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天然药物隔山消促进釉质再矿化的研究



全 文 :收稿日期:2007-06-20;修回日期:2007-09-24
基金项目:云南省教育厅科研基金(03Y637A)
作者简介:戴啊师(1986-),男 ,汉族 ,福建人
通讯作者:蓝海(1964-),女 , (白族),云南大理人 ,副教授 ,
主要从事生物无机化学方面的研究。 Tel:0872-
2257414
天然药物隔山消促进釉质再矿化的研究
戴啊师 1 , 蔡春木 1 , 蓝 海1 , 刘剑虹 2
(云南:1.大理学院药学院 , 大理 671000;2.云南师范大学分析测试中心 , 昆明 650092)
[摘 要 ]   目的:观察隔山消水提取物处理早期人工龋后的表面形态。方法:采用化学方法建立牙齿
龋病模型 ,分别经五倍子和隔山消处理后 ,利用扫描电镜观察二者对牛牙釉质龋再矿化的影响。结果:经隔山
消处理后的釉质块表面有较紧密均匀的结晶区 , 五倍子有规则均匀的矿物沉淀 ,去离子水处理的釉质表面呈蜂
窝状结构。结论:在龋病发生过程中隔山消可能对龋病的进展具有抑制作用 , 五倍子的再矿化作用强于隔山
消。
[关键词 ] 隔山消;釉质;促进;再矿化
[中图分类号 ] R780.1   [文献标识码 ] A   [文章编号 ] 1005-2593(2007)11-0635-03
[牙体牙髓牙周病学杂志 , 2007, 17(11):635]
TheefectofGeraniumStrictipesonthepromotion
oftheremineralizationofinitialartificialenamellesions
DAIAshi * , CAIChun-mu, LANHai, LIUJian-hong
(*Departmentofpharmaceutical, Daliuniversity, Dali671000, China)
[ Abstract]   AIM:ToobservethemorphologyofinitialartificialenamellesionstreatedwithGeraniumStric-
tipes.METHODS:CariesmodelswereestablishedusingchemicalmethodsandtreatedwithGeraniumStrictipesand
GallaChinesis.ThesurfaceofenamelontheremineralizedbovineenamelblockwasinvestigatedwithSEM.RE-
SULTS:TheGeraniumStrictipesandGalaChinesishadtheabilitytopromotetheremineralizationofenamelcaries
whencomparedwiththecontrol.Theremineralizationsurfaceofenamelcariesbecamedenseandevenaftertreatedwith
GeraniumStrictipes;GalaChinesiscausedthecalciumphosphatetodepositregularly, anddeionedwatergroupformed
honeycombstructure.CONCLUSION:GeraniumStrictipesmayrestraincariesprocessduringthedevelopmentof
carieslesion.TheeffectofGalaChinesisismarkedlysuperiortotheGeraniumStrictipes.
[ Keywords] GeraniumStrictipes;enamel;promote;remineralization
