全 文 ：［收稿日期］ 20151102(001)
［基金项目］ 广东省科技计划项目(2013B020311013);韶关市科技计划项目(2014CX /K288)
［通讯作者］ * 何小英，主管药师，从事医院药学工作，Tel:0751-2823976，E-mail:hexiaoying1007@ 163. com
芒毛苣苔药材质量标准
何小英1* ，黄艳萍2，唐丽丽3，庞斌1
(1. 翁源县人民医院，广东 翁源 512600;2. 广东食品药品职业学院，广州 510520;
3. 韶关市食品药品检验所，广东 韶关 512028)
［摘要］ 目的:建立芒毛苣苔药材的质量标准，为该药材质量控制提供依据。方法:参照《中国药典》(2015 年版)方法对
芒毛苣苔药材性状、显微、水分、灰分及醇溶性浸出物进行检测;以 5，7-二羟基-6，4-二甲氧基黄酮为对照品，分别采用 TLC和
HPLC进行定性鉴别和含量测定。结果:性状、显微鉴别和 TLC法鉴别具有专属性;芒毛苣苔药材的水分为 8. 9% ～ 11. 0%，总
灰分为 3. 9% ～ 7. 4%，醇溶性提取物为 11. 0% ～ 15. 9%;HPLC含量测定方法学结果表明 5，7-二羟基-6，4-二甲氧基黄酮进样
量在 0. 108 2 ～ 1. 082 μg具有良好的线性关系，r = 0. 999 9，平均回收率为 99. 7%，ＲSD 1. 1%，6 批样品含 5，7-二羟基-6，4-二
甲氧基黄酮在 0. 62% ～ 0. 88%。结论:建立的方法可用于芒毛苣苔药材的质量控制。
［关键词］ 芒毛苣苔;质量标准;薄层色谱法;高效液相色谱法;5，7-二羟基-6，4-二甲氧基黄酮
［中图分类号］ Ｒ284． 1 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1005-9903(2016)15-0073-05
［doi］ 10. 13422 / j． cnki． syfjx． 2016150073
Quality Spectificationg of Aeschynanthus bracteatus
HE Xiao-ying1* ，HUANG Yan-ping2，TANG Li-li3，PANG Bin1
(1. Wengyuan Peoples Hospital，Wengyuan 512600，China;
2. Guangdong Food and Drug Vocational College，Guangzhou 510520，China;
3. Shaoguan Institute for Food and Drug Control，Shaoguan 512028，China)
［Abstract］ Objective:To establish the quality standard of Aeschynanthus bracteatus，and provide
scrientific basis for its quality control． Method:Empirical and microscopic identification methods were adopted to
observe morphological characteristics，microscopic characteristics，miosture content，ash content and ethanol-
soluble extracts were determined by empirical method and referring to the method in Chinese Pharmacopoeia
(2015)． TLC and HPLC were used for qualitative identification and quantitative analysis of 5，7-dihydroxy-6，4-
methoxyfldvone in A． bracteatus． Ｒesult:The macroseopical identification，microscopic identification and TLC
