全 文 ：灵香草中多酚提取工艺优化研究①
孙科１，李德慧２，孙俪铭２，彭冰３，李容１，陈冉１②
（１．右江民族医学院，广西　百色　５３３０００　Ｅ－ｍａｉｌ：１５７１４７４４８８＠ｑｑ．ｃｏｍ；
２．右江民族医学院临床医学院２０１４级临床医学本科，广西　百色　５３３０００；
３．右江民族医学院检验学院２０１３级卫生检验与检疫本科，广西　百色　５３３０００）
摘　要：目的　通过纤维素酶辅助－微波提取法，首次对灵香草中多酚的提取工艺条件进行探讨。方法　采用单因素
试验和正交试验法，以灵香草中多酚得率为指标，分别考察了酶用量、酶解时间、溶剂体积分数、料液比、提取时间、微波
功率等因素对提取工艺的影响。结果　最佳工艺条件是：酶用量０．８％，酶解时间１．５ｈ，乙醇体积分数７０％，料液比１∶
２０，提取时间１０ｍｉｎ，提取温度７０℃，微波功率４００Ｗ。结论　本方法操作简单，节能环保，多酚的提取效果良好，为该
药材的质量控制和进一步开发研究提供参考依据。
关键词：灵香草；微波提取法；纤维素酶；多酚；正交试验
中图分类号：Ｒ２８４．２　　　文献标识码：Ａ　　　文章编号：１００１－５８１７（２０１６）０３－０２４５－０５
ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００１－５８１７．２０１６．０３．００２
Ｐｒｏｃｅｓｓ　ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ　ｆｏｒ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌ　ｆｒｏｍＬｙｓｉｍａｃｈｉａ　ｆｏｅｎｕｍ－ｇｒａｅｃｕｍ　Ｈａｎｃｅ
Ｓｕｎ　Ｋｅ１，Ｌｉ　Ｄｅｈｕｉ　２，Ｓｕｎ　Ｌｉｍｉｎｇ２，Ｐｅｎｇ　Ｂｉｎｇ３，Ｌｉ　Ｒｏｎｇ１，Ｃｈｅｎ　Ｒａｎ１
（１．Ｙｏｕｊｉａｎｇ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｆｏｒ　Ｎａｔｉｏｎａｌｉｔｉｅｓ，Ｂａｉｓｅ　５３３０００，Ｇｕａｎｇｘｉ，Ｃｈｉｎａ
Ｅ－ｍａｉｌ：１５７１４７４４８８＠ｑｑ．ｃｏｍ；
２．Ｇｒａｄｅ　２０１４，Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｃｌｉｎｉｃａｌ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ　Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｙｏｕｊｉａｎｇ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｆｏｒ　Ｎａｔｉｏｎａｌｉｔｉｅｓ，
Ｂａｉｓｅ　５３３０００，Ｇｕａｎｇｘｉ，Ｃｈｉｎａ；３．Ｇｒａｄｅ　２０１３，Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　Ｓｃｉｅｎｃｅ，
Ｙｏｕｊｉａｎｇ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｆｏｒ　Ｎａｔｉｏｎａｌｉｔｉｅｓ，Ｂａｉｓｅ　５３３０００，Ｇｕａｎｇｘｉ，Ｃｈｉｎａ）
　　Ａｂｓｔｒａｃｔ：　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ａ　ｃｅｌｕｌａｓｅ－ａｓｓｉｓｔｅｄ　ｍｉｃｒｏｗａｖｅ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｍｅｔｈｏｄ　ｗａｓ　ｕｓｅｄ　ｔｏ　ｒｅｓｅａｒｃｈ　ｔｈｅ　ｅｘｔｒａｃ－
