全 文 ：基金项目:科技部 973 计划前期研究专项资助项目(2012CB722601);国家重大科学仪器设备开发专项资助项目(2011YQ12003506)
作者简介:黄筑艳，女，副教授 研究方向:天然产物化学 * 通讯作者:张援虎，男，博士，研究员 研究方向:天然产物化学
Tel:(0851)83806114 E-mail:zhangyuanhu@ 263. net
·论 著·
牛角瓜化学成分及其抗肿瘤活性研究
黄筑艳1，2，敖芳芳1，吴希芝1，杨万霞1，黄滔1，张建新1，张援虎1* (1． 贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室，贵阳
550002;2． 贵州大学药学院，贵阳 550025)
摘要:目的 分离牛角瓜(Calotropis gigantea L.)中的化学成分并评价其体外抗肿瘤活性，为确定牛角瓜中的抗肿瘤有效成分
提供基础。方法 牛角瓜全株用体积分数 95%乙醇溶液加热回流提取，减压回收乙醇，浓缩液加水稀释后经石油醚、三氯甲
烷萃取，三氯甲烷萃取物利用正相硅胶、反相 Ｒp-18、微孔吸附树脂 CHP 20P、Sephadex LH － 20 等柱色谱方法分离纯化，通过理
化性质和光谱数据进行结构鉴定。结果 从牛角瓜中分离鉴定了 13 个化合物，分别为:钉头果苷(1)，乌沙苷元(2)，阿江榄
仁酸(3)，3ξ-(1ξ-hydroxyethyl)-7-hydroxy-1-isobenzofuranone(4) ，胡萝卜苷(5)，丁香脂素(6)，12-O-benzoyl-deacylmetaplexige-
nin(7) ，3-羟基-4-甲氧基苯甲酸(8)，齐墩果酸(9)，β-谷甾醇(10)，1-萘乙酸甲酯(11)，对羟基苯甲酸丁酯(12) ，α-D-olean-
dropyranoside(13)。其中化合物 2 ～ 4、6 ～ 9、11 ～ 13 为首次从该植物中分离得到。体外活性检测显示，只有化合物 1、2 对肿瘤
HLE、K562、ＲPMI8226、MCF7、MDA、WM9 细胞的增殖具有明显的抑制活性，对肿瘤 K562、ＲPMI8226 细胞株的增殖抑制活性尤
为显著。结论 初步确定牛角瓜中的抗肿瘤有效成分为强心苷类化合物钉头果苷及乌沙苷元。
关键词:牛角瓜;抗肿瘤活性;萝藦科;钉头果苷;乌沙苷元
doi:10. 11669 /cpj. 2016. 21. 002 中图分类号:Ｒ284 文献标志码:A 文章编号:1001 － 2494(2016)21 － 1826 － 05
Chemical Constituents of Calotropis gigantea L. and Their Anticancer Activity
HUANG Zhu-yan1，2，AO Fang-fang1，WU Xi-zhi1，YANG Wan-xia1，HUANG Tao1，ZHANG Jian-xin1，ZHANG
Yuan-hu1* (1． The Key Laboratory of Chemistry for Natural Products of Guizhou Province and Chinese Academy of Sciences，Guiyang
550002，China;2． The Pharmacy college of Guizhou University，Guiyang 550025，China)
ABSTＲACT:OBJECTIVE To study the anti-cancer components of Calotropis gigantean L. METHODS The powdered whole
plants of C. gigantea were extracted with 95% alcohol. After removal of the solvent，the residue was extracted with petroleum ether
and chloroform，and the compounds in the chloroform extract were isolated and purified by different column chromatograghies carried
out on silica gel，ＲP-18，MCI，and Sephadex LH － 20 and their structures were elucidated by spectral data. ＲESULTS Thirteen
compounds were isolated and their structures were characterized as gofruside(1)，uzarigenin(2) ，arjunolic acid(3) ，3ξ-(1ξ-hydroxy-
ethyl)-7-hydroxy-1-isobenzofuranone(4) ，daucosterol(5) ，syringaresinol(6) ，12-O-benzoyl-deacylmetaplexigenin(7) ，3-hydroxy-4-
methoxybenzoic acid(8) ，oleanolic acid(9) ，β-sitosterol(10) ，methyl 1-naphthaleneacetate(11) ，butylparaben(12) ，α-D-oleandropy-
ranoside(13) ，and compounds 2 － 4，6 － 9，and 11 － 13 were isolated from this plant for the first time. Compounds 1 and 2 showed cy-
totoxicity against HLE，K562，ＲPMI8226，MCF7，MDA，and WM9 cell lines，with K562 and ＲPMI8226 being the most sensitive
cells. CONCLUSION Compounds 1 and 2 are premilinarily judged as the anti-cancer components in C. gigantean.
