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第 1 3卷 第 9 期
2011 年 9 月
辽 宁 中 医 药 大 学 学 报
JOURNAL OF LIAONING UNIVERSITY OF TCM
Vol. 13 No. 9
Sep . ，2011
· 方药纵横 ·
独行千里为山柑科（Capparaceae）植物独行千
里Capparis acutifolia Sweet〔C. membranacea Gardn.
et Champ.〕的干燥根。别名扣钮子（广东乳源）、独
虎龙、黑皮蛇等，产于广东、广西、江西（大余）等地。
性平，味苦、涩，有毒；功能活血散瘀，解痉止痛。用
于治疗风湿关节痛，筋骨不舒，咽喉肿痛，腹痛[1-2]。
本实验对独行千里有效部位（DXQL）抗炎镇痛方面
进行药效学研究，以期为临床应用提供科学依据。
1 材 料
1.1 药品与试剂
独行千里药材购自清平药市，经广州中医
药大学鉴定教研室童家贇讲师鉴定为山柑科
（Capparaceae）植 物 独 行 千 里Capparis acutifolia
Sweet〔C. membranacea Gardn. et Champ.〕的 干 燥
根。独行千里有效部位自制：独行千里根茎干燥
后粉碎，分别加入12、10、10倍量75%~80%乙醇回
独行千里氯仿部位抗炎镇痛作用及机制研究
邓亚利1，操红缨2，郭颖娟3
（1.华南农业大学制药工程系，广东 广州 510642；2.广州中医药大学，广东 广州 510405；
3.陕西省中医药研究院汉唐制药有限公司，陕西 西安 710018）
摘 要：目的：研究独行千里氯仿部位的抗炎镇痛作用。方法：采用弗氏完全佐剂诱发大鼠关节炎、角叉菜胶
致大鼠足肿胀法、小鼠腹腔毛细血管通透性及二甲苯致小鼠耳肿胀试验评价独行千里有效部位的抗炎作用；采用冰
醋酸致痛法评价药物镇痛作用；用Elisa法测定炎性组织中白介素1（IL-1）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）含量，紫
外分光光度法测定丙二醛（MDA）含量。结果：独行千里有效部位可明显抑制佐剂性关节炎大鼠原发性和继发性
足跖肿胀；抑制大鼠足肿胀程度，抑制毛细血管通透性增加，降低肿胀足中IL-1、TNF-α和MDA含量；可抑制小
鼠耳壳肿胀作用，对醋酸刺激引起的小鼠疼痛反应。结论：独行千里具良好的抗炎、镇痛和免疫抑制作用。
关键词：独行千里；抗炎；镇痛
中图分类号：R285.5 文献标识码：A 文章编号：1673-842X (2011) 09- 0194- 04
收稿日期：2011-03-02
基金项目：华南农业大学资源环境学院院长基金资助项目（2009023）
作者简介：邓亚利（1970-），女，陕西西安人，副主任药师，博士，研究方向：药物新剂型、新技术及新药研究。
通讯作者：郭颖娟（1976-），女，陕西西安人，药师，研究方向：新药临床前研究。E-mail：guoyingjuan77@yahoo.com.cn。
Influence of Capparis Acutifolia Sweet to IL-1 TNF-α and MDA
DENG Ya-li1，CAO Hong-ying2，GUO Ying-juan3
（1. Pharmaceutics Engineering Department of South China Agriculture University，Guangzhou
510642，Guangdong，China；2.College of Pharmacy，Guangzhou University of Traditional
Chinese Medicine，Guangzhou 510405，Guangdong，China；3.Hantang Pharamaceutical Co.
Ltd., Shaanxi Academy of Traditional Chinese Medicine，Xian 710018，Shaanxi，China）
Abstract：Objective：To investigate the anti-inflammatory and analgesic effect of Capparis acutifolia
Sweet. Mehods：The anti-inflammatory effects of Capparis acutifolia Sweet were conducted by adjuvant-
induced arthritis in rats，Carrageenan-induced rat paw edema in rat，capillary permeability in abdominal
cavity of mice and ear edema of mice induced by xylene. The analgesic effects were evaluated by the
twisting reaction of mice induced by hotplate and acetic acid. The content of IL-1，TNF-αwere measured
by ELISA，and MDA were measured by ultraviolet spectrophotometry. Results：Capparis acutifolia Sweet
could effectively counterwork the primary and secondary reaction of adjuvant-induced arthritis in rat model，
inhibit capillary permeability and lighten ear edema in mouse model. And decrease the content of IL-1，
TNF-α and MDA of edema foot of rats. Capparis acutifolia Sweet also improved the pain threshold of
hotplate test in mice and those injected with acetic acid. Conclusion：Capparis acutifolia Sweet has the good
functions of analgesia，anti-inflammation and anti-adjuvant arthritiss function.
