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倒提壶药材质量标准研究



全 文 :倒提壶药材质量标准研究

李 伟**,赵翡翠***
(新疆医科大学附属中医医院药学部,新疆 乌鲁木齐 830000)
摘要:目的 建立倒提壶药材的质量控制标准,为其药用植物资源的开发利用提供科学依据。方法 于不
同产地采集5批倒提壶样品,对倒提壶原植物进行鉴定,并对其性状进行描述;以β-谷甾醇对照品按照《中国药典》
2010年版(一部)附录ⅥB对倒提壶药材进行薄层色谱鉴别;按照《中国药典》2010年版(一部)附录Ⅸ H和附录Ⅸ
K测定5批倒提壶药材的水分、总灰分、酸不溶性灰分;按照《中国药典》2010年版(一部)附录Ⅹ A测定5批倒提
壶药材的浸出物。结果 倒提壶药材以环己烷-乙醚-乙酸乙酯(40∶11∶5)为展开剂,倒提壶中β-谷甾醇薄层
色谱鉴别,分析显示检查项中暂定倒提壶药材水分不得过15%,总灰分不得过18%,酸不溶性灰分不得过1.5%。
倒提壶浸出物不得少于18.00%。结论 所制定倒提壶药材的质量控制标准可用于评价倒提壶药材的质量。
关键词:倒提壶;质量标准;薄层色谱
中图分类号:R931.5  文献标识码:A  文章编号:1009-5551(2010)09-1036-03
Research on quality specification of Herb Cynolgossum officinale
LI Wei,ZHAO Fei-cui
(Department of Pharmaceutical Sciences,Affiliated Traditional Chinese Medicine Hospital,
Xinjiang Medical University,Urumqi 830000,China)
Abstract:Objective To provide scientific basis for the utilization and development of Cynolgossum offici-
nale by setting up the quality control specification of Cynolgossum officinale.Methods There are 5differ-
ent origin batchs of Cynolgossum officinales,after identificating and describing the properties,making
contrast toβ-Sitosterol on TLC according to Chinese Pharmacopoeia 2010version(VolⅠ)of appendix
ⅥB;we made determination for the moisture,total ash and acid-insoluble ash of the 5batches Cynol-
gossum officinales according to Chinese Pharmacopoeia 2010version(VolⅠ)of appendixⅨ H and K,
then the ethanol-soluble extract determination method of Cynolgossum officinale were inspected according
to Chinese Pharmacopoeia 2010version(VolⅠ)of appendixⅹ A.Results The origin′s identification of
Cynolgossum officinale were described,and the TLC identification method was formulated with thiacyclo-
hexane-ethyl ether-ethyl acetate(40∶11∶5)as developing solvent,temporarily formulating moisture
was not over 15%,the total ashes was 18%,acid-insoluble ashes was 1.5%.Determined the method of
ethanol-soluble extract of Cynolgossum officinale and the ethanol-soluble extract product was not less
than 18.00%.Conclusion The Cynolgossum officinale quality control standard can be used to evaluate the
quality of Cynolgossum officinale.
Key words:Cynolgossum officinale;quality specification;TLC
   倒 提 壶 来 源 于 紫 草 科 植 物 药 用 琉 璃 草
(Cynoglossum officinale L.)的全草。本品在新疆
地区资源较丰富,民间应用广泛。据《维吾尔药志》
记载,倒提壶性平、清热解毒、降压清脑。用于头痛
头晕、高血压、记忆力差、痰喘咳嗽、神经衰弱等
症[1]。本品虽已收载于《新疆药用植物志》[2]、《新疆
中草药》[3]、《新疆植物志》[4]、《中国植物志》[5]等多
种书籍,但目前尚无药材质量标准,很难保证其在临
床使用中的安全性和有效性。为此,本文对倒提壶
药材的质量标准进行研究,并建立其质量标准草案。
6301 新疆医科大学学报 JOURNAL OF XINJIANG MEDICAL UNIVERSITY 2010Sep.,33(9)

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***
基金项目:新疆维吾尔自治区科学研究与技术开发(含攻关)计划项目(200633127)
作者简介:李 伟(1967-),男,主管中药师,大专,研究方向:中药新药开发及质量标准研究。
通讯作者:赵翡翠,女,副主任中药师,硕士生导师,E-mail:zzffcc@126.com。
1 仪器与试药
Waters2695高效液相色谱仪(美国 Waters公
司),AG-135电子分析天平(梅特勒-托利多仪器有
限公司),SK3300LH超声清洗器(上海科导超声仪
器有限公司),Direct-QTM5超纯水仪(Milipore公
司),YOKO-ZS紫外线分析摄影仪(武汉药科新技
术开发公司),YOKO-DF薄层电动涂敷器(武汉药
科新技术开发公司),ZF-I型三用紫外分析仪(上海
顾村电光仪器厂)。β-谷甾醇对照品(购自中国生物
制品检定所,批号为110851-200504),其它试剂均
为分析纯。倒提壶样品分别于2007~2008年采自
新疆乌鲁木齐市燕儿窝、乌拉泊、南山、奇台等地,经
新疆医科大学附属中医医院中药鉴定室李永和主任
药 师 鉴 定 均 为 紫 草 科 植 物 药 用 琉 璃 草
(Cynoglossum officinale L.)的全草。
2 方法与结果
2.1 形态特征 倒提壶药材为紫草科植物药用琉
璃草(Cynoglossum officinale L.)的全草。新疆地
区与药用琉璃草同属植物还有大果琉璃草 (C.
