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耳叶牛皮消中的苯乙酮类化合物及其抗氧化活性研究



全 文 :药学实践杂志 年 月 日 第 卷第 期

耳叶牛皮消 中 的苯 乙酮类化合物及其抗氧化活性研究
陈 炳 阳 , 岳 荣 彩 , 刘 芳 , 李 夏 , 李元元 , 吴 国振 , 单 磊 ( 第二军 医大学药学院 ,上海
摘要 目 的 研究耳叶 牛 皮 消 ( 萝摩科 ) 冊 块根的 化学成分及其抗氧
化活性 。 方法 药材提取物分部萃取后 采用硅胶 、 柱层析等进行分离纯化 ,通过理化性质 和 光谱分 析鉴 定结构 。
在 刺激条件下 ,研究化合物对 细胞中超氧化物歧化酶 ( 活 性 、过氧化氢酶 ( 活性 以 及谷胱甘肽过氧化物酶
活性的影响 。 结果 从耳 叶 牛皮 消 中 分离得到 了 个 苯 乙 酮类化合物 ,分别鉴定 为
、 、 丨 、 。 能降低 、 和 三种抗氧化藤活性 , 而耳叶牛
皮消 中的苯乙 酮类化合物可抑制 引 起的氧化损伤 。 结论 耳叶牛皮 消 中的 苯 乙酮类化合物具有抗氧化活性 。
关键词 耳 叶牛 皮 消 ; 萝摩科 ; 化学 成分 ; 苯乙酮类化合物
中 图分类号 文 献标志码 文 章编号
, ,

, ,
, , , ,
; ; ;
耳 叶 牛 皮 消 ( 糖苷类化合物 具有很强 的 细胞毒性 ‘ 另 有文献
系萝摩科 ( 马利 筋亚科 ( 报道其 乙醇总 提物 和正丁醇部位具有抗多种 肿瘤
鹅绒藤属 ( 植 物 。 在 我 细胞 的活性 同 时 乙醇 总提物 和 氯仿部 位还 具
国 资源 丰 富 ,分 布 于 全 国 大部分省 区 ; 山 东 、 江苏 有 胃保护 的作用 后期 研究 又证 实从 中 分离得
有人工栽培 。 药用其块根 , 为 我 国 著名 中药 “ 白 首 到 的化合物 具有 十分 明 显的 抗氧化
乌 ” 的正 品 之一 , 在 我 国 已 有 余年 的药 用历 损伤作用 ⑷ , 而其总 苷 成分具 有抗抑 郁 和 免 疫调
史 。 具有补肝肾 ’ 强筋 骨 , 益精血 ’ 健脾 消食 ’ 解毒 节 活性 ⑴ 。 本 研究从滨海产耳 叶牛 皮 消药 材
疗搭 等 功 效 。 主治 腰膝麵 ’ 阳 痿 遗精 ’ 丨 叾 醇提取物隨仿 和 乙 酸乙酯部位 中翻 个苯鸣 , 心悸 失 眠 ’ 食 欲 不 振

小 儿府 积 ’ 产 后 乳 汁 乙酮类 化合 物 ,并 进 步 研究 了 其抗 氧 化活 性 。
现将研究方法和结果报告 以下 。其有效部 位和 有效 成分具 有 多 种药理 活性 , 而从
中分离 得到 的 化合物 以 及 甾 体 仪器和 材料
耳叶牛 皮消 药材采 自 江苏 省 滨海县 , 经第二军
作者简介 陈炳阳 ( 丨 七男 , 硕士研究生 隱 丨 医 大学生药教 研 室郑汉 臣教 授鉴定 为
: 丨
通讯作者 单 磊 , 丨 :― 。 熔点用 型 电热溶
点 测定仪测 定 ; 红外光谱用 型红外
药 学实践杂志 年 月 日 第 卷第 期

分析仪测 定 ;核磁共振用 型核磁共 。 」 :
振仪测定 ( 为 内标 ) ;质谱用 质 缔和羰基 ) 。
谱仪测定 ;薄层层析及 柱层析用硅胶均 为 中 国青 岛

海洋化工集 团公 司 生产 ; 为安法玛 心
西亚生物技 术上海有 限公司生产 。 超氧化物歧化酶 (
, , ,
、谷胱甘肽过氧化物酶 ( 和过氧化氢
, 。 :
酶 ( 测定试剂盒 均购 自 南京建成生物工程研究 。 谱数据
所 。 细 胞 来 自 中 科 院 上 海 细 胞 研 究 所 。 见表 ! 。 以上数据与文献报道 ” 对照基本一致 故鉴
培 养基 和 胎牛 血清 购 自 ( 。 酶标 仪为 定为 图
型超净 无菌工作台 来 自 化合物 黄色不定形粉末 , ,
上 海上净净 化设备 有 限公 司 , 一 氧化 碳培 养 箱 为