KEY WOＲDS:Calotropis gigantea;Antitumor activity;Asclepiadaceae;gofruside;uzarigenin
牛角瓜(Calotropis gigantea L. )为萝藦科(Ascl-
epiadaceae)牛角瓜属植物，又名哮喘树、羊浸树、断
肠草，广泛分布于我国海南、广东、四川和云南等
地［1］。牛角瓜属植物在民间具有广泛的药用价值，
其根、茎、叶、果及各部位的白色汁液均可药用，具有
抗菌、消炎、驱虫、化痰、解毒等作用，用于哮喘、咳
嗽、麻风病、溃疡、痔疮、肿瘤等疾病的治疗［2］。研
究表明，牛角瓜属植物中主要含有强心苷、C21甾体、
三萜、黄酮类等成分［3-5］。前期体外抗肿瘤活性研究
发现，牛角瓜总提物有较好的抑制人白血病细胞株
K562 增殖的作用，表明其可能具有抗肿瘤活性，因
此对其化学成分进行了较深入的研究，并对分离鉴
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定的单体化合物进行了体外抗肿瘤细胞生长活性检
测，为确定牛角瓜中的抗肿瘤有效成分提供了基础。
1 仪器与材料
X4显微熔点仪(温度计未校正);MS5973 型质谱
仪(美国 HP 公司);VG Auto Spec 3000 型质谱仪;
Varian INOVA －400型核磁共振波谱仪(美国);Bruk-
er Avance 500型核磁共振波谱仪(德国);柱色谱硅胶
(300 ～400目)、硅胶 H(10 ～ 40 μm)(青岛海洋化工
厂);Ｒp-18(40 ～60 μm) (日本 YMC公司);MCI CHP
20P(75 ～150 μm) (日本三菱化学有限公司);Sepha-
dex LH － 20(40 ～ 70 μm) (Amersham Pharmacia Bio-
tech AB公司)。二氧化碳培养箱(美国 Thermo Fisher
Scientific公司);倒置荧光显微镜(德国 ZEISS公司);
生物安全柜(美国 Thermo Fisher Scientific 公司);酶
标仪(美国 Gene company)。所用溶剂均为重蒸工业
试剂，石油醚沸点范围为 60 ～ 90 ℃。用于研究的肿
瘤细胞株 HLE、K562、ＲPMI8226、MCF7、MDA、WM9
均来自于加拿大多伦多大学细胞库。
药材于 2012 年 9 月采于云南元江县洼垤乡，经
西双版纳植物园肖春芬教授鉴定为牛角瓜(Calotro-
pis gigantea L. )。标本存放于贵州省中国科学院天
然产物化学重点实验室。
2 实验方法
2. 1 提取与分离
15 kg 干燥牛角瓜粉碎后，用体积分数 95%乙
醇加热回流提取 4 次，提取液减压浓缩后，浓缩液加
水溶解，依次用石油醚、三氯甲烷萃取，得到石油醚、
三氯甲烷萃取物。三氯甲烷萃取物 206 g 经硅胶
(200 ～ 300 目)柱色谱，三氯甲烷-甲醇(100∶ 0→0∶
100)梯度洗脱，TLC 检测合并，得到 6 个流分
(A ～ F)。流分 A(30 g)经正相硅胶柱色谱分离，三
氯甲烷-甲醇(100∶ 0→0∶ 100)梯度洗脱，得到 6 个部
分(A1 ～ A6)，其中 A2部分(3. 1 g)再经正相硅胶柱
色谱分离，石油醚-丙酮、石油醚-乙酸乙酯系统梯度
或等度洗脱，洗脱物再经 Sephadex LH － 20 反复分
离纯化，重结晶，得到化合物 11(14 mg)、12(6
mg)。同理，流分 B(35 g)再经正相硅胶、Sephadex
LH －20、反相 Ｒp-18 柱色谱反复分离纯化，得到化
合物 3(10 mg)、4(9 mg)、6(16 mg)、9(17 mg)、10
(21 mg)、13(10 mg)。流分 C(28 g)经微孔吸附树
脂 CHP 20P柱色谱分离，甲醇-水(50∶ 100→100∶ 0)
梯度洗脱得到 7 部分(C1 ～ C7)，其中 C2部分(2. 4
g)再经反相 Ｒp-18［甲醇-水(50∶ 100→0 ∶ 100)］、葡
聚糖凝胶 LH －20［三氯甲烷-甲醇(1∶ 1)］和正相硅