Key words：capparis acutifolia sweet；anti-inflammation；analgesic
DOI：10.13194/j.jlunivtcm.2011.09.196.dengyl.064
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流提取3次，时间分别为2、1.5、1.5h，合并提取液，
减压浓缩至浸膏，以1%~2%稀酸水酸化后，酸水液
以氨水调PH至9，氯仿萃取，减压回收氯仿所得稠
膏，采用酸性染料比色法进行含量测定，生物碱含
量为63.7%，即得独行千里氯仿部位。阿司匹林肠
溶片（拜耳医药保健有限公司，规格100mg/片，批号
116966）；正清风痛宁片（湖北正清制药集团股份有
限公司，规格20mg/片，批号0906119），各药临用前
以0.5％羧甲基纤维素（CMC）配成相应浓度的混
悬液（阿司匹林片除去肠衣后配制）；弗氏完全佐剂
（FAC），美国 Sigma公司产品（098K8729）。大鼠白
介素1（IL-1）、肿瘤坏死因子（TNF-α）Elisa试剂
盒，上海森雄科技实业公司产品；丙二醛（MDA）试
剂盒，广州市齐云生物技术有限公司提供；冰醋酸、
二甲苯、伊文思兰等试剂均为分析纯。
1.2 动物
SPF级昆明小鼠（由广东省实验动物监测所提
供），雌雄兼用，体重18~22g，合格证号SCXK（粤）
2008-0015。SPF级SD大鼠（由广东省实验动物监
测所提供），雄性，体重180~220g，合格证号SCXK
（粤）2008-0020。
1.3 主要仪器
AT-858自动酶标仪（上海安泰分析仪器有限公
司）；UV2300型紫外可见光光度计（上海天美科学仪
器有限公司）；BP-211D电子分析天平（北京赛多利
斯天平有限公司）；6mm打孔器；ACS-1EAS 型电子
天平（精度 0.5g，北京市菲姆斯科技开发公司产品）。
2 方 法
2.1 抗炎作用
2.1.1 对大鼠佐剂性关节炎的影响
SD大鼠50只，适应性饲养3天，按体重随机分
为5组：模型组、正清风痛宁片组（40mg/kg）、独行
千里有效部位小剂量组（折算成药材量40g·kg-1）、
中剂量组（80g·kg-1）、大剂量组（120g·kg-1），按
1mL/100g体重灌胃给药，模型组给予生理盐水，各组
给药容积相等。连续给药2天后。第3天用游标卡
尺在测量正常足厚度之后，每只大鼠右后足趾皮内
注射弗氏完全佐剂0.1mL，并在6h、18h、24h、3、5天分
别测量致炎后足肿胀度，并在10、14、18、22、26天分
别测定左后足趾（非致炎足）的厚度[3]。
2.1.2 对角叉菜胶致大鼠足肿胀的影响
雄性SD大鼠50只，按体重随机分成5组。各组
分别灌胃受试药物或等体积生理盐水，每日1次，连
续7天。末次给药30min后，于右后足皮下注射1%
角叉菜胶生理盐水溶液0.1mL，分别在致炎前和致
炎后1、2、3、4h测量足爪容积，以致炎前后足爪容积
的差值表示肿胀度。测量后处死动物，截取右后足，
称重，冰浴条件下剪碎、匀浆，按所购试剂盒的操作
步骤测定IL-1、TNF-α和MDA含量。
2.1.3 对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响
小鼠50只，雌雄各半，随机分成5组。各组分
别灌胃受试药物或等体积生理盐水，每日1次，连续
7天。末次给药30min后，尾静脉注射0.5%伊文思
蓝生理盐水溶液0.2mL，随后立刻腹腔注射0.6%醋
酸0.2mL，20min后脱颈椎处死小鼠，剖开腹腔用适
量生理盐水反复冲洗，并收集洗出液，滤纸滤过，并
调整容积至6mL，在3 000r·min-1离心15min，取上
清液于722型光栅分光光度计中在590nm处波长测
OD值。比较各组的差异。
2.1.4 对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响
按2.1.3方法对小鼠随机分组，给药。末次给药
1h后，每只小鼠左耳涂布二甲苯0.1mL致炎，右耳
不涂作为对照。1.5h后将小鼠脱颈椎处死，用直径
6mm打孔器分别在左、右耳同一部位打下圆耳片，
秤重，以左、右耳片重量之差作为肿胀度，比较各组
间差异。
2.2 镇痛作用
对醋酸致小鼠扭体反应的影响按2.1.3方法对
