全 文 ：2 0 1 0 年
第 24 卷 第 5 期
实 用 中 医 内 科 杂 户匕
J O UR NAL O FP RAC TIC A L R TA D OI ! TN A L C HIN E S E NI E R TNA L M E D IC NI E
红药气雾剂质量标准的研究
张春玲` ,
( 1
. 辽宁省沈阳红药制药有限公司 ,辽宁沈阳
周晓琳 , , 郑 霞2
1 仪日4 ;2 . 辽宁省中医药研究院 ,辽宁沈阳 n o 34
摘 要 : 【目的 ]建立红药气雾剂的现代质量控制方法。 「方法〕分别采用薄层 色谱 、 高效液相 色谱法 ,对红药气雾剂
进行质量控制研究 。 【结果 l薄层色谱斑点清晰 ;人参皂普 R g ,进样量在 3 . % 此 一 9 . 24 此 范围 内呈良好线性关 系 ,平均
样品回收率为 10 . 2% ( n = 6) , sR D 为 1 . 95 % , 经三批测定 ,本品每 l m L 药液含人参皂普 飞 ,均不低于 1 . 50 m g 。 〔结论〕
本方法可作为红药气雾剂的质量控制方法 。
关 键 词 : 红药气雾剂 ; 质量标准 ; 薄层色谱法 ; 高效液相色谱法 ; 含量测定
中图分类号 : R 一 3 3 文献标识码 : A d io : l o . 39 69j/ . is s n . 167 1 一 7 8 13 . 20 10 . 仍 . 13
S t u d y o n Q u a liyt S t a n d a dr fo r Ho n g y a o A e r o s o l
z H A N G C h u n 一 l i n g l , z H o U X i a o 一 il n l , z H E N G x i a Z
( 1
.
S h e叮an g H o n群 a o P h a mr a e e u柱e al C o . , L t d , S h e n y a n g 1 10 0 4 4 , U a o n i嗯 , C h i an ;
2
.
T r a d i t i o n a l C h i n e s e M o d i e i n e R e s e ar e h nI
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( H P L C )
.
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10 0
.
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.
9 5 % )
.
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R g l d id n o t l e s s ht an 1
.
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A e or so L
K e y W o dr s
: H o n g y a o a e or
s o l : qU
a li yt s t a n d a r d ; T L C ; H P L C ; d e t e mr i
n e
红药气雾剂具有止痛 、 活血 、 生新功效 。 为保证
药物临床疗效 , 采用 T L C 法对红药气雾剂处方中三
七 、 当归 、川芍等 6 味药材进行定性鉴别 , 同时以人参
皂昔 R g ,为代表性成分 , 采用 H P L C 法进行了含量测
定 , 以期为红药气雾剂的质量评价提供科学依据 。
1 仪器与试剂
高效液相色谱仪 、 L C 一 10 A vT p 溶剂输送泵 、 S P D
一 10 A vP 紫外 一 可见检测器 ( 日本岛津 ) , N 一 2 0 0 色
谱工作站 (浙江大学智达有限公司 ) ;红药气雾剂 (沈
阳精诚药业有 限公司生产 。 批号 : 07 01 01 、 07 01 02 、
07 0 103 )
。 人参皂昔 R g , ( 中 国药 品生物制 品检定所
提供 。 供含量测定用批号 : n 07 03 一 20 03 2 ) 。 乙睛
( 山东禹王实业有限公司禹城化工厂 ) , 色谱纯 。 乙
醇 、 乙醚 、磷酸 、二氯 甲烷 、醋酸乙醋 、 甲醇 、 正丁醇 、石
油醚等均为分析纯 。
2 定性鉴别
2
.
1 三七 的薄层色谱 鉴别 取排除抛射剂后 的药
液 25 m L , 减压干燥 ,残渣加水 s m L 溶解 , 乙醚提取 2
次 , 每次 巧m L ,弃去乙醚相液 , 水相 以水饱和的正丁
醇提取 3 次 , 每次 巧 m L , 合并正丁醇液 , 用正丁醇饱
和的水洗涤 5 次 ,每次 O3 m L ,正丁醇液减压蒸干 , 残
渣加甲醇 s m L 使溶解 ,作为供试品溶液 。 另按处方
配伍比例称取不含三七的药材 ,用 90 % 乙醇 回流提
取三次 ,提取液滤过 ,滤液合并 ,减压 回收乙醇至相对
密度 0 . 85 一 0 . 87 ( 25 ℃ ) ,取本品适量 , 与供试品平行
操作 ,制备阴性对照液 。 另取三七对照药材粉末 2 9 ,
加甲醇 lo m L超声提取 3o im n ,滤过 ,滤液作为对照药
材溶液 。 吸取上述溶液各 1o 泌 , 分别 点于同一 以梭
甲基纤维素钠为粘合剂 的硅胶 G 薄层板上 , 以二氯
甲烷 一 醋酸乙醋 一 甲醇 一 水 ( 巧 : 40 : 2 : 10) 10 ℃ 以
下放置的下层液为展开剂 ,展开 , 取出 , 晾干 , 喷以 lO
% 硫酸乙醇溶液 , 在 12 0℃ 烘箱中加 热数分钟 ,观察
显相同颜色的斑点 。
2
.