divaricatum Steph.exLehm.)、大萼琉璃草 (C.
macrocalycinum Riedl.)、绿 花 琉 璃 草 (C.
viridifiortun Pall.exLehm),相近的植物还有紫
草科长柱琉璃草属植物长柱琉璃草 [Lindelofia
stylosa(Kar.et Kir.)Brand.]和长蕊琉璃草属植
物长蕊琉璃草 (Solenanthus circinnatus Ldb.),各
植物形态特征的主要区别见表1,药用琉璃草的形
态特征较易与相近种属植物区分[4]。
表1 与倒提壶药材来源相近种属植物形态特征的区分
种名
大果琉璃草C.
divaricatumSteph.
exLehm.
药用琉璃草C.
officinale L.
大萼琉璃草C.
macrocalycinum
Riedl.
绿花琉璃草C.
viridifiortunPall.
exLehm
长柱琉璃草
Lindelofia stylosa
(Kar.Et Kir.)Brand
长蕊琉璃草
Solenaathus
circinnatus Ldb.

茎直立,中空,具肋棱,
由上部分枝,分枝开展,
被向下贴伏的柔毛
茎单一,直立,粗壮,具
肋棱,由上部分枝,分枝
斜升
茎五分枝,伸展或略
被反卷毛
茎具肋棱,有毛 茎有贴伏的短柔毛,上
部通常分枝
茎直立,基部有残存叶
柄围成的鞘,通常不分
枝,疏生短柔毛

基生叶和茎下部叶长7
~15cm,宽2~4cm,
上下面均密生贴伏的短
柔毛;茎中部及上部叶
无柄
基生叶具柄,茎生叶无
柄,排列紧密,长5~15
cm,宽1~5cm,上面具
长柔毛,下面密生短柔
毛,仅具1条中脉
茎下部叶柄不明显,
中部叶无柄,长13~
14cm,宽 3~3.5
cm,被长短不齐的卷
曲毛
基生叶及茎下部叶,
长15~25cm,宽7~
9cm,上面无毛,下面
密生短柔毛;茎中部
叶具短柄;茎上部叶
渐小无柄
基生叶长可达35cm,
两面疏生短伏毛,基部
叶柄扁,有狭翅,几无
毛;下部茎生叶有柄;中
部以上茎生叶无柄或近
无柄
基生叶有长柄,叶片长
5~8cm,宽3~6cm,
两面疏生短伏毛,叶柄
长6~10cm;茎生叶无
柄,基部渐狭并稍下延
花序/苞
片/花梗
顶生 及 腋 生,长 约 10
cm,花稀疏,集为疏松的
圆锥状花序;苞片狭披
针形或线形;花梗细弱,
长3~10mm,花后伸
长,果期伸长2~4cm,
下弯,密被贴伏柔毛
顶生及腋生,具多花,排
列紧密呈头状,直径1
~2cm,花后伸长呈总
状,长可达15cm;花梗
长5~10mm,密生短
柔毛,果期伸长,长1.5
~2cm
花序短,先端大,无苞
片;花梗开花时长1
cm,果期长3cm,密
被白色柔毛
顶生及腋生,集为圆
锥状,无苞片;花梗长
1.5~3mm,密生白
柔毛,花后增大,长1
cm,下弯
花序初时长3~7cm,
果期伸长可达20cm,
花序轴、花梗、花萼部密
生贴伏短柔毛;花梗长
2.5~4mm,果期伸长
可达3cm
花序显著呈蝎尾状,多
数,腋生,在结果时长可
达7cm,于茎上部再集
成圆锥状花序,花序轴、
花梗、花萼都密生短柔
毛;花无苞片,花梗长
1.2mm
花萼
长2~3mm,外面密生
短柔毛,裂片卵形或卵
状披针形,果几不等大,
向下反折
长4~6mm,宽2~4
mm,裂片卵状长圆形
或卵状披针形,稀卵形,
外面密生灰色短柔毛,
内面无毛,果期增大,长
可达1.5cm,宽1cm
花期长8~9mm,裂
片基部离生,边缘覆
瓦状重叠,卵形或卵
状长圆形,花期后伸
长1~1.5cm,长度、
宽度各异,宽度范围
2.5~5mm
长2.5~4mm,外面
被贴伏的短柔毛,裂
片长圆状线形
裂片钻状线形,稍不等
大,长5~6mm
长4.5~5.5mm,5裂
至近基部,裂片线形,半
开展
花冠
蓝紫色,长约3mm,檐
部直径3~5mm,深裂
至下1/3,裂片卵圆形,
先端微凹,喉部有5个
梯形附属物,附属物长
约0.5mm
蓝紫色、紫红色、暗紫红
色,漏 斗 状,长 5~7
mm,裂 片 圆 形,具 网
脉,喉部附属物梯形,长
约1.5mm
暗紫色,钟状,宽9~
9.5mm,筒部长约5
mm,和檐部等长,喉
部附属物大,近方形
黄绿色,长4.5~5.5
mm,基部直径l~1.
