全 文 ：云南农业大学学报 Journal of Yunnan Agricultural University，2015，30 (3) :408 － 412 http:/ /xb. ynau. edu. cn
ISSN 1004 － 390X;CODEN YNDXAX E-mail:xb@ ynau. edu. cn
收稿日期:2014 － 04 － 15 修回日期:2014 － 12 － 15 网络出版时间:2015 － 05 － 16 13:58
* 基金项目:现代农业产业技术体系建设专项资金 (CAＲS － 23) ;云南省应用基础研究计划项目 (2011FZ089)。
作者简介:王蕊 (1988—) ，女，云南昆明人，硕士研究生，主要从事食品安全与质量控制研究。
E-mail:742826467@ qq. com
＊＊通信作者Corresponding author:侯艳 (1978—) ，女，云南玉溪人，硕士，讲师，主要从事普洱茶保健功效研究。
E-mail:zgynndhy@ 163. com
网络出版地址:http: / /www. cnki. net /kcms /detail /53. 1044. S. 20150516. 1358. 014. html
DOI:10. 16211 / j. issn. 1004-390X(n). 2015. 03. 014
普洱茶对酒精性肝损伤组织病理动态变化的影响*
王 蕊1，肖 蓉2，杨兰兰3，刘文文4，施瀚超4，侯 艳5＊＊
(1. 云南省昆明市食品药品检验所，云南 昆明 650000;2. 云南农业大学 食品科学技术学院，云南 昆明 650201;
3. 云南省昆明市动物疫病预防控制中心，云南 昆明 650000;4. 云南农业大学 动物科技学院，云南 昆明 650201;
5. 云南农业大学 龙润普洱茶学院，云南 昆明 650201)
摘要:为探讨普洱茶 (熟茶)对酒精诱发的酒精性肝损伤大鼠肝组织结构的影响;将 120 只 Wistar大鼠随机
分为阴性对照组、阳性对照组、KXL药物组、普洱茶 (熟茶) (低、中、高)剂量组，每组 20 只。试验大鼠
采用液体饲料饲喂，每天定时经口灌胃受试样品，普洱茶组给予不同剂量普洱熟茶，低、中、高剂量组灌胃
剂量分别为 0. 5，1. 0，2. 0 g /kg，药物组灌胃 KXL药品，灌胃剂量为 0. 15 g /kg，阴性对照组、阳性对照组每
天均灌胃 2 mL蒸馏水。每隔 15 d，每组随机选取 3 只，做肝组织病理检测，试验观察期为 60 d，结束后即牺
牲试验大鼠并检测肝组织病理变化及大鼠肝组织谷草转氨酶 (AST)和丙氨酸转氨酶 (ALT)活性。试验结
果显示:与阳性对照组相比，普洱茶低、中、高剂量组与药物组均可显著降低肝组织 ALT，AST 活力 (P ＜
0. 01) ，通过试验大鼠标本和病理检测发现，普洱茶能改善由酒精引起的肝组织病变。通过试验可知普洱茶
(熟茶)能够有效抑制酒精性肝损伤大鼠肝组织病变。
关键词:普洱茶;酒精性肝损伤;肝组织病理;动态;影响
中图分类号:Ｒ 151. 41 文献标志码:A 文章编号:1004 － 390X (2015)03 － 0408 － 05
The Effects of Fermented Pu-erh Tea on the Dynamic Pathological
Changes of the Alcoholic Liver Injury Ｒats
WANG Ｒui1，XIAO Ｒong2，YANG Lanlan3，LIU Wenwen4，SHI Hanchao4，HOU Yan5
(1. Food and Drug Inspection Offices，Kunming 650000，China;
2. College of Food Science and Technology，Yunnan Agricultural University，Kunming 650201，China;
3. Center for Animal Disease Control and Prevention，Kunming 650000，China;
4. College of Animal Science and Technology，Yunnan Agricultural University，Kunming 650201，China;
5. College of Longrun Pu-erh Tea，Yunnan Agricultural University，Kunming 650201，China)
Abstract:We investigated the effects of fermented Pu-erh tea on dynamic pathological changes of the al-
