全 文 ：.4 2
. 中国药理学通报 义卯 2年 第 8卷 第 1 期
江南牡丹草总碱的抗炎作用及其作用机理
刘青云 彭代银 宋培光 朱正煌 周 健
( 安徽中医学院 中药药理教研室 合肥 23 0 0 3 8 )
岑吸ù兴炎火ù溉菜聚渐冰提要 W S A L K和 F S A L K能抑制小 鼠腹腔和 皮肤毛 细 血 管 通 透
性 , 抑制二甲 笨 、 角叉菜胶所致的炎性水肿 , 减少急性胸膜炎渗液量 , 抑
制 白细胞游走 , 对棉球 肉芽增生也有一定抑制作用 ; 对肾上腺 、 胸腺重量
以 及血浆 皮质醇含量无明显影响 ; 但可 降低炎症组 织 中P G E含 量 。 提 示
其杭炎作用与抑制 P G E合成及释放有关 。 用小 鼠二 甲笨性耳水肿模 型 测
得杭炎治 疗指 数 : W S A L K 比 F S A L K 大 2 . 07 倍 。
关键词 江南牡丹草总碱 杭炎
江南牡丹 草 ( L e o n t i o e K ia g n a n 一 型分光光度计 。
炎半ē兴水梁ù紊小欺岑火ǎ淡米效份
e n s i s P L C h i u ) 属小集科植物 , 药 用
块茎 , 有清热解毒 、 活血化淤功效。 本文
对其水溶性和脂溶性生物碱的抗炎作用及
作用机理进行探讨 。
材 料
1 药物 江南牡丹草水溶性生物碱
( W
a t e r S o l
u b l e A l k a l o i d o f L e o -
n t i e e K i a g n a n e n s i s
,
W S A L K ) 和脂
溶性生物碱 ( F a t S o l u b l e A l k a l o i d
0 f L e o n t i e e K i a g n a n e n s i s
,
F S A -
L K )
, 为其干燥块茎经石油醚 , 氯仿 ,
正丁醇等反复分离提取而得 ; 氢化可的松
( H C )
, 中国信谊制药厂产 品 , 批 号
5 7 0 3 0 3 ; 水杨酸钠针剂 ( 5 5 ) , 上 海 兽
药厂产品 , 批号 8 7 1 2 1 7 ; 叫噪美辛 , 无锡
第四制药厂提供 ; 前列腺素 ( P G E : ) ,
安徽 医科大学临床药理研究所提供 ; 角叉
菜胶 , 沈阳药学院中药药理教研室提供 ;
皮质醇放射免疫盒 , 中国同位素公司北方
免疫试剂研究所 。
2 动物 昆明种小鼠 , 体重 20 士 2
g ; W i s t
a r大鼠 , 体重 1 4 0 ~ 2 50 9 。 本 院
动物房提供 。
冬 仪器 7 21 型分光光度计 和 7母Z Q
方法与结果
1 对毛细血管通透性的影响
1
.
1 腹腔毛细血 管 通 透 性 小 鼠
( 古 ) 6 0只 , 随机均分 6 组 , 分别 s e N S
( 阴性对照 , 下同 , W S A L K 1 5 0 、 3 0 0
m g / k g
,
F S A L K 13
,
26 m g / k g
, 水 杨
酸钠 ( 5 5 , 阳性对照 ,下同 ) 25 0m : / k g 。
用药后 30 m in , 依次 尾 iv ` E v a 那 蓝 液
5 m l / k g
,
s m i
n 后 i p 0 . 7% H A C 1 0
m l/ k g
,
30 m in 后脱颈椎处死小鼠 , 用 蒸
馏水反复冲洗腹腔 , 收集洗液稀 释 至 10
m l
, 按比色法 〔 ” , 测定 E v a n s 蓝 渗 出
量 。 表 1 结果表明 W S A L K 和 T S A L K
均能显著地抑制小鼠腹腔毛细血 管 通 透
性 , 且随剂量增加而作用增强 。
1
.
