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旱田草的生药学研究



全 文 :华西药学杂志
W C J·P S 2016,31(4)∶386 ~ 388
基金项目:广西自然科学基金创新研究团队项目(2011GXNSFF018006);《广西壮药质量标准(第三卷)》质量评价与标准研究项目(MZY
2013022);广西 2011 协同创新中心 -壮瑶药协同创新中心项目(桂教科研 2013 - 20 号);广西壮瑶药重点实验室项目(桂科基字
2014 - 32 号);广西重点学科(壮药学)项目(桂教科研 2014 - 16 号)
作者简介:唐玉荣(1988—),女,广西灵川,正攻读中药学专业的硕士学位。
* 通信作者(Correspondent author),Email:caiyi118@ 163. com
旱田草的生药学研究
唐玉荣,颜萍花,曾祥燕,蔡 毅*
(广西中医药大学,广西 南宁 530001)
摘要:目的 对旱田草进行生药学研究。方法 鉴别旱田草的性状,并按 2010 年版《中国药典》附录中的方法测定旱田草的
水分、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物含量等。结果 初步建立了生药学鉴别方法,其水分不得过 13. 0%,总灰分小于 18. 0%,
酸不溶性灰分低于 9. 0%,醇溶性浸出物大于 13. 0%。结论 所用方法可为制定旱田草药材质量标准提供参考。
关键词:旱田草;生药学;性状鉴别;显微鉴别;薄层鉴别;水分;灰分;浸出物
中图分类号:R28 文献标志码:A 文章编号:1006 - 0103(2016)04 - 0386 - 03
DOI:10. 13375 / j. cnki. wcjps. 2016. 04. 016
Pharmacognosy study of Lindernia ruellioides
TANG Yurong,YAN Pinghua,ZENG Xiangyan,CAI Yi*
(Guangxi University of Chinese Medicine,Nanning,Guangxi,530001 P. R. China)
Abstract:OBJECTIVE To conduct a pharmacognosy study of Lindernia ruellioides(Colsm.) Pennell. METHODS The
pharmacognosy identification,the moisture,total ash,acid insoluble ash,and extractives in L. ruellioides were determined based on
appendix of Chinese Pharmacopoeia published in 2010. RESULTS Pharmacognosy identification method was established,and the limit
of moisture,total ash and acid insoluble ash in L. ruellioides must be less than 13. 0%,18. 0% and 9. 0%,respectively. The extractives
were more than 13. 0% . CONCLUSION The established methods can provide a reference for the quality standards for L. ruellioides.
Key words:Lindernia ruellioides(Colsm.)Pennell;Pharmacognosy;Morphological identification;Microscopic identification;Thin layer
identification;Moisture;Ash content;Extract
CLC number:R28 Document code:A Article ID:1006 - 0103(2016)04 - 0386 - 03
旱田草为玄参科植物旱田草 Lindernia ruel-
lioides (Colsm.)Pennell 的全草[1],味甘、淡、性平,
具有理气活血、解毒消肿的功效,主治月经不调,痛
经,闭经,乳痈,瘰疬,跌打损伤,蛇犬咬伤;是广西的
常见壮药[2]。为确保旱田草临床用药安全,现通过
鉴别研究、常规检查及浸出物测定,可为其质量标准
的建立提供依据。
1 实验部分
1. 1 仪器与试药
DFC500 Microsystems 、DM2500 光学生物显微
镜、RM2145 自动轮转切片机(德国徕卡)。旱田草
采自广西各地,经蔡毅教授鉴定为玄参科植物旱田
草 Lindernia ruellioides (Colsm.)Pennell 的全草;毛
蕊花糖苷(中国药品生物制品检定所,批号:
111530 - 201310);薄层层析硅胶 G(青岛海洋化工
有限公司);其余试剂为分析纯。
1. 2 方法与结果
1. 2. 1 原植物的特征与药材性状的鉴别 原植物详
细的特征描述见中国植物志[3](图 1A)。药材多皱缩
成团。须根细长,有分枝,黄白色。茎纤细,直径 1 ~3
mm,长 10 ~15 cm,有细纵皱纹,黄绿色;体轻,质脆,
易折断,断面中空。叶对生,叶柄长;叶片皱缩卷曲,
边缘有明显的细锯齿,上表面黄绿色,下表面灰绿色,
两面均有粗涩的短毛。总状花序顶生。蒴果圆柱形,
长 1. 5 ~2. 0 cm,比宿萼长约 2倍。味甘、淡(图 1B)。
A B
图 1 旱田草的原植物(A)和药材(B)图
Figure 1 Original plant(A) and medicinal plant(B) of L.