胶(石油醚-丙酮(100∶ 0→0∶ 100))柱色谱反复分离
纯化，得到化合物 2(35 mg)、7(18 mg)、8(20 mg)。
同理，流分 D(30 g)经微孔吸附树脂 CHP 20P 柱色
谱分离，甲醇-水(30 ∶ 100→100 ∶ 0)、反相 Ｒp-18［甲
醇-水(30∶ 100→0 ∶ 100)］、葡聚糖凝胶 LH － 20［三
氯甲烷-甲醇(1∶ 1)］和正相硅胶［石油醚-乙酸乙酯
(100∶ 0→0∶ 100)］柱色谱反复分离纯化，得到化合
物 1(20 mg)、5(12 mg)。
2. 2 结构鉴定
化合物 1:白色针晶，mp 165 ～ 167 ℃。ESI-MS
m/z:559. 2［M + Na］+。1H-NMＲ(CD3OD，400 MHz)
δ:5. 89(1H，s，H-22)，5. 05，4. 93(各 1H，d，J = 18. 6
Hz，H-21) ，4. 74(1H，d，J = 8. 0 Hz，H-1) ，3. 86，
3. 83(各 1H，d，J = 12. 0 Hz，H-19) ，3. 73(1H，d，J =
11. 2 Hz，H-19) ，3. 70(1H，m，H-3) ，1. 23(3H，d，J =
5. 6 Hz，H-6) ，0. 92(3H，s，H-18)。13 C-NMＲ(100
MHz，CD3 OD)δ:32. 6(C-1，t)，30. 8(C-2，t) ，79. 4
(C-3，d) ，35. 8(C-4，t) ，45. 8(C-5，d) ，29. 4(C-6，
t) ，28. 7(C-7，t) ，43. 0(C-8，d) ，51. 4(C-9，d) ，52. 1
(C-10，d) ，24. 0(C-11，t) ，40. 5(C-12，s) ，49. 6(C-
13，s) ，86. 6(C-14，s) ，33. 3(C-15，t) ，28. 0(C-16，
t) ，51. 1(C-17，s) ，16. 5(C-18，q) ，210. 6(C-19，s) ，
178. 7(C-20，s) ，75. 4(C-21，t) ，117. 7(C-22，d) ，
177. 4(C-23，s) ，99. 8(C-1，d) ，72. 5(C-2，d) ，72. 9
(C-3，d) ，74. 4(C-4，d) ，70. 5(C-5，d) ，18. 2(C-
6，q)。以上数据与文献［6］报道的钉头果苷(go-
fruside)一致。
化合物 2:无色针晶，mp 230 ～ 232 ℃。EI-MS
m/z:374 ［M］+，356，341，323，203，165，147，111。
1H-NMＲ(CDCl3，400 MHz)δ:5. 89(1H，s，H-22)，
5. 05(2H，dd，J = 1. 6，18. 8 Hz，H-21) ，2. 84(1H，dd，
J = 4. 8，8. 4 Hz，H-17) ，3. 52(1H，m，H-3) ，0. 88
(3H，s，H-19) ，0. 83(3H，s，H-18)。13C-NMＲ(CDCl3，
100 MHz)δ:37. 0(C-1，t)，31. 3(C-2，t) ，71. 1(C-3，
d) ，37. 8(C-4，t) ，44. 3(C-5，d) ，28. 4(C-6，t) ，27. 3
(C-7，t) ，41. 6(C-8，d) ，49. 7(C-9，d) ，35. 7(C-10，
s) ，21. 2(C-11，t) ，39. 8(C-12，t) ，49. 5(C-13，s) ，
85. 5(C-14，d) ，33. 0(C-15，t) ，26. 8(C-16，t) ，50. 8
(C-17，d) ，15. 7(C-18，q) ，12. 2(C-19，q) ，174. 5(C-
20，s) ，73. 4(C-21，t) ，117. 7(C-22，d) ，174. 6(C-23，
s)。以上数据与文献［7］报道的乌沙苷元(uzarige-
nin)一致。
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化合物 3:白色粉末，mp 332 ～ 334 ℃。EI-MS
