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濒危植物缘毛太行花组培苗的生根培养与驯化移栽



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短。本试验结果证实其胚性感受态的存在,只有当胚发育为
鱼雷期至子叶期时才有少量的不定胚发生,此时七月酥和巴
梨不定胚发生率仅为 4. 20%和 3. 72%。
2. 3 梨子叶胚不定器官再生过程
谢花后 90 d的子叶胚培养观察发现,培养 3 d 后子叶胚
由白色变为乳黄色,6 d后开始隆起肿胀,并在子叶近轴端开
始产生少量白色愈伤组织。7 d,子叶近轴端上开始出现淡绿
色的单芽或丛芽点,15 d 左右可明显观察到不定芽点,20 d
时不定芽点增加,30 d 前后可观察到大量明显的不定芽产
生,不定芽大部分可以从子叶上直接再生,少部分经愈伤组织
形成。在相同的培养条件下不定胚的发生时期较不定芽发生
晚,子叶接种培养 25 d 后肉眼可以看见晶莹透明的不定胚。
不定胚的发生数量较少,一般不定胚长至子叶期便停止发育,
少部分可以发育为成熟的植株,不定胚的发生都是从子叶上
直接发生的,没有经愈伤途径发生的。
3 讨论
外植体的遗传因素、生理学年龄、极性及取材部位等是影
响形态建成的重要因素[3]。处于不同发育时期的胚,都有一
定的愈伤组织形成能力,但以谢花后 45 d的胚愈伤组织形成
能力最高,其可能原因是胚由早期的异养阶段逐渐转变为自
养阶段的过程,其内部发生了一系列生理生化变化,不同胚龄
的胚内蛋白质、脂肪、RNA、DNA、可溶性糖、氨基酸及一些酶
活性存在差异,特别是胚内内源激素水平的变化,如生长素、
细胞分裂素、赤霉素等也同样随着胚的发育进行着合成或代
谢,从而调节胚的生长和发育。内部环境的变化,使得处于不
同发育阶段的胚对外源激素或培养基的反应不同,从而导致
脱分化难易程度也不相同。胚只有发育至子叶期( 谢花后
60 d) 才有一定的不定芽发生,且不定芽的发生率随着胚的成
熟也随之增加; 而不定胚的发生时间极短,这主要是胚性感受
态的存在。在黑核桃中也发现授粉 6 ~ 7 周后的幼胚体胚发
生频率最高,8 周以后幼胚体胚发生能力下降[4]。
参考文献:
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研究现状[J]. 河南林业科技,2004( 2) : 7 - 10.
[2]张 蕾,韩素英,张守攻,等. 植物体细胞胚胎发生及其相关应答
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[3]黄学林,李莜菊. 高等植物组织离体培养的形态建成及其调控
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[4]汤浩茹,王永清,任正隆. 核桃体细胞胚发生与转基因研究进展
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王兰明,朱美霞,韩改英,等. 濒危植物缘毛太行花组培苗的生根培养与驯化移栽[J]. 江苏农业科学,2012,40( 7) : 64 - 65.
濒危植物缘毛太行花组培苗的生根培养与驯化移栽
王兰明1,朱美霞1,韩改英1,王彦军2
( 1.河北工程大学农学院,河北邯郸 056021; 2.河北省武安市林业局,河北武安 056300)
摘要: 将缘毛太行花的无根组培苗接种在 9 种不同植物生长激素配比的生根培养基上,结果在添加0. 2 mg /L
IBA的 1 /2 MS培养基上缘毛太行花组培苗生根率最高,可达 93. 3%。生根培养 30 d后敞口炼苗 3 d,而后移栽至不
同配比的基质中,从中筛选出成活率较高的移栽基质,即蛭石,其移栽成活率为 76. 7%。本研究为缘毛太行花的扩繁
和工厂化育苗奠定了一定的基础。
关键词: 缘毛太行花; 组培苗; 生根培养; 驯化; 移栽
中图分类号: S580. 4 文献标志码: A 文章编号: 1002 - 1302( 2012) 07 - 0064 - 02
收稿日期: 2011 - 11 - 12
基金项目: 河北省邯郸市科学技术研究与发展计划 ( 编号:
1022101058 - 5) 。
作者简介:王兰明( 1964—) ,女,河北深州人,硕士,教授,主要从事观
赏植物方面的教学与科研工作。E - mail: wanglanming198 @
126. com。
缘毛太行花 ( Taihangia rupestris var. ciliata ) 是蔷薇科
( Rosaceae) 太行花属太行花的变种[1],是一种野生多年生草
本植物,主要分布于河北省武安市西部山区海拔 1 000 m 及
以上的悬崖峭壁上。缘毛太行花因其分布区狭小,残存量极
少,属于稀有、濒危植物,被列为我国首批二级保护植物[2]。
它早春开花,花朵稠密、花色洁白,极具观赏价值,又因富含黄
酮类成分,药用价值也很高[1]。本试验对缘毛太行花组培苗
的生根培养与驯化栽培进行研究,旨在为缘毛太行花的扩繁
