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光果翠雀的止血镇痛作用



全 文 :[基金项目]军队“十一五”医药重大专项课题(编号:06D005-4) [作者简介]费改顺,男,硕士,副主任药师,电话:0931-8994670,E-mail:
Lgaishunfei@public.lz.gs.cn
光果翠雀的止血镇痛作用
费改顺,贾正平,乔树洲,李茂星,盛杰 (兰州军区兰州总医院,甘肃 兰州730050)
[摘要] 目的:研究光果翠雀的止血、镇痛作用。方法:采用兔耳动脉切割止血法及后肢肌肉切割止血法,以云南白药为阳性
对照药,用光果翠雀根粉及其水提物、醇提物外敷出血部位进行止血作用研究;分别采用热板法和醋酸扭体法,以对乙酰氨基
酚为阳性对照药研究光果翠雀水提物、醇提物的镇痛作用。结果:光果翠雀粉对兔耳动脉切割后及肌肉切割的止血作用优于
云南白药(P<0.05),其水提物、醇提物也有一定的止血作用;水提物、醇提物能显著提高小鼠的热板痛阈,对醋酸引起的小鼠
扭体反应具有显著的抑制作用,其镇痛效果与对乙酰氨基酚相当。结论:光果翠雀具有良好的止血镇痛作用。
[关键词] 光果翠雀;止血镇痛作用;光果翠雀提取物
[中图分类号]R285.6  [文献标识码]A  [文章编号]1001-5213(2010)11-0898-03
Experimental studies on haemostasis and analgesic effect of Delphinium grandiflorum L.var.
leiocarpum
FEI Gai-shun1,JIA Zheng-ping,QIAO Shu-zhou,LI Mao-xing,SHENG Jie(Lanzhou General Hospital,
Lanzhou Command,Gansu Lanzhou 730050,China)
ABSTRACT:OBJECTIVE To investigate the haemostasis and analgesic effect of Delphinium grandiflorumL.var.leiocarpum
(DGVL).METHODS The bleeding exerimental animal models were made by incisions of arteriae auricularis and hind limbs
muscles in rabbits.And then spread the power of Delphinium grandiflorum L.var.leiocarpum,its extracts and Yunnan-
baiyao respectively on the bleeding parts,to observe their haemostasis effects writh.Yunnanbaiyao was taken as the positive
medicine in this test.In analgesic mice model,hot-plate procedure and acetic acid writhing method were used with paracetamol
as positive medicine to study the analgesic effect of aqueous extract and alcohol extract fromDelphinium grandiflorumL.var.
leiocarpum.RESULTS The haemostasis effect of the power of Delphinium grandiflorumL.var.leiocarpumwas better than
that of Yunnanbaiyao(P<0.05).And its aqueous extract and alcohol extract have some haemostasis effect.Furthermore they
can raise the pain threshold in mice remarkably.CONCLUSION Delphinium grandiflorum L.var.leiocarpumpossesses
strong haemostasis and analgesic effect.
KEY WORDS:Delphinium grandiflorumL.var.leiocarpum;haemostasis and analgesic effect;extracts of Delphinium gran-
diflorumL var Leiocarpum
  光果翠雀(Delphinium grandiflorum L.var.