m/z:488［M］+，470，248，203。1 H-NMＲ(CDCl3，400
MHz)δ:5. 29(1H，m，H-12)，3. 75(1H，dt，J = 4. 4，
12. 0 Hz，H-2) ，3. 58(1H，d，J = 10. 8 Hz，Hb-23) ，
3. 37(1H，d，J = 10. 8 Hz，H-3) ，3. 36(1H，d，J =
10. 6 Hz，Ha-23) ，1. 14(3H，s，H-27) ，1. 01(3H，s，H-
25) ，0. 93(3H，s，H-30) ，0. 90(3H，s，H-29) ，0. 82
(3H，s，H-26) ，0. 78(3H，s，H-24)。13C-NMＲ(CDCl3，
100 MHz)δ:12. 5(C-24，q)，16. 8(C-26，q) ，16. 9
(C-25，q) ，18. 1(C-6，d) ，22. 9(C-11，t) ，23. 3(C-
16，t) ，23. 5(C-30，q) ，25. 8(C-27，q) ，27. 5(C-15，
t) ，30. 6(C-20，s) ，32. 1(C-22，t) ，32. 4(C-7，t) ，
33. 0(C-29，q) ，33. 8(C-21，t) ，38. 0(C-10，s) ，39. 1
(C-14，s) ，41. 1(C-18，d) ，41. 7(C-8，s) ，45. 7(C-1，
t) ，45. 8(C-19，t) ，42. 4(C-4，s) ，46. 2(C-17，s) ，
47. 4(C-9，d) ，48. 5(C-5，d) ，68. 3(C-2，d) ，69. 0(C-
23，t) ，79. 5(C-3，d) ，122. 0(C-12，d) ，143. 8(C-13，
s) ，180. 8(C-28，s)。以上数据与文献［8］报道的阿
江榄仁酸(arjunolic acid)一致。
化合物 4:褐色固体，mp 102 ～ 103 ℃。EI-MS
m/z:194 ［M］+，150，121，93。1 H-NMＲ(CDCl3，500
MHz)δ:11. 0(1H，s，HO-7)，7. 56(1H，t，J = 7. 8
Hz，H-5) ，7. 04(1H，d，J = 7. 8 Hz，H-4) ，7. 00(1H，
d，J = 7. 8 Hz，H-6) ，4. 62(1H，m，H-3) ，1. 52(1H，d，
J = 6. 0 Hz，H-2)。13 C-NMＲ(CDCl3，125 MHz)δ:
168. 6(C-1，s)，69. 0(C-3，d) ，116. 3(C-4，d) ，136. 9
(C-5，d) ，117. 7(C-6，d) ，161. 9(C-7，s) ，106. 6(C-
8，s) ，141. 2(C-9，s) ，80. 0(C-1，d) ，17. 9(C-2，q)。
以上数据与文献［9］报道的 3ξ-(1ξ-hydroxyethyl)-7-
hydroxy-1-isobenzofuranone一致。
化合物 5:白色无定形粉末，mp 295 ～ 298 ℃。
5%硫酸乙醇溶液喷雾，加热显红色，ESI-MS m/z:
599. 3［M + Na］+。与胡萝卜苷标准品进行 TLC 对
照，在 3 种溶剂系统中展开，Ｒf 值一致，且混合熔点
不下降，故确定为胡萝卜苷(daucosterol)［10］。
化合物 6:白色固体，mp 174 ～ 176 ℃。EI-MS
m/z(%):418 ［M］+，387，251，181，167。1 H-NMＲ
(CDCl3，400 MHz)δ:6. 59(4H，s，H-2，6，2，6)，
5. 54(2H，s，OH-4，4) ，4. 74(2H，d，J = 4. 4 Hz，H-7，
7) ，4. 30(2H，dd，J = 6. 8，9. 2 Hz，H-9e，9e) ，3. 92
(2H，m，H-9a，9 a) ，3. 91(12H，s，OMe-4) ，3. 10
(2H，m，H-8，8)。13 C-NMＲ(CDCl3，100 MHz) δ:
147. 1(C-3，5，3，5，s)，134. 2(C-4，4，s) ，132. 0(C-
