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薄层扫描法测定腹水草根部熊果苷的含量



全 文 :薄层扫描法测定腹水草根部
熊果苷的含量
Content Determination of Arbutin in Villosulous Veronicastrum
Herb or Root by LSM
赵焕霞 Zhao Huanxia1 ,石延榜 Shi Yanbang 2
1.三门峡市食品药品检验所 , 河南 三门峡 472000
Sanmenxia Municipal Institute for Food and Biochemical
Drug Control , Sanmenxia , Henan , China , 472000
2.河南中医学院 , 河南 郑州 450008
Henan College of T raditional Chinese Medicine ,
Zhengzhou , Henan , China , 450008
关键词:腹水草根;熊果苷;TLC;薄层扫描
Key words:Villo sulous veronicastrum herb or roo t;Arbutin;
TCL;LSM
中图分类号 CLC number:R285  
文献标识码 Document code:A  
文章编号 Article ID:1672-6839(2007)04-0033-01
腹水草具有清热解毒 、利水消肿 、散瘀止痛等功效 ,是民
间常用草药 ,该植物主要含有熊果苷(ar-butin)、黄酮等成
分 ,熊果苷具有杀菌 、抑制胰岛素降解 、镇咳 、抗氧化等作用。
为了进一步了解腹水草根部是否含有熊果苷 ,我们对几种腹
水草根部熊果苷的含量进行了测定。
1 仪器与试药
1.1 仪器
CS -9000 型薄层扫描仪(日本岛津), 定量毛细管
(Drummond Scientfic Co.), 分析天平(1/ 10 万 , Mettler To ledo
AG135),硅胶 GF254(青岛海洋化工厂)。
1.2 试药
熊果苷对照品 , 购自中国药品生物制品检定所 , 试验用
腹水草为自采 ,经学名鉴定 , 取根部 、阴干 、粉碎 , 过 60 目筛
备用 ,试剂均为色谱纯和分析纯。
2 方法与结果
2.1 对照品溶液的制备
取熊果苷对照品 10 mg , 精密称定 ,置 5 ml容量瓶中 , 加
甲醇至刻度 ,摇匀 , 即得。
2.2 供试品溶液的制备
取腹水草根(过 60 目筛)样品 1 g , 精密称定 , 置据塞磨
口瓶中 , 精确加甲醇 25 ml , 称重 , 浸泡 12 h , 超声振荡
20 min ,补充减失重量。吸取上清液 3 ml 、蒸干 , 用适量氯
仿-甲醇(8∶2)溶液溶解。加于自制硅胶(100-200)小柱
上 ,用氯仿-甲醇(8∶2)液洗脱 , 弃去前 5 ml洗脱液 , 收集
500 ml洗脱液 , 减压回收至干 ,用甲醇转移至 1 ml容量瓶中 ,
加甲醇至刻度 ,即得。
2.3 检测波长选择
照薄层色谱法(附录Ⅵ B)试验 ,分别吸取样品溶液 5 ul ,
对照品溶液 2 ul。交叉点于同一硅胶 GF254 薄层板上 ,以氯
仿-甲醇 -水(7∶3∶0.4)为展开剂展开 , 置紫外光灯
(254 nm)下检视 , 熊果苷呈一暗斑 , 对改位置作全波长紫外
扫描(200~ 370 nm),其紫外吸收曲线与薄层板背景吸收曲
线重合。同法对熊果苷色谱斑点作全波长紫外扫描。结果
双波长反射法锯齿扫描 sx=3.0 , 狭缝 1.20 mm×1.20 mm ,
λs=260 mm ,λR=330 mm。
2.4 标准曲线制备
精密吸取熊果苷对照品溶液 1.0 、2.0、4.0 、6.0 、8.0、
10 ul , 点于同一薄层板上 , 按上法展开 , 扫描计算 , 结果回归
方程为 Y =5072.51X+7633 , r=0.9992 , 线性范围 2 ~
20 ug。
2.5 稳定性试验
精密吸取对照液 5 ul , 点于薄层板上 , 同法展开 , 分别在
0.5 、1 、2 、4 、8 h 测定扫描一次 ,结果表明 , 在 8 h 内积分值基
本无变化。
2.6 精密度试验
在同一薄层板上 , 点对照品 5 个点 , 每点 5 ul 展开 、扫
描 ,结果精密度良好 , RSD=1.396%。
2.7 方法重复性试验
取同一种样品 , 依法平行制备 5 份供试品溶液 , 依法测
定熊果苷含量 ,含量的 RSD=2.2%。
2.8 加样回收率试验
精密称取样品二份 ,其中一份添加对照品一定量 ,按 2.2
方法提取 、点样 、展开 、扫描 、计算回收率 , 结果回收率为
99.982%, RSD=2.60%。
2.9 样品测定
精密吸取样品液 25 ul , 熊果苷对照溶液 2 ul , 按 2.2 方
法点样 、展开 、扫描 ,计算结果 , 见表 1。
表 1 腹水草不同样品熊果苷含量测定
样品 含量(%)
细穗腹水草 Veronicast rum stenostach yum 0.782
腹水草 V.seenostach yum.subsp.piukenetii 0.582
宽叶腹水草 V.latifolium 0.226
管花腹水草 V.tubi florum 0.215
3 讨论
双波长薄层扫描测定腹水草根部熊果苷的含量方法简
便 、准确 , 展开后 12 h 吸收面积基本稳定。
腹水草采集后应及时阴干 ,以免发黑。
试验表明 ,腹水草根部同样有一定量的熊果苷 , 且含量
与全草的含量接近。
参考文献:
[ 1] 赵焕霞 ,宋哲 ,刘王月 ,等.薄层扫描法测定 7 种腹水草属植物中熊
果甙的含量[ J] .中国野生植物资源 , 1997 ,(3):30.
[ 2]国家药典委员会.中国药典·一部[ S] .2005:附录 Ⅵ B.
编辑:蒋士卿
收稿日期:2007-03-15
作者简介:赵焕霞(1963-), 女 ,河南偃师人 , 理学学士 ,副主
任药师。
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2007 年 7 月第 4 期
No.4 Jul. 2007          
河 南 中 医 学 院 学 报
JOURNAL OF HENAN UNIVERSIT Y OF CHINESEMEDIC INE
          第 22卷 总第 131 期
Vol.22 Serial No.131
DOI :10.16368/j.issn.1674-8999.2007.04.019