全 文 ：鸡肉参为紫葳科植物滇川角蒿（Incarvillea
mairei（le’vl）Grierson）的根，俗名土地黄、波罗花、
红花角蒿（丽江）、土生地、山羊参等。产于云南的西
北及东部地区（丽江、中甸、永胜、鹤庆、洱源、盐
丰），生长于海拔2 400～3 655m高山草坡，为民间常
用药材之一。根入药，具有补血、调经、健胃功效。用
于治疗骨折肿痛、贫血、消化不良。在丽江民间用作
代替生地用，亦治产后少乳，体虚，久病虚弱，头晕。
本品资源丰富，疗效较好〔1〕。经查阅相关文献，未见
对鸡肉参多糖提取及含量测定研究的相关报道，为
此，本实验以大理花甸坝东山的鸡肉参为原料，采
用超声波提取法提取多糖〔2-5〕，并用正交实验设计
法对超声时间、料液比、提取次数进行优化研究，用
苯酚-硫酸法测定其多糖含量〔6-11〕。
1 仪器与材料
1.1 仪器 中药粉碎机（天津方泰斯特仪器有限公
正交实验法优选鸡肉参多糖的提取工艺
何发忠，马芳芳，段新波，杨月娥，杨永寿*
（大理学院药学院，云南大理 671000）
［摘要］目的：用超声提取法对鸡肉参中多糖提取工艺进行研究。方法：用正交实验设计法筛选最佳提取工
艺，并用苯酚-硫酸法测定鸡肉参多糖含量。结果：λmax=491nm，平均回收率为102.05%，RSD为1.73%。鸡肉参
多糖的最佳提取工艺为：超声提取时间120min，料液比为1∶40，提取次数为1次。结论：该方法简单、快速、准
确，为从鸡肉参中提取多糖提供理论依据。
［关键词］鸡肉参；超声波提取；正交实验
［中图分类号］Q949.777.9 ［文献标识码］A ［文章编号］1672-2345（2009）10-0021-03
［基金项目］大理市科技局科研基金资助项目（2008SFS11）
［收稿日期］2009-06-04
［作者简介］何发忠（1987-），男，云南曲靖人，2006级药学专业本科生.
*通讯作者：杨永寿，高级实验师，电话：13887219065
On the Extraction Process of Polysaccharide from Incarvillea mairei（levl）Grierson
He Fazhong，Ma Fangfang，Duan Xinbo，Yang Yuee，Yang Yongshou
（College of Pharmacy, Dali University, Dali, Yunnan 671000, China）
〔Abstract〕Objective: To study the optimum extraction process of polysaccharide from Incarvillea mairei（levl）Grierson. Methods:
The optimal ultrasonic extraction process was selected with the orthogonal design and the content of polysaccharide was determined
by speetrophtometry. Result: The optimum extraction process was as follows: the polysaccharide was extracted by ultrasonic
technology for 120 minutes, with 1∶40 〔S〕/〔L〕ratio and extracted for once. The average recovery was 102.11%,RSD=1.78%，λmax=
491nm. Conclusion: The experimental results provide the basis for the ultrasonic extraction process of polysaccharide from Incarvillea
mairei（levl）Grierson. This optimum process is simple, stable and efficient.
〔Key words〕Incarvillea mairei（levl）Grierson; ultrasonic extraction process; orthogonal experimental design
大理学院学报
JOURNAL OF DALI UNIVERSITY
第8卷第10期 2009年10月
Vol.8 No.10 Oct. 2009
21
司），UV2500双光束紫外可见分光光度计（日本岛津
仪器公司），SK-3200H超声波清洗器（上海科导超声
仪器有限公司）；HH-S2S恒温水浴锅（进坛市大地
自动化仪器厂）。
1.2 材料 葡萄糖对照品（成都化学试剂厂，优级
纯）；苯酚，浓硫酸均为分析纯；鸡肉参样品采自云
南大理苍山花甸坝，经大理学院药学院杨月娥老师
鉴定为紫葳科植物滇川角蒿的根。
2 方法与结果
2.1 正交实验设计 本实验拟用L9（34）正交设计对
超声时间（A）、料液比（B）、提取次数（C）三因素进行
筛选。因素与水平见表1。
表1 鸡肉参多糖提取工艺正交实验的因素水平表
2.2 含量测定
