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茸果鹧鸪花不同部位脂溶性成分研究



全 文 :茸果鹧鸪花[Trichilia sinensis Bentv.]别名绒果
海木 、 白骨走马 , 是楝科 (Meliaceae)鹧鸪花属
(Trichilia)植物, 主要产于海南、 广东、 广西等省
(区)[1-3]。 茸果鹧鸪花的根、 叶苦, 寒, 有轻毒, 用
于杀虫、 燥湿、 止痒、 止血 [3]。 鹧鸪花属植物富含
三萜(主要为四降三萜), 甾体, 酚性化合物, 具有
抗肿瘤、 抗氧化、 杀虫等生物活性 [4-9]。 目前, 有
关茸果鹧鸪花的化学成分及生物活性报道较少, 仅
岳建民等[10]对其枝条乙酸乙酯萃取物的四降三萜类
化学成分及抗炎活性的研究报道, 但对同一植物不
同部位的比较研究及其抗菌活性尚未见报道。 本研
究对茸果鹧鸪花根和叶的石油醚萃取物, 经 GC-
MS 对其脂溶性成分及含量进行了定性定量分析,
用滤纸片琼脂扩散法测定其抗菌活性, 并比较不同
部位脂溶性成分的异同, 为茸果鹧鸪花这一药用植
物资源在临床的应用及其资源的进一步合理开发利
用提供科学依据。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 供试材料 茸果鹧鸪花根、 叶于 2011 年
11 月采于海南省万宁市, 由中国热带农业科学院
热带作物学报 2014, 35(8): 1648-1652
Chinese Journal of Tropical Crops
收稿日期 2014-01-08 修回日期 2014-04-11
基金项目 公益性行业(农业)科研专项(No. 201303117); 国家科技支撑计划课题(No. 2013BAI11B04)。
作者简介 刘寿柏(1983年—), 男, 博士研究生; 研究方向: 天然产物化学。 *通讯作者(Corresponding auther): 戴好富(DAI Haofu), E-mail:
daihaofu@itbb.org.cn。
茸果鹧鸪花不同部位脂溶性成分研究
刘寿柏 1,2, 梅文莉 2,3, 郭志凯 2,3, 曾艳波 2,3, 戴好富 2,3*
1 海南大学园艺园林学院, 海南海口 570228
2 中国热带农业科学院热带生物技术研究所海南省黎药资源天然产物研究与利用重点实验室 海南海口 571101
3 海口市热带天然产物研究与利用重点实验室, 海南海口 571101
摘 要 为研究茸果鹧鸪花[Trichilia sinensis Bentv.]叶与根的脂溶性成分, 采用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)
对其化学成分进行分离分析, 通过 Nist2008 和 Wiley275 质谱库检索分别鉴定各化学成分; 经面积归一化法测定
各样品中化学成分的相对百分含量; 用滤纸片琼脂扩散法测定其抗菌活性。 结果分别从茸果鹧鸪花叶、 根的脂
溶性成分中分离出 22、 41 个化合物, 分别鉴定了其中的 20、 41 个化合物, 所鉴定的化合物其相对含量分别占
各脂溶性成分总量的 86.99%、 91.33%。 抗菌活性结果表明: 其脂溶性成分对金黄色葡萄球菌均有抑制作用。
关键词 茸果鹧鸪花; 根叶; 脂溶性成分; 气相色谱-质谱联用; 抗菌活性
中图分类号 Q949.718.3 文献标识码 A
Study on the Liposoluble Components from Different Parts
of Trichilia sinensis Bentv.
LIU Shoubai1,2, MEI Wenli2,3, GUO Zhikai2,3, ZENG Yanbo2,3, DAI Haofu2,3*
1 Horticultural and Garden College, Hainan University, Haikou, Hainan 570228, China
2 Hainan Key Laboratory for Research and Development of Natural Products from Li Folk Medicine / Institute of Tropical
Bioscience and Biotechnology, Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences, Haikou, Hainan 571101, China
3 Haikou Key Laboratory for Research and Development of Tropical Natural Products, Haikou, Hainan 571101 China
Abstract The study was aimed to clarify the chemical constituents of the liposoluble extracts from the roots and
leaves of T. sinensis Bentv. The chemical compounds were separated and analyzed by GC-MS, and identified by
Mass Spectral Database Nist 2008 and Wiley 275. Antibacterial activity was assayed by paper disk diffusion
method. The relative content of each component was determined by area normalization. 41, 22 compounds were
separated and 41, 20 compounds were identified from the roots and leaves, respectively. The ratios of identified
compounds accounted for 91.33% , 86.99% of total liposoluble components in different parts as well. These
liposoluble extracts exhibited inhibitory effect on Staphylococcus aureus.
