)Frishadbeenobtainedbypetroleum
ether, ethylacetateandn-butylalcohol.Theanti-inflammationandanalgsicefectinmicewerefurtherevaluatedhere-
in.Theresultprovedthatethylacetatepartdemonstratedanobviousanti-inflammatoryandanalgesticefects.Therefore,
theextractscouldobviouslyinhibittheearedemainducedbyxylene, aswelasgranulomainducedbycotonball.Fur-
ther, painscausedbyhotboradmightbeconsiderablyaleviatedaftertheutilityofthisextract.
Keywords:Girardiniadiversifolia;Anti-inflammatory;Analgesticefects;Anti-rheumatism;Activefraction
大蝎子草 Girardiniadiversifolia(Link)Fris又名红禾麻 、红火麻 、大红活麻 、老虎麻 、红麻等 ,为荨麻科
蝎子草属植物 ,广泛分布在贵州省黔中地区 ,是贵州省民间常用草药之一 ,收载于《贵州中草药名录》、《滇
南本草 》、《四川常用草药》中 ,味苦 、辛 ,性凉 ,有小毒 ,祛风除痰 ,利湿解毒 ,广泛用于风湿性关节炎 ,类风
湿性关节炎等病的治疗[ 1] ,其疗效确切 ,但目前其作用物质基础研究尚未见相关报道 。因此 ,寻找大蝎子
草活性成分具有十分重要的意义。笔者从抗炎镇痛方面对大蝎子草提取物不同萃取部位进行了初步的药
理学考察 ,以期寻找大蝎子草抗风湿的活性部位。
1　材料与方法
1.1　材料
1.1.1　供试药材与动物　大蝎子草采于贵州省安顺市 ,经贵州大学生命科学学院熊源新教授鉴定为荨
麻科蝎子草属大蝎子草 Girardiniadiversifolia(Link)Fris,全草晒干备用;试验动物为昆明种小鼠(清洁
＊ 收稿日期:2009-09-01;修回日期:2009-09-21
作者简介:郑庆霞(1984-),女 ,河南安阳人 ,贵州大学生命科学学院在读硕士 ,研究方向为药物化学。 E-mailfannyzheng610@126.com
＊通讯作者:李洪庆 ,博士 ,教授 ,硕士研究生导师。研究方向为天然药物的研究与开发。E-mailli.hongqing@yahoo.com
DOI :10.15958/j.cnki.sdnyswxb.2009.05.022
级),体重(20±2)g,由贵阳医学院实验动物中心提供。
1.1.2　仪器与试剂　旋转蒸发仪(广东仪科实验室技术有限公司);电子天平(莆田市亚太计量仪器有限
责任公司);ARTT407C电子分析天平(上海奥豪斯公司);电热鼓风干燥箱(上海博讯实业有限公司医疗
设备厂)。乙醇为化学纯 ,石油醚 、乙酸乙酯 、正丁醇 、二甲苯 、乙醚 、冰醋酸均为分析纯 。
1.2　方法
1.2.1　大蝎子草提取物制备　取干燥大蝎子草 500g适当粉碎 , 95%工业乙醇 6倍量冷浸提取 3次 ,每
次 5d,提取液合并 ,回收乙醇至无醇味 ,得到乙醇浸膏 11.72 g。将乙醇浸膏悬浮于水 ,用石油醚(60 ～
90℃)萃取 5次 ,减压回收溶剂后得石油醚浸膏(A)2.04g;乙酸乙酯萃取 5次 ,减压回收溶剂后得乙酸乙
酯浸膏(B)2.37g;继用正丁醇萃取 5次 ,减压回收溶剂后得正丁醇浸膏(C)2.75g,剩余提取液减压回收
后得水溶浸膏(D)4.21g。各组分均用 0.5%羧甲基纤维素钠(CMC)溶液超声溶解 ,分别配成 50mg·mL
-1的溶液备用。
1.2.2　抗炎活性测定
1.2.2.1　大蝎子草提取物对小鼠耳廓肿胀的影响　取雄性小鼠 50只 ,随机分成 5组 ,每组 10只。分为
蒸馏水组 、石油醚组(A)、乙酸乙酯组(B)、正丁醇组(C)和水溶性组(D)。按每 10g体重给药 0.1mL进