coholic liver injury rats． One hundred and twenty Wistar rats were divided into negative control group，posi-
tive control group，drug group，low，medium and high dose of the fermented Pu-erh tea groups． Twenty rats
in each group were fed with liquid feed． The low，medium and high dose of the fermented Pu-erh tea were
given with daily oral administrations of fermented Pu-erh tea and the doses were 0. 5，1. 0，2. 0 g /kg，re-
spectively． The drug group was given with daily oral administrations of drug and the dose was 0. 15 g /kg．
The negative control group and positive control group were given with oral administrations of 2 mL distilled
water． Every 15 days，three rats in every group were randomly selected and the pathological changes of
their livers were tested． After 60 days of treatment，all the rats were sacrificed and the liver tissue levels of
AST，ALT and pathological changes of the liver were tested． The results showed that compared with the
positive control group，the liver levels of AST，ALT in low，medium and high does groups of the fermented
Pu-erh tea significantly decreased (P ＜0. 01)． Through the specimens of rats and pathological detection，it
was found that medium and high dose of the fermented Pu-erh tea group obviously improved pathological
changes of the liver in alcoholic fatty liver rats． Fermented Pu-erh tea can effectively prevent the occurrence
and development of the alcoholic liver injury．
Keywords:Pu-erh tea;alcoholic liver injury;pathological changes;dynamic;effect
近年来，酒精已成为病毒性肝炎后导致肝损
害的第二大病因，酒精性肝病的致病因素单一，但
其发病机制较为复杂，目前尚不完全清楚［1 － 2］。现
代研究证实，普洱茶具有降脂、减肥、降压、抗动
脉硬化;防癌、抗癌;养胃、护胃;健牙护齿;消
炎、杀菌、治痢;抗衰老等作用［3 － 7］，其广泛的生
物学效应对酒精性肝损伤的预防显示出诱人的应用
前景，因此，本试验采用酒精饲喂大鼠，同时持续
给予不同剂量的普洱茶 (熟茶)水浸提物进行干
预，每隔 15 d，每组随机选取 3只大鼠摘取肝组织
检测肝组织病理变化，试验观察期为 60 d，结束后
即牺牲试验大鼠并检测肝组织病理变化及大鼠肝组
织 AST，ALT活性。探索普洱茶对酒精性肝损伤的
预防作用，为普洱茶作为防治肝脏疾病的药物原料
或保健食品的开发研究提供科学依据。
1 材料与方法
1. 1 材料
1. 1. 1 普洱茶样品
龙润普洱茶熟茶 (2007 年 10 月) :云南云县
天龙生态茶叶有限责任公司生产 (产品标准号:
DB 53 /103—2007) ;版纳普洱熟茶 (2007 年 7 月)
云南省农业科学院茶叶研究所，西双版纳普洱茶研
究院 (产品标准代号:DB 53 /103) ;帕卡普洱熟
茶 (2007年 5 月)云南省思茅茶树良种场，中国
普洱茶研究院 (产品标准代码:DB 53 /103)。将
上述茶样按 1∶1∶1等量混合制成受试茶样。
1. 1. 2 药品:
药品为市售某保肝药物 KXL。