ｔｉｏｎ　ｐｒｏｃｅｓｓ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ　ｆｏｒ　ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ　ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌ　ｆｒｏｍ　Ｌｙｓｉｍａｃｈｉａ　ｆｏｅｎｕｍ　ｇｒａｅｃｕｍ　Ｈａｎｃｅ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｆｉｒｓｔ　ｔｉｍｅ．　
Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｔｈｅ　ｓｉｎｇｌｅ　ｆａｃｔｏｒ　ｔｅｓｔ　ａｎｄ　ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ　ｔｅｓｔ　ｗｅｒｅ　ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ　ｉｎ　ｔｈｉｓ　ｐａｐｅｒ．Ｔｈｅ　ｙｉｅｌｄ　ｏｆ　ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌ　ｆｒｏｍ
Ｌｙｓｉｍａｃｈｉａ　ｆｏｅｎｕｍ　ｇｒａｅｃｕｍ　Ｈａｎｃｅ　ｗａｓ　ｕｓｅｄ　ａｓ　ｉｎｄｅｘ　ｆｏｒ　ｏｂｓｅｒｖｉｎｇ　ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｆａｃｔｏｒｓ　ｓｕｃｈ　ａｓ　ｔｈｅ　ａ－
ｍｏｕｎｔ　ｏｆ　ｃｅｌｕｌａｓｅ，ｅｎｚｙｍａｔｉｃ　ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ　ｔｉｍｅ，ｓｏｌｖｅｎｔ　ｖｏｌｕｍｅ　ｆｒａｃｔｉｏｎ，ｓｏｌｉｄ－ｌｉｑｕｉｄ　ｒａｔｉｏ，ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｔｉｍｅ，
ｍｉｃｒｏｗａｖｅ　ｐｏｗｅｒ　ａｎｄ　ｏｔｈｅｒ　ｆａｃｔｏｒｓ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｐｒｏｃｅｓｓ．　Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍａｌ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ　ｆｏｒ　ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ
ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌ：ｔｈｅ　ａｍｏｕｎｔ　ｏｆ　ｃｅｌｕｌａｓｅ　ｗａｓ　０．８％，ｅｎｚｙｍａｔｉｃ　ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ　ｔｉｍｅ　１．５ｈ，ｅｔｈａｎｏｌ　ｖｏｌｕｍｅ　ｆｒａｃｔｉｏｎ
７０％，ｓｏｌｉｄ－ｌｉｑｕｉｄ　ｒａｔｉｏ　１∶２０，ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｔｉｍｅ　１０ｍｉｎ，ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　７０℃，ｔｈｅ　ｍｉｃｒｏｗａｖｅ　ｐｏｗｅｒ