行腹腔注射给药 。给药 40min后后用二甲苯 0.1mL均匀涂布于各鼠右耳的正反面 , 30min后脱颈处死 ,
用 8mm打孔器在两耳同一部位扎下左右耳片 ,精密称重 ,以右耳的重量减去左耳的重量作为耳廓炎性肿
胀度 ,按公式:抑制率 =[ (空白组平均肿胀度 -给药组平均肿胀度)/空白组平均肿胀度 ] ×100%[ 2]计算
右耳的肿胀度及抑制率。
1.2.2.2　棉球肉芽肿　雄性小鼠 50只 ,乙醚浅麻醉下腹部去毛消毒 ,腹部切口 ,将 1个已高压灭菌的
10mg棉球植入小鼠右侧腋窝皮下 ,缝合皮肤消毒。随机分成 5组 ,给药量及方式同 1.2.2.1。连续给药
7d,每天 1次。末次给药 1h后将小鼠脱颈处死 ,剥离棉球 ,置烘箱内 70℃干燥 2h,去除称重 ,计算肉芽肿
重量[ 3] 。以肉芽肿重作为炎症肿胀程度的指标 ,按公式:增生抑制率(%)=(对照组肉芽平均重 -给药组
肉芽平均重)/对照组肉芽平均重 ×100%[ 4]计算增生抑制率 ,用增生抑制率表示其抗炎强度。
1.2.3　镇痛作用测定
1.2.3.1　对醋酸所致小鼠扭体的影响　50只小鼠(雌雄各半),随机分为 5组 ,每组 10只 ,称重并编号 。
阴性对照组腹腔注射生理盐水(按每 10g体重注射 0.1mL),给药组给药方式同 1.2.2.1。在给药 1h后
按每只腹腔注射 0.6%醋酸溶液 0.2mL,观察并记录注射醋酸溶液 15min内出现扭体反应的次数 [ 5] 。按
公式:镇痛百分率(%)=(对照组扭体次数 -实验组扭体次数)/对照组扭体次数 ×100%[ 6]计算药物镇痛
百分率 。
1.2.3.2　热板法镇痛试验　选取筛选合格的雌性小鼠(痛阈值在 10 ～ 30s),随机分成 5组 ,每组 10只 。
每只老鼠给药前测其痛阈值 ,取两次平均值作为其正常痛阈值。腹腔注射给药 、阴性对照组注射生理盐水
(给药量和方式同上)后 30、60、90、120min测定痛反应潜伏期 ,计算痛阈提高率 [ 5] 。
1.2.4　统计方法　试验数据以 x±s表示 ,采用统计软件 SPSS13.0进行方差分析 。
2　结果与分析
2.1　大蝎子草的抗炎活性
2.1.1　对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响　从表 1可见 , B组可显著抑制二甲苯所致的小鼠急性耳廓肿
胀 ,与蒸馏水对照组比较差异极显著(P<0.01), C、D组也有明显的抑制作用(P<0.05)。
2.1.2　对小鼠棉球肉芽肿的影响　从表 2可见 , B组能明显抑制小鼠棉球肉芽增生 ,与对照组比较差异
极显著(P<0.01), A组对小鼠棉球肉芽增生无明显抑制作用。
2.2　大蝎子草的镇痛活性
2.2.1　对醋酸所致小鼠扭体的影响　从表 3可见 , B、C、D组均能有效减轻小鼠醋酸性腹腔疼痛反应 ,扭
体次数与对照品组相比显著下降(P<0.05或 P<0.01)。同时 B、C、D组还能延缓小鼠扭体的出现 。
430 山 地 农 业 生 物 学 报 　2009年
表 1　大蝎子草各组分对小鼠耳廓肿胀的影响(x±s)
Tab.1　EffectsofGirardiniadiversifoliaextractsonswelingofauricleinducedbydimethylbenzeneinmice(x±s)
组　别 剂　量(g·kg-1) 耳廓炎症肿胀度(mg) 抑制率(%)
蒸馏水 - 3.7±1.0 -
A 0.5 3.5±1.0 6.2
B 0.5 1.8±1.0＊＊ 52.9
C 0.5 2.7±1.3＊ 27.8
D 0.5 2.5±1.3＊ 32.6
注:与蒸馏水组比较 , ＊表示 P<0.05, ＊＊表示 P<0.01, n=10。下表同。
表 2　大蝎子草各组分对棉球肉芽肿重量的影响(x±s)
Tab.2　EfectsofGirardiniadiversifoliaextractsongranulomaweightinducedbycotonbal(x±s)
组　别 剂量(g·kg-1) 肉芽肿干重(mg) 抑制率(%)
蒸馏水 - 10.4±4.0 -
A 0.5 10.3±3.2 1.5
B 0.5 7.1±2.1＊＊ 31.6