1，1，s) ，102. 6(C-2，6，2，6，d) ，86. 0(C-7，7，d) ，
71. 8(C-9，9，t) ，56. 3(OMe，d) ，54. 3(C-8，8，q)。
以上数据与文献［11］报道的丁香脂素(syringares-
inol)一致。
化合物 7:白色结晶，mp 236 ～ 238 ℃。ESI-MS
m/z:507. 1［M + Na］+。1 H-NMＲ(CDCl3，400 MHz)
δ:7. 95(2H，d，J = 7. 2 Hz，H-3，7)，7. 55(1H，t，J =
7. 4 Hz，H-5) ，7. 44(2H，t，J = 7. 8 Hz，H-4，6) ，5. 38
(1H，brs，H-6) ，2. 08(3H，s，H-21) ，1. 56(3H，s，H-
18) ，1. 14(3H，s，H-19)。13C-NMＲ(CDCl3，100 MHz)δ:
38. 6(C-1，t)，30. 7(C-2，t) ，71. 7(C-3，d) ，38. 6(C-4，
t) ，140. 4(C-5，s) ，117. 7(C-6，d) ，34. 1(C-7，t) ，74. 2
(C-8，s) ，43. 5(C-9，d) ，36. 9(C-10，s) ，24. 1(C-11，t) ，
73. 1(C-12，d) ，58. 2(C-13，s) ，88. 0(C-14，s) ，33. 1
(C-15，t) ，31. 9(C-16，t) ，91. 4(C-17，s) ，9. 5(C-18，
q) ，18. 5(C-19，q) ，209. 5(C-20，s) ，27. 4(C-21，q)
165. 3(C-1，s) ，129. 8(C-2，s) ，129. 5(C-3，d) ，128. 4
(C-4，d) ，133. 1(C-5，d) ，128. 4(C-6，d) ，129. 5(C-
7，d)。以上数据与文献［12］报道的 12-O-benzoyl-
deacylmetaplexigenin一致。
化合物 8:白色粉末，mp 178 ～ 180 ℃。EI-MS
m/z:168［M］+，154，140，112，86。1 H-NMＲ(CDCl3，
400 MHz)δ:7. 67(1H，dd，J = 8. 0，2. 0 Hz，H-6)，
7. 57(1H，d，J = 2. 0 Hz，H-2) ，6. 93(1H，d，J = 8. 0
Hz，H-5) ，3. 94(3H，s，OCH3)。
13 C-NMＲ(CDCl3，100
MHz)δ:121. 6(C-1，s)，113. 9(C-2，d) ，146. 0(C-
3，s) ，150. 0(C-4，s) ，111. 8(C-5，d) ，124. 2(C-6，
d) ，168. 5(C O，s)，55. 6(OCH3，q)。以上数据与
文献［13］报道的 3-羟基-4-甲氧基苯甲酸(3-hydrox-
y-4-methoxybenzoic acid)一致。
化合物 9:白色粉末(CHCl3)，mp 298 ～ 300 ℃。
EI-MS m/z:456 ［M］+，248，203。1 H-NMＲ(CDCl3，
400 MHz)δ:5. 29(1H，t，J = 4. 0 Hz，H-12)，3. 24
(1H，dd，J = 12. 0，4. 0 Hz，H-3) ，1. 13(3H，s，CH3-
27)，0. 99(3H，s，CH3-25)，0. 93(3H，s，CH3-23)，
0. 91(3H，s，CH3-26)，0. 90(3H，s，CH3-30)，0. 77
(3H，s，CH3-29)，0. 75(3H，s，CH3-24)。
13 C-NMＲ
(CDCl3，100 MHz)δ:38. 3(C-1)，27. 1(C-2) ，79. 0
(C-3) ，38. 7(C-4) ，55. 1(C-5) ，18. 2(C-6) ，32. 6(C-
7) ，39. 2(C-8) ，47. 6(C-9) ，37. 0(C-10) ，22. 9(C-
11) ，122. 6(C-12) ，143. 5(C-13) ，41. 6(C-14) ，27. 6