ruellioides Herba
1. 2. 2 显微鉴别 根横切面呈类圆形。表皮细胞
类方形,1 列,紧密排列;皮层较宽,内含 15 ~ 22 个
通气组织;内皮层细胞呈扁长方形,1 列,凯氏点偶
见;韧皮部狭窄;中央为木质部,1 ~ 3 个导管聚生,
成放射状排列,射线细胞常呈单列(图 2A)。茎横
切面呈类多角形。表皮细胞 1 列,类方形,排列紧
密,外被角质层;可见扁球形腺鳞和非腺毛。皮层较
宽,由 8 ~ 12 列薄壁细胞组成;分泌细胞散在,内含
分泌物;在四角处有明显的 4 个纤维束。外韧型维
管束常为 6 束,环状排列;韧皮部狭窄,外侧可见中
柱鞘纤维;木质部明显,由导管、木薄壁细胞及木纤
维组成;导管 3 ~ 5 个成行排列。髓部宽广,由较大
的薄壁细胞组成,排列疏松(图 2B、2C)。叶横切面
的上表皮细胞 1 列,类方形,排列紧密,外被角层,通
过主脉时常向下凹陷;下表皮细胞 1 列,大小不一,
可见气孔、非腺毛及扁球形腺鳞。近等面叶。栅栏
细胞呈短圆柱状,叶绿体众多;海绵组织占较大部
分,细胞较大,排列疏松。外韧型维管束 1 ~ 3 束,中
央一束较大,旁边的较小;木质部向茎面,导管成单
个列;韧皮部位于下方,狭窄,外侧常有纤维束环绕
(图 3A)。叶表面片的叶上、下表面的表皮细胞垂
周壁均波状弯曲;气孔直轴式;腺鳞头部多由 4 个细
胞组成(图 3B、3C)。粉末呈淡黄色。腺鳞呈圆球
形、扁圆球形,头部多由 4 个细胞组成,直径 15 ~ 23
μm,腺柄极短。分泌细胞可见,呈类圆形或椭圆形,
棕黄色,内含分泌物,直径 22 ~ 45 μm。非腺毛多
见,长 50 ~ 130 μm,直径 18 ~ 32 μm,壁具疣状突
起。纤维散在,壁厚,孔沟明显。导管多为螺纹型。
淀粉粒细小,常为单粒,类圆形,直径 2 ~ 4 μm(图
4)。
表皮
通气组织
皮层
内皮层
韧皮部
木质部
射线
皮层纤维束
表皮
皮层
非腺毛
韧皮部
木质部
腺鳞
髓部
中柱鞘纤维
A B C
分泌细胞
图 2 旱田草的根(A)、茎(B)和茎局部放大(C)的横切面显微图
Figure 2 Microscopic photos of transverse section of the root(A),stem(B)and enlarge photo of stem(C)of L. ruellioides Herba
上表皮
非腺毛
栅栏组织
气孔
海绵组织
腺鳞
木质部
韧皮部
纤维束
下表皮
非腺毛
上表皮
气孔
腺鳞
非腺毛
下表皮
气孔
腺鳞
A B C
图 3 旱田草叶横切面(A)、上表面(B)和下表面(C)的显微图
Figure 3 Microscopic photos of transverse section of the leaves(A),the upper surface(B)and lower surface(C)of L. ruellioides Herba
1
2
3
4
5
6
1.腺鳞
2.导管
3.纤维
4.非腺毛
5.淀粉粒
6.分泌细胞
图 4 旱田草的粉末图
Figure 4 Powder characteristics diagrams of L. ruellioides Herba
1. 2. 3 薄层鉴别 取 1 g样品粉末,加 20 mL 95%
乙醇,超声 30 min,滤过,蒸干滤液,残渣中加 1 mL
乙醇使溶解,作为供试品溶液。另取 1 g 旱田草对
照药材(HTC - 1),同法制成对照药材溶液。再取
适量毛蕊花糖苷对照品,加 95%乙醇制成 1 mg·
mL -1对照品溶液。照 TLC法试验,吸取上述 3 种溶
液各 2 μL,点于同一以 CMC - Na 为黏合剂的硅胶
G薄层板上,以乙酸丁酯 - 甲醇 - 甲酸 - 水(6∶
1. 5∶1. 5∶1)为展开剂,展开,取出,晾干,喷 3%三
氯化铝乙醇溶液,晾干,置紫外光灯(365 nm)下检
视,供试品色谱中,在与对照药材色谱和对照品色谱
相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点(图 5)。
783第 4 期 唐玉荣,等。旱田草的生药学研究
1、12.毛蕊花糖苷对照品
2.旱田草对照药材
3~11.旱田草供试品药材
HTC-2~HTC-10
A.蓝色斑点
B.浅蓝色斑点
C.浅蓝色斑点
D.红色斑点
展开前沿
原点
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
图 5 旱田草的薄层色谱图