[ ChineseJournalofConservativeDentistry, 2007, 17(11):635]
  龋病是发生于人类最常见的细菌性疾病。多
年来人们一直试图采用药物控制 、预防龋病。氟化
物防龋是研究最多且广为认可的方法 ,但其应用有
诸多局限性 ,如氟浓度的稳定性 ,防止氟的毒副作
用以及口腔耐氟菌株选择性生长等方面的问题尚
未解决。龋病在本质上是菌群生态失去平衡性的
疾病 ,其致病菌均为口腔正常菌群。因此 ,寻找一
种使用安全 ,能有效调理口腔菌群平衡的防龋天然
植物药成为研究的重点。天然植物药防龋的研究
具有鲜明的地域特性。根据全球各地不同的地理
环境和国情 ,不同的国家和地区都有代表性的天然
药物 。
本研究通过扫描电镜观察隔山消 、五倍子处理
后釉质表面结构变化 ,探讨隔山消对釉质龋的再矿
化作用。
·635·牙体牙髓牙周病学杂志(ChinJConservDent)2007, 17(11)DOI :10.15956/j.cnki.chin.j.conserv.dent.2007.11.001
1 材料和方法
1.1 药品和仪器
脱矿液:2.2 mmol/LCaCl2 , 2.2 mmol/L
NaH2PO4 , 0.05mol/LCH3COOH,用 NaOH校正 ,
pH = 4.0;再 矿 化 液:1.5 mmol/L CaCl2 ,
0.9mmol/LNaH2PO4 , 0.15mol/LKCl, pH=7.0;
处理液:隔山消水提物 ,五倍子水提物;sp060型水
恒温培养箱(上海实验仪器总产);FA1004电子天
平(上海精密科学仪器有限公司);RE-52C旋转
蒸发仪(上海亚荣生化仪器产);3SY3200-T超声
清洗仪 (上海声源超生波仪器设备有限公司);
KYKY-2800B型数字化扫描电子显微镜(SEM,北
京)。
1.2 标本制备
市场购买新鲜拔除的牛切牙 15个 ,去除牙根
部软组织 ,用无氟石英砂纸打磨去除釉质表面的色
素和菌斑 ,超声洗净 ,干燥 ,置于生理盐水中 -4℃
保存备用。
将 15个牙齿于唇面开窗 3mm×3mm,其余部
分用无色指甲油涂布封闭 ,用 350mL/L的乙醇浸
泡 24h。置于 250mL脱矿液中 , 37℃恒温箱放置
10d,每 5d更换 1次脱矿液。扫描电镜观察釉质
表面。釉质表面结构疏松 ,有大量的腔隙 ,表明釉
质表面已经发生脱矿(图 1)。
1.3 各种处理液的制备
参照王芸等 [ 1] 的方法 ,分别将隔山消和五倍
子用等量的去离子水浸泡 24h,将提取液蒸发浓缩
成隔山消和五倍子提取液浸膏 ,再用去离子水配制
成 1mg/mL隔山消处理液和 1mg/mL五倍子处理
液。
1.4 再矿化
将标本随机分成隔山消处理组 、五倍子处理组
和去离子水处理(对照)3组 ,每组 5个 ,进行体外
pH循环 [ 2] 。循环过程为先以 50 mL脱矿液处理
4h,然后分别用 50mL药物处理液处理 6h,再浸入
50mL再矿化液中过夜 ,每换一种处理液前用大量
的蒸馏水振荡冲洗 5 min,连续循环 10d。从开窗
区中间切开标本 ,肉眼和扫描电镜观察脱矿区表面
和剖面。
2 结果
2.1 肉眼观察
实验组(隔山消 、五倍子处理组)各釉质块表
面完整 ,开窗区有明显的沉积物 ,对照组釉质表面
完整 ,开窗区看不到明显的沉积物 。隔山消和五倍
子开窗区剖面变为黑色 ,指甲油覆盖部分未见变
化 ,去离子水未见颜色改变。
2.2 扫描电镜观察
隔山消 、五倍子 、去离子水处理后的扫描电镜
观察(图 2 ~ 4), 1mg/mL隔山消组的釉质表面有
分散均匀的结晶区 ,有少量的腔隙存在;1mg/mL
五倍子组的釉质表面沉积了致密均匀的沉积物 ,有
极少的腔隙存在;对照组釉质表面结构疏松 ,有大
量的腔隙 ,有少量的沉积物。
图 1 脱矿液处理后的釉质
表面 (×200)
图 2 1mg/mL隔山消处理后
的釉质表面 (×200)
图 3 1mg/mL五倍子处理后
的釉质表面 (×200)
图 4 去离子水处理后的釉