和工厂化育苗奠定基础,并为保护及合理开发利用这一濒危
植物提供一定的理论依据。
1 材料与方法
1. 1 试验材料
2009 年 6 月,河北工程大学分子生物实验室研究人员于
武安市西部山上采集到了缘毛太行花的种子,并以种子为外
植体进行了组织培养。本试验所用的缘毛太行花无根组培苗
就源于该实验室。
1. 2 试验方法
将缘毛太行花无根组培苗接种在以 1 /2MS 培养基为基
本培养基并添加不同浓度 6 - BA、2,4 - D、IBA 外源激素的 9
种培养基上,激素种类及含量见表 1。每处理接种 40 株,3 次
—46— 江苏农业科学 2012 年第 40 卷第 7 期
DOI:10.15889/j.issn.1002-1302.2012.07.122
重复。培养温度 ( 17 ± 1 ) ℃,光照强度1 600 lx,光照时间
12 h /d。当根长到约 1 cm时,统计生根苗数。
驯化移栽基质的配制方法有 3 种: ( 1) 腐熟的粪土 2 份、
园土 1 份、炉灰面和等量的河沙 1 份、腐熟的芝麻酱渣面 1
份,混匀后使用; ( 2) 蛭石 1 份、园土 1 份,混合均匀; ( 3) 全部
用蛭石。将已生根的缘毛太行花敞口炼苗 3 d,然后取出用自
来水冲去琼脂,栽种到上述 3 种培养基质上。每种处理栽种
30 株,栽植后浇透水( 自来水) ,以后每隔 7 d 施用 1 次营养
液,30 d后统计成活率。
表 1 添加不同种类、不同配比激素培养基生根情况
激素种类 含量( mg /L)
接种无根组
培苗数( 株)
生根苗数
( 株)
生根率
( % )
2,4 - D 0. 1 40 × 3 72 60. 0
2,4 - D 0. 2 40 × 3 96 80. 0
2,4 - D 0. 4 40 × 3 100 83. 3
6 - BA 0. 1 40 × 3 6 5. 0
6 - BA 0. 2 40 × 3 12 10. 0
6 - BA 0. 4 40 × 3 4 3. 3
IBA 0. 1 40 × 3 96 80. 0
IBA 0. 2 40 × 3 112 93. 3
IBA 0. 4 40 × 3 108 90. 0
注:以上 9 种培养基均附加 3%蔗糖、0. 5%琼脂,pH 值 5. 8 ~
6. 0,并在 121 ℃下灭菌 15 min。
2 结果与分析
2. 1 生根培养
以 1 /2MS培养基为基本培养基,添加不同的外源植物生
长激素,筛选最有利于缘毛太行花组培苗生根的培养基,结果
见表 1。添加 0. 2 mg /L IBA 的 1 /2MS 培养基上生根苗数为
112,生根率为 93. 3%,是 9 种处理中生根率最高的 1 种;其次
为添加 0. 4 mg /L IBA 的 1 /2MS 培养基,生根苗数为 108,生
根率为 90. 0%。因此,添加 0. 2 mg /L IBA 的 1 /2MS 培养基
最适合缘毛太行花组培苗生根,生根状况见图 1。
2. 2 驯化移栽
生根后的缘毛太行花经 3 d 的敞口炼苗后,移栽到不同
配比的基质中,最初 1 周内每天给小苗洒水,之后 2 ~ 3 d浇 1
次水,7 d浇 1 次营养液,满 30 d 时记录移栽成活率,结果见
表 2。3 种不同配比基质移栽成活率分别为 30. 0%、43. 3%、
76. 7%,以蛭石为基质移栽成活率最高。移栽苗生长状况见
图 2。
表 2 不同配比基质上移栽成活率
基质配比 栽种生根苗数 成活苗数 成活率( % )
( 1) 30 9 30. 0
( 2) 30 12 43. 3
( 3) 30 23 76. 7
3 讨论
3. 1 生根培养
高浓度生长素和低浓度细胞分裂素的组合有利于形成壮
苗,易于生根,这在本试验中亦得到验证,如本试验中最有利
于缘毛太行花组培苗生根的培养基配方是 1 /2MS + 0. 2 mg /L
IBA。此外,生根培养基本培养基为 1 /2MS培养基,使培养基
中无机盐和蔗糖浓度减少一半,有利于刺激小植株自身进行
光合作用制造有机物,由异养型向自养型过渡。因此,缘毛太
行花能较好地生根,对水分胁迫和疾病的抗性也会有所增强,
植株可能表现出生长迟缓。但实践证明,这样的幼苗,要比在
低光强条件下的较绿较高的幼苗移栽成活率高。
3. 2 驯化移栽
对缘毛太行花组培苗移栽前进行 3 d 的开瓶炼苗,可使
组培苗叶片气孔的关闭功能得到明显恢复。缘毛太行花组培
苗经炼苗移栽在蛭石支撑的基质中,即使移栽后不喷雾、不洒
水亦不覆膜,成活率也可达到 76. 7%。本试验方案可在 5 ~ 6
个月内形成大量完整植株,为濒危植物缘毛太行花的扩繁和
工厂化育苗创造了良好的条件。
参考文献:
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展望[J]. 基因组学与应用生物学,2011,30: 1207 - 1210.
[2]沈世华,陆文梁,王伏雄. 太行花生殖生物学研究: Ⅰ.太行花生
境的分析[J]. 生物多样性,1994,2( 4) : 210 - 212.
—56—王兰明等:濒危植物缘毛太行花组培苗的生根培养与驯化移栽