method had the specificity． The sample size of 5，7-dihydroxy-6，4-methoxyfldvone was between 0. 108 2 μg to
1. 082 μg (r = 0. 999 9)with an average recovery rate of 99. 7% (ＲSD 1. 1%)． The content of 5，7-dihydroxy-
6，4-methoxyfldvone in 6 batches of samples was between 0. 62% to 0. 88% ． Moisture content in A． bracteatus
was between 8. 9% to 11. 0%;total ash was between 3. 9% to 7. 4%;ethanol-soluble extracts content was between
11. 0% to 15. 9% ． Conclusion:The established method can be used for quality control of Aeschynanthus
bracteatus．
［Key words］ Aeschynanthus bracteatus; quality standard; TLC; HPLC; 5， 7-dihydroxy-6，
4-methoxyfldvone
芒毛苣苔又名石榕、大叶榕藤、石壁风、牛奶树， 性平，味甘、淡［1-2］。产于西藏、云南、广西、广东、台
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湾、四川等地。生于山谷林中树上或溪边石上，海拔
300 ～ 1 300 米。在广东、广西民间广泛应用，治疗风
湿骨痛、跌打损伤、肾虚、慢性肝炎等［3］。芒毛苣苔
也是翁源县人民医院成方制剂骨脉康胶囊的主要药
材［4-6］。芒毛苣苔作为地方常用药材目前缺少质量
标准，难以控制其质量，为保证用药的有效性和安全
性，因此，有必要建立芒毛苣苔的质量标准，以期对
该药材进行质量控制。笔者对芒毛苣苔化学成分进
行预试验，表明含有黄酮类、三萜类等成分，并从中
分离鉴定出含量高的黄酮类成分 5，7-二羟基-6，4-
二甲氧基黄酮。本研究建立芒毛苣苔药材的质量标
准，为芒毛苣苔药材的质量控制和进一步深度开发
药用资源提供依据。
1 材料
BT25s型电子天平(北京赛多利斯仪器有限公
司)，1100Series型高效液相色谱仪(美国 Agilent，自
动进样器，四元泵，DAD 检测器)，AS5150BD-1 型超
声波清洗仪(天津奥特赛思斯仪器有限公司)，
WFH-20B型三用紫外分析仪(上海精科实业有限公
司)，DHG-9240A型电热恒温鼓风干燥箱(上海一恒
科技有限公司)，SX-4-10 型马弗炉(上海光学仪器
厂)，BH2 型系统生物显微镜，PD-2 型显微摄影数码
系统(日本 Olympus公司)。
6 批芒毛苣苔药材采集于不同产地，经中国科
学院华南植物园叶华谷研究员鉴定为苦苣苔科植物
芒毛苣苔 Aeschynanthus bracteatus 的地上部分，样品
收集信息见表 1;硅胶 GF254预制板(青岛谱科);5，
7-二羟基-6，4-二甲氧基黄酮对照品(自制，纯度 ＞
99. 0%);甲醇为色谱纯，水为超纯水，其他试剂均
为分析纯。
表 1 芒毛苣苔药材样品信息
Table 1 Specific information of Aeschynanthus bracteatus
No． 来源 收集时间 No． 来源 收集时间
1 广东翁源 2013-09 4 广东阳山 2014-07
2 广东新丰 2014-08 5 广东连州 2014-11
3 广西桂林 2015-07 6 广东翁源(市
售)
2015-01
2 方法与结果
2. 1 形状 本品茎呈圆柱形，有分枝，长短不一，直
径 0. 2 ～ 0. 8 cm。表面灰棕色，栓皮脱落处为棕褐
色，具纵皱纹，常具细小须根。质硬。断面中空，纤
维性，浅黄棕色。叶多皱缩，破碎，完整者展开后椭
圆形或狭倒披针形，边缘全缘，基部楔形，顶端渐尖，