Key words T. sinensis Bentv.; Roots and leaves; Liposoluble Components; GC-MS; Antibacterial activity
doi 10.3969/j.issn.1000-2561.2014.08.034
第 8 期 刘寿柏等: 茸果鹧鸪花不同部位脂溶性成分研究
热带生物技术研究所代正福副研究员鉴定为楝科
(Meliaceae)鹧鸪花属 (Trichilia)植物茸果鹧鸪花 [T.
sinensis Bentv.], 凭证标本(20111120)存放于中国热
带农业科学院热带生物技术研究所。
1.1.2 仪器和试剂 美国安捷伦公司 HP6890/5975C
GC/MS联用仪, 色谱柱为 ZB-5MSI 5% Phenyl-95%
DiMethylpolysiloxane(30 m×0.25 mm×0.25 μm)弹性
石英毛细管柱。 乙醇、 石油醚等均为国产 AR。
1.2 方法
1.2.1 提取方法 样品自然风干, 粉碎过 5目筛,
根及叶称重均为 500.0 g, 分别用 95%乙醇(2.0 L)室
温浸提 3 次, 每次超声处理 30 min, 合并提取液,
减压浓缩至无醇味。 将乙醇提取物分散于水中成悬
浊液, 经石油醚萃取后减压浓缩得到油状提取物。
1.2.2 脂溶性成分的分析鉴定 气相色谱条件: 柱
温 50 ℃(保留 2 min), 以 5 ℃/min 升温至 310 ℃,
保持 10 min; 汽化室温度 250 ℃; 载气为高纯 He
(99.999%); 柱前压 7.62 psi, 载气流量 1.0 mL/min;
分流比 20 ∶ 1, 溶剂延迟时间: 4.0 min。
质谱条件: 离子源为 EI源; 离子源温度 230 ℃;
四极杆温度 150 ℃; 电子能量 70 eV; 发射电流
34.6 μA; 倍增器电压 1364 V; 接口温度 280 ℃;
质量范围 20~480 u。
数据处理及质谱检索: 对总离子流图中的各峰
经质谱计算机数据系统检索及核对 Nist2008 和
Wiley275 标准质谱图进行鉴定, 用峰面积归一化
法测定了各化学成分的相对质量分数。
1.2.3 抗菌活性测定 以金黄色葡萄球菌为指示
菌, 采用滤纸片法 [11]测定脂溶性成分的抗菌活性。
将金黄色葡萄球菌制成一定浓度的菌悬液 (105~
107 cfu/mL), 用棉签将其均匀涂布于供试无菌平
板, 制成含菌平板。 选用直径为 6 mm 灭菌滤纸
片, 将脂溶性成分配成浓度为 20 mg/mL 样品溶液,
并加 25 μL于滤纸片上, 待溶剂挥干后放置于含菌
平板上, 每处理重复 3次, 以硫酸卡那霉素为阳性
对照, 37 ℃恒温培养。 24 h 后观察结果, 测量并
记录抑菌圈直径。
2 结果与分析
2.1 GC-MS 分析结果
按上述条件对茸果鹧鸪花根、 叶脂溶性成分进
行 GC-MS 分析, 对总离子流图中的各峰经质谱计
算机数据系统检索及核对 Nist2008 和 Wiley275 标
准质谱图进行鉴定, 采用色谱峰面积归一化法计算
其相对含量, 具体结果见表 1 和表 2, 总离子流图
见图 1和图 2。
茸果鹧鸪花根中共鉴定出 41 个化合物, 占总
量的 91.33%, 含量大于 1%的有 15 个, 含量大于
图1 茸果鹧鸪花根脂溶性部分总离子流图
Fig. 1 The total oil current figure of the liposoluble extract from the roots of T. sinensis Bentv.