leiocarpum WT.Wang)为毛茛科翠雀属植物,主要
分布于山西、宁夏、甘肃、陕西等地海拔680~1800
m的山坡、草地、固定沙丘。其地上部分民间用于
风热牙疼、疥癣、头虱等;其根用于跌打损伤、止血
止痛。光果翠雀根含牛扁碱,甲基牛扁碱,德尔色
明甲、德拉瓦印甲等二萜生物碱及槲皮素、山奈
酚、异鼠李素等黄酮类化合物。有关其药理学性
质的研究尚未见文献报道。本实验采用兔耳动脉
切割止血法及肌肉切割止血法对光果翠雀根原粉
及其水提物、醇提物的止血作用进行研究;同时采
用热板法和醋酸扭体法研究光果翠雀水提物、醇
提物的镇痛作用,以期为该植物的进一步开发研
究提供依据。
1 材料
光果翠雀于2006年6月采自陕西靖边县,经兰
州大学赵汝能教授鉴定为毛茛科翠雀属植物光果翠
雀。其根晒干后粉碎,过6号筛,为白色粉性粉末,
味苦气微,具有较强的吸湿性,故密闭保存。对乙酰
氨基酚(山东新华制药有限公司,批号9602013);云
南白药(云南白药股份有限公司,批号20060803);
戊巴比妥钠 (河北通县育才精细化工厂,批号
950427);光果翠雀水提物及光果翠雀醇提物由本实
验室自制;新西兰大白兔,体质量(2.5±0.2)kg(兰
州生物制品研究所,动物实验科适应性饲养5 d,动
物合格证号:甘医动字20-012号),BalB/C小鼠,体
质量(20±2)g(兰州军区总医院动物实验科,动物合
格证号:甘医动字22-005号)。
·898· 中国医院药学杂志2010年第30卷第11期Chin Hosp Pharm J,2010 Jun,Vol 30,No.11
2 方法
2.1 光果翠雀水提物的制备 称取光果翠雀根粉
50 g,加水200 mL回流提取3次,每次1 h。提取液
静置、过滤、浓缩、真空干燥,研细,过6号筛密闭保
存,用于止血实验。用于镇痛实验时加生理盐水配
制成相当于原药材50 g·L-1的溶液。
2.2 光果翠雀醇提物的制备 制备时称取光果翠雀根
粉50 g,回流溶剂为200 mL70%乙醇,方法同“2.1”项。
2.3 兔耳中动脉创伤出血试验 新西兰白兔16
只,随机分为2组。每只以3%戊巴比妥钠静脉麻
醉后,于中耳动脉距较粗分支约3 cm处切断动脉血
管,血液流出后立即外敷光果翠雀根粉或云南白药
0.5 g并施以200 g压力,每30 s观察一次,除去压
力120 s不出血即为止血,记录止血所需时间。
2.4 兔肌肉切割伤出血试验 新西兰白兔32只,
随机分为4组:云南白药组、光果翠雀粉组、光果翠
雀水提物组及光果翠雀醇提物组。实验时,每只兔
子以3%戊巴比妥钠静脉麻醉后,右后肢肌肉发达
处去毛,纵切皮肤并切断后肢静脉,切口长3 cm,深
约4 mm,待血液流出后,切口分别敷实验药物0.5
g,加盖纱布并施以200 g压力,每30 s观察一次,除
去压力120 s不出血即为止血。
2.5 热板法镇痛试验[1] 健康小白鼠,♂,体质量
(19±2)g,热板法(55℃)测定痛阈值2次,挑选平
均痛阈值不超过30 s的60只为试验对象。随机分
为6组,每组10只,分别设为生理盐水组、对乙酰氨
基酚组(0.2 g·kg-1)、光果翠雀水提取物高剂量组
(相当于原植物0.5 g·kg-1)、光果翠雀水提取物低
剂量组(相当于原植物0.25 g·kg-1)、醇提物高剂量
组(相当于原植物0.5 g·kg-1)、醇提物低剂量组(相
当于原植物0.25 g·kg-1)。除生理盐水组外,其余
均采用腹腔注射给药,剂量为0.1 mL·(10g)-1,生
理盐水组给相应体积的生理盐水。分别于给药0.5,
1 h后用热板法(55℃)测定痛阈。
2.6 醋酸扭体法镇痛试验[1] 健康小白鼠60只,
体质量(20±2)g,随机分为6组,每组10只,♀♂各
半,空白对照组(给生理盐水)、对乙酰氨基酚组(0.2
g·kg-1)、光果翠雀水提取物、醇提物高剂量组(相当
于原植物0.5 g·kg-1)、光果翠雀水提取物、醇提物
低剂量组(相当于原植物0.25 g·kg-1)。除空白对
照组外,其余均采用腹腔注射给药,剂量为0.1 mL·
(10g)-1,30 min后腹腔注射0.6%醋酸0.2 mL/只,
观察20 min内各组动物由醋酸引起的扭体次数。
空白对照组腹腔注射相应体积的生理盐水0.1 mL·
(10 g)-1。观察扭体反应,记录扭体次数,计算扭体
抑制率。抑制率=(空白组扭体次数-给药组扭体
次数)/空白组扭体次数×100%。
2.7 数据处理 采用SPSS13.0统计分析软件进
行统计分析,组间和自身对照t检验。
3 结果
3.1 光果翠雀对兔耳动脉创伤出血的作用 以云
南白药为阳性对照药,通过切断兔动脉对其进行研
究,光果翠雀局部外用对创伤所导致的动脉出血具
有良好的止血作用,其止血效果优于云南白药(因动
脉出血量多速度快故不设空白),结果见表1。
表1 光果翠雀对兔耳动脉创伤出血时间的影响(珔x±s,n=8)
Tab1 Effects of DGVL on haemostasis time in incisions of
rabbit arteriae auricularis(珚x±s,n=8)