2 薄荷脑 、 冰片的 薄层色谱鉴 别 取排除抛射剂
后药液 2 . s m L ,加石油醚 ( 3O 一 6o ℃ ) 3 m L 提取 ,分取
石油醚层作为供试品溶液 ; 另按照处方配伍比例称取
薄荷脑 、 冰片阴性的其他药材 ,按照 2 . 1 项下喷雾剂
制备工艺及本鉴别供试液制备方法 , 制备薄荷脑 、 冰
片阴性对照液 ,备用 ,即得 ;取薄荷脑 、冰片对照品 ,加
石油醚 ( 3o 一 6o ℃ ) 制成每 l m L 各含 s m g 的混合溶
液 ,作为对照品溶液 · 。 吸取上述溶液各 lo 闪 , 分别
点于同一以梭甲基纤维素钠为粘合剂 的硅胶 G 薄层
板上 , 以环 己烷 一 醋酸乙醋 ( 17 : 3) 为展开剂 ,展开 ,
取出 , 晾干 , 喷以 5 % 香草醛硫酸溶液 , 于 60 ℃烘数分
钟 ,观察显相同颜色的荧光斑点 。
2
.
3 当归 、 川 芍的薄层 色谱鉴别 取排除抛射剂 的
药液 oZ m L , 加乙醚 OZ m L 萃取 1 次 , 分离乙醚层 , 低
温浓缩至 3 m L 作为供试品溶液 。 另按照处方配伍比
例称取当归 、川芍阴性的其他药材 ,按照 2 . 1 项下喷
雾剂制备工艺及本鉴别供试液制备方法 ,制备当归 、
川弯阴性对照液 ,备用 , 即得 ; 另取当归 、 川芍药材各
.0 2 9
,加乙醚 10 m L 加热提取 l h ,制成药材对照溶液 。
分别吸取上述三种溶液各 lo 林L 点 于同一 以梭甲基
纤维素钠为粘合剂的硅胶 G 薄层板上 , 以 甲苯 一 乙
酸乙醋 ( 3o : l) 为展开剂 ,展开 ,取出 , 晾干 , 置紫外灯
( 36 5~ )下观察 ,显示相同颜色的荧光斑点 。
实 用 中 医 内 科 杂 志
J O UR N A LO F P R AC T 】C A T R LAD !T !O N A LC H I NE S E ! NT E R N A LME D IC I NE
May
.
20 10
V o l
.
4 N 2o
.
5
表明 : 方法重复性良好 。
3
.
7稳定性试验 精密吸取同一供试品溶液 (批号
m o l o 一) ,分别于 。 、 2 、 4 、 s 、 一2 、 24 h 进样分析分析 , 测
定人参皂昔 R g l 含量变化 , 结果 R S D 为 1 . 89 % ,结果
表明 : 供试品溶液在 24 h 内稳定 。
3
.
8 加样 回收率试验 精密称取已 知含量的供试
品 6 份 (批号 7 0 10 1 ,含量 l . 6 2 l m岁 m L ) ,分别按每份
l m L
,精密加人人参皂昔 R g ;对照品 1 . 7 m g 比例 ,制备
适量加标溶液 。 分别按供试品溶液制备方法制备供
试品溶液 ,进样 , 测定人参皂昔 R g l 含量 ,计算 回收
率 。 结果见表 1 。
表 1 加样回收率试验考查结果
编号 实测量
( m g )
3
.
2 8 0
回收率
(% )
9 7
.
6
10 2
.
2
9 8
.
4
1(X)
.
0
1(X)
.
5
10 2
.
4
均值 粼
10
.
2 1
.
9 5
5894230
内jZ八、ù凡j,J八j飞ù
2
.