侧脉纤细，不太明显。叶面暗绿色，叶背黄棕色。气
微，味微涩，见图 1。
2. 2 鉴别
2. 2. 1 显微鉴别 本品粉末棕色。草酸钙方晶、簇
晶存在于薄壁细胞中。导管为网纹导管，薄壁细胞
中含有淀粉粒。石细胞类圆形、长方形、分枝形和不
规则形，壁较厚或极厚，纹孔及孔沟明显，有的一面
菲薄，直径 22 ～ 52 μm。纤维浅黄色，长条形，壁薄，
散乱或成群，长 20 ～ 140 μm，直径 2. 0 ～ 5. 0 μm。
导管主要为网纹导管，多成群，直径 10 ～ 20 μm。气
孔为不定式。花粉粒淡黄色，呈球形或近球形，直径
约 20 μm，外壁表面，内含少量颗粒状物质。
2. 2. 2 薄层色谱鉴别 分别称取不同产地的药材
粉末各 0. 5 g置锥形瓶中，加甲醇 15 mL，超声处理
30 min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇 1 mL 使溶解，
作为供试品溶液。精密称取 5，7-二羟基-6，4-二甲
氧基黄酮对照品各适量，加甲醇制成每 1 g·L －1的溶
液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(2015 年版《中
国药典》一部)试验，分别吸取 5，7-二羟基-6，4-二
甲氧基黄酮对照品溶液及上述供试品溶液各 1 μL，
点于同一硅胶 GF254薄层板上，以三氯甲烷-甲醇
(10∶ 1)为展开剂，预饱和 15 min，展开，取出，晾干
后置紫外灯下(254 nm)检视。供试品色谱中在与
5，7-二羟基-6，4-二甲氧基黄酮对照品色谱相应位
置上，显相同颜色的斑点，见图 3。
2. 3 检查
2. 3. 1 水分的测定 取各产地芒毛苣苔粉末约 2
g，精密称定，按照 2015 年版《中国药典》(一部 附录
0832)水分测定法第一法进行测定，每批平行测定 3
份，结 果 分 别 为 8. 9%，8. 9%，9. 9%，9. 8%，
10. 9%，11. 0%。
2. 3. 2 总灰分的测定 取各产地芒毛苣苔粉末约
(过二号筛)2 g，精密称定，按照 2015 年版《中国药
典》(一部附录 2302)总灰分测定法测定，每批平行
测定 3 份，结果分别为 7. 0%，7. 4%，4. 4%，4. 7%，
3. 9%，4. 0%。
2. 4 浸出物的测定 取各产地芒毛苣苔粉末约 4
g，精密称定，以稀乙醇作溶剂，按照 2015 年版《中国
药典》(一部 附录 2202)醇溶性浸出物测定法项下
的冷浸法测定，每批平行测定 3 份，结果分别为
11. 0%，12. 6%，18. 4%，16. 3%，14. 5%，15. 9%。
2. 5 含量测定
2. 5. 1 供试品溶液的制备 取不同产地芒毛苣苔
药材粉末约 0. 5 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加甲
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图 1 芒毛苣苔药材
Fig． 1 Grude drug material Aeschynanthus bracteatus
1. 草酸钙方晶;2. 草酸钙簇晶;3. 薄壁细胞;4 ～ 8. 石细胞;9. 纤维;
10. 导管;11. 气孔;12. 花粉粒
图 2 芒毛苣苔粉末显微
Fig． 2 Micrograph of Aeschynanthus bracteatus
醇 30 mL，称定质量，超声处理(功率 250 W，频率 33
kHz)30 min，放冷，再次称定质量，用甲醇补足减失
的质量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
2. 5. 2 对照品溶液的制备 取 5，7-二羟基-6，4-二
甲氧基黄酮对照品适量，精密称定，置 100 mL 量瓶
中，加甲醇溶解并稀释至刻度，得质量浓度 54. 1
1. 5，7-二羟基-6，4-二甲氧基黄酮对照品;2 ～ 7. 样品药材
图 3 芒毛苣苔药材薄层色谱 (254 nm紫外)
Fig． 3 TLC chromatogram of Aeschynanthus bracteatus (by