４００Ｗ．　Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｔｈｉｓ　ｍｅｔｈｏｄ　ｗａｓ　ｓｉｍｐｌｅ，ｅｎｅｒｇｙ　ｓａｖｉｎｇ　ａｎｄ　ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ　ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ　ｅｘ－
ｔｒａｃｔｉｎｇ　ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌ　ａｒｅ　ｇｏｏｄ，ｐｒｏｖｉｄｉｎｇ　ａ　ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ　ｆｏｒ　ｑｕａｌｉｔｙ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ａｎｄ　ｆｕｒｔｈｅｒ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｌｙｓｉｍａｃｈｉａ
ｆｏｅｎｕｍ　ｇｒａｅｃｕｍ　Ｈａｎｃｅ．
　　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：　Ｌｙｓｉｍａｃｈｉａ　ｆｏｅｎｕｍ－ｇｒａｅｃｕｍ　Ｈａｎｃｅ；ｍｉｃｒｏｗａｖｅ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｍｅｔｈｏｄ；ｃｅｌｕｌａｓｅ；ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌ；
ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ　ｔｅｓｔ
—５４２—
第３８卷　第３期　　　　　　　　　　右江民族医学院学报　　　　　　　　　　　Ｖｏｌ．３８Ｎｏ．３
２０１６年６月　　　　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｙｏｕｊｉａｎｇ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｆｏｒ　Ｎａｔｉｏｎａｌｉｔｉｅｓ　　　　Ｊｕｎ．２０１６
①
②
基金项目：右江民族医学院 ２０１４ 年自然科学类科研课题 （右医科字 ［２０１４］２ 号），广西自然基金资助项目
（２０１５ＧＸＮＳＦＢＡ１３９１６３），广西高校科学技术研究资助项目（ＫＹ２０１５ＹＢ２２６）
通讯作者，Ｅ－ｍａｉｌ：２５５６７２０２８０＠ｑｑ．ｃｏｍ
　　灵香草（Ｌｙｓｉｍａｃｈｉａ　ｆｏｅｎｕｍ－ｇｒａｅｃｕｍ　Ｈａｎｃｅ）
为报春花科珍珠菜属植物，主产于广西、云南等地［１］。
全草入药，味辛、甘，性平，无毒，归肺、胃经，具有解表、
行气、祛风寒、止痛、驱蛔等功效［２］。灵香草富含多种
活性物质，如黄酮类、三萜类、多酚类、多糖类等［３－４］。
天然的酚类化合物不仅具有较强的抗氧化能力，还具
有很好的抗菌消炎、增加免疫力、改善心血管、降血脂、
保护肝脏、抗癌等作用［５－８］，灵香草的抗氧化能力与其
多酚的含量密切相关［９］。但目前未见有关于优化灵香
草中多酚提取工艺研究的文献报道。微波辅助提取法
作为一种新型高效的萃取技术，具有高选择性、低耗
能、高效率、低污染等优势，已被广泛用于天然产物有
效成分的提取［１０］。酶法辅助提取是低能耗而经济的
技术，近年来在中草药提取中逐渐得到应用［１１－１２］。为
此，本实验研究纤维素酶解预处理后微波提取灵香草
总酚的工艺条件，探索高效节能的提取技术。
１　材料与方法
１．１　原料　灵香草（购于广西金秀香料香精有限责任