4 白芷 的薄层色谱鉴别 取排除抛射剂 的药液
2 0 m L
, 加乙醚提取 2 次 , 每次 OZ m L , 合并提取液 ,低
温浓缩至 3 m L 作为供试品溶液 。 另按照处方配伍比
例称取白芷阴性的其他药材 ,按照 2 . 1 项下喷雾剂制
备工艺及本鉴别供试液制备方法 ,制备白芷阴性对照
液 ,备用 ,即得 ;取白芷药材 2 9 ,加乙醚 巧 n 1 L 超声提取
30 而 n ,过滤 ,滤液低温浓缩至 3 I n L 作为对照药材溶液 。
分别吸取上述三种溶液各 10 闪 , 点于同一以梭甲基纤
维素钠为粘合剂的硅胶 G 薄层板上 , 以石油醚 ( so ~
6O ℃ ) 一 乙醚 ( 3 : 2) 为展开剂展开 , 取出晾干 ,置紫外
灯 ( 3 65 n m )下观察 ,显相同颜色的荧光斑点。
3 含最测定
3
.
1 色 谱 条 件 D i a mo n s il C : 。 柱 ( 20 0 x 4 . 6 n
,
5 林 I n ) ; 流动相 : 乙睛 一 水 一 磷酸 ( 2O : 80 : 0 . 05 ) ( w
V ) ;检测波长 : 20 3~ ;流速 : 1 . 0 11 11 / 而 n 。 柱温 : 25 ℃ 。
3
.
2 对照 品溶液的制备 精密称取以五氧化二磷为
干燥剂减压干燥 4 h8 的人参皂昔 R g l 对照品 3 . 3 m g ,
加甲醇制成 0 . 6 m留m L 溶液 ,作为对照品溶液 。
3
.
3 供试 品溶液的制备 精密量取红药喷雾剂药液
(排除抛射剂 ) 2 . 5 】l lL , 加 甲醇定容至 10 1n L , 摇匀 , 滤
过 ,作为供试品溶液 , 即得 。
3
.
4
` 线性范 围可考查 分别精密吸取对照品溶液 6 、
8
、
10
、
12
、
14 闪 ,按照上述色谱条件进样测定色谱峰峰
面积 , 以人参皂昔 R g :进样量 ( x )对色谱峰峰面积 ( Y )
绘制标准曲线 ,得回归方程为 : y = 21 6 0 7 7 x 一 16 23 43 r 二
0
.
9 92
。 结果表明 : 人参皂昔 R g : 进样量在 3 . % 林 g 一
.9 24 林 g 范围内 ,与峰面积呈良好线性关系 。
3
.
5 精 密度试验 精密吸取人参皂昔 R g l对照品溶
液 10 林 L ,重复进样 6 次 , 测定峰面积 , 结果 R S D 为
1
.
8 %
,方法精密度良好 。
3
.
6 重 复性试验 取同一批样品 (批号 : 07 01 01 ) ,
按照上述供试品溶液制备方法 , 平行制备供试品溶液
6 份 ,分别进样 ,测定含量 , 结果 R S D 为 0 . 90 % ,结果
理论值
( m g )
1
.
6 2 1
1
.
6 2 1
1
.
6 2 1
1
.
6 2 1
1
.
6 2 1
1
.
6 2 1 3
.
36 2
4 样品测定
按照处方配伍比例制备三七药材阴性的喷雾剂
及按供试品溶液制备方法制备三七 阴性对照液 , 备
用 , 即得 。 分别精密吸取对照品溶液 、供试品溶液及
阴性对照液 2o 闪 (采用 2O 闪 定量环 ) ,注人液相色谱
仪 ,按照上述色谱条件进行测定 ,连测三批 ,结果见表
2
。 色谱图见图 l 、 图 2 、 图 3 。
表 2 红药气雾剂人参皂普 R g l含里测定结果
批号 测得值 (
m岁m L )
07 0 10 1
07 01 02
0 7 0 10 3
第 1 次
1
.
5 82
1
.
5 6 1
l
,
5 7 3
第 2 次
1
.
5 7 1
1
.
5 7 2
1
.
5 9 0
第 3 次
1
.
5 15
1
.
5 62
1
.
5 7 2
平均值 ( m盯mL )
1
.
5 5 6
1
.
56 5
1
.
57 8
、, , ; _ _ _
{
_
时间伽 10)
图 1 人参皂昔 Rg ; HP优 图 2
5 小 一结
上述试验结果表明 : 三七 、 当归 、 川芍 、 白芷 、 冰
片 、 薄荷脑六味药材 LT C 鉴别及人参皂昔 R g : H PL C
测定 ,方法便捷 ,专属性好 ,可为红药气雾剂质量标准
制定提供科学依据 。
参考文献
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(收稿 日期 : 2 0 0 9 一 1 2 一 2 0 )