时间/min
2.5e+07
2.4e+07
2.3e+07
2.2e+07
2.1e+07
2.0e+07
1.9e+07
1.8e+07
1.7e+07
1.6e+07
1.5e+07
1.4e+07
1.3e+07
1.2e+07
1.1e+07
1.0e+07
9 000 000
8 000 000
7 000 000
6 000 000
5 000 000
4 000 000
3 000 000
2 000 000
1 000 000
10.00 15.00 20.00 25.00 30.00 35.00 40.00


TIC: 12110503.D
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第 35 卷热 带 作 物 学 报
表1 茸果鹧鸪花根脂溶性部分的化学成分
Table 1 Chemical constituents of the liposoluble extract from the roots of T. sinensis Bentv.
编号 保留时间/min 化合物 分子式 分子量 相对含量/%
1 8.50 Hexanoic acid 己酸 C6H12O2 116 0.209
2 10.26 Nonanal 壬醛 C9H18O 142 0.020
3 10.78 Methyl octanoate 甲基辛酸甲酯 C9H18O2 158 0.051
4 13.54 Caprylic acid 辛酸 C8H16O2 144 0.180
5 15.09 Massoilactone 二氢戊基吡喃酮 C10H16O2 168 0.091
6 16.48 2,3-dimethyl-4(E)-Hexenoic acid,2,3-二甲基-4(E)-己烯酸 C8H14O2 142 5.342
7 17.66 Prunolide 椰子醛 C9H16O2 156 0.068
8 18.58 Capric aicd 癸酸 C10H20O2 172 0.352
9 19.36 Methyl 9-oxononanoate 4-氧壬酸甲酯 C10H18O3 186 0.510
10 19.59 Dimethyl suberate 辛二酸二甲酯 C10H18O4 202 0.125
11 21.23 Butyl hydroxyl toluene二丁基羟基甲苯 C15H24O 220 0.238
12 21.36 Methyl laurate 月桂酸甲酯 C13H26O2 214 0.112
13 22.11 Dimethyl azelate 壬二酸二甲酯 C11H20O4 216 0.544
14 22.66 Ochracin 赭曲菌素 C10H10O3 178 3.135
15 23.97 5-phenyl-Undecane 5-苯基-十一烷 C17H28 232 0.358
16 24.44 Junipene刺伯烯 C15H24 204 0.374
17 24.82 Guaiol 愈创木醇 C15H26O 222 1.081
18 26.01 Methyl myristate 肉豆蔻酸甲酯 C15H30O2 242 0.778
19 27.67 3,5-Dimethoxy-4-hydroxybenzhydrazide 3,5-二甲氧基-4-羟基苯甲酰肼 C9H12N2O4 212 1.153
20 28.14 Methyl pentadecanoate 十五酸甲酯 C16H32O2 256 1.121
21 28.48 β-Eudesmol β-桉叶醇 C15H26O 222 0.367
22 29.77 Methyl palmitoleate 棕榈油酸甲酯 C17H32O2 268 1.232
23 30.44 Methyl palmitate 棕榈酸甲酯 C17H34O2 270 18.392
24 30.94 Ledol 喇叭茶醇 C15H26O 222 0.219
25 31.11 Butyl phthalate邻苯二甲酸丁酯 C16H22O4 278 0.395
26 31.52 Ethyl palmitate 棕榈酸乙酯 C18H36O2 284 0.443
27 32.02 Palmitic acid 棕榈酸 C16H32O2 256 3.875
图2 茸果鹧鸪花叶脂溶性部分总离子流图
Fig. 2 The total oil current figure of the liposoluble extract from the leaves of T. sinensis Bentv.