(C-15) ，23. 3(C-16) ，46. 5(C-17) ，41. 0(C-18) ，
45. 8(C-19) ，30. 6(C-20) ，33. 8(C-21) ，32. 4(C-
22) ，28. 0(C-23) ，15. 5(C-24) ，15. 2(C-25) ，17. 0
(C-26) ，25. 9(C-27) ，182. 7(C-28) ，33. 0(C-29) ，
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23. 5(C-30)。以上数据与文献［14］报道的齐墩果
酸(oleanolic acid)一致。
化合物 10:白色针状结晶(CHCl3)，mp 140 ～
142 ℃。5%硫酸乙醇溶液喷洒，加热显砖红色，与
β-谷甾醇标准品进行 TLC 对照，在 3 种溶剂系统中
展开，Ｒf值一致，且混合熔点不下降，故确定为 β-谷
甾醇(β-sitosterol)。
化合物 11:黄色油状物，EI-MS m/z:200
［M］+，141，127，115。1H-NMＲ(CDCl3，400 MHz)δ:
7. 96(1H，brd，J = 8. 0 Hz，H-8)，7. 80(1H，brd，J =
8. 0 Hz，H-5 ) ，7. 73(1H，brd，J = 8. 0 Hz，H-4) ，
7. 33 ～ 7. 50(4H，m，H-2，3，6，7) ，4. 00(2H，s，H-
1) ，3. 74 (3H，s，-OCH3)。
13 C-NMＲ (CDCl3，100
MHz)δ:38. 8(C-1，t)，171. 8(C-2，s) ，51. 9(C-3，q) ，
131. 9(C-1，s) ，126. 2(C-2，d) ，125. 3(C-3，d) ，
127. 9(C-4，d) ，128. 6(C-5，d) ，128. 7(C-6，d) ，
125. 6(C-7，d) ，123. 6(C-8，d) ，130. 3(C-9，s) ，
133. 6(C-10，s)。以上数据与文献［15］报道的 1-萘
乙酸甲酯(methyl 1-naphthaleneacetate)一致。
化合物 12:白色结晶粉末，mp 72 ～ 74 ℃。EI-
MS m/z:194 ［M］+，138，121。1 H-NMＲ(CDCl3，400
MHz)δ:7. 97(2H，d，J = 8. 0 Hz，H-2，H-6)，7. 26
(1H，s，-OH) ，6. 89(2H，d，J = 8. 0 Hz，H-3，H-5) ，
4. 32(2H，t，J = 8. 0 Hz，H-1) ，0. 99(3H，t，J = 8. 0
Hz，H-4)。13 C-NMＲ(CDCl3，100 MHz)δ:123. 1(C-
1)，132. 2(C-2，C-6) ，161. 6(C-4) ，115. 5(C-3，C-
5) ，167. 0(-CO-Ph) ，65. 2(C-1) ，31. 0(C-2) ，19. 6
(C-3) ，14. 0(C-4)。以上数据与文献［16］报道的
对羟基苯甲酸丁酯(butylparaben)一致。
化合物 13:白色粉末，mp 192 ～ 194 ℃。ESI-MS
m/z:199. 1［M + Na］+。1 H-NMＲ(CDCl3，400 MHz)
δ:3. 39(3H，s，-OCH3)，3. 33(3H，s，-OCH3)，1. 31
(3H，d，J = 6. 0 Hz，H-6)。13 C-NMＲ(CDCl3，100
MHz)δ:98. 4(C-1，d)，33. 8(C-2，t) ，78. 3(C-3，d) ，
76. 0(C-4，d) ，67. 3(C-5，d) ，17. 8(C-6，q) ，54. 6(C-
1-OMe，q) ，56. 4 (C-3-OMe，q)。以上数据与文
献［17］报道的 α-D-oleandropyranoside一致。
2. 3 抗肿瘤活性检测
白血病细胞 HLE、K562，人多发性骨髓瘤细胞
株 ＲPMI8226，乳腺癌 MCF7 及 MDA，黑色素瘤细胞
WM9 均培养于含有 5% FBS 的 ＲPMI-1640 培养液