1. 1. 3 试验动物
试验动物:SPF 级 Wistar 雄性大鼠 (180 ～
220 g) ，由北京维通利华实验动物技术有限公司
提供 ［批号:SCXK (京)2012—0001］。
1. 1. 4 动物饲料
由北京华阜康生物科技股份有限公司提供，
动物饲料能量组成如表 1 所示。
表 1 动物饲料能量组成表
Tab. 1 The energy composition of feed
项目
item
阴性对照组 (kJ·L －1)
negative control group
项目
item
试验组 (kJ·L －1)
experimental group
蛋白质
protein 632. 2
蛋白质
protein 632. 2
脂肪 fat 1 503. 1 脂肪 fat 1 503. 1
碳水化合物
carbohydrate 2 051. 5
碳水化合物
carbohydrate 565. 2
酒精
alcohol 0
酒精
alcohol 1 486. 3
总量
total 4 186. 8
总量
total 4 186. 8
1. 2 方法
1. 2. 1 茶汤制备方法
普洱茶 (熟茶)磨碎后制备茶汤，制备方法
参照文献 ［7］。提取的茶汤终质量浓度为
1 g /mL，灭菌后置于 4 ℃冰箱保存待用。
1. 2. 2 动物分组与处理
参照中华人民共和国卫生部 2003 年颁布的
《保健食品检验与评价技术规范》和国际公认动
物模型，根据所评价的功能性试验动物要求，选
用外形符合健康标准，体重在 180 ～ 220 g 之间的
SPF级 Wistar雄性大鼠 120 只为试验对象，按体
重随机分为阴性对照组、阳性对照组、KXL 药物
组，普洱茶 (熟茶)低、中、高剂量组，每组 20
只。每天，饲喂阴性对照组液体饲料，其他各组
大鼠均饲喂试验组饲料 (含酒精) ，在饲喂液体
饲料的同时每天定时经口灌胃普洱茶和药品。普
洱茶组给予不同剂量普洱熟茶 (低、中、高剂量
分别为人体推荐摄入量的 5，10，20 倍，即 0. 5，
1. 0，2. 0 g /kg) ，药物组灌胃 KXL药品 (0. 15 g /
kg)［8］，一次经口灌胃 2 mL /d，阴性对照组、阳
性对照组每天均灌胃 2 mL蒸馏水。每天记录大鼠
摄食量及生长状况，每隔 15 d，每组随机选取 3
904第 3 期 王 蕊，等:普洱茶对酒精性肝损伤组织病理动态变化的影响
只大鼠摘取肝组织检测肝组织病理变化，试验观
察期为 60 d，结束后即牺牲试验大鼠并检测肝组
织病理变化及大鼠肝组织 AST，ALT活性。
1. 2. 3 测定指标与方法
大鼠处死后，迅速取出肝脏，观察肝脏的质
地、色泽，同时，从最大叶距边缘 5 mm 处取肝
脏组织，固定于 10%甲醛溶液中，组织脱水机脱
水，包埋机、切片机包埋、切片，HE (苏木精—
伊红染色)染色，进行显微镜常规病理分
析［9 － 10］。同时，摘取肝组织，制备 10%的肝脏匀
浆，用生化分析仪测定肝脏组织中 AST，ALT 活
性，检测方法参照试剂盒说明书进行。
1. 2. 4 数据统计方法
采用 SPSS 17. 0 软件进行方差分析。
2 结果与分析
2. 1 普洱茶对 Wistar大鼠肝组织 AST，ALT活性
的影响
表 2显示:与阴性对照组相比，阳性对照组肝
脏组织中 ALT，AST 活性显著上升 (P ＜ 0. 01);与
阳性对照组相比，普洱茶低、中、高剂量组与药物
组均可以降低 ALT，AST活力 (P ＜0. 01)。
表 2 普洱茶对 Wistar大鼠 ALT，AST的影响
Tab. 2 Effects of fermented Pu-erh tea
on ALT and AST in wistar rats U /L
组别 group ALT AST
阴性对照组
negative control group 90. 29 ± 10. 91 b
* 43. 53 ± 6. 40 a*
阳性对照组
positive control group 130. 11 ± 12. 72 c 72. 35 ± 6. 93 c
KXL药物组
KXL drug group 83. 59 ± 11. 49 b
* 54. 18 ± 5. 91 b*
普洱茶低剂量组
low dose group
of Pu-erh tea
76. 86 ± 14. 69 ab* 49. 00 ± 5. 37 ab*
普洱茶中剂量
medium dose group
of Pu-erh tea
62. 56 ± 16. 72 a* 49. 76 ± 4. 91 ab*
普洱茶高剂量组
high dose group
of Pu-erh tea
65. 80 ± 17. 01 a* 51. 33 ± 8. 37 ab*
注:结果系平均值 ±标准差。同列不同字母表示差
异显著 (P ＜ 0. 05) ;“* ”表示与阳性对照组相比，差异