ultraviolet light 254 nm)
g·L －1的 5，7-二羟基-6，4-二甲氧基黄酮对照品
溶液。
2. 5. 3 色谱条件及系统适用性试验 采用
Kromasil C18色谱柱(4. 6 mm ×250 mm，5 μm);以甲
醇-0. 1%乙酸(75∶ 25)为流动相，检测波长 287 nm，
流速 1. 0 mL·min －1，进样量 10 μL，精密吸取 5，7-二
羟基-6，4-二甲氧基黄酮对照品溶液、供试品溶液按
上述色谱条件进行测定，结果分离度均 ＞ 1. 5，其他
成分不干扰，按 5，7-二羟基-6，4-二甲氧基黄酮峰计
算理论塔板数不低于 6 000。见图 4。
A．对照品;B．供试品;1. 5，7-二羟基-6，4-二甲氧基黄酮
图 4 芒毛苣苔药材 HPLC
Fig． 4 HPLC chromatograms of Aeschynanthus bracteatus
2. 5. 4 线性关系考察 分别自动进样对照品溶液
2，5，10，15，20 μL，按 2. 1 项下色谱条件测定，以峰
面积(Y)为对进样量(X)进行回归，得标准曲线方
程为 Y = 65 324. 2X + 31. 6(r = 0. 999 8)。结果表明
5，7-二羟基-6，4-二甲氧基黄酮进样量在 0. 108 2 ～
1. 082 μg与峰面积成良好线形关系。
2. 5. 5 精密度试验 取 5，7-二羟基-6，4-二甲氧基
黄酮对照品溶液适量，按上述色谱条件重复进样 6
次，测定峰面积。结果峰面积的 ＲSD 0. 4%，表明仪
器精密度良好。
2. 5. 6 稳定性考察 取同一份供试品(样品 1)溶
液适量，在室温下放置 0，2，4，6，8，10 h，按上述色谱
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条件测定，记录色谱图。结果峰面积的 ＲSD 0. 6%，
表明供试品溶液在 10 h内稳定。
2. 5. 7 重复性试验 取同一批号的芒毛苣苔样品
约 0. 5 g，共 6 份，精密称定，分别按 2. 3. 1 项下方法
制成供试品溶液，按上述色谱条件测定。结果 5，7-
二羟基-6，4-二甲氧基黄酮质量分数的 ＲSD 0. 6%，
表明方法重复性良好。
2. 5. 8 加样回收率试验 精密称取芒毛苣苔药材
样品 1 (含 5，7-二羟基-6，4-二甲氧基黄酮为
0. 62%)0. 25 g 共 9 份，分别置具塞锥形瓶中，精密
加入上述对照品溶液适量，按 2. 5. 1 项下方法制备
供试品溶液，按上述 2. 5. 3 项下色谱条件测定，计回
收率。结果，5，7-二羟基-6，4-二甲氧基黄酮加样回
收率为 99. 7%，ＲSD 1. 1%，见表 1。
表 2 5，7-二羟基-6，4-二甲氧基黄酮的加样回收率
Table 2 Ｒesults of add sample recovery test of 5，7-dihydroxy-6，4-
methoxyfldvone
称样量
/ g
样品中量
/mg
测得量
/mg
回收率
/%
平均值
/%
ＲSD
/%
0. 250 6 1. 554 3. 067 99. 86
0. 250 1 1. 551 3. 061 99. 72
0. 251 1 1. 557 3. 072 100. 01
0. 250 2 1. 551 3. 055 99. 27
0. 251 4 1. 559 3. 032 98. 86 99. 7 1. 1
0. 251 6 1. 560 3. 071 99. 74
0. 251 8 1. 561 3. 077 100. 07
0. 250 9 1. 556 3. 062 99. 61
0. 250 7 1. 554 3. 058 99. 27
注:加入量均为 1. 515 mg。
2. 5. 9 样品的含量测定 取 6 批不同产地的芒毛
苣苔药材粉末，按 2. 5. 1 项下的方法制备供试品溶
液，按 2. 5. 3 项下色谱条件测定，按外标法计算 5，7-
二羟基-6，4-二甲氧基黄酮质量分数在 0. 62% ～
0. 88%，暂拟定本品 5，4-二羟基-7-甲氧基二氢黄酮