( 。

其余化学试剂均 为分析纯 。
( : ;
方法 ( ,

提取分 离 流程 耳 叶牛皮 消药材 粉碎 ’
乙醇 回 流提取 次 ,合并提取液 。 浸 出 液 减压


)浓缩得到乙 醇浸 膏 , 超声 下 用 水 分散 , 依次 用 石 油
,醚 、氯仿 、 乙酸 乙酷和水饱和正丁醇卒取 。 取氯仿卒
,取部位浸膏 ’经正 相桂胶柱色谱 ’ 以不 同 比伊 谱 数据的石細 乙 酸 乙離脱翻不 同部位 ’ 自 石《 絲 丨 。 以上擁与文随 翻本一致 ,故⑶ 乙醋 ( : —脱流份 ’ 经反复重结晶得黄色针 鉴定 为 图状结晶即化合物 ,其它部位再经正 化合物 黄色针状结 晶 ( 丙酮 ) ,胶 ( 氯仿 甲 醇 ) 和 咖如 瓜 甲 醇 ) 反 复 柱层
叩况 ⑶ 、 ‘析 ,得到化合 物 和
: ,
叫 ) ,⑷ 。 取乙酸乙 醋萃取 部位浸膏 ’ 经正相謹
甲醇 甲醇 反复柱层析 ’
翻化合物 。
( , , , ,抗氧化活 性测 定 细 胞接种于培养皿
, , , , , , ,
中 , 培 养 基 为 含 胎 牛 血清 、 青霉 素
和链 霉素 , 置 于
培养箱 中培养 。 经细胞毒测 试 , 个 苯 乙酮化
、 、 、 、 、 、 。合物在 浓度下对 细胞无任何影响 。 取 谱数据见表 。 以 上数据与 文献报道 对照基本对数期生长 的 细胞以 接种至
一致 ,故鉴疋 为 图 。孔培养 板 , 每孔加 苯 乙 酮 化合物 预处理 為 奸 曰化合物 橙黄色结 晶 ,后 ,再加 培养 后 ,胰酶消 化收
集细 胞 后 用 超 声 裂 解 细 胞 , 获 取 细 胞 匀 叛 , 按
和 试剂 盒测定说 明书 检测 ,跳
做阴性对 昭 ;
秘 沐 片 又 紅 古粉《仏 丨 、 丨 枱 粉 士一 批 若统 计 学 分析 所 有数据均 以均 数 ± 标准 差
⑴ ) 表 示 , 组 间 比 较 应 用 巧 曙 和
以 认为 有统
计 竟义 ( ’ 。 ’。、 。
、 、 、 、 。 谱数
据见表 。 以上数据与文献报道 对照基本一致 ,
化合物 结构鉴定 化合物 黄色针状结 晶 ( 甲 故鉴 定为 图 。
° 化合物 橙色结晶 ,
药学实践 杂志 年 月 日 第 卷第 期
, ,

( , 。 谱数据 见表 。 ,
, 。 以 上 数 据 与 文 献报
芳环吸收 ) 。 和 道 对照基本一致 ,故鉴定为 图 。
專 替
图 从耳 叶牛皮消分离得 到的五个苯乙 酮类化 合物 结构
表 化合物 的 谱数据 ( 表 化合物 的 和 谱数据
丨 丨


药学实践杂志 年 月 日 第 卷第 期

化合物抗氧化活性 处理 细胞 是 由于它们 的抗氧化活 性 , 大量文献报道 , 苯 乙酮类
后 , 细胞 内 、 和 的活 性减少 。 苯 乙 化合物 的抗氧化活 性主要是 由 它们能够清除活性氧
酮类化合物预处理 可 以 明显对抗 诱导 的 并且能够抑制 相应 的酶或螯合微量元素产生 的活性
抗氧化损伤作用 。 结果见表 。 本研究分离得到 的 氧 。 因此 , 本研究表 明苯 乙酮类化合物对抗
个苯乙酮类化合物主要来 自 氯仿部位 显示 出这一部 诱导的抗氧化损伤作用 主要是通过它们 能增强
位独特的药理活性 。 苯 乙 酮类化合物发挥作用 主要 抗氧化酶 、 和 的活性来实现的 。
表 耳叶牛皮 消 中 分离得到的苯 乙酮类化合物对 细胞 内抗 氧化酶活性的影响
组别
对明组 ± ± ±
模型组 ± ± ±
± ± ±
± ” ± 士
± ” ± ” ±
± ± ±
± ± ±
, 与 常对照组 比较 ’ 与模 型组 比较 。
供论
本研究 采用 损伤 的体外细 胞培养模型 研

究了耳 叶牛皮 消 中分离得到的 个苯 乙酮类化合物
的抗氧化作用 。 实验结果表 明 , 苯 乙酮类化合物能 土眺 :
增强抗氧化酶 、 和 的 活性 。 因 此 ⑷
推测 ,耳叶牛 皮消 中分离得到的苯 乙 酮类化合物对 ’
秀导的 绍 胞 的保护作用 部分是通 过提

局细胞 内 抗氧化酶活 性来实现 的 , 从而对文献报道

苯乙鋼类化合物的抗氧化机制进行了 补充 。

【参考文献 】








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