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大花飞燕草的组织培养及植株再生



全 文 :植物生理学通讯 第 34 卷 第 l 期 , 1 9 9 8年 2 月
9 8%的出愈率 ,每个芽有 30 一 40 个增殖芽和
4 0一 5 0 个增殖芽 。 因此 , 培养基 ( 1 2 )对芽的
出愈与增殖的效果是最优的 。 这也表明细胞
分裂素 6一 B A 与生长素 N A A 的适当浓度配比
增进芽的愈伤组织诱导和增殖 。
4
.
3 生根与移栽 将上述芽置于生根培养
基上培养约 2 周 , 在培养基 ( 14) 上有 98 %的
芽基部产生 白色根突起 ,继而迅速生长且分
出须根 , 约 4 周可以获得根系较发达的再生
植株 ,而在培养基 ( 1 3) 上的芽无一生根 。 这说
明 N A A 0 . 2一 0 . 4 对诱导 芫要芽 生根很 有
效 , 而 BI A 0 . 2 无效 。 试管苗根长约 1 . cZ m 且
根系较发达时 ,打开瓶膜 (盖 )炼苗 2一 3d 后 ,
取出小苗 ,洗净培养基 ,植于含 1 3/ 砂的菜圃
土壤中 , 浇水后罩上烧杯 , 1 0d 后除去烧杯 ,
成活率为 95 % 。 5一 7d 喷 1 次营养液 (稀释的
M S 无机成分 ) , 20 ~ 30 d 其根系发育成侧须
根发达的根团 ,此时可栽入大田 。
5 意义与进展 芫姜为伞形科植物 , 我国各
地均有栽培 ,尤 以华北最为广泛 。 芫婪全株可
入药 , 芫要子可提取芫婪油 , 茎 叶可作蔬菜 。
由于受季节的限制 , 芫萎不能全年供应市场 。
组织培养与快速繁殖方法可缩短育苗周期 ,
克服季节等因素的限制而全年供苗 , 以满足
药材市场与人们生活的需要 。 芫萎花蕾愈伤
组织试管苗是否有遗传上的变异尚待观察 。
如有 , 则将有助于品种的培育与筛选 , 可为新
品种选育提供大量的原始材料 。 芫婪已有人
以原生质体再生植株 ,但其花蕾组织培养与
芽离体快速繁殖 , 尚未见报道 。
大花飞燕草的组织培养及植株再生 `
何小玲 王金发 (中山大学生命科学学院 ,广州 5 1。27 5 )
T i s s u e C u l t u r e a n d P l a n t le t R e g e n e r a t i o n of L地IP h 诬牡诬u m g r a 牡 d玄f lo r u 饥
H E x i a卜 L in g , w A N G J i n 一凡 ( 1场吧 及:敌涅泌 Of L滋介 ,女妇优移 , , Z触己妇腼 2 ` 砚血柳威即, 份阴几州切 5 1 0 2 7 5 )
l 植物名称 大花飞燕草 (倒夕无玩~ 尹田以卜
了如 , , ) ,商品名“ 美丽飞燕草太平洋混色 ” 。
2 材料类别 无菌种子苗真叶 。
3 培养条件 基本培养基为 M S 。 ( l) 种子萌
发培养基 : 12/ M S十 6一 B A 0 . sm g · L 一 ` (单位
下同 ) + N A A 0 . 2 ; ( 2) 愈伤组织诱导培养基 :
M S + 6

B A 2
.
5 + N A ^ 0
.
5 十 I A ^ 0 . 2 ; ( 3 ) 芽
分化培养基 : sM + 6一 B A 3 + N A A 0 . 3 ; ( 4) 生
根培养基 : M S + I BA 0 . 5 。培养基 ( 1 ) 、 ( 2 ) 中添
加 3%蔗糖 、 0 . 3%琼脂 ,培养基 ( 3 ) 、 ( 4 ) 中添
加 3%蔗糖 、 0 . 8%琼脂 , p H S . 8 。 培养温度 2 5
士 l oC , 光照 1 4h · d一 ` , 光照度 1 5 0 0 l x 。
4 生长与分化情况
4
.
1 无菌苗的获得 种子用无菌水浸泡 d2 ,
在超净工作台上冲洗掉种子外囊膜 , 用饱和
漂白粉溶液处理 1 0m in ,无菌水冲洗 5一 8 次
后 ,转入 0 . 1% A g N o 3 中消毒 3m in ,再用无菌
水冲洗 5 ~ 8 次 ,接种于培养基 ( 1) 上 。 约 30 d
左右种子开始萌发 , 1 d0 后长出真叶 。
4
.
2 愈伤组织诱导与芽分化 取无菌种子
苗的幼嫩真叶切 成 0 . sc m x 0 . sc m 的小块
(带中脉 ) ,接种到培养基 ( 2) 上 ,培养 1 d0 后 ,
叶片边缘开始膨大并有小突起产生 , 培养 2 d0
后统计 40 个外植体 , 愈伤 组织发 生率 为
80 %
。 将绿色半透明愈伤组织块转移到培养
基 ( 3) 上 (要及时转移 , 否则会褐化而死去 ) ,
约 7d 后愈伤组织表面有绿色芽点产生 。 培养
5 周后统计 20 个外植体 ,平均每个外植体分
化的芽数为 5 个 。
收稿
1
19 9 7