组别 给药剂量/g 止血时间/s
云南白药组 0.5  158.6±78.8
光果翠雀根粉组 0.5  77.1±29.3a
注:与云南白药组相比较,aP<0.05
3.2 光果翠雀及其不同溶剂提取物对兔肌肉切割伤
止血时间的影响 为了进一步研究其止血作用存在
的部位及其作用的强弱,我们对其进行了水提和醇
提,并将提取物用于肌肉切割伤出血部位对其止血作
用进行研究。结果发现,光果翠雀止血效果显著,平
均止血时间为86 s,云南白药为110 s,明显优于云南
白药,但差异无显著性(P>0.05)。水提物和醇提物
都具有一定的止血时间作用,但其止血作用均不如光
果翠雀粉。提取过程中发现,醇提物含糖量较高不易
干燥,味先甜后极苦,我们早期的光谱分析研究发现
其含蔗糖较多,吸湿性较强,极易结块,不易分散在创
伤表面,可能导致止血效果较差。结果见表2。
表2 光果翠雀及其提取物对兔后肢肌肉切割伤止血时间
的影响(珚x±s,n=8)
Tab 2 Effects of DGVL extracts on haemostasis time in in-
cisions of muscles of rabbits posterior limbs(珚x±s,n=8)
组别 给药剂量/g 止血时间/s
云南白药组 0.5  110.57±48.7
光果翠雀粉组 0.5  86±29.8
光果翠雀水提物组 0.5  142±38.8a
光果翠雀醇提物组 0.5  150.0±72.3a
注:与光果翠雀粉组相比较,aP<0.05
3.3 光果翠雀水提物、醇提物对热板法测定小鼠痛
阈值的影响 结果见表3。
表3中的结果表明,光果翠雀水提物、醇提物0.5,
0.25 g·kg-1腹腔给药对小鼠痛阈有明显延长作用。
3.4 光果翠雀水提物、醇提物对醋酸扭体法测定小
鼠痛阈值的影响 结果见表4。
由表4可见,与对照组比较,对乙酰氨基酚组、
光果翠雀水提物和醇提取物高、低剂量组均能显著
抑制醋酸引起的小鼠扭体次数(P<0.01)。
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表3 光果翠雀提取物对热板法测定小鼠痛阈值的影响(珚x
±s,n=10)
Tab3 Effects of extracts of DGVL on pain threshold in
mice by hot-plate procedure(珚x±s,n=10)
组别
给药剂量
/g·kg-1
给药前
痛阈/s
给药后不同时间痛阈/s
0.5 h  1 h
生理盐水组 - 21.6±3.3  20.7±5.5  19.3±3.5
对乙酰氨基酚组 0.2  19.4±4.1  26.0±6.5a 23.0±5.5
光果翠雀水提取物组 0.5  17.4±4.7  23.9±5.6b  24.0±5.1b
0.25  17.1±2.9  23.7±5.5b  29.2±7.5b
光果翠雀醇提取物组 0.5  19.2±2.7  25.9±4.7b  24.5±4.1b
0.25  17.9±4.9  23.9±5.8b  22.8±6.5b
注:与给药前相比较,aP<0.05,b P<0.01
表4 光果翠雀提取物对醋酸扭体法测定小鼠痛阈值的影
响(珚x±s,n=10)
Tab 4 Effects of DGVL on pain threshold in mice by acetic
acid writhing method(珚x±s,n=10)
组别
给药剂量
/g·kg-1
扭体次数 抑制率/%
空白对照组 - 34.8±21.4  0   
对乙酰氨基酚组 0.2  7.5±7.6a 76.1±30.4a
光果翠雀水提取物组 0.5  1.2±1.9a 96.3±5.9a
0.25  2.8±4.4a 88.5±21.2a
光果翠雀醇提取物组 0.5  2.4±3.8a 79.0±34.0a
0.25  1.5±2.2a 92.8±11.8a
注:与对照组比较,aP<0.01
4 讨论
光果翠雀在陕北民间用于治疗外伤出血及陈旧
性伤口溃烂,具有良好的治疗作用,其药理学性质未
见文献报道。关于翠雀属植物化学成分研究报道较
多。川西翠雀花、峨嵋翠雀花等基本都含有C-19
二萜类生物碱如牛扁碱、甲基牛扁碱、氨茴香甲基牛
扁碱、德尔色明甲、德拉瓦印等[2]。本研究发现光果
翠雀具有良好的止血镇痛作用,与文献报道同属植
物翠雀花的作用相似[3]。就止血作用而言,光果翠
雀根粉较其提取物作用好。其水提物、醇提物吸湿
性较强,特别是醇提物极易吸水,这就导致其在出血
部位容易成团不能较好铺展,这可能是其止血作用
较差的原因之一。本类植物多有毒性,有关其毒理
学性质及止血镇痛的机制尚需作进一步研究。本研
究对于光果翠雀的药用价值的开发研究具有一定的
指导意义,对于从中草药中寻找高效低毒的止血镇
痛天然药物具有一定的参考价值。
(志谢:陕西老中医乔生润提供研究用药材。)
参考文献:
[1] 徐淑云,卞如濂,陈修.药理实验方法学 [M].2版.北京:人民
卫生出版社,2001:693-701.