时间/min
10.00 15.00 20.00 25.00 30.00 35.00 40.00 45.00 50.00


TIC: 12110505.D4 500 000
4 000 000
3 500 000
3 000 000
2 500 000
2 000 000
1 500 000
1 000 000
500 000
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第 8 期 刘寿柏等: 茸果鹧鸪花不同部位脂溶性成分研究
编号 保留时间/min 化合物 分子式 分子量 相对含量/%
28 32.13 Methyl 14-methylhexadecanoate 14-甲基十六烷酸甲酯 C18H36O2 284 0.637
29 33.79 Methyl linoleate 亚油酸甲酯 C19H34O2 294 18.087
30 33.85 Methyl oleate 油酸甲酯 C19H36O2 296 10.861
31 34.15 Methyl stearate 硬脂酸甲酯 C19H38O2 298 3.073
32 35.14 Oleic acid 油酸 C18H32O2 280 5.132
33 35.37 Stearic acid 硬脂酸 C18H36O2 284 0.653
34 35.80 Methyl nonadecanoate 十九酸甲酯 C20H40O2 312 0.323
35 36.84 Methyl 9,12,15-octadecatrienoate 9,12,15-十八碳三烯酸甲酯 C19H32O2 292 0.935
36 38.80 5-Nonadecen-1-ol 5-十九烯-1-醇 C19H38O 282 2.366
37 39.23 Ethyl linoleate 亚油酸乙酯 C20H36O2 308 0.430
38 40.26 Methyl eicosa-7,10,13-trienoate 7,10,13-二十烯酸甲酯 C21H36O2 320 0.724
39 40.58 Methyl 8,11-eicosadienoate 8,11-二十烯酸甲酯 C21H38O2 322 2.486
40 41.16 Octoil 邻苯二甲酸二异辛酯 C24H38O4 390 2.588
41 43.68 2-Monoolein 2-油酸单甘油酯 C21H40O4 356 2.268
续表1 茸果鹧鸪花根脂溶性部分的化学成分
Table 1 Chemical constituents of the liposoluble extract from the roots of T. sinensis Bentv. (Continued)
5%的有 5 个, 其含量较高的成分依次为棕榈酸
甲酯(18.39%)、 亚油酸甲酯(18.09%)、 油酸甲酯
(10.86%)、 2,3-二甲基-4(E)-己烯酸(5.34%)、 油
酸(5.13%); 根脂溶性成分主要为脂肪酸类化合物。
茸果鹧鸪花叶脂溶性成分中共鉴定出 20 个化
合物, 占总量的 86.99%, 含量大于 1%的有 11个,
含量大于 5%的有 6 个, 其含量较高的成分依次为
穿贝海绵甾醇(26.41%)、 麦角-5-烯醇(12.65%)、
编号 保留时间/min 化合物 分子式 分子量 相对含量/%
1 8.82 2,3,6-Trimethyl-1,5-heptadiene 2,3,6-三甲基-1,5-庚二烯 C10H18 138 0.211
2 13.09 2,4-dimethyl-furan 2,4-二甲基呋喃 C6H8O 96 0.723
3 14.66 2-Ethyl-3-methylmaleimide 2-乙基-3甲基马来酰亚胺 C7H9NO2 139 0.637
4 19.67 Hexadecane 正十六烷 C16H34 226 0.355
5 22.99 Lauric acid 月桂酸 C12H24O2 200 0.801
6 27.33 Myristic acid 肉豆蔻酸 C14H28O2 228 1.461
7 28.28 Neophytadiene 新植二烯 C20H38 278 5.753
8 28.46 6,10,14-trimethyl-2-Pentadecanone 6,10,14-三甲基-2-十五酮 C18H36O 268 3.756
9 28.78 9-Eicosyne 9-二十炔 C20H38 278 1.005
10 29.15 3,7,11,15-Tetramethyl-2-hexadecen-1-ol 3,7,11,15-四甲基-2-十六烯醇 C20H40O 296 1.684
11 30.06 Methyl palmitate 棕榈酸甲酯 C17H34O2 270 0.721
12 31.44 Palmitic acid 棕榈酸 C16H32O2 256 5.834
13 33.74 Phytol 植醇 C20H40O 296 3.511
14 35.07 Stearic acid 硬脂酸 C18H36O2 284 0.364
15 37.95 4,8,12,16-Tetramethylheptadecan-4-olide 4,8,12,16-四甲基十七烷-4-内酯 C21H40O2 324 0.685
16 47.31 未鉴定 2.432
17 48.51 未鉴定 3.081
18 49.36 Vitamin E 维生素E C29H50O2 430 0.781
19 50.64 Ergost-5-enol麦角-5-烯醇 C28H48O 400 12.654
20 51.01 Stigmasterol 豆甾醇 C29H48O 412 7.040
21 51.79 Clionasterol 穿贝海绵甾醇 C29H50O 414 26.409
22 52.90 Hop-22(29)-en-3β-ol茂瑞烯醇 C30H50O 426 12.604
表2 茸果鹧鸪花叶脂溶性部分的化学成分
Table 2 Chemical constituents of the liposoluble extract from the leaves of T. sinensis Bentv.