中(pH 7. 2 ～ 7. 4)，培养环境为 37 ℃、饱和湿度、
5% CO2培养箱。采用 MTT 法检测分离的化学成分
对培养的上述细胞体外增殖的抑制活性。
3 结 果
体外检测了 5 μmol·L －1化合物对多种癌细胞
的生长抑制，结果表明，只有化合物 1、2 对肿瘤
HLE、K562、ＲPMI8226、MCF7、MDA、WM9 细胞的增
殖具有明显的抑制活性(表 1)，其中对白血病细胞
K562 的生长抑制活性尤为显著，接近阳性对照药多
柔比星的活性。进一步分析了不同浓度对白血病细
胞 K562 生长的抑制作用，以计算其 IC50值(图 1)。
结果表明，这两个化合物对 K562 细胞生长的抑制
作用与浓度有一定的关联性，表明其抑制作用是浓
度依赖性的。另外，根据其浓度抑制曲线，计算得到
化合物 1 和化合物 2 的 IC50值分别为(10. 89 ±
1. 26)和(7. 39 ± 1. 47)μmol·L －1。而阳性对照药
多柔比星的 IC50值为(3. 48 ± 1. 58)μmol·L
－1，化
合物 2 的 IC50值与多柔比星的较接近(图 2)，说明
化合物 2 的抗白血病活性较强。这些结果表明，将
化合物 1 与化合物 2 作为母体化合物，进行结构修
饰后，可能会得到较为理想的抗癌候选化合物。
表 1 牛角瓜化合物 1 和 2 对癌细胞生长的抑制作用．
n = 3，珋x ± s
Table 1 Inhibitory effects of compounds 1 and 2 from
C. gigantea on cancer cell lines． n = 3，珋x ± s
Compounds
Inhibitory /%
HLE K562 ＲPMI8226
1 38. 76 ± 2. 38 68. 98 ± 5. 27 59. 34 ± 3. 26
2 37. 54 ± 3. 46 75. 24 ± 6. 85 54. 25 ± 3. 38
Doxorubicin 86. 26 ± 5. 42 82. 9 ± 1. 09 92. 38 ± 1. 64
Compounds
Inhibitory /%
MCF7 MDA WM9
1 37. 29 ± 2. 69 45. 24 ± 2. 19 20. 12 ± 1. 89
2 42. 36 ± 4. 25 48. 37 ± 3. 58 21. 53 ± 2. 31
Doxorubicin 95. 37 ± 1. 98 91. 25 ± 2. 38 92. 56 ± 1. 75
图 1 牛角瓜化合物1和2对K562癌细胞生长的浓度抑制曲线．
n =3，珋x± s
Fig. 1 Concentration inhibition curve of compounds 1 and 2
from C. gigantea towards K562 cell line． n = 3，珋x ± s
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中国药学杂志 2016 年 11 月第 51 卷第 21 期 Chin Pharm J，2016 November，Vol. 51 No. 21
图 2 牛角瓜化合物 1 和 2 对不同细胞生长抑制作用
Fig. 2 Inhibitory effects of compounds 1 and 2 from C. gigantea
on different cell lines
实验结果表明，样品牛角瓜乙醇提取物、化合物
1、化合物 2 对试验细胞株均有抑制作用，对 K562
细胞株抑制作用较强，这些研究结果为深入研究和
开发牛角瓜植物资源提供了科学依据。
致谢:核磁共振波谱数据和质谱数据由贵州省中国科学院天
然产物重点实验室仪器室提供;抗肿瘤活性测试实验数据由
肿瘤药理学课题组提供。
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·0381· Chin Pharm J，2016 November，Vol. 51 No. 21 中国药学杂志 2016 年 11 月第 51 卷第 21 期