2 皮肤毛 细血管通透性 大 鼠 30
只 , 均 分 3 组 , 分 别 cS W S A L K 3 0
m g / k g
、
F S A L K 2 6 m g / k g 和 N S , 3 0
m i 。后腹中线两侧 ic 组胺 l o o o m : / L , 立
即 i v l 肠 E v a n s蓝液 1 m l / k g , 1 5m i n 后
测量皮肤内侧面蓝染区直径 , 按 r “ 二 ( r为
纵横直径均值 ) , 计算着色面积 「 “ ’ 。 用丙
酮一盐水 ( 7 : 3 ) 10 m l浸泡蓝 染 皮肤
2 4 h
, 上清液用 7 2 1分光光度计 ( 6 2 0 n m )
表 1 对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响
药 物 动物数 剂量 ( m g / k g ) E , a n s蓝渗出量
( m g / L 又土 S D )
抑制率
(拓 )
n,O
产
7RZ躬35牡2劝
7
.
0士 1 . 2
4
. 弓士 1 . 3二 ’
4
.
4士 1 . 5…
3
.
4土 1 . 1’ 二
5
.
4土 1 . 7’
4
.
9土 1 . 2二
0八”心25乃30肠刀
10扣N S
S S
W S A L
F S A L K
与 N S比较 , ` F < 0 . 0弓, . ’ P < 0 . C i , . ” P ( O . CGI (下同 )
测吸收值 。 N S组皮肤着色面积为 16 2 . 4士 均随剂量增加而增强 。
4 o
.
Zm m
“ ,
E v a sn 浓度 2 . 6 士 。 . s m g / L ; 3 对角叉菜胶致大鼠足肿胀的影响
W S A L K 分别为 1 14 . 2士 3 8 . 7 m m 艺 ( P < 大鼠 6 4只 , 按表 2 分组及 i p 给药 。 给药后
0
.
0 5 ) 和 2 . 4 士 o . 7 m : / L ( P < 0 . 0 1 ) ; 3 o m i n , 每鼠右后足拓 s e l % 角叉 菜 胶
F S A L K 为 1 2 2 . 4 士 4 1 . l m 二 “ ( P < 。 . 05 ) 0 . l m l致炎 , 致 炎前与致炎后按毛细管 放
和 1 . 9士 0 . s m g / L ( P < 0 . 05 ) 。 表 明 大测量法 「 ` 〕 ,测足容积 , 致 炎前后足容积
W S A L K 和 F S A L K 均能显著抑 制 组 胺 差值为足肿胀度 。 表 2 结果表明 : W S A
引起的皮肤毛细血管通透性增高 。 L K 和 F S A L K 对大鼠角叉菜胶足肿有 明
2 对二 甲苯致小鼠耳壳炎症的影响 显抑制作用 , 并呈剂量依赖性 。
小鼠80 只 , 随机均分 8 组 , 印给药 , 按鼠 4 对大鼠急性胸膜炎的影响 大鼠
耳肿胀法 二 ” 〕 ,用二 甲苯致 炎 , 测量各组小 ( 忿 ) 24 只 , 按表 3 分组与印给药 , 给药
鼠左右耳片重量差 。 N S 组 为 6 . 6 士 1 . 5 后 30 m in 在乙醚麻醉下于每鼠左侧胸 腔内
nr g
;
5 5组 ( 2 5o m g / k g ) 2 . 2 士 z . l m g 注入 1 % 角叉菜胶 o . Z m l , s h处死 , 测
( P < 0
.
0 1 )
,抑制率 6 . 3% ; W S A L K 定胸腔渗 出液与其中白细胞总数 二 ` 弓 。 表 3
7 5
、
16 。、 3 o o m g / k g , 分别为 5 . 2 士 2 . 0 结果表明 : W S A L K和 F S A L K 可 减 少
m g ( P < 。 . 0 5 ) , d . 4 士 1 . 4 m g ( P < 渗液量和白细胞总数 。
0
.
0 5 )
, 1
.
9 士 o . g m g ( P < 。 . 0 0 1 ) , 相 5 对大鼠棉球肉芽肿增生和胸腺 、
应抑制率 20 外 、 32 . 4 % 、 70 . 5 毋 ; F S A 一 肾上腺重量的影响 大鼠48 只 , 乙 醚 麻
L K 6
.