5mm,檐部直径5~
6mm,裂片圆形,喉
部附属物梯形,肥厚,
长约1.5mm,宽约1
mm
紫色或紫红色,长8~
11mm,无毛,筒部直,
与萼近等长,檐部裂片
线状倒卵形,长3.5~
4.5mm,近直伸,附属
物鳞片状,无毛
宽筒状,紫红色,长约6
mm,无毛,檐部具5个
齿状裂片,裂片近开展,
先端微2裂,附属物在
花冠中部之下,舌状
花药/花
丝/花柱
花药卵球形,长约0.6
mm,着生花冠筒中部
之上;花柱肥厚,扁平
花 药 长 圆 形,长 约 1
mm;花丝极短;花柱长
约3mm,肥厚
花柱短,隐于花冠中,
花期后子房不膨大
花药长圆形,与附属
物近等长;花丝极短,
着生花冠筒中部;花
柱 短 粗,长 约 1.5
mm,直径0.8mm
花药线状长圆形,长约
3mm,先端具 2 小尖
头;花 丝 丝 形,长 约 2
mm,子房4裂,花柱长
1.2~1.5cm,通常稍弯
曲,基部稍有毛,柱头头
状,细小
花药雄蕊着生附属物之
上,花药短长圆形,长约
1mm,两端钝;花丝稍
不等长,均远伸出于花
冠外,花柱长约8mm,
外伸,无毛,结果时残存
并稍弯曲,柱头微小
2.2 薄层色谱鉴别 对供试品前处理方法和展开
剂进行反复试验后,确定本品薄层色谱鉴别方法为:
取本品粉末2g,捣碎,加三氯甲烷20ml,超声提取
15min,滤过,滤液挥干,残渣加三氯甲烷1ml使溶
解,作为供试品溶液。另取β-谷甾醇对照品,加三氯
甲烷制成每1ml含2mg的溶液,作为对照品溶液。
照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录Ⅵ
B)试验,吸取供试品溶液5μl、对照品溶液2μl,分
别点于同一硅胶G薄层板上,以环己烷∶乙醚∶乙
酸乙酯(40∶11∶5)为展开剂,展开,取出,晾干,喷
以10%硫酸乙醇溶液,加热至斑点显色清晰,检测
不同产地的2个批号倒提壶药材供试品色谱中,与
对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,β-谷
甾醇Rf值为0.38,对照药材和供试药材共有4个主
7301新疆医科大学学报 JOURNAL OF XINJIANG MEDICAL UNIVERSITY 2010Sep.,33(9)
斑点,斑点均可对应一致,经实验验证重现性好,结果
见图1。
图1 倒提壶的薄层色谱图
1:β-谷甾醇对照品;2:倒提壶对照药材;3、4:2个批
号倒提壶样品
2.3 检查和浸出物
2.3.1 检查 水分测定法、总灰分测定法、酸不溶
性灰分测定参照《中国药典》2010年版(一部)附录
Ⅸ H和附录Ⅸ K[6]。根据测定结果,暂定5批倒提
壶药材水分不得过15%,总灰分不得过18%,酸不
溶性灰分不得过1.5%(表2)。
2.3.2 浸出物测定 预试验分别参照《中国药典》
2010年版(一部)附录Ⅹ A[6],采用水溶性浸出物热
浸法和冷浸法以及75%醇溶性浸出物热浸法和冷
浸法测定,结果水溶性浸出物测定中药液过滤困难,
以75%醇溶性浸出物热浸法结果重现性较好,故采
用此法进行浸出物测定。根据检测结果,暂定倒提
壶药材浸出物不得少于18.00%(表2)。
表2 水分、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物定量测定结果
编号 采集时间
质量分数(%)
水分 总灰分 酸不溶性灰分 浸出物
1  20070421  12.10  12.97  1.47  19.80
2  20070526  11.82  16.35  1.28  20.01
3  20080523  11.85  12.90  0.65  20.18
4  20080611  11.76  16.26  1.33  24.73