0 8

1 3
广东省自然科学基金资助项 目 (批准号 : 93 02 4 ) 。
DOI : 10. 13592 /j . cnki . ppj . 1998. 01. 013
植物生理学通讯 第 3 4卷 第 1 期 , 1 99 8 年 2 月
4
.
3 生根与移栽 培养基 (3 )上培养约 8 莫科翠雀属宿根草本花卉 。 “ 美丽飞燕草太平
周 , 无根苗长 至 3一 4c m 时切下 , 接种到培养 洋混色 ” 是其优良的重瓣切花 品种 , 花形奇
基 ( 4) 上 , 10 ~ 1 5d 后生根并形成完整植株 。 特 ,花色丰富 ,具有较高的观赏价值和经济价
移栽前打开瓶口 , 炼苗 3d ,取出后洗净根部残 值 。 现主要用种子繁殖 ,但出苗迟缓 ,增殖率
留培养基 , 移栽入装有消毒营养土的花钵 ,罩 低 ,且有种子繁殖后代发生分离的问题 。 组织
上薄膜 ,保温保湿 3 ~ 4d 后揭去薄膜 。 移栽成 培养和植株再生系统的成功建立有可能满足
活率为 60 % 。 国内外市场的需求 。 大花飞燕草的组织培养
5 意义与进展 大花飞燕草又名翠雀 ,属毛 国内外尚未见报道 。
植物组织培养简报摘编
植物名称及外植体
花抽
(为以阴恤网 邵加纷各
培养基 ( m g · L一 ` ) 果 作者 (单位 )
茎段
诱导茎段腋芽萌芽培养基 :
( 1 )M S + 6
一 B A 1
.
0+ K T
1
.
0 + IB A 0
.
1 ~ 0
.
5 +
3%葡萄糖
诱导愈伤组织培养基 :
( 2 ) M S + 6
一 B A 1
.
0 + K T
1
.
0 + 2
,
4
一 D 0
.
1 ~ 0
.
5
+ 3%葡萄糖
分化培养基 :
( 3 ) M S + 6
一 B A 1
.
0 +
IB ^ 0
.
1 + 3% 蔗糖
( 4 ) M S + 6
一B A 1
.
0 +
2
,
4

n 0
.
2+ 3%蔗糖
增殖培养基 :
( 5 ) M S + 6
一 B A 1
.
0十 2沪
1
.
0~ 2
.
0+ 3% 蔗糖
生根培养基 :
( 6 ) l / 2 M S + N A A 0
.
5
+ 3%蔗糖
把茎段切成 。 . 5一 1 . co m 小段 ,
接种在培养基 ( 1) 上 。 7d 后腋芽开始
萌动 , 2 0d 左右可长到约 1 . oc m 。 这时
将其转接在培养基 ( 2) 上 , 15d 腋芽基
部膨大 , 5 d0 左右形成愈伤组织 。 将愈
伤组织块分别接种到培养基 (3 )和 ( 4)
上 , 1个半月左右都可分化出不定芽 ,
分化率分别是 89 %和 95 % 。 将分化出
的不定芽再转到培养基 ( 3 ) 、 ( 4 )上也
可进行继代培养 ;而转入到培养基 (5 )
中 ,则增殖作用明显 ,增殖系数达 7 ~
8 倍 , 说明加入一定的 2于 对花烛增殖
有促进作用 。 继代增殖约 1 个半月 1
次 。 不定芽长到 2 . oc m 时 ,可切下接种
在培养基 (6 ) 上 , 1 个月 可长出 3 ~ 4
条根 , 根长 2 ~ 4c m 。 此时 , 可将小苗
移栽到经曝晒过的河砂中 , 成活率达
9 5% 以上 。
梁国平 肖三元
杨 众
(云南 省热带作物科学
研究所 ,景洪 6 6 6 10 0 )
收稿 1 99 7一 0 8一 1 1
花椒
(加山. 蟀翻 吞曰 -
脚喊阴门 )
带顶芽茎段和
带腋芽茎段
诱导芽培养基 :
( l ) l / 3 M S + 6
一 B A 1
.
0
+ IBA 0
.
0 2 + 蔗糖 2%
增殖培养基 :
( 2 ) M S + 6
一B A 1
.
0 ~
L S + BI A 0
.
2 + 蔗糖
2
.
5 %
生根培养基 :
( 3 ) 1 / Z M S + I B A O
.
5 +
N A A 0
.
3 + 蔗糖 3%
( 4 ) l / 2 M s + I B ^ 0
.
2 5
+ N A A 0
.
5十蔗糖 3%
( 5 ) 1 / 2 M S + N A ^ 0
.
5
+ 蔗糖 3%
( 6 ) 1 / 2 M S + N A A 0
.
7 5
+ 蔗糖 3%
把带顶芽的茎梢和带腋芽的茎段
接种在培养基 ( 1) 上 , 1 周后 , 茎梢明
显 生长 , 茎段腋芽突出 。 2 0d 后 ,茎梢
高度增加 , 叶片展开 , 茎段上腋芽萌
发 ,伸长 。 把茎梢切成段 , 腋芽切下转
接到培养基 (2 )上 , 2 0d 后芽基部分化
出许多小芽 , 腋叶间也萌发小芽 , 形
成芽丛 。 将丛生芽切成单株分别接种
到培养基 (3 ) ~ (6 ) 上 , l 个月后调查
生根率 。 培养基 (6 )较适合于花椒试管
芽的生根 , 生根率可达 80 % 。 生根的
试管苗在蛙石中驯化炼苗 1 个月后 ,
长出白色新根 ,形成根团 ,即可栽入普
通土 、草炭土和牛粪 ( l : 1 : l) 的混合
土中 ,成活率达 90 %以上 。
及 华 温春秀
赵京献
( 河北 省 林 业科 学 院 ,
石家庄 0 5 0 0 6 1 )
收稿 19 9 7一 0 8一 1 5