公司），用清水洗净后阴干，均匀摊开后放入７０℃的烘
箱中烘烤４ｈ。取出后将烘干的灵香草放入中药高速
粉碎机中粉碎，粉碎后过２０目筛备用。
１．２　实验仪器与试剂　ＸＨ－１００Ａ微波催化萃取仪
（北京祥鹄科技发展有限公司），Ｃａｒｙ　６０紫外可见分
光光度计（安捷伦），ＨＨ－ＺＫ６００智能恒温水浴锅（巩
义市英峪高科仪器厂），ＫＱ－２５０ＤＥ型数控超声波清
洗器（昆山市超声仪器有限公司），ＦＡ２００４Ｎ型电子分
析天平（上海民析精密科学仪器公司），１０１－３型电热
鼓风干燥箱（上海齐欣科学仪器公司），ＦＷ１７７型中草
药粉碎机（天津泰斯特仪器有限公司）。没食子酸对照
品（中国药品生物制品检定所）；纤维素酶（Ｃ８２７０，北
京索莱宝科技有限公司）；福林酚试剂，碳酸钠，醋酸，
醋酸钠，无水乙醇均为分析纯。实验用水为二次蒸馏
水。
１．３　标准曲线绘制　精密称取焦性没食子酸对照品
１０．０ｍｇ，用甲醇定容到１００ｍｌ的容量瓶中，得到浓度
为１００μｇ／ｍｌ的焦性没食子酸标准储备液。分别移取
０ｍｌ、０．１ｍｌ、０．２ｍｌ、０．４ｍｌ、０．６ｍｌ、０．８ｍｌ没食子
酸标准储备液于１０ｍｌ容量瓶中，各加５．０ｍｌ　１０％福
林酚试剂混合摇匀后反应５ｍｉｎ，再加入４．０ｍｌ　７．５％
碳酸钠溶液，用蒸馏水定容，摇匀，常温静置６０ｍｉｎ。
以标准液加入量为０ｍｌ的溶液为参比，在７６６ｎｍ处
测定吸光度，以没食子酸浓度（μｇ／ｍｌ）为横坐标，以吸
光度为纵坐标，得到回归方程为：ｙ＝０．０５２４ｘ－
０．０２７４（ｒ＝０．９９９４），没食子酸在１．０～８．０μｇ／ｍｌ浓
度范围内有良好的线性关系。
１．４　灵香草多酚的提取测定　称取一定量的灵香草
粉末，加入４倍量ｐＨ＝４．５的醋酸－醋酸钠缓冲液和
一定量纤维素酶，充分搅拌后在５０℃恒温水浴下保温
一定时间，１００℃水浴灭活２ｍｉｎ，移入圆底烧瓶中，加
乙醇溶剂，摇匀。放入微波萃取装置中，在一定功率和
７０℃温度下提取，过滤，用旋转蒸发仪浓缩，最后将滤
液定容至５０ｍｌ的容量瓶中，待测。将提取液用乙醇
稀释２５倍，取１ｍｌ按照上述“１．３”方法测定其吸光
度，然后由回归方程计算多酚的含量。
灵香草中多酚得率＝提取液中多酚的质量／原料
质量×１００％
１．５　灵香草提取液底物干扰试验　取“１．４”项下提取
液，用蒸馏水稀释到１０ｍｌ容量瓶中。利用紫外分光
光计在３７０～８００ｎｍ波长范围内扫描，得到光谱吸收
图，见图１。由图１可知，在７００～８００ｎｍ无吸收峰，
且基线吸收接近０。本实验选择在７６６ｎｍ波长下测
样品提取液中多酚的含量，因此样品提取液固有颜色
对多酚的测定几乎没有干扰。
图１　灵香草提取液的紫外吸收光谱图
１．６　单因素试验　以酶用量、酶解时间、乙醇浓度、料
液比、提取时间、微波功率作为影响灵香草多酚得率的
单因素，分别对灵香草多酚提取工艺进行考察，最后根
据各单因素试验结果确定正交试验。
１．６．１　酶用量的影响　分别称取１０ｇ灵香草粉末，
加入４倍量的醋酸－醋酸钠缓冲液，各加入０．１％、
０．４％、０．８％、１．２％、１．６％的纤维素酶，充分搅拌后，
在５０℃恒温水浴下保温１ｈ，取出后放入１００℃水浴
灭活２ｍｉｎ，按料液比１∶１５（ｇ／ｍｌ），加入５０％的乙醇
溶液，在３００Ｗ 和７０℃微波条件下提取１０ｍｉｎ，抽
滤，定容后检测计算多酚提取率。
１．６．２　酶解时间的影响　使用０．８％的纤维素酶，在
其他条件一致的情况下，分别考察了０．５ｈ、１ｈ、１．５
ｈ、２ｈ、２．５ｈ的酶解时间对多酚得率的影响。
１．６．３　乙醇体积分数的影响　在其他条件一致的情
况下，按料液比１∶１５（ｇ／ｍｌ）分别加入４０％、５０％、