极显著 (P ＜ 0. 01) ;下同。
Note:The data is Mean ± SD． Different lowercases in the
same columns indicate significant difference (P ＜ 0. 05)and
“* ”indicates extremely significant difference，compared with
the positive control group (P ＜0. 01) ;the same as below．
2. 2 普洱茶对 Wistar大鼠肝组织病理变化的影响
2. 2. 1 普洱茶对大鼠肝脏大体肉眼观察结果
从肉眼观察标本可以看出阴性对照组大鼠肝
组织颜色暗红、边缘锐利、质韧;阳性组大鼠肝
脏颜色呈土黄色或红黄相间，体积明显增大，边
缘钝化，质地脆弱易碎，切面略带油腻感。药物
组、普洱茶各剂量组肝组织外观较阳性对照组有
所改善，其中，低剂量普洱茶组肝组织外观介于
阴性对照组和阳性对照组之间，中、高剂量普洱
茶组肝组织外观最接近于阴性对照组。
2. 2. 2 普洱茶对 Wistar大鼠肝组织病理变化病变
的影响及肝组织评分
表 3表明:除阴性对照组外，所有组别大鼠肝
组织均有不同程度的病变。与阴性对照组相比，阳
性对照组大鼠肝组织病变程度显著增加 (P ＜0. 01)，
与阳性对照组相比，普洱茶中、高剂量组病变程度
显著降低 (P ＜0. 05或 P ＜0. 01))，这说明普洱茶对
酒精引起的肝组织损伤具有保护作用。
表 3 普洱茶对Wistar大鼠肝脏组织病变影响及肝组织评分
Tab. 3 Effects of fermented Pu-erh tea on liver
pathological changes of Wistar rats and liver tissue scores
组别
group
数量
quantity － + ++ +++
肝组织评分
liver
tissue score
阴性对照组
negative
control group
10 10 0 0 0 0. 40 ± 0. 52 a*
阳性对照组
positive
control group
9 4 1 4 0 5. 33 ± 1. 86 d
KXL药物组
KXL drug group 8 3 2 1 2 4. 75 ± 1. 99 cd
普洱茶低剂量组
low dose group
of Pu-erh tea
9 2 4 2 1 6. 71 ± 1. 38 bc
普洱茶中剂
medium dose group
of Pu-erh tea
9 4 4 1 0 3. 86 ± 1. 22 bc
普洱茶高剂量组
high dose group
of Pu-erh tea
8 2 6 0 0 3. 00 ± 0. 63 b*
注: － ． 表示肝组织正常;+ ． 表示 ＞ 30% ～ 50%肝
细胞脂肪变性，轻度脂肪肝; ++ ． 表示 ＞ 50% ～ 70%肝
细胞脂肪变性，中度脂肪肝;+++ ． 表示 ＞ 70%以上肝细
胞脂肪变性，重度脂肪肝。
Note: － ． normal;+ ． ＞30% ～50% of hepatic steatosis，
mild fatty liver;++ ． ＞ 50% ～70% of hepatic steatosis，mod-
erate fatty liver;+++ ． ＞70% of hepatic steatosis，severe fatty
liver．
014 云南农业大学学报 第 30 卷
2. 2. 3 大鼠肝组织显微镜观察结果
显微镜观察结果显示:阴性对照组各时间点
肝细胞及肝小叶结构基本正常，其余各组 15 d 时
均无明显病变，其余时间点均有不同程度的水样
变性、气球样变及脂肪变性，部分病例可见点状
或灶性碎屑样坏死，尤以 45，60 d病变较为明显。
其中，60 d时普洱茶中剂量组病变较 45 d 时有所
减轻，普洱茶高剂量组较阳性对照组病变轻，病
变主要表现在 60 d时。
第 60 天大鼠肝组织显微镜观察结果如图 1
所示。阴性对照组肝细胞及肝小叶结构基本正
常;阳性对照组肝细胞中—重度水样变性、脂
肪变性，轻度气球样变及胞浆凝聚，可见点状
肝细胞坏死。药物组肝细胞中—重度水样变
性，轻—中度脂肪变性、气球样变，较多炎症
细胞多灶性浸润。灌胃不同剂量的普洱茶后能
够梯度性的改善由酒精引起的肝脏病变，中、
高剂量普洱茶更接近正常对照组肝组织、表明
普洱茶有明显抑制酒精性脂肪肝大鼠肝脏病变
的作用。
3 讨论
乙醇在代谢的过程中产生的活性氧可损害细
胞膜以及线粒体的膜，细胞膜通透性增强，使肝
细胞中的转氨酶渗透至血液中，造成血液中 ALT
和 AST 活性升高［11 － 12］。在生物体内，AST 和
ALT都是反映肝损伤的常用酶活指标［13］。本研究
