全 文 ：肾近曲小管上皮细胞。大黄素可能是其主要的毒性成分 ,损伤
机制可能为大黄素引起肾脏脂类代谢异常 , 从而引发肾小管上
皮细胞周期阻滞 ,进而导致线粒体膜电位途径凋亡的损伤 , 造
成肾小管上皮细胞的膜性结构破坏 ,从而导致肾小管重吸收障
碍 ,这种毒性作用是可逆的。
大黄的临床应用十分广泛 , 是不可多得的“将才” , 但并不
绝对安全 , 具有潜在的肝肾毒性 , 因此在临床上长期用药尤其
是肾损伤患者中的应用时 ,要注意监测其肝肾功能。必要时要
权衡利弊 ,调整剂量。随着代谢组学技术的发展 , 此新技术将
会为中药的合理应用和发扬光大提供有力的检测工具 ,对于实
现中药现代化具有重要的意义。
大黄酸在 Beagle犬体内的
毒代动力学研究
江振洲 ,黄鑫 , 王涛 ,舒斌 , 倪彬 ,张陆勇
(中国药科大学新药筛选中心 , 江苏 南京 210009)
中图分类号:R994　 文献标识码:A　 文章编号:1002-
3127(2007)04-0302-01
关键词:高效液相色谱法;大黄酸;犬;毒代动力学
【摘要】　目的　大黄酸为防治糖尿病肾病的新型药物 , 是
大黄游离蒽醌衍生物的单体之一。在本研究中通过获得 Beagle
犬经口给予大黄酸后体内的毒代动力学信息 ,为临床安全用药
提供参考依据。方法　建立 HPLC-荧光分析方法 , 采用与长期
毒性试验相同的剂量设置(35、111 和 350 mg kg)进行毒代动力
学研究 , 每组 6 只动物 , 雌雄各半 , 在给药第一天 、连续给药 26
周(第 182 天)和连续给药 39 周(第 273 天)时进行毒代动力学
试验 , 测定不同时间点的血浆大黄酸浓度 , 统计矩方法估算大
黄酸在犬体内的毒代动力学参数。结果　犬方法学验证该分
析方法可靠 ,符合生物样品分析要求。犬经口给 35、111 和 350
mg kg 大黄酸第 1 天时 , Cmax 分别为(19.48±2.36)、(45.11 ±
13.26)和(77.89 ±2.48)mg L, AUC 分别为(105.1 ±9.561)、
(227.5±44.2)和(506.6±133.3)mg (L·h)。 给药 26 周时 , Cmax
分别为(23.96 ±3.36)、(50.85±3.31)和(80.98±3.58)mg L ,
AUC分别为(128.1 ±32.0)、(270.8±27.4)和(591.4 ±24.2)
mg (L·h)。给药 39 周时 , Cmax分别为(30.64±5.084)、(53.30 ±
6.31)和(84.52 ±4.41)mg L , AUC 分别为(141.4 ±26.1)、
(241.1±29.9)和(600.6±97.5)mg (L·h)。 结论　在研究的剂
量范围内 ,大黄酸在犬体内的毒代动力学过程是基本一致的 ,
各剂量间AUC 及 Cmax的比例均接近 1∶2∶4。对于同一剂量 , 单
次给药和多次给药后的 AUC 和 Cmax没有显著性改变。说明大
黄酸在犬体内蓄积程度较轻。
单抗 NC05017安全性评价
研究中的新技术方法
耿兴超 ,彭茜 , 林志 ,李佐刚 , 沈连忠 ,王秀文 , 李波
(中国药品生物制品检定所国家药物安全
评价监测中心 , 北京 100083)
中图分类号:R994.1　 文献标识码:A　 文章编号:1002-
3127(2007)04-0302-01
关键词:单抗类药物;安全性评价;新技术
【摘要】　目的　由于单抗类药物在种属特异性 、免疫原
性 、免疫毒性 、药代动力学和毒代动力学等方面都有别于常规
药物 ,因此通过嵌合单抗 NC05017 的安全性评价研究 , 探索单
抗类药物安全性评价的新技术和新方法。 结果　在 NC05017
的试验研究中 , 共使用了 4 种不同于常规药物安全性评价的新
技术方法:(1)通过体外试验筛选和确定药物敏感动物:利用血
小板结合试验 ,发现 NC05017 与人 、Beagle 犬和恒河猴的血小板
结合力为:人>Beagle 犬>恒河猴 , 而与大鼠 、小鼠则没有特异
性结合 , 因此 ,在动物选择上首选 Beagle 犬进行药物安全性评