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２０１６年　　　　　　　　　　　　　右江民族医学院学报　　　　　　　　　　　　　　第３期
６０％、７０％、８０％的乙醇溶液，在３００Ｗ 和７０℃微波
条件下提取１０ｍｉｎ，抽滤，浓缩，定容检测。
１．６．４　料液比的影响　以６０％的乙醇溶液为提取溶
剂，按不同料液比１∶１０、１∶１５、１∶２０、１∶２５、１∶３０
（ｇ／ｍｌ）加入，在３００Ｗ，７０℃微波条件下提取１０ｍｉｎ，
抽滤，浓缩，定容检测。
１．６．５　提取时间的影响　选择料液比为１∶２０（ｇ／
ｍｌ），６０％的乙醇溶液为提取溶剂，在３００Ｗ、７０℃微
波条件下，考察了提取时间分别为４ｍｉｎ、６ｍｉｎ、８
ｍｉｎ、１０ｍｉｎ、１２ｍｉｎ、１４ｍｉｎ时灵香草中多酚的提取
效果。
１．６．６　微波功率的影响　选择料液比为１∶２０（ｇ／
ｍｌ），６０％的乙醇溶液为提取溶剂，当提取时间为１０
ｍｉｎ，提取温度７０℃时，考察了提取功率分别为２００
Ｗ、３００Ｗ、４００Ｗ、５００Ｗ、６００Ｗ、７００Ｗ 时灵香草中
多酚的提取效果。
１．７　正交试验　通过正交试验对结果进行极差分析
以确定最佳提取条件。本试验采用Ｌ９（３４）正交表，选
择酶用量、酶解时间、乙醇浓度、料液比等４个对多酚
提取率影响较大的因素做正交试验，选取３个水平，试
验因素与水平见表１。
表１　正交试验因素与水平
水平
Ａ酶用量
（％）
Ｂ酶解时间
（ｈ）
Ｃ乙醇体积
分数（％）
Ｄ料液比
（ｇ／ｍｌ）
１　 ０．４０　 １．００　 ５０　 １∶１５
２　 ０．８０　 １．５０　 ６０　 １∶２０
３　 １．２０　 ２．００　 ７０　 １∶２５
１．８　统计学方法　采用ＳＰＳＳ　１１．０统计软件进行数
据分析，采用正交设计资料的单因素方差分析。Ｐ ＜
０．０５为差异有统计学意义。
２　结果
２．１　单因素试验
２．１．１　酶用量的选择　随着酶用量的增加，多酚的提
取率呈现先上升后下降的趋势（见图２），当加入０．８％
的纤维素酶时多酚提取率最高。这是由于在一定浓度
范围内，酶活性与酶浓度成正比，在低浓度时，随着酶
浓度增加酶活性也在不断增加，但当酶过量后，酶活性
反而会降低，酶促反应速率下降。因此，选用０．８％的
纤维素酶为最佳酶用量。
２．１．２　酶解时间的选择　当酶解时间为１．５ｈ时多
酚提取率较高，继续增加提取时间多酚得率变化微小，
说明酶解时间为１．５ｈ时灵香草的细胞壁已有效破
解，多酚已最大程度溶解到乙醇溶剂中（见图３）。因
此酶解时间选择１．５ｈ。
图２　酶用量对多酚得率的影响
图３　酶解时间对多酚得率的影响
２．１．３　乙醇体积分数的选择　随着乙醇的体积增加，
多酚的提取率呈现先上升后下降的趋势，当乙醇的体
积为６０％时，多酚的提取率最高（见图４）。这是因为
当乙醇的浓度较低时，不能破坏多酚与别的有机物质
之间的氢键和疏水作用；乙醇浓度太高时，灵香草中醇
溶型物质溶出量增加，由于竞争作用，使多酚的浸出过
程受阻，且较多的杂质会干扰测定。因此选用６０％的
乙醇为提取溶液。
图４　乙醇体积分数对多酚得率的影响
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２．１．４　料液比的选择　随料液比增加，多酚得率也随
之增高，当料液比超过１∶２０时多酚得率无明显变化
（见图５），且增加溶剂用量会使提取杂质增多，还会浪
费溶剂，提取溶剂太少，溶液易达到饱和，有效成分无
法提取完全，因此本试验采用料液比为１∶２０。
图５　料液比对多酚得率的影响
２．１．５　提取时间的选择　在提取时间从２～１０ｍｉｎ