5
、
13
. 。、 26 m g / k : , 分别 为 4 . 9 醉 , 于各鼠左右肢 鼠蹊部支下植 入 20 m ;
士 l . 4 m g ( P < 。 . 0 5 ) 、 3 . 9士 1 ` 3 m g ( P 灭菌棉球 ( 1 8 o 0 U / L庆大霉素浸泡 , 拱
< o
`
0 2 )
、
2
.
5士 z . 3 m g ( p < 0 . 0 0 1 ) , 干 ) 第 8 天各 1 个 。 按表 4 分组 与 S c 给
相应抑制率 24 肠 、 40 . 8肠 、 61 . 7% 。 表明 药 , q d 火 7 d , 于第 8天处死大鼠 , 剖 离
W S A L K 和 F S A L K 对耳水肿抑 制 作 用 肉芽肿组织 , 70 ℃烘 4 h后 , 称重 。 同 时
表 2 对角又菜胶致大鼠足肿的影响
剂 量
( m g / k g ) 1 2
0
,
2 7士 0 . 12 0 . 4 7士 0 . 0 8
0
.
1 5士 0 . C6 . D . 3 1士 0 . 2 7…
0
.
12 士 0 . 0 6 母 . 0 . 28 士 0 . 0 6…
0
.
14 土 0 . 0 8 * 0 . 3 3土0 . 0 9二
0
.
16 士 0 . 0 6 * 0 . 3 7士 0 . 0 1 *
0
.
13 土 0 . 0 6 * 0 . 30土 0 . 1 1 * *
D
,
1弓土 0 . 07 * 0 . 3弓士 0 . 1 0今
0
.
1 6士 O , 0 7 * 0 . 38士 0 . 0 9 *
3 4
0
.
53 士 0 . 11 0 . 6 5士 0 . 2 1
0
.
3 7土 0 . 0 8 . “ 0 , 4 2土 0 . 1 4 .
0
.
3 9士 0 . 0 7 . “ 0 . 4 3土0 . 18 .
0
.
4 0土0 . 12 , 0 . 4 5士0 . 14 .
0
.
4 7士 0 , 1 4 0 . 5 5士0 . 1 7
0
.
3 7土 0 . 0 9 t . 0 . 4 4士D . 1 6.
0
.
4 1士 0 . 1 1* 0 . 4 6士0 . 1 3t
0 4弓土 0 . 1 8 0 . 56士 D . 2 1
数,物只动(动物吸组 )
致炎后不同丝间 (五 )足肿旅度左琴土 SD: _卫功_ _ _
N S S 一
55 8 2弓0
W S A L K 8 3 0 0
8 1弓0
8 7 5
r S A L K 8 2 6
8 李3
8 6
.
5
.4 4
·
表 3
药物
对大鼠急性胸膜炎渗液量及白细胞数的影响
动物数 (只 ) 剂量 ( m g /k g ) 渗液量 (功 1)
2
.
1士 0 . 4
1
.
2士 0 . 5 , .
1
. `士 0 . 5 ,
1
。
7士 0 . 6
(
皿二 8 , 又土 S D )
白细胞总数 ( x 1 0 . ) 抑制率 ( % )
N S
W S A LK
F S人L K
D
e二
3 0 0
2 6
9 8
.
8士 28 . 4
勺 . 8土扭 . .1 .
61
.
4士 24 . 6 .
5 8
.
2士 26 . 5 , .
4 6
.
5
3 7
.
8
4 1
.
1
6
取各鼠胸腺 、 肾上腺称重 。 表 4 结 果 表
明 : W S A L K Z种剂量和 F S A L K 大 剂
量可明显抑制棉球肉芽增生 , 但 作 用 比
H C弱 。 两药对胸腺 、 肾上腺重量无明 显
影响 。
6 抗炎效价测定 采用小鼠二甲苯
性耳水肿模型 。 W S A L K 和 F S A L K 各
4 个剂量组 , 每组小鼠 8 只印给药 。 获得
各剂量组的抑制率后 , 用简化机率单位法
求 E D 。 。 , 并比较 治 疗 指 数 ( T l ) 。
W S A L K E D
。 。 = 19 3
.