C 0.5 8.6±2.4＊ 18.0
D 0.5 7.7±3.0＊ 26.5
表 3　大蝎子草各组分对醋酸所致小鼠疼痛的影响(x±s)
Tab.3　InhibitoryeffectsofGirardiniadiversifoliaextractsonwrithingresponseofmicecausedbyaceticacid(x±s)
组　别 剂量(g·kg-1) 出现扭体(min) 15min内扭体次数 镇痛率(%)
对照组 - 3.1±1.2 41.4±2.4 -
A 0.5 3.0±1.3 41.2±2.8 0.5
B 0.5 5.9±1.7＊＊ 17.7±1.4＊＊ 57.2
C 0.5 4.3±1.4＊ 26.8±1.4＊＊ 35.3
D 0.5 4.7±1.3＊＊ 24.9±1.9＊＊ 39.9
2.2.2　对小鼠热板镇痛实验的影响　从表 4可见 , A、B、C、D组小鼠给药后不同时间测定的痛阈值均较
给药前或对照组有一定的延长趋势 ,其中 B组作用最强 , 给药后痛阈值与给药前相比差异极显著
(P<0.01)。
表 4　大蝎子草各组分对小鼠热板致痛反应的影响(x±s)
Tab.4　AnalgesiceffectsofGirardiniadiversifoliaextractsonhotplateofmice(x±s)
组别 剂量g·kg-1
给药前痛
阈值(t/s)
给药后痛阈值(t/s)
30min 60min 90min 120min
痛阈提高百分率(%)
30min 60min 90min 120min
对照组 - 15.4±3.4 16.4±3.9 17.1±6.5 12.3±4.1 16.1±2.3 6.6 11.1 - 5.1
A 0.5 16.3±3.0 17.7±3.6 18.6±2.8＊ 17.3±2.3■■ 17.5±3.4 9.0 14.3 6.4 7.3
B 0.5 16.0±5.1 21.4±5.0＊＊■ 27.1±5.7＊＊■■ 25.1±5.3＊＊■■ 22.4±4.8＊＊■■ 33.5 69.2 56.3 39.9
C 0.5 13.8±3.4 16.3±4.0 18.4±5.7＊ 15.7±2.5＊■■ 15.6±3.5 18.3 33.4 13.9 13.2
D 0.5 15.4±3.3 18.3±3.9＊ 22.3±5.0＊＊■■ 18.6±4.0＊＊■■ 17.5±4.0＊ 19.1 44.9 21.1 13.4
注:与给药前比较 , ＊表示 P<0.05, ＊＊表示 P<0.01;相同时间与对照组比较■表示 P<0.05, ■■表示P<0.01, n=10。
3　讨论
关节的炎症与疼痛是风湿病学中最常见的表现 ,因此抗炎与镇痛是风湿病治疗学中最主要的内容之
一 [ 8] 。本研究以抗炎镇痛为导向对大蝎子草醇提取物的不同萃取部位进行了初步的药理学研究 。小鼠
耳廓肿试验和棉球肉芽肿试验中 ,乙酸乙酯部位均表现出良好的抗炎作用(P<0.01),表示该部位对急慢
性炎症具有抑制作用;热板法温度刺激与腹腔注射有害化学品分别用于检测中枢与外周镇痛活性 ,醋酸引
起疼痛与内源性物质释放兴奋痛觉神经末梢有关。研究表明大蝎子草提取物的乙酸乙酯部位在热板法与
(下转第 461页)
431第 5期　 郑庆霞 ,等:大蝎子草提取物抗风湿活性的初步研究
3.2　通过与子实体相连有菌索找寻菌根带有不确定性 ,但菌套下哈氏网观察可以辅助我们确定菌根与共
生真菌的关联 ,这使得对林区菌根的调查以及对林区接种菌根菌的调查有据可依 。
3.3　建立菌套下哈氏网观察的方法使我们观察到带有一定规律的哈氏网形态 ,扩大试验增加考察菌种数
量 、观察同一树种下不同菌种菌套下哈氏网差异以及同种菌不同树种下的差异 ,从而建立森林生态中 “外
生菌根 ”识别体系等 ,有待下一步深入研究 。
参　考　文　献:
[ 1] MIRENK.Duilabeitia, SusanaHoormila, EctomycorrhizaesynthesizedbetweenPinusradiateandeithtfungiassociatedwith
Pinusspp[ J] .Mycologia1996, 88(6):897-908.