提取出的多酚得率有所增加，随着时间继续增加，多酚
提取量变化不大（见图６），表明１０ｍｉｎ时间已经可以
提取完全，故后续实验的提取时间定为１０ｍｉｎ。
图６　提取时间对多酚得率的影响
２．１．６　微波功率的选择　微波功率在２００～４００Ｗ
时多酚得率不断增高，超过４００Ｗ 后反而降低（见图
７），这是由于微波功率增加，细胞壁受到电磁波作用更
增强，细胞壁破碎程度增大，多酚的溶出量增大。但
当功率增大到一定限度时，会破坏多酚分子内结构，导
致多酚含量降低。故选择微波功率为４００Ｗ。
图７　微波功率对多酚得率的影响
２．２　正交试验　参考单因素试验的结果，选取酶用
量、酶解时间、乙醇浓度、料液比４个因素，按照 Ｌ９
（３４）正交表安排进行试验设计，结果见表２，方差分析
结果见表３。由表２和表３可知，４个所考察的因素对
多酚得率都有显著影响，主次顺序为Ａ＞Ｂ＞Ｃ＞Ｄ，纤
维素酶辅助－微波法提取灵香草中多酚的最佳工艺条
件是Ａ２Ｂ２Ｃ３Ｄ２，即纤维素酶用量０．８％、酶解时间１．５
ｈ、乙醇浓度７０％、料液比１∶２０（ｇ／ｍｌ）。在最优工艺
条件下进行３次平行试验，得率分别为 ０．９６％、
１．０７％、１．０３％，平均得率为１．０２％，数据稳定，结果
可靠。
表２　Ｌ９（３４）正交试验结果与极差分析
试验号 Ａ　 Ｂ　 Ｃ　 Ｄ 得率（％）
１　 １　 １　 １　 １　 ０．５２
２　 １　 ２　 ２　 ２　 ０．８１
３　 １　 ３　 ３　 ３　 ０．７２
４　 ２　 １　 ２　 ３　 ０．９０
５　 ２　 ２　 ３　 １　 １．０３
６　 ２　 ３　 １　 ２　 ０．８９
７　 ３　 １　 ３　 ２　 ０．８５
８　 ３　 ２　 １　 ３　 ０．８４
９　 ３　 ３　 ２　 １　 ０．７８
Ｋ１ ２．０５　 ２．２７　 ２．２５　 ２．３３
Ｋ２ ２．８２　 ２．６８　 ２．４９　 ２．５５
Ｋ３ ２．５７　 ２．３９　 ２．６０　 ２．４６
Ｒ　 ０．７７　 ０．４１　 ０．３５　 ０．２２
表３　方差分析结果
方差
来源
离差平方
和（ＳＳ）
自由度 Ｆ　 Ｐ
Ａ　 ０．２９９　 ２　 ２０２．１６ ＜０．０５
Ｂ　 ０．０９　 ２　 ６０．７８５ ＜０．０５
Ｃ　 ０．０６２　 ２　 ４０．０９５ ＜０．０５
Ｄ　 ０．０２７　 ２　 １８．５ ＜０．０５
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３　讨论
酶解法是新型高效的绿色提取技术，纤维素酶是
中药材提取中应用最广泛的酶，在ｐＨ　４．０～６．０和４０
～６０℃的环境下活性稳定性较好。因此选择在ｐＨ＝
４．５醋酸－醋酸钠缓液和５０℃恒温水浴条件下酶解
灵香草［１３］。用纤维素酶处理灵香草药材，能够降解植
物细胞壁及细胞间质中的纤维素等物质，破坏细胞壁
的致密结构，从而促进有效成分多酚的提取，降低能
耗。适当增加酶的浓度，可以改善降解的效果，提高多
酚的提取率，然而酶浓度过高反而会降低酶的活性，不
利于后续的提取。这是因为酶是在一定的浓度范围内
才具有较好的活性［１３］。
在做料液比的选择时，虽然增加料液比能增加提
取试剂与样品的接触面积，避免因提取液的饱和造成
样品中多酚的浸出过程受阻，但料液比过大时，其他物
质也容易浸出，不能改善提取效果，反而浪费试剂。
提高微波功率能促进多酚的浸出，加快多酚在样
品和提取剂中的平衡速率，但微波功率太高反而会促
进其他物质与多酚发生氧化作用，并且易破坏多酚的
结构，从而降低多酚的提取率。
本文通过纤维素酶辅助－微波提取法，首次对灵
香草中多酚的提取工艺条件进行探讨，实验证明，使用
纤维素酶辅助提取，对灵香草中多酚的提取具有良好