显示:阳性对照组肝组织中 AST和 ALT活力显著
升高，给予普洱茶和 KXL药物后，试验大鼠肝组
织中的 AST和 ALT活力较阳性对照组降低。通过
对肝脏组织的肉眼观察以及肝脏切片的显微镜观
察，肝脏病变主要表现为肝脏的水样变性、气球
样变及脂肪变性，部分病例有轻度的胞浆凝聚，
偶见坏死病例。显微镜观察结果显示:阴性对照
组各时间点肝细胞及肝小叶结构基本正常，其余
各组 15 d时均无明显病变，其余时间点均有不同
程度的水样变性、气球样变及脂肪变性，部分病
例可见点状或灶性碎屑样坏死，尤以 45，60 d 病
变较为明显，其中普洱茶中剂量组 60 d 时病变相
对 45 d时有所减轻，普洱茶高剂量组较阳性对照
组病变轻，病变主要表现在 60 d 时。由此可知，
酒精既损伤了肝细胞膜，也损伤了细胞线粒体。
摄入普洱茶和 KXL药物后均有效地抑制了肝组织
中 ALT和 AST的升高。提示普洱茶能够有效保护
细胞膜以及线粒体的膜免遭酒精所引起的损伤，
对酒精性肝损伤具有延缓和减轻的作用。普洱茶
对酒精引起的酒精性肝损伤具有很好地预防保护
作用，其原因可能与普洱茶中的多种生物活性成
114第 3 期 王 蕊，等:普洱茶对酒精性肝损伤组织病理动态变化的影响
分比如茶多酚，茶多糖等有着密切关系。此外，
前期研究发现:灌胃普洱茶后的酒精性脂肪肝试
验大鼠体内，清除自由基的 SOD 和 GSH-PX 活力
显著升高，而脂质过氧化产物 MDA 含量显著降
低，灌胃普洱茶后有效的改善了酒精性肝损伤大
鼠肝组织氧化损伤，从而有效预防和减轻了酒精
性肝损伤的发生或发展［14］。
4 结论
根据卫生部 2003 年颁布的《保健食品功能学
评价程序与检验方法规范》的判定标准可判定:
本批次的普洱茶 (熟茶)具有预防酒精性肝损伤
的发生和发展的功效，从整体上看，高剂量普洱
茶 (熟茶)的作用更显著。
［参考文献］
［1］ DAHIA P L． PTEN，a unique tumor suppressor gene ［J］ .
Endocrine-related Cancer，2000，7 (2):115 －129．
［2］孙元水，叶再元，赵仲生，等． 血管内皮生长因子-C
和生存素在胃癌组织中的表达及其临床意义 ［J］． 中
华胃肠外科杂志，2006，9 (3) :264 － 267．
［3］赵龙飞，周红杰，安文杰． 云南普洱茶保健功效的研
究 ［J］． 食品研究与开发，2005，26 (2) :114 － 118．
［4］侯艳，肖蓉，徐昆龙，等． 普洱茶对试验大鼠血清中
血脂水平和脂质过氧化的影响 ［J］． 中国食品学报，
2009，9 (2) :80 － 85．
［5］张冬英，邵宛芳，刘仲华，等． 普洱茶功能成分单体
降糖降脂作用研究 ［J］． 茶叶科学，2009，29 (1) :
41 － 46．
［6］龚加顺，陈文品，周红杰，等． 云南普洱茶特征成分
的功能与毒理学评价 ［J］． 茶叶科学，2007，27 (3) :
201 － 210．
［7］ HOU Yan，SHAO Wanfang，XIAO Ｒong，et al． Pu-erh
tea aqueous extracts lower atherosclerotic risk factors in a
rat hyperlipidemia model［J］． Experimental Gerontology，
2009，44 (6 /7) :434 － 439．
［8］付强强，曾涛，李阳，等． 大蒜油治疗小鼠酒精性脂肪肝
的研究［J］． 毒理学杂志，2010，24 (5):392 －393．
［9］张桂英，吴光健，王宝贵，等． 白桦脂醇对大鼠酒精
性肝损伤保护作用 ［J］． 中国公共卫生，2009，25
(3) :378 － 379．
［10］ CLAＲK J M． The epidemiology of nonalcoholic fatty liv-
er disease in adults［J］． Journal of Clinical Gastroen-
terology，2006，40 (3) :5 － 10．
［11］魏兆伟． AST /ALT在肝病中的诊断意义 ［J］． 中华
医学实践杂志，2006，5 (8) :67 － 69．
［12］冼永超，杨景毅，徐茹，等． 血清谷氨酰转肽酶含量
测定在慢性乙型肝炎中的临床意义 ［J］． 中华实验
和临床病毒学，2007，21 (4) :383 － 385．
［13］张弛，刘瑛，李华珠，等． 血清谷丙转氨酶在正常范
围内对非酒精性脂肪性肝病的预测 ［J］． 世界华人
消化杂志，2011，19 (8) :841 － 844．
［14］王蕊，侯艳，肖蓉，等． 普洱茶对酒精性脂肪肝大鼠
脂质过氧化的影响 ［J］． 云南农业大学学报:自然
科学，2013，28 (6) :845 － 850．
214 云南农业大学学报 第 30 卷