价研究;(2)组织交叉反应试验:构建了用于单抗类药物安全性
评价的人体组织库 , 完成了该药物与人体组织的交叉反应试
验 ,结果发现 NC05017 与 29 种正常人体组织均无特异性组织
交叉反应 , 但能与人血小板特异性结合 , 其和药效学试验结果
一致;(3)药代动力学评价:自主研制开发了 NC05017 的多克隆
抗体酶标检测试剂盒 ,完成了 Beagle犬血浆中测定重组抗体融
合蛋白 NC05017 的方法学构建。方法学认证结果显示该试剂
盒测定方法可靠 ,特异性强 , 灵敏度高 , 重现性好 , 回收率高 , 线
性范围可满足药代动力学研究的需要;(4)免疫原性检测:本试
验采用改良的 ELISA 方法测定了不同给药阶段 Beagle 犬血清
抗体水平 ,结果发现重复给予 NC05017 不能引起 Beagle 犬血清
中产生抗NC05017的特异性 IgG 抗体。结论　通过以上 4种方
法的研究 , 能更准确 、更全面的评价单抗类生物技术药物的毒
性反应 ,为我国同类药物的安全性评价研究提供参考依据。
龙胆泻肝丸 、关木通 、三叶木通及
五叶木通的小鼠体内毒性比较
薛翔 ,任进
(中国科学院上海药物研究所国家重点心实验室
药物安全评价研究中心 , 上海 201203)
中图分类号:R114　 文献标识码:A　 文章编号:1002-
3127(2007)04-0302-02
关键词:龙胆泻肝丸;马兜铃酸药物;安全性评价
【摘要】　目的　目前市售龙胆泻肝丸和含马兜铃酸药物
如关木通等中药的安全性问题十分引人关注。 本研究比较和
评价了连续给予按近期中国药典生产的龙胆泻肝丸 , 关木通 ,
三叶木通及五叶木通对小鼠所产生的毒性反应及程度 ,以提供
木通类药物和龙胆泻肝丸的安全性资料 , 确定毒性剂量范围 ,
为临床用药提供参考。 方法　龙胆泻肝丸 、关木通 、三叶木通
及五叶木通对小鼠连续灌胃28 d , 观察小鼠的一般情况 、进行血
液生化学 、病理组织学检查等。剩余 1 2 小鼠进行停药 25 d 恢
复期观察。结果　龙胆泻肝丸组在整个试验期间未见明显的
毒性反应 , 无毒性反应剂量为>3.00 g (kg·d)。关木通的无毒
性反应剂量为 0.06 g (kg·d);在>=0.24g (kg·d)时见体重增
·302· 毒理学杂志 2007年 8月第 21卷第 4期　J Toxicol August 2007 Vol.21　No.4
长缓慢 ,耗食量减少 , 肝 、肾功能指标异常 , 高剂量组明显。 病
理观察可见明显的肾脏毒性 , 如肾近曲小管明显扩张 , 小管上
皮细胞变性 、坏死 , 肾间质炎症及明显的纤维化。肾脏病变停
药后仍不能完全恢复。三叶木通和五叶木通组在整个试验期
间未见与药物相关的毒性反应 , 无毒性反应剂量分别为 0.40
和>10.00 g (kg·d)。结论　在本试验条件下 ,关木通显示出明
显的肾脏毒性 , 其出现毒性的剂量为 0.24 g (kg·d), 等于临床
用量;而龙胆泻肝丸 、三叶木通和五叶木通未见与药物相关的
毒性反应 ,其无毒性反应剂量为临床用量的 5 ～ 25倍。
免疫交叉反应在单克隆抗体类药物
临床前安全性评价中的应用
林志
(中国药品生物制品检定所国家药物安全
评价监测中心 , 北京 100176)
中图分类号:R994　 文献标识码:A　 文章编号:1002-
3127(2007)04-0303-01
关键词:免疫交叉反应;单克隆抗体类药物;安全性评价
单克隆抗体有特异性识别作用靶点的能力 , 具有药效精确
可控 、副作用小的优点。单克隆抗体类药物作为一种新型的生
物技术药物具有特定的免疫原性。如果除去本身特定的靶器
官外 , 人体正常组织细胞中存在相同或相似的抗原决定簇 , 单
克隆抗体类药物则可能会与非靶器官外的其他组织或细胞结
合 ,从而产生严重的副作用。因此单克隆抗体类药物的免疫交
叉反应在药物临床前的安全性评价中非常重要。
根据 FDA 的相关规定 ,抗体类药物的免疫交叉反应常常采
用正常成人组织或相应的细胞株进行免疫组织化学或免疫细
胞化学试验。
在一些特殊情况下 , 免疫交叉反应也可选用培养的细胞
株 、干细胞 、胚胎或胎儿组织。为覆盖人类基因的多态性 ,所采