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第 35 卷热 带 作 物 学 报
茂瑞烯醇(12.60%)、 豆甾醇(7.04%); 叶脂溶性成
分主要为甾体类化合物。
茸果鹧鸪花根与叶脂溶性成分中共有成分较
少, 共有成分分别为棕榈酸甲酯、 棕榈酸、 硬脂
酸, 且含量明显不同, 棕榈酸甲酯根中含量比叶中
高出 17.67%, 棕榈酸叶中含量比根中高出 1.96%。
2.2 活性测定结果
以滤纸片琼脂扩散法测定脂溶性成分的抗菌活
性, 结果表明, 茸果鹧鸪花根与叶脂溶性成分对金
黄色葡萄球菌均有抑制作用, 抑菌圈直径分别为
11.23 mm(28.85 mm), 8.15 mm(26.76 mm)(括号中
为阳性对照)。
3 讨论与结论
本研究从茸果鹧鸪花根及叶中共鉴定出 59 种
化学成分, 这些化学成分在茸果鹧鸪花化学成分已
有研究中均未见报道。 根脂溶性成分主要为脂肪酸
类化合物, 此外, 还有一些倍半萜、 长链醇、 醛、
含氮化合物等; 叶脂溶性成分主要为甾体类化合
物, 此外也含有一些脂肪酸类化合物、 含氮化合物
等。 茸果鹧鸪花与鹧鸪花在亲缘关系上较近, 为同
属植物, 同属植物化学成分的类型具有一定的相似
性, 然而本研究与前人关于该属植物主要脂溶性成
分的研究结果具有一定的差异, Agarwal G 等 [12]用
水蒸气蒸馏法从鹧鸪花根中得到的脂溶性成分主要
成分是倍半萜类化合物 (69.3%), 包括 β-花柏烯、
α-毕橙茄醇、 δ-杜松烯、 顺-去氢白菖烯、 β-石竹
烯、 β-桉叶醇、 金钟烯醇等。 Kumar R 等[13]用乙酸
乙酯提取的鹧鸪花根中脂溶性成分主要是倍半萜类
化合物 (30.7%), 包括 β-花柏烯、 α-香柑油烯等;
单萜类化合物(15.7%), 包括甘菊环、 Heminellitene
等 。 Senthilkumar N 等 [14]用甲醇提取鹧鸪花叶中
脂溶性成分包括棕榈酸甲酯 (13.4%)、 萘 (8.5%)、
Benzene, 1-(1,5-dimethyl-4-hexyl-4-methyl(5.2%)、
Phenol, 2,4-bis(1,1-dimethylethyl)(5.2%)以及一些
含氮化合物(8.5%)等。 Kumar R 等[13]用乙酸乙酯提
取的鹧鸪花叶中脂溶性成分主要是单萜类化合物
(9.1%)和倍半萜类化合物(9.7%), 包括甘菊环、 蒎
烯、 β-石竹烯等; 这些差别可能与生长环境、 采
集季节以及提取方法的差别有关。
本文首次对茸果鹧鸪花根与叶脂溶性化学成分
及其抗金黄色葡萄球菌的活性进行了初步研究, 丰
富了该植物的化学成分, 拓宽了该药用植物的用
途, 为寻找植物源抗菌剂提供了理论依据, 抗菌活
性可能是多种物质协同作用的结果, 但其主要抗菌
物质及其抗菌作用机制还有待进一步研究。
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责任编辑: 叶庆亮
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