[2] 郑曦玫,王锋鹏.峨嵋翠雀花中生物碱成分的研究[J].天然产
物研究与开发,2002,14(1):13.
[3] Zafara S,Ahmada MA,Siddiquib TA.Effect of roots aqueous
extract of delphinium denudatum on morphine-induced toler-
ance in mice[J].Fitoterapia,2002,73(7-8):553-556.
[收稿日期]2009-03-27
[基金项目]暨南大学青年基金项目(编号:51208021);广东省医学科研基金项目(编号:B2009127) [作者简介]巫剑峰,男,硕士研究生,电
话020-85223784,E-mail:jeffwu86@qq.com [通讯作者]李沙,女,副教授,电话:020-85223784,E-mail:slfly@163.com
丹参提取物固体分散体的制备与溶出特性
巫剑峰1,邱佩斯1,陈彦雯1,陈海南1,李沙1,2 (1.暨南大学药学院,广东 广州510632;2.暨南大学中药药效物质基础
及创新药物研究广东省高校重点实验室,广东 广州510632)
[摘要] 目的:制备丹参提取物固体分散体,考察其中丹参酮ⅡA的溶出效果。方法:选择不同种类的聚乙二醇(PEG)与聚乙
烯吡咯烷酮(PVP K30)载体材料,分别采用熔融法和溶剂法制备丹参提取物的固体分散体。用高效液相色谱法对固体分散
体中及溶出液中所含丹参酮ⅡA进行测定,色谱柱为Kromasil C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇-水(85∶15);流
速为1.0mL·min-1;检测波长为270 nm。结果:与丹参提取物相比,以PEG和PVP所制备的丹参提取物固体分散体中丹参
酮ⅡA的溶出度与溶出速度均明显增加,且有显著性差异(P<0.01或P<0.05)。其中以PEG2000∶PEG4000(3∶7)为载体材
料,药载比为1∶9所制备的固体分散体,其丹参酮ⅡA溶出度最优,60 min累积溶出百分率达87%,高出丹参提取物32%。结
论:采用PEG与PVP K30成功制备了丹参提取物固体分散体,其中丹参酮ⅡA的溶出较原料提取物有明显改善。采用固体
分散技术可为更有效地利用丹参提取物中脂溶性成分提供一种新的制剂手段。
[关键词] 丹参提取物固体分散体;丹参酮ⅡA;溶出特性
[中图分类号]R969.1  [文献标识码]A  [文章编号]1001-5213(2010)11-0900-06
Preparation and dissolution study of solid dispersions of Danshen extract
WU Jian-feng,QIU Pei-si,CHEN Yan-wen,CHEN Hai-nan,Li Sha(1.Colege of Pharmacy,Jinan University,
Guangdong Guangzhou 510632,China;2.Guangdong Province Key Laboratory of Pharmacodynamic Constituents of TCM and
New Drugs Research,Guangdong Guangzhou 510632,China)
ABSTRACT:OBJECTIVE To prepare solid dispersions of Danshen extract and to investigate their dissolution behaviour by u-
·009· 中国医院药学杂志2010年第30卷第11期Chin Hosp Pharm J,2010 Jun,Vol 30,No.11