6土 0 . 1 0 9 / k g ,
。 丫 L D : 。 18 1 0 _ . _ , 。 . 二 二二
T l二共之毕卫~ = 一典粤之卫二一 二 9 . 3 5 : F S A L KE D s o 2 9 3 . 6 ` ’ 一 ’ 一 “ 一 “
E D 。 。 = 17
.
4士 o . r o g / k g , T l = 7 8
.
5
17
.
4
= 4
.
5 0
。
W S A L K T l比 F S A L K 大 2 . 0 7
倍。
7 抗炎机理分析
7
.
1 对去肾上腺大鼠角又菜胶 致 足
肿的影 响 大 鼠 18 只 , 按文献方法 仁 . ’ 摘
除双侧肾上 腺 , 饲 以 1 肠 N a CI 溶液 , 术
后第 3 天随机均分成 3 组 , 分 别 iP N S
s m l/ k g
,
W S A L K s o o m g / k g
、
F S A -
L K 26 m g k/ g
,
30 m 汪后用角叉菜 胶 致
炎 , 测肿胀度 。 表 5结果表明 : W S A L K
和 F S A L K对大鼠角叉菜胶性足肿仍有明
显抑制作用 。
7
.
2 对正常大 鼠血桨皮质醉浓 度 的
影响 大鼠 18 只 , 均分成 3 组 , 分别 iP N S
s m l / k g
、
W S A L K 3 0 0 0 9 / k g
、
F S A -
L K 13 m g k/ g
,
4 h后摘眼球取血 。 用放
免法测定血浆皮质醇含量 〔 弓 ’ 。 N S 组为
7 1
.
6士 r 9 . 3协g / L , W S A L K 7 0 . 4士 2 6 . 2
卜g / L , F S A L K 7 9
.
2士 1 4 . 5卜g / L 。 表
明两种提取物对血浆皮质醇含量无明显影
响 。
7
.
3 对 大鼠足爪 炎症组 织 P G E含 量
的影响 大鼠32 只 , 均分成 4 组 , 沙给药
后 30 m in , 于各鼠足拓 s c l 肠角 叉 菜 胶
o
.
Zm l致炎 , 4 h后脱颈处死大鼠 , 将 致
炎足自踩关节上 1 c m处剪下 , 称重 后 剪
碎放入 7 m l N S中浸泡 l h ,离心 。 取上 清
液按文献方法 〔 7 1处理 , 用 7 5 2 0分光 光 度
表 4 对大鼠棉球肉芽肿 、 脚腺、 肾上腺重量的影响 ( 。 二 8 )
药物 动物数
(只 ) 荆 量 重
量 ( nz g / 1 0 09休重 , 又土 S D )
( m g / k g 大 d ) 肉芽组织 肾 上 腺
N S
H C
W S A L K
F SA L K
2 0 X 7
3 00 X 7
6D0 X 7
玛 X 7
26 X 7
5 9
。
8士 12 . 3
30
.
1士8 . ” .
4 1
.
9士刀 . 3 * `
39
.
8士 14 。 3 . 中
50
.
3士 19 。 3 +
46
.
4士拙 . .D +
1 7 3
.
6士49 . 6
13 1
.
7士 23 . 6 .
184
.
5土 7 3 . 8
1 65
.
2士弓4 . 7
1 79
.
3士 6 1 . 4
1 7 1
,
6土5 0 . 弓
2 1
.
7土8 . 1
14
.
9士4 . 0 *
2 0
.
5士3 . 0
1 7
.
3土 6 . 1
2 3
. 弓士 4 . 8
26
.
4 土9 . 1
户O碑0j6
与H C比 , 干 P < 0 . 0 5
表 5 对去肾上腺大鼠角叉菜胶性足肿胀的影响
药物 铿举 滥诸 致炎后不同时间 ( h )足肿胀度 (又士 S D , nI l)
N S
W S A L K
F S人L K
3 0 0
2 6
0
.
3 5士 0 . 1 0
0
.
18 上 0 . 0 7二
0
.
2 士 0 . 08 ,
0
.
49 士 0 . 巧
0
.
2 7土 0 . 1*1 *
0
.