[ 2] 郑　玲 ,吴小芹.植物菌根共生体结构的研究进展 [ J] .南京林业大学学报(自然科学版), 2008, 32(5):135-139.
[ 3] 弓明钍 ,昧应龙 , 忡崇禄.苗根研究及应用 [ M] .北京:中国韩业出版社 , 1997:4-21;78-80.
[ 4] 牛永春.真菌系统分类与鉴定中的新方法 [ J] .北京林业大学学报 , 1995, 17(2):93-98.
[ 5] 黄亦存 ,沈崇尧 , 裘维蕃.外生茵根的形态学 、解剖学及分类学研究进展 [ J] .真菌学报 , 1992, 11(3):169-178.
(上接第 431页)
扭体法两个试验中均表现出较强的镇痛作用(P<0.01),证明该活性部位有利于风湿 、类风湿炎症及疼痛
的缓解 ,这对进一步研究大蝎子草具有重要意义。但是 ,本试验仅从抗炎镇痛方面对大蝎子草的抗风湿活
性进行了初步的研究 ,而关于其抗风湿的药理机理研究还有待于进一步深入 ,同时其活性成分的分离 、纯
化 、鉴定等工作 ,还有待于后续研究。
参　考　文　献:
[ 1] 国家中医药管理局《中华本草》编委会.中华本草 [ M] .上海科学技术出版社.1999:2, 556-557.
[ 2] 陈　奇.中药药理实验方法学 [ M] .北京:人民卫生出版社 , 1994:70.
[ 3] 周玖瑶 ,黄桂英 , 韩 　坚.三叶人字草抗炎镇痛作用研究 [ J] .中国医药导报 , 2007, 4(2):155-156.
[ 4] 王　新 ,张秀英.9种中药抗炎作用的实验观察 [ J] .中国兽医杂志 , 2007, 43(1):35-36.
[ 5] 徐叔云 ,卞如濂 , 陈　修 ,等.药理实验方法学 [ M] .第 2版.北京:人民卫生出版社 , 2002:882.
[ 6] 王丽娟 ,王　勇 , 朱旭艳 ,等.黄芩抗炎镇痛作用的实验研究 [ J] .齐齐哈尔医学院学报 , 2008, 29(11):1 304-1 305.
[ 7] 王翠娥.镇痛散对小白鼠的镇痛作用 [ J] .山东中医学院学报 , 1993, 17(4):50.
[ 8] 杨岫岩.风湿科的镇痛与抗炎 [ J] .中国处方药 , 2008, 8(77):68-69.
(上接第 440页)
参　考　文　献:
[ 1] 刘丽萍 ,赵祥颖 , 刘建军.葡萄籽原花青素的功能及提取工艺 [ J] .食品与药品 , 2006, 8(12):17-21.
[ 2] JORGEMRICARDODASILNA, ACQUESRIGAUD, VERONIQUECHEYNIER, etal.Procyanidindimmersandtrimersfrom
Grapeseeds[ J] .phytochemistry, 1991, 30(4):1 259-1 264.
[ 3] 陈晓玲.植物药中原花青素的抗氧化作用 [ J] .中国中药杂志 , 2003, 28(8):700-702.
[ 4] 沈　琳 ,高青海 , 刘相菊 ,等.葡萄籽原花青素对实验性动脉粥样硬化兔基质金属蛋白酶的影响 [ J] .山东大学学报 ,
2006, 44(1):33-40.
[ 5] SALAHN, MILLERNJ, PAGANGAG, etal.RiceevansC[ J] .ArchBiochembiophys, 1995, 332(1):339-346.
[ 6] PEKICB, KOVAC, ALONSOE.Studyoftheextractionofproanthocyanidinsfromgrapeseeds[ J] .FoodChem, 1998, 61
(12):201-206.
[ 7] 奚洪民 ,邹宪芝 , 刘进邦.葡萄籽中低聚原花青素研究进展 [ J] .化学世界 , 2005(12):759-762.
461第 5期　 罗土炎 ,等:牛肝菌和红菇的菌根形态扫描电镜识别初探