小鼠随机分组，给药。末次给药30min后，各小鼠腹
腔注射0.6%醋酸0.2mL，记录注射醋酸后40min内
小鼠扭体次数。
3 结 果
3.1 对大鼠佐剂性关节炎的影响
以足肿胀度为指标，采用SPSS13.0统计软件包
进行单因素方差分析。急发性和继发性炎症实验结
果分别见表1~2。
表1 独行千里对大鼠佐剂性关节炎原发性反应的影响（右足肿胀度，n=10，x—±s）
组别 剂量（g·kg-1）
右足肿胀度（mm）
6h 18h 24h 3d 5d
模型组 - 3.38±0.29 4.77±0.26 4.00±0.89 3.60±0.88 3.29±0.86
小剂量组 40 2.60±0.35* 3.21±1.04△ 3.30±0.90 * 2.67±0.86 2.81±1.00
中剂量组 80 2.02±0.64△ 2.01±0.75△ 2.31±0.59 * 2.08±0.49 2.37±0.76*
大剂量组 120 2.88±0.36△ 2.67±0.68△ 2.34±0.68 * 2.00±0.51* 1.91±0.39
正清风痛宁片组 0.04 2.46±0.25△ 3.21±0.56△ 3.06±0.34 * 2.84±0.37 2.80±0.36*
注：与模型组相比，*P<0.05，△P<0.01。
表2 独行千里对大鼠佐剂性关节炎继发性肿胀的影响（左足肿胀度，n=10，x—±s）
组别 剂量（g·kg-1）
左足肿胀度（mm）
10d 14d 18d 22d 26d
模型组 - 0.96±0.33 0.89±0.33 0.87±0.31 0.88±0.32 0.80±0.18
小剂量组 40 0.94±0.16 0.85±0.12 0.78±0.22 0.61±0.21 0.51±0.25
中剂量组 80 0.93±0.11 0.80±0.15 0.75±0.17 0.56±0.18* 0.39±0.12*
大剂量组 120 0.89±0.09 0.82±0.17 0.70±0.15 0.54±0.18* 0.35±0.14△
正清风痛宁片组 0.04 0.93±0.07 0.86±0.12 0.80±0.13 0.56±0.13* 0.38±0.10*
注：与模型组相比，*P<0.05，△P<0.01。
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从表1可知，24h内为急性炎症的发生期[4-5]，与
模型组相比，给药组各个剂量和阳性对照组对其均
有明显抗炎作用。24h后为继发性炎症的形成期，
各个给药组对继发性炎症形成虽有一定的抑制作
用，但不是特别明显。3天后，给药组和阳性对照组
的炎症抑制作用较弱。由此可见，独行千里有效部
位大、中、小剂量组，对大鼠佐剂性关节炎急性炎症，
均有抑制作用。
从表2可知：18天以内是继发性炎症的形成
期，药物对继发性炎症的形成有一定的抑制作用，
作用相对缓和，无显著性。18天后，继发性炎症
形成，药物的抗炎作用开始显效。与模型组相比，
22天大、中剂量组和阳性对照组都有明显的抗炎
作用（P<0.05）。26天大剂量组有极显著性差异
（P<0.01），中剂量组与阳性对照组有显著性差异
（P<0.05）。
表3 独行千里对角叉菜胶致大鼠足肿胀的影响（n=10，x—±s）
组别 剂量（g·kg-1）
肿胀度（mL）
1h 2h 3h 4h
模型组 － 0.59±0.24 0.85±0.21 1.15±0.15 1.08±0.20
阿司匹林组 0.2 0.18±0.16△ 0.28±0.11△ 0.50±0.12△ 0.46±0.16△
大剂量组 120 0.20±0.13△ 0.32±0.22△ 0.52±0.21△ 0.51±0.14△
中剂量组 80 0.26±0.15△ 0.36±0.13△ 0.76±0.26△ 0.70±0.18△
小剂量组 40 0.44±0.19 0.52±0.24△ 0.89±0.19△ 0.88±0.23*
注：与模型组比较，*P<0.05，△P<0.01。
3.2 对角叉菜胶致大鼠足肿胀的影响
从表3可知，与模型组比较，独行千里小剂量组
在致炎后2h，大、中剂量组在致炎1~4h内，大鼠足肿
胀均有减轻（P<0.01）。同时，独行千里大、中剂量组
可明显降低IL-1、TNF-α和MDA含量（P<0.01或
P<0.05），结果见表4。