3 0士 0 . 1 3*
0
.
5弓士 0 . 16
0
.
3 3土 0 . 10二
0
.
42士 0 . 1 1 .
0
.
6D土 D. 2 1
0
。
4D土 0 . 1 5
0
.
4 9土 0 . 1 1
`
6
.
6
·
45
·
计 ( 入~ 2饱 n m ) 测光密度值 , 计算 P C E
含呈 。 N S组每克炎症组织中 F G E含量 为
25 0
.
3 土 5 4 . 4卜g , W S A L K ( 3 0 0 m g /
k g ) 组为 9 4 . 1士 3 7 . 3卜g ( P < 0 . 0 1 ) ,
F S A L K ( l s m g / k g ) 组为 22 0 . 2士 4 2 . 4
协g ( P < 0 . 0 5 ) , I n d o m o t h a e 主n ( 2 5
m g / k g )组为 7 8 . 6士 2 2 . 邻 g ( P < 0 . 0 0一) 。
表明W S A L K和 F S A L K 可 明显降低炎症
组织中 P G E含量 。
讨 论
实验性 炎症模型证实 , W S A L K 和
F S A L K对毛细血管通透性 、 炎性渗出 和
白细胞游走以及 肉芽组织增生均有 明显的
抑制作用 。
W S A L K和 F S A L K对大鼠胸腺 、 肾
上腺重量无明显影响 , 对切除双侧肾上腺
的大鼠仍有 抗炎作用 , 其抗炎剂量也不影
响大鼠血浆皮质醇浓度 , 提示其抗炎作用
不是通过垂体一一肾上腺皮质系统 , 本身
也不具有肾上腺皮质激素样作用 。 而 W S
A L K 与 F S A L K 可明显降低大鼠足 爪 炎
症组织中 P G E含量 , 故其抗炎机理 可 能
与抑制炎症中 P G E的合成或释放有 关 。
此外 , W S A L K 和 F S A L K对晚期肉芽组
织增生抑制作用较弱 , 提示其抗炎作用与
非街体类抗炎药相似 。
两药达到相 同抗炎强度时 , W S A L K
用量虽比 F S A L K大 1 1 . 1倍 , 但前者从原
药材中分离提取得率比后者远大于 1 倍 ,
故 W S A L K抗炎作用实际意义比 F S A L K
为优 。
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,
F S A L K ) w
e r e
d
e s e r i b e d a f t e r s e o f
W S A L K ( 1 5 0
, 3 0 0 m g / k g )
a n d F S A L K ( 1 3
, 2 6m g / k g )
.
T h e i n e r e a s e d
e a p i l l a r y p e r m e a b i l i t y i n a b d o nr i n a l e a v i t 了 a n d s k i n o f m i e e i n d u e e d
r e s p e e t i v e ly b y 0
.
7 % H A e a n d h i s t a nr i几 w e r e i n h i b i t e d a b v i o u s l v
.
W S A L K ( 7 5
, 1 5 0 , s o o m g / k g
,
i p ) a n d F S A L K ( 6
.
5
,
1 3
, 2 6m g / K g
,
i p )
m a r k e d l y i n h i b i t e d t h e e a r i n f l a m m a t i o n i n d u e e d b y x y l e n e i n m i e e
,
e a r r a g e e n i n 一 i n d u e e s s w e l l i n g o f t h e a n k l e i n n o r m a l o n a d r e n a l e e t o -
m i z e d r a t s
, a n d e a r r a g e e n i n 一 i n d u e e d p l e u r i s y i n r a t s
.