的效果，与单一的微波法相比，提取率提高３０％左右，
与文献中的浸提法相比［９］，不仅大大缩短提取时间，提
取效果也有很大改善。经过单因素实验探索，由正交
实验得知酶用量对多酚的得率影响最大，其次是酶解
时间、乙醇体积分数，最后是料液比，最终确定最佳工
艺条件是：酶用量０．８％，酶解时间１．５ｈ，乙醇浓度
７０％，料液比１∶２０，提取时间１０ｍｉｎ，提取温度７０
℃，超声波功率４００Ｗ。本方法操作简单，节能环保，
多酚的提取效果良好，对灵香草的进一步开发利用提
供了理论依据。
参考文献：
［１］　龚复俊，王有为．广西灵香草挥发油化学成分［Ｊ］．植物资
源与环境学报，２００４，１３（３）：５９－６１．
［２］　江苏新医学院．中药大辞典（下册）［Ｍ］．上海：上海科学
技术出版社，１９８６：２４７０－２４７２．
［３］　胡展育，詹云静．灵香草的研究进展［Ｊ］．安徽农业科学，
２０１２，４０（２９）：１４２４０－１４２４１．
［４］　黄琼，田玉红，李志华．不同方法提取灵香草挥发油的比
较研究［Ｊ］．湖北农业科学，２０１０，４９（４）：９４４－９４６．
［５］　Ｄａｎｉｅｌ　Ｇｒａｎａｔｏ，Ｆｌáｖｉａ　Ｃｈｉｚｕｋｏ，Ｉｎａｒ　Ａｌｖｅｓ，ｅｔ　ａｌ．Ｐｈｅ－
ｎｏｌｉｃ　ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｓｏｕｔｈ　Ａｍｅｒｉｃａｎ　ｒｅｄ　ｗｉｎｅｓ　ｃｌａｓｓｉｆｉｅｄ
ａｃｃｏｒｄｉｎｇ　ｔｏ　ｔｈｅｉｒ　ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　ａｃｔｉｖｉｔｙ，ｒｅｔａｉｌ　ｐｒｉｃｅ　ａｎｄ
ｓｅｎｓｏｒｙ　ｑｕａｌｉｔｙ［Ｊ］．Ｆｏｏｄ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２０１１，１２９（２）：３６６－
３７３．
［６］　Ｓａｍｉａ　Ｏｕｅｓｌａｔｉａ，Ｎａｊｌａ　Ｔｒａｂｅｌｓｉ，Ｍｏｎｄｈｅｒ　Ｂｏｕｌａａｂａ，ｅｔ
ａｌ．Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ　ｏｆ　ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｅｄｉｂｌｅ　ａｎｄ
ｍｅｄｉｃｉｎａｌ　Ｓｕａｅｄａ　ｓｐｅｃｉｅｓ　ａｎｄ　ｒｅｌａｔｅｄ　ｐｈｅｎｏｌｉｃ　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ
［Ｊ］．Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ　Ｃｒｏｐｓ　ａｎｄ　Ｐｒｏｄｕｃｔｓ，２０１２，３６（１）：５１３－
５１８．
［７］　潘廷啟，文全泰，肖林彬，等．正交设计优化金樱子多糖的
超声提取工艺［Ｊ］．右江民族医学院学报，２０１２，３４（４）：
４６５－４６７．
［８］　苏妹芬，罗宝芳，黄祉健，等．正交试验优选芒果叶多酚的
微波提取工艺［Ｊ］．右江民族医学院学报，２０１３，３５（６）：
７９０－７９２．
［９］　Ｈａｉ－ｙｕｎ　Ｌｉ，Ｚａｉ－ｂｉｎ　Ｈａｏ，Ｘｉｕ－ｌｉ　Ｗａｎｇ，ｅｔ　ａｌ．Ａｎ－
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收稿日期：２０１６－０４－１８；修回日期：２０１６－０６－２３
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２０１６年　　　　　　　　　　　　　右江民族医学院学报　　　　　　　　　　　　　　第３期