表4 独行千里对大鼠肿胀足中IL-1
TNF-α和MDA含量的（n=10，x—±s）
组别 剂量（g·kg-1） IL-1 TNF-α MDA
模型组 － 132.19±21.86 529.52±95.62 121.96±34.67
阿司匹林组 0.2 52.17±16.35△390.44±126.53* 34.11±21.75△
大剂量组 120 67.72±10.46△416.58±64.86* 35.45±21.03△
中剂量组 80 79.91±13.75△439.79±61.70* 46.95±26.93△
小剂量组 40 114.29±31.02 466.41±129.31 94.39±30.66
注：与模型组比较，*P<0.05，△P<0.01。
3.3 对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响
从表5可知，与模型组相比，独行千里大、中剂
量组与阳性对照组可明显降低小鼠腹腔毛细血管通
透性（P<0.01）。
表5 独行千里对小鼠毛细血管通透性的影响（n=10，x—±s）
组别 剂量（g·kg-1） OD 值
模型组 － 0.406±0.127
阿司匹林组 0.2 0.217±0.081△
大剂量组 120 0.199±0.056△
中剂量组 80 0.214±0.082△
小剂量组 40 0.330±0.088
注：与模型组比较，△P<0.01。
3.4 对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响
实验结果见表6，独行千里大、中、小剂量组与
模型组相比，均呈不同程度的抑制小鼠耳壳肿胀作
用，具有随剂量增加而作用增强的趋势，大剂量组有
极显著性差异（P<0.01），中、小剂量组有显著性差异
（P<0.05）。与阿司匹林组比较，大剂量组有显著性
差异（P<0.05）。
表6 独行千里对二甲苯所致小鼠耳
壳肿胀的影响（n=10，x—±s）
组别 剂量（g·kg-1） 肿胀度（mg） 抑制率（％）
模型组 － 1.88±0.55 －
阿司匹林组 0.2 1.20±0.45 36.20*
大剂量组 120 0.70±0.48 62.77△☆
中剂量组 80 1.06±0.54 43.62*
小剂量组 40 1.34±0.42 28.72*
注：与对照组比较，*P<0.05，△P<0.01；与阿司匹林组
相比，☆P<0.05。
3.5 对醋酸致小鼠扭体反应的影响
实验结果见表7，与模型组比较，阿司匹林组、
大剂量组均能显著减少小鼠扭体次数（P<0.01或
P<0.05）。
表7 独行千里对小鼠扭体次数的影响（n=10，x—±s）
组别 剂量（g·kg-1） 扭体次数 抑制率（％）
模型组 － 48.1±10.1 －
阿司匹林组 0.2 27.8±13.0△ 42
大剂量组 120 26.8±11.4 △ 44
中剂量组 80 34.5±11.3 * 28
小剂量组 40 39.9±7.4 17
注：与模型组比较，*P<0.05，△P<0.01。
4 讨 论
独行千里药材常用于治疗风湿关节痛（RA），
RA以关节组织慢性炎症病变为主要表现，大鼠
AA能较好地模拟人类RA，是中医药治疗RA的
实验研究中被广泛运用的一种动物模型。[6]IL-1
和TNF-α是重要的炎症介质，低浓度时主要在
炎症的局部起作用，对中性粒细胞、巨噬细胞和
淋巴细胞有激活、趋化作用。MDA是自由基引发
的脂质过氧化反应的一种产物，可以激活环氧化
酶（COX），一方面促进花生四烯酸生成PG，导致
细胞代谢紊乱诱发炎症；另一方面可影响白三烯
代谢诱发炎症。[7-10]
本实验研究发现独行千里提取物对大鼠AA
原发性病变有明显的抑制作用，对继发性病变也
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排石利胆颗粒由赤芍、茵陈、柴胡等10味药组
成，具有舒肝理气、利胆排石之功效，用于治疗胆囊
炎，胆石症。原标准无含量测定项，因此不能有效控
制药品质量、保证疗效。本研究以芍药苷为含量测
定指标，用高效液相色谱法对其含量进行方法学考
察；为补充排石利胆颗粒质量标准提供科学的依据。
1 仪器与试剂
高效液相色谱仪：LC-10p液相泵、LC-10uv检
测器，UV260紫外可见分光光度计。