不得少于 0. 50%。结果见表 3。
表 3 不同产地芒毛苣苔中 5，7-二羟基-6，4-二甲氧基黄酮质量
分数
Table 3 Contents of 5，7-dihydroxy-6，4-methoxyfldvone in
Aeschynanthus bracteatus in different area %
No． 来源
5，7-二羟基-6，
4-二甲氧
基黄酮
No． 来源
5，7-二羟基-6，
4-二甲氧
基黄酮
1 广东翁源 0. 62 4 广东阳山 0. 88
2 广东新丰 0. 71 5 广东连州 0. 79
3 广西桂林 0. 78 6 广东翁源(市售) 0. 65
3 讨论
芒毛苣苔作为民族药材和广东、广西地区的习
用药材已经有悠久的历史了，目前只有《全国中草
药汇编》收载来源为 Aeschynanthus bracteatus 全株或
根、茎、叶入药，鉴于目前尚无芒毛苣苔的化学成分
和药理、药效等生物活性的报道，有必要建立其质量
标准以保证临床用药安全、有效。
测定 6 批样品水分，结果为 8. 9% ～ 11. 0%，最
高值为 11. 0%，以最高测定值的 120% 设限，为
13. 2%，暂规定本品水分不得过 14. 0%。测定 6 批
样品总灰分，结果为 3. 9% ～ 7. 4%，最高测定值为
7. 4%，以最高测定值的 120%设限，为 8. 9%，暂规
定本品总灰分不得过 9. 0%。6 批样品醇溶性浸出
物 11. 0% ～ 18. 4%，平均值 13. 1%，暂规定本品浸
出物含量不少于 10%。
在文献报道［7-9］和笔者在前期对芒毛苣苔化学
成分研究中发现该药材主要化学成分为黄酮类和三
萜类，以 5，7-二羟基-6，4-二甲氧基黄酮成分含量较
高，其结构特征与芹菜素和木犀草素相近。研究表
明，木犀草素有抗氧化、抗菌、抗癌等活性［10-12］，芹
菜素具抗菌、抗癌、神经元保护作用、衰老等活
性［13］，与芒毛苣苔抗菌、消炎与止血、治疗神经衰弱
等方面的传统功效具有相关性在。因此，选取 5，7-
二羟基-6，4-二甲氧基黄酮合适作为芒毛苣苔定性
定量指标性成分。
薄层鉴别方法中比较了样品用水提取，再用三
氯甲烷萃取，合并三氯甲烷萃取液，置水浴中蒸干，
残渣加乙醇溶解作为供试品溶液，以三氯甲烷-甲醇
作为展开剂，展开后，用碘显色，发现该方法杂质干
扰多，样品拖尾现象明显。改用本文方法色谱分离
效果较好，斑点清晰集中。经对不同温度(20，4 ℃)
湿度条件(32% ～90%)以及不同厂家薄层板(自制
硅胶 GF254薄层板，Merck 产硅胶预制薄层板和青岛
谱科产硅胶 GF254预制薄层板)的色谱效果进行了比
较，结果表明，温度、湿度、不同厂家预制板对薄层色
谱鉴别影响不大，本文建立的薄层条件重复性较好，
色谱的结果稳定、成本低，其斑点清晰、结果一致。
含量测定试验中考察了提取溶剂(95%乙醇、
75%乙醇、50%乙醇、甲醇和 50%甲醇)和回流提取
及超声提取法，溶剂用量(25，30，50，80 mL)及超声
时间(20，30，50 min)。结果表明本试验方法测定得
5，7-二羟基-6，4-二甲氧基黄酮最高。
对甲醇-水和乙腈-水为流动相进行了筛选，以
甲醇-0. 1%乙酸(75∶ 25)为流动相具有基线分离良
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好，分离度 ＞ 1. 5，峰型对称理论塔板数高。考察了
Hypersil ODS C18，Agilent Eclipse C18和 Kromasil C18
色谱柱(规格均为 4. 6 mm × 250 mm，5 μm)对分离
效果的影响，结果以 Kromasil C18色谱柱分离效
率高。
6 批样品 5，7-二羟基-6，4-二甲氧基黄酮含量
在 0. 62% ～ 0. 88%，考虑药材来源的差异，拟定本
品 含 5，7-二 羟 基-6，4-二 甲 氧 基 黄 酮 不 低
于 0. 50%。
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［责任编辑 顾雪竹］
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