2.2.1 对照品溶液的配制 精密称取105℃干燥至
恒重的葡萄糖对照品100mg置于100ml的容量瓶中，
加水适量使其溶解，稀释至刻度，摇匀。精密吸取上
述溶液10ml于100ml容量瓶中加水至刻度，摇匀，即
得100μg/ml的对照品溶液。
2.2.2 标准曲线的绘制 精密吸取对照品溶液0.6、
0.8、1.0、1.2、1.4ml置具塞试管中，加水至2.0ml摇匀。
另精密吸取2.0ml蒸馏水于10ml具塞试管中作为空
白。分别向上述试管中精密加入1.0ml 5%苯酚溶液
和5.0ml 98%浓硫酸，摇匀，置沸水浴中反应25min，
反应完毕后取出，放置至室温，定容至8ml，于491nm
处测定吸光度。以对照品溶液浓度为横坐标，其
相应的吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方
程Y=0.052 4X-0.119 5，r=0.999 5，线性范围7.5～
17.5μg/ml。
2.2.3 供试品溶液的制备 精密称取鸡肉参粉末
1g置于100ml茄形瓶中，按表1设定的因素进行超声
提取，过滤，取续滤液备用，按“2.2.2”项操作进行含
量测定。见表2。
表2 正交实验方案与结果
2.2.4 结果分析 用实验误差对各个因素作用的
显著性进行检查，对实验数据进行方差分析，见表
3。
表3 方差分析
F0.05（2，2）=19.00 F0.01（2，2）=99.00
经方差分析可知，各因素对提取效果影响的大
小顺序为：A>B>C，即超声时间为最主要的影响因
素，料液比次之，提取次数影响不大。表3方差分析
表明超声时间对结果的影响具有极显著性差异，料
液比对结果的影响有显著性差异，提取次数对结果
的影响无显著性差异。
正交实验结果显示最佳提取工艺为：A3B3C1，即
超声时间为120min，料液比为1∶40，提取次数为1次。
2.2.5 验证实验 按优选出的最佳提取工艺A3B3C1
分别重复实验5次，实验结果见表4。
（C）提取次数/次
1
2
3
因素水平
1
2
3
（A）超声时间/min
60
90
120
（B）料液比/g·ml-1
1∶12
1∶30
1∶40
鸡肉参多糖含量/（mg/g）
18.17
20.06
23.66
21.70
28.71
33.27
32.41
37.56
40.08
实验号
1
2
3
4
5
6
7
8
9
K1
K2
K3
K1
K2
K3
R
A
1
1
1
2
2
2
3
3
3
61.89
83.68
110.05
20.63
27.89
36.68
16.05
B
1
2
3
1
2
3
1
2
3
72.28
86.33
97.01
24.09
28.78
32.34
8.25
C
1
2
3
2
3
1
3
1
2
89.00
81.84
84.78
29.67
27.28
28.26
2.39
D（空白）
1
2
3
3
1
2
2
3
1
86.96
85.74
82.92
28.99
28.58
27.64
1.35
显著性
++
+
方差来源
A
B
C
D
误差E
离均差平方和
387.73
102.56
8.64
2.86
1.35
自由度
2
2
2
2
2
均方
193.87
51.28
4.32
1.43
F值
287.21
75.97
6.40
2.12
大理学院学报总第 70 期 医学
22
表4 验证实验结果
2.2.6 加样回收实验 精密称取鸡肉参粉末0.7、
0.8、0.9g各3份（共9份），于100ml茄形瓶中加入与
0.1、0.2、0.3g鸡肉参中多糖当量的葡萄糖。按“2.2.2”
项步骤操作，平均回收率为102.05%，RSD为1.73%。
3 讨论
采用超声波提取优化鸡肉参中多糖的提取工
艺，能增强鸡肉参细胞膜的穿透能力和传输能力，
加快其释放多糖的速度，缩短提取时间，提高多糖
的提取率〔12〕。本实验对超声时间、料液比、提取次
数3因素按L9（34）设计3因素3水平试验，筛选较优的
鸡肉参多糖提取工艺，结果在超声时间为120min，
料液比为1∶40，提取次数为1次条件下进行提取，多
糖提取率最高。该方法简单、快速、准确，为从鸡肉
参中提取多糖提供了参考。
对多糖的测定采用苯酚-硫酸法，其原理是多
糖在强酸作用下水解生成单糖，并迅速脱水生成糖
醛及其衍生物，与酚性物质缩合成有色化合物，用
分光光度法在适当波长处测定其吸光度，再通过计
算，可以得到多糖含量。但在操作过程中要注意加
浓硫酸的速度，迅速加入和慢慢加入、直接滴到液
面和沿管壁流入对最后的结果都是不同的，测到的
吸光度会偏差很大，并且加完浓硫酸后要充分使其
混匀，否则也会导致偏差。
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（责任编辑 蒋 康）
RSD
0.94%
实验号
1
2
3
4
5
鸡肉参多糖含量/（mg/g）
40.82
40.54
41.23
40.67
41.45
鸡肉参多糖平均含量/（mg/g）
40.94
何发忠，马芳芳，段新波，等 正交实验法优选鸡肉参多糖的提取工艺 第 8 卷总第 70 期
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