Figure 5 TLC chromatogram of L. ruellioides Herba
1. 2. 4 浸出物测定的方法学考察 按表 1 中的方
法对浸出物测定作方法学考察。结果表明:以 50%
乙醇为提取溶剂,热浸法所得浸出物的含量最高。
表 1 旱田草中水及不同浓度乙醇浸出物的含量(%)
Table 1 Contents of ethanol extracts in L. ruellioides Herba with
water and different solubility(%)
方法 水 30%乙醇 50%乙醇 70%乙醇 95%乙醇
冷浸 20. 50 26. 26 25. 08 21. 52 13. 30
热浸 26. 95 28. 00 28. 96 24. 59 15. 93
1. 2. 5 各批药材中水份、总灰分、酸不溶性灰分及
浸出物的测定 水分、总灰分及酸不溶性灰分按
《中国药典》2010 年版一部附录中ⅨH、ⅨK 测定。
以 50%乙醇为溶剂,按《中国药典》2010 年版一部
附录中ⅩA醇溶性浸出物项下热浸法测定(表 2)。
表 2 中所测定项目的 RSD均 < 3. 0%。
表 2 旱田草中水分、总灰分、酸不溶性灰分和浸出物的测定结果(%,n =3)
Table 2 Determination results of moisture,total ash,acid - insoluble ash and extracts of L. Ruellioides Herba(%,n =3)
编号 采集时间 采集地点 水分 总灰分 酸不溶性灰分 醇浸出物
HTC - 1 2014 - 05 - 29 大化县那卖屯 10. 16 15. 22 6. 27 27. 02
HTC - 2 2014 - 04 - 02 上林县 11. 50 17. 62 8. 44 13. 85
HTC - 3 2014 - 04 - 21 上林县西燕 10. 73 17. 36 8. 28 17. 81
HTC - 4 2014 - 05 - 03 桂平紫荆镇 11. 76 11. 62 1. 67 28. 83
HTC - 5 2014 - 05 - 16 桂平市 11. 48 12. 58 4. 05 25. 58
HTC - 6 2014 - 05 - 27 岑溪市南渡镇 11. 14 14. 01 2. 63 19. 28
HTC - 7 2014 - 07 - 06 大化县岩滩 9. 94 16. 72 7. 16 20. 08
HTC - 8 2014 - 07 - 15 桂平紫荆镇 11. 43 11. 96 1. 55 26. 99
HTC - 9 2014 - 09 - 09 桂平紫荆镇 10. 14 13. 36 1. 89 24. 00
HTC - 10 2014 - 10 - 02 金秀县金秀乡 9. 50 15. 50 6. 34 21. 94
HTC - 1 为旱田草对照药材
2 讨论
旱田草的主要鉴别特征为:全草皱缩成团,茎纤
细,叶皱缩卷曲,体轻,质脆。茎横切面皮层四角处
有明显的 4 个纤维束,可见分泌细胞散在;外韧型维
管束常为 6 束,环状排列。全草粉末中可见腺鳞、非
腺毛、分泌细胞。在薄层鉴别中,对药材提取溶剂、
提取方法、提取时间、展开剂、显色方法等进行了一
系列的方法学考察,最终得出药材粉末用 20 mL
95%乙醇超声 30 min,以乙酸丁酯 -甲醇 -甲酸 -
水(6∶1. 5∶1. 5∶1)展开,置紫外光灯(365 nm)下
检视,所得到的斑点清晰,分离度较好。上述鉴别特
征明显、稳定,可作为药材的真伪鉴别依据。在课题
组前期实验中,运用 HPLC 检测到旱田草中含毛蕊
花糖苷;毛蕊花糖苷对肝保护、神经系统、免疫系统
具有明显的作用[4 - 6],也有文献报道其具有植物的
雌激素活性作用[7],这是否与药材的功效具有相关
性有待研究,故薄层鉴别中暂以毛蕊花糖苷为化学
对照品进行监测。根据实验结果,适当将幅度放宽,
初步拟定旱田草药材的检查项目:水分不得过
13. 0%,总灰分小于 18. 0%,酸不溶性灰分低于
9. 0%,醇溶性浸出物大于 13. 0%。
参考文献:
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的植物雌激素活性研究[J]. 天然产物研究与开发,2015,26
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收稿日期:2015 - 01 - 15
883 华 西 药 学 杂 志 第 31 卷