5  20080723  12.54  14.85  1.18  25.29
3 讨论
3.1 倒提壶含有生物碱类成分天芥菜品(倒提壶
碱、海蓼苏品)、天芥菜定、天芥菜碱、毛果天芥菜碱
等[1]。由于中国生物制品检定所未提供上述成分的
对照品,所以本试验先采用经鉴定为正品的原植物
对照药材为对照,分别采用以下条件进行实验:(1)
取本品粉末2g,加浓氨试液2ml与苯20ml,放置
过夜,滤过,取滤液蒸干,残渣加三氯甲烷1ml使溶
解,作为供试品溶液,以乙酸乙酯∶甲醇∶浓氨试液
(17∶2∶1)为展开剂,结果供试品色谱斑点显色不
清晰。(2)取本品粉末2g,加乙醇20ml,加热回流
1h,滤过,滤液蒸干,残渣加稀盐酸10ml,搅拌使溶
解,滤过,滤液用40%氢氧化钠溶液调节pH值至10
以上,用三氯甲烷振摇提取2次,每次10ml,合并三
氯甲烷液,蒸干,残渣加无水乙醇1ml使溶解,作为
供试品溶液,以苯∶乙酸乙酯∶二乙胺(15∶10∶2)
为展开剂,结果供试品色谱中,斑点显色仍不清晰。
故又选择倒提壶的另一成分β-谷甾醇为对照品,再
次调整供试品前处理方法:(3)取本品粉末2g共4
份,捣碎,分别加乙醇20ml,超声提取15min、30
min和回流提取15min、30min,滤过,滤液挥干,残
渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液。(4)取本
品粉末2g共4份,捣碎,分别加三氯甲烷20ml,超
声提取15min、30min和回流提取15min、30min,
滤过,滤液挥干,残渣加三氯甲烷1ml使溶解,作为
供试品溶液。经试验,按(4)法制备供试品溶液进行
薄层色谱鉴别试验效果较好。又因药用琉璃草含有
的天芥菜品属于叔胺型生物碱,其碱性仅次于季胺
碱,又对展开系统的研究:分别以(1)石油醚(30~
60℃)∶乙酸乙酯∶甲醇(20∶5∶1);(2)环己烷∶
乙醚∶乙酸乙酯(40∶11∶5)为展开剂,经试验结果
表明,以(2)展开系统展开,薄层斑点清晰,分离好。
最终确定了倒提壶药材的薄层色谱方法,结果表明
采用此法鉴别倒提壶中β-谷甾醇和对照药材操作简
便,专属性强,主斑点清晰,分离度高,为倒提壶的鉴
别提供了一种准确、有效的新方法。
3.2 经测定5批倒提壶药材的总灰分(生理性灰
分)最高可达16.35%,较一般全草类植物高(大多
全草类植物多在10%以下)[6],可能与本品果实有
较多锚状刺有关,因此倒提壶药材的总灰分反映了
该科属植物的生理特性,可作为该药材质量控制指
标。
总之,通过实验研究暂定了倒提壶药材质量控
制指标的标准值,制订了质量标准草案,该质量标准
可用于评价倒提壶药材的质量,为倒提壶药材资源
的开发利用提供了科学依据。
参考文献:
[1] 刘勇民.维吾尔药志[M].上册.乌鲁木齐:新疆科技卫生出版
社,1999:446-451.
[2] 中国科学院新疆生物土壤沙漠研究所.新疆药用植物志(第二
册)[M].乌鲁木齐:新疆人民出版社,1981:124.
[3] 新疆卫生局.新疆中草药[M].乌鲁木齐:新疆人民出版社,
1975:69.
[4] 新疆植物志编辑委员会.新疆植物志(第四分册)[M].乌鲁木
齐:新疆科技卫生出版社,2004:206.
[5] 中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志(第64卷)
[M].北京:科学出版社,1991:157.
[6] 国家药典委员会.中国药典[S].第一部.北京:化学工业出版
社,2010:附录ⅥB,ⅨH,ⅨK,ⅩA.
[收稿日期:2010-04-28]
8301 新疆医科大学学报 JOURNAL OF XINJIANG MEDICAL UNIVERSITY 2010Sep.,33(9)