质表面 (×200)
3 讨论
近几十年来 ,国内外一直没有间断过天然药物
防龋的研究 [ 3] 。从 50年代有学者发现饮茶能减少
龋病开始 ,对天然药物中的鞣酸进行了大量的系统
研究 ,并推出了鞣酸防龋牙膏 。鞣酸(tannicacid)
又称单宁酸或者没食子鞣酸 ,分子式为 C76H52O46 ,
是五倍子 、隔山消等植物的有效成分 。 1978年 ,
Tanizaki针对鞣酸能与蛋白反应 ,抑制胶原分解的
特性 ,用于牙本质研究 ,发现鞣酸抑制了牙本质胶
·636· 牙体牙髓牙周病学杂志(ChinJConservDent)2007, 17(11)
原的分解 ,阻碍牙本质龋的进程 [ 4, 5] 。五倍子是近
几年来一直在研究的天然防龋药物 ,通过动物实验
发现五倍子能抑制龋病发生 , 减少釉质脱矿[ 6] 。
李艳君体外实验证实五倍子可以抑制牙本质胶原
分解 ,促进牙本质再矿化 [ 7] 。五倍子含有 70%的
鞣酸 ,大多数学者认为:五倍子的防龋作用是鞣酸
与有机质和钙结合形成复合物 。隔山消为白族 、彝
族民间习用草药 ,原植物为牻牛儿苗科老鹳草属植
物 G.StrictpsR.Kunth,其根入药 ,民间长期用作厌
食症的治疗 ,同时具有消炎 、止痢 、收敛的功效 。目
前 ,隔山消的抗龋作用尚未见报道。实验证实隔山
消含有鞣酸 、没食子酸 、原儿茶酸 、鞣花酸等[ 8] ,理
论推测 ,隔山消具有防龋的功能可能与鞣酸有关。
一方面隔山消中的鞣酸和再矿化液中的 Ca2 +结合
为一种坚硬的物质 -鞣酸钙沉积在釉质表面 ,另一
方面可能是鞣酸与釉质中的有机质和钙结合形成
不溶性的复合物促进再矿化。另外 ,酸脱矿发生的
釉质龋 ,蛋白不会丢失 ,所以 ,隔山消可能还会和牙
釉质中的蛋白结合生成不溶性的物质 。
扫描电镜显示 ,天然药物隔山消和五倍子均有
明显的结晶区 ,较少的腔隙存在 ,去离子水则无明
显的结晶区并且有较大的腔隙存在 ,提示隔山消和
五倍子都有防龋的作用。但从电镜照片上看 ,相同
浓度的隔山消和五倍子处理的釉质表面结构是不
相同的 ,那么隔山消防龋的功能除了与鞣酸有关以
外 ,可能还和隔山消中的其他成分有关 ,至于是什
么关系还有待进一步的研究 。
(致谢:感谢大理学院药学院生药学教研室马晓匡
教授对植物药隔山消的鉴定 。)
参考文献:
[ 1] 王芸 ,唐荣银.五倍子水提物处理早期人工釉质龋后的表面
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[ 8] 蓝海 ,李龙星 ,杨永寿.隔山消有效成分的研究 [ J] .大理医
学院学报 , 2001, 10(4):13-14
乳磨牙含牙囊肿伴继承
恒牙胚缺失 1例
阿孜古丽·阿不都热依木 1 , 吴礼安 2 , 石利强 2
(1.市口腔医院 , 新疆 乌鲁木齐 830002;
2.第四军医大学口腔医学院 ,陕西 西安 710032)
患儿男 , 7岁 ,因双侧后牙不萌就诊。检查:乳牙列 ,全
口除第二乳磨牙缺失外 , 其余牙排列整齐 , 无龋损 , 咬合关
系正常 , 无生理间隙。全口曲面断层片示:75, 85牙根基本
发育完成 , 牙根细小 ,冠周低密度区 , 约 1.5 mm×2.0 mm,
密度均匀 , 边界清楚 ,可见致密白线 ,根端接近下颌骨下缘 ,
距离约 5mm,未见 15, 25, 35, 45恒牙胚(图 1)。 口内相当
于 75, 85处未见局部隆起。初步诊断:①75, 85埋伏阻生 ,
含牙囊肿;②15, 25, 35, 45恒牙胚缺失。治疗:75, 85囊肿
摘除术 ,形成萌出通道 ,术中可见囊壁和大量囊液。复位龈
瓣缝合 ,囊腔内填塞碘仿纱条 , 1周更换一次 , 直至牙齿萌
出。观察半年 , 若不能自行萌出 , 辅以外科 -正畸导萌治
疗 ,翻瓣开窗 -闭合性牵引。目前 ,仍在观察中。
(收稿日期:2007-08-09)
·637·牙体牙髓牙周病学杂志(ChinJConservDent)2007, 17(11)