用的成人组织最好来源于 3 个或 3 个以上的捐赠者。 免疫交
叉反应中抗体浓度的选择非常重要。最佳的抗体浓度应该是
与靶器官有效结合的最低浓度。此外 , 免疫交叉反应试验必须
选用阴性和阳性对照组。据国外文献报道 , 一般的组织细胞中
均有转铁蛋白受体的表达 ,所以常将抗转铁蛋白受体抗体作为
阳性抗体 , 作为阳性对照中的“外部对照” 。 同时 , 将检测抗体
与相应的靶器官或细胞株进行反应 , 作为阳性对照中的“自身
对照” ,以确保检测抗体的效力。良好的免疫组织化学或免疫
细胞化学染色切片是正确判定染色结果的基础和前提。因此 ,
要根据染色结果进行调整。
我们就单克隆抗体类药物免疫交叉反应相关的研究背景、
国际法规要求、试验设计特点以及试验操作注意事项等进行了
综合论述。免疫交叉反应试验系统设计的合理及试验操作的严
格可以有效控制试验结果的准确可靠 , 从而正确判定单克隆抗
体类类药物是否存在组织交叉反应 , 为日后的临床用药提供参
考。
95%肟草酮的亚慢性经口毒性
谭玉凤 ,吴南翔 , 金锋 ,于仲波 , 陶核 ,金勇 , 娄金萍
(浙江省医学科学院 , 浙江 杭州 310013)
中图分类号:R994.1　 文献标识码:A　 文章编号:1002-
3127(2007)04-0303-01
关键词:肟草酮;亚慢性经口毒性;无明显损害作用剂量
【摘要】　目的　研究肟草酮原药对大鼠的主要亚慢性毒
性作用及无明显损害作用剂量。方法　按照 GB 15670-1995《农
药登记毒理学实验方法》中大鼠亚慢性经口毒性试验方法进
行 ,设 0、11.31、33.92和 101.75 mg kg 4个剂量组。结果　雌性
大鼠中剂量组(33.92 mg kg)和高剂量组(101.75 mg kg)总摄食
量 、总食物利用率 、体重总增加量低于对照组 ,雄性大鼠中剂量
组(33.92 mg kg)和高剂量组(101.75 mg kg)组肝 体比均高于对
照组 ,中剂量组雄性大鼠肺 体比和脾 体比高于对照组 ,雌性大
鼠中剂量组肝 体比高于对照组。血液常规指标中剂量组雄性
大鼠 RBC、HGB 均低于对照组 、ALP高于对照组 , 高剂量组雄性
大鼠 RBC、HCT、RDW 均低于对照组 、高剂量组雄性大鼠 RBC、
HGB、HCT低于对照组 , RDW 低于对照组 ,其差异均有统计学意
义。结论　肟草酮原药的无明显损害作用剂量为:雄性大鼠
(9.67±0.65)mg (kg·d),雌性大鼠(10.21±0.45)mg (kg·d)。
Beagle犬经口给药 AF-5 PVP固体分散体
9个月和恢复期 3周毒性研究
沈连忠 , 曹丽梅 ,姜华 , 刘芳 ,杨艳伟 ,
郎书惠 ,李珊珊 , 王秀文 ,李波
(中国药品生物制品检定所国家药物安全
评价监测中心 , 北京 100083)
中图分类号:R994.1　 文献标识码:A　 文章编号:1002-
3127(2007)04-0303-01
关键词:Beagle 犬;AF-5 PVP;安全性评价
【摘要】　目的　研究AF-5对机体产生的中毒反应及其严
重程度 、主要毒性靶器官以及损害的可逆程度 。方法　设 5 、15
和50 mg kg , PVP对照组及蒸馏水对照组。按每周给药 6 次 , 给
Beagle犬经口给予 AF-5 PVP共 9 个月 , 并经 3 周恢复期进行毒
性研究。结果　15 和 50 mg kg 剂量组在给药期间出现血清
ALP水平的升高 , 但是停药后恢复正常;动物体重 、进食量 、心
电图 、神经活动状况 、尿生化 、血液学 、以及其他血清生化指标
等均未见明显异常。结论　血清ALP水平的升高 , 与经口给予
的大剂量的AF-5 PVP固体分散体影响胃肠道有关;Beagle犬经
口给药AF-5 PVP固体分散体 9 个月的无明显毒副反应剂量为
5 mg kg。
Beagle犬经口给予六神丸
急性毒性研究
齐卫红 ,李欣 , 沈连忠 ,王超 , 刘芳 ,王越 , 郎书惠 ,李波
(中国药品生物制品检定所国家药物安全
·303·毒理学杂志 2007年 8月第 21卷第 4期　J Toxicol August 2007 Vol.21　No.4