芍药苷对照品（中国药品生物制品检定所提
供，批号：110736- 200320，经归一化法测定纯度为
99.5%），乙腈（色谱纯，山东禹王有限公司），水为重
蒸馏水。
2 色谱分析条件及系统适用性试验
2.1 色谱分析条件
Hpersil C18色谱柱（5μm，4.6mm×200mm）；流
RP-HPLC法测定排石利胆颗粒中芍药苷含量
张颖1，张起辉2，邸子真1，邹桂欣1，尤献民1
（1.辽宁省中医药研究院，辽宁 沈阳 110034；2.重庆大学化学化工学院，重庆 400030）
摘 要：目的：建立排石利胆颗粒中芍药苷的含量测定方法。方法：采用RP-HPLC法测定含量，使用Hypersil
C18（5μm，4.6mm×200mm）色谱柱，紫外检测波长230nm，乙腈-0.1%磷酸（13：87）为流动相，流速1.0mL/min。
结果：通过方法学考察，芍药苷在0.08104~0.48624μg与峰面积呈良好的线性关系，r=0.9996，平均回收率96.2％
（RSD=1.1％，n=9）。结论：RP-HPLC法可用于排石利胆颗粒中芍药苷的含量测定。
关键词：RP-HPLC；排石利胆颗粒；芍药苷
中图分类号：R284.1 文献标识码：A 文章编号：1673-842X (2011) 09- 0197- 02
收稿日期：2011-03-19
作者简介：张颖（1979-），女，辽宁沈阳人，助理研究员，博士，研究方向：药物分析。
Determination of Paeoniflorin in Paishi Lidan Granule by RP-HPLC
ZHANG Ying1，ZHANG Qi-hui2，DI Zi-zhen1，ZOU Gui-xin1，YOU Xian-min1
（1. Liaoning Province Academy of Chinese Medicine，Shenyang 110034，Liaoning，China；2.College
of Chemistry and Chemical Engineering，Chongqing University，Chongqing 400030，China）
Abstract：Objective：To establish the determination method of the concent of paeoniflorin in Paishi
Lidan granule by HPLC. Method：The column was Hpersil C18（5μm，4.6mm×200mm），the detection
wavelength was at 230nm，the mobile phase was the mixture of acetonitrile-0.1% phosphoric acid（13：
87），the flow rate is 1.0mL/min. Result：A good linear correlation of paeoniflorin was observed between
0.08104~0.48624μg，r =0.9996，the average recovery was 96.2% with RSD of 1.1%（n=9）. Conclusion：
The method can be used as the quality control method of this preparation.
Key words：RP-HPLC；Paishi Lidan granule；paeoniflorin
有显著治疗作用；抑制角叉菜胶致大鼠足肿胀；抑
制毛细血管通透性增加、减少小鼠耳廓肿胀度；有
明显的镇痛作用；与模型组相比，大中剂量组可
降 低IL-1含 量（P<0.01），显 著 降 低TNF-α含 量
（P<0.05），降低MDA含量（P<0.01）；提示其抗炎作
用与降低炎症组织中的炎症因子IL-1、TNF-α和
MDA含量有关。
对独行千里提取物酸化后加碘化汞钾试液、
碘化铋钾试液、硅钨酸试液，均显生物碱反应，提
示其抗炎镇痛作用的活性成分为生物碱类成分，
采用酸性染料比色法测定其含量为63.7%，在药效
学指引下对活性成分的筛选分离是进一步研究的
课题。◆
参考文献
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