B o t h e o m -
p o u n d a l s o i几 h i b i t e d t h e g r a n u l o m a i n d u e e d b y e o t t o n p e l l e t
a f t e r s e o f W S A L K 3 0 0
, 6 0 0 m g / k g a
o d F S A L K 1 3
, 2 6 m g / k g q d
、
4合 、 中国拓理学通报 1 , 92年 第白卷 第 1期
P 6 A对大鼠肠系膜微循环和
离体腹主动脉条舒缩状态的影响
樊 贵 牛春雨 张 静
赵 明 “ 彭师奇 “ 蔡孟深 “
汤 健
( 张家口 医学院病理生理教研室
王秉瑞 3
厂张家口
唐朝枢 `
吴祥林 3
0 7 5 0 0 0 )
器人OUín丫父VQù令ènX又提要 在大鼠肠 系膜微循环和 离体腹主动脉条上观 察纤维蛋 白 ( 原 )
降解产物 P 6 A 的血管扩张作用。 结果发现 , P 6A 拮杭去甲肾上腺素和血 管
紧张素 I 收缩大鼠肠 系膜微血管的作用。 促进血管紧张素 I 所致微血 管内
血液流态改变的恢蔚。 在 内皮完整的血管 , P 6A 呈 剂量依赖性时 杭 去 甲
肾上腺素讨腹主动脉的收缩 效应 。 进一步证实了 P 6 A的血管扩 张 作 用 。
关键词 P 6 A 肠 系膜微循环 腹主动脉 去甲肾上腺 素 血 管 紧
张素 I
è一XUnO甘0八又况器ù
纤维蛋 白 ( 原 ) 降 解 产 物 P 6A
( p
“ p it d “ 6 A ) 为人纤维蛋白日链 N 端
的一个小肤片段 ( 4 3 ~ 4 7 ) 〔 ` 〕 。 近年研究
发现 , 它具有扩张冠状动脉 、 增加冠脉血
流量和抑制血栓形成的作用 , 有可能作为
一种新型血管再通剂应 用于临床 仁 “ ’ ” 〕 。本
工作在大鼠肠系膜微循环和离体腹主动脉
条上 , 观察 P 6 A对血管舒缩状态的影响 ,
以进一步认识 P 6 A 的作用机制 。
材料与方法
1 大鼠肠系膜微循环 观 察 2 50 ~
抽匕京医科大学心肺内分泌研究室 北京 1 0 0 083
叫匕京医科大学国家天然药物与仿生药物实验室
北京 1 0 08 3
”卫生部兰州生物制品研究所 兰州 7 3 0 0。。
3 0 0 9古W i s t a r大 鼠 , 实 验 前 禁 食 9 ~
1 2 h
, 自由饮水 。 1 % 戊巴比妥钠 ( 5 0m g
/ k g
,
i m ) 麻醉 , 将下段回肠系 膜外置并
铺展于观察台上 , 37 ℃ 的 K r “ b “ 一 H “ sn “ -
1e i t( K
一
H ) 液经恒温微量蠕动泵灌流 ,
速度为 l m l / m in , 用冷光源加光导 纤 维
作透射光源 , 通过微循环显微 电 视 放 大
4 0 倍观察 , 录相记录分析 。 微循 环稳 定
半小时后 , 随机分为正常微循 环 加 6P A
( 浓度分别为 1 0一 4 , Z x i o一 4 , 1 0 一 ” m o l /
L )
、 组织胺 (上海第十制药 厂 )加 P 6 A 、
5 一经色胺 ( 5一 H T , A l d r i e h C h e m i c a l
C o L t d) 加 P 6 A 、 去甲肾腺 上素 ( N E ,
天津市和平制药厂 ) 加 P 6A 及血管张 紧素
I ( A 互 , S i g m a C o ) 加 P 6A 组 , 每 组
x 7 d
.
B o t h e o m p o u n d d e e r e a s e d t h e e o n t e n t o f P G E i n e x u d a t e f o r m -
e d a f t e r i n j e e t i n g e a r r a g e e n i n i n t o t h e h i n d p a w o f r a t s
.
T h e s e r e -
s u l t s s u g g e s t t h a t b o t h e o m p o u n d s p a s s e s s e s t h e a n t i一 i n f l a m m a t o r y
a e t i v i t y a n d t h e i r a e t i o n s m i g h t b e r e l a t i e d t o t h e i r i n h i b i t i n g t h e
s y n t h e s i s o r r e l a s e o f p r o 一 s t a g za n d i n E
.
W s A L K T z 9
.
3 5 , F s A L K
T 1 4
.
5 0
.
K e y w o r d s
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T o t a l a l k a l o i d o f L e o n t i e e K i a g n a n e n s i s : A n t i一 i n -
f l a m m a t o r y e f f e e t