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薄层扫描法测定广西匙羹藤中牛弥菜醇A的含量



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胞损伤有保护作用,能减轻大鼠肝细胞的病理变
化[3],还可提高及改善小鼠细胞免疫和非特异性免
疫功能的作用,对环磷酰胺所造成的小鼠免疫功损
害有明显的恢复和保护作用[4],这与齐墩果酸的药
效作用基本一致,笔者认为可能是蒲公英中齐墩果
酸起到的作用,其结果有待进一步药理研究证实。
[参考文献]
[1] 国家药典委员会 . 中华人民共和国药典[S]. 一部 . 北
京:化学工业出版社,2005,244.
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[4] 俞红,李锦兰 . 蒲公英对小鼠免疫功能的影响[J]. 贵
阳医学院学报,1997,22(2) :137.
[收稿日期] 2009-11-12
[基金项目] 广西自然科学基金项目(桂科自 0229044);广西教育厅科研项目(桂教科 2001);广西中医学院重点科研项目(ZD2004010);
广西高校人才小高地建设创新团队资助计划[桂教人(2005)80 号]
[通讯作者] * 甄汉深,Tel:(0771)2918239;E-mail:8zhen@ 163. com
薄层扫描法测定广西匙羹藤中牛弥菜醇 A的含量
丘琴1,2,甄汉深1* ,肖聪3,黄小秋1
(1. 广西中医学院,南宁 530001;2. 成都中医药大学,成都 611137;
3. 广西桂林药检所,广西 桂林 541000)
[摘要] 目的:采用薄层扫描法测定广西匙羹藤 Gymnema sylvestre(Retz.)Schult 中牛弥菜醇 A 的含量。方法:使用硅胶 H
板,展开剂为苯-乙酸乙酯-甲醇(10∶ 3∶ 5),5%香草醛硫酸溶液显色,于 105 ℃加热至斑点清晰,在 200 nm ~ 800 nm 范围内进
行扫描,检测波长 538 nm,参比波长 700 nm。结果:牛弥菜醇 A 的线性范围为 1. 025 ~ 6. 150 μg,平均加样回收率为 98. 84%,
RSD = 2. 02%(n = 6),匙羹藤中牛弥菜醇 A 的含量为 2. 08%。结论:该法简便、灵敏、准确性高,重复性好,可为匙羹藤药材的
定性鉴别和含量测定提供科学依据。
[关键词] 匙羹藤;牛弥菜醇 A;薄层扫描法
[中图分类号] R284. 1 [文献标识码] B [文章编号] 1005-9903(2010)05-0054-03
Determination of Conduriol A in Guangxi Gymnema
sylvestre(Retz.)Schult by TLCS
QIU Qin1,2,ZHEN Han-shen1* ,XIAO Cong3,HUANG Xiao-qiu1
(1. Guangxi Traditional Chinese Medical University,Nanning 530001,China;
2. Chengdou University of Tradition Chinese Medicine,Sichuang,Chengdou 611137,China;
3. Guilin,Guangxi Institute for Drug Control,Guilin 541000,China)
[Abstract] Objective:To determine the content of conduriol A in Guangxi Gymnema sylvestre(Retz.)Schult
by TLCS. Method:Silica H thin layer plate was used;the developer reagent was benzene:ethyl acetate:methanol
(10∶ 3∶ 5),the color reagent was 5% vanillin sulfate solution. The plate was at heating on 105 ℃,when the spot
was clear;the detection wavelength was 538 nm and the reference wavelength was at 700 nm. Result:The conduriol
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第 16 卷第 5 期
2010 年 5 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol. 16,No. 5
May,2010
DOI:10.13422/j.cnki.syfjx.2010.05.041
A was linear in range of 1. 025 ~ 6. 150 μg;the average recovery was 98. 84%,RSD = 2. 02%(n = 6). The average
content of conduriol A was 2. 08% in was simple,sensitive,accurate and had good reproducibility. Conclusion:
The method can be used the identification and determination method of Guangxi Gymnema Sylvestre(Retz.)Schult
and qualitatively.
[Key words] Gymnema sylvestre(Retz.)Schult;conduriol A;TLCS
匙羹藤 Gymnema sylvestre(Retz.)Schult 又名武
靴藤、羊角藤、金刚藤[1],为萝藦科匙羹藤属植物,分
布于印度、印尼、非洲、越南和我国广西、广东、福建、
台湾和云南等省区[2]。广西匙羹藤茎 95% 乙醇提
取物对四氧嘧啶性糖尿病小鼠及肾上腺素性高血糖
小鼠有明显的降血糖作用,并且能增强正常小鼠的
葡萄糖耐受量[3]。牛弥菜醇 A 是匙羹藤降血糖作
用的主要有效成分之一,能明显降低四氧嘧啶性糖
尿病小鼠的血糖值,增强正常小鼠的负荷糖耐量,对
抗肾上腺素引起的小鼠血糖升高[4 ~ 5]。目前还没有
文献对这方面的含量测定进行公开报道,本文首次
以牛弥菜醇 A 为指标,采用薄层扫描法对广西匙羹
藤药材中的牛弥菜醇 A 进行了含量测定。
1 材料
CAMAG SCANNER Ⅲ 薄 层 扫 描 仪 (瑞 士
CAMAG);Linomat 5 半自动点样仪(瑞士 CAMAG);
BP211D 电 子 分 析 天 平 (德 国 赛 多 利 斯);KQ-
200VDB 型双频数控超声波清洗器(昆山市超声仪
器有限公司);匙羹藤采自南宁郊区,经广西中医学
院药用植物教研室刘寿养副教授鉴定为萝摩科匙羹
藤属植物匙羹藤 Gymnema sylvestre(Retz.)Schult 的
地上部分。
牛弥菜醇 A(广西中医学院药物分析室制,纯度
98%),硅胶 H(青岛海洋化工厂);羧甲基纤维素钠
(沈阳化学试剂厂),甲醇、苯、乙酸乙酯(北京化工
厂,分析纯),其余试剂均为分析纯,水为去离子水。
2 方法与结果
2. 1 对照品溶液的制备 精密称取牛弥菜醇 A 对
照品适量,加甲醇制成每 1 mL 含 1. 025 mg 的溶液。
2. 2 供试品溶液的制备 取匙羹藤药材粗粉 0. 5
g,精密称定,加甲醇 25 mL,超声 15 min,放冷,称
重,用甲醇补足损失重量,滤过,取续滤液作为供试
品溶液。
2. 3 薄层色谱分析条件 硅胶 H 薄层板,精密吸
取供试品溶液 4 μL,对照品溶液 1 μL,3 μL,交叉点
于同一硅胶 H 薄层板上,展开剂苯-乙酸乙酯-甲醇
(10∶ 3∶ 5),展开,展距约 12 cm,晾干,喷 5%香草醛
硫酸溶液显色,晾干,105 ℃加热至斑点清晰,对照
品与供试品在相同位置上均呈紫红色斑点,见图 1。
对上述的斑点进行薄层光谱扫描,结果供试品溶液
与对照品溶液的最大吸收波长均为 538 nm,而在
700 nm 处吸收较小,因此选择双波长 λ s = 538 nm,
λR = 700 nm 进行测定,见图 2。
图 1 匙羹藤和牛弥菜醇 A 薄层色谱图
1、2、5、6、9、10、13、14 牛弥菜醇 A
3、4、7、8、11、12、15、16 匙羹藤样品
图 2 匙羹藤和牛弥菜醇 A 薄层扫描图
2. 4 线性关系的考察 精密吸取牛弥菜醇 A 对照
品溶液(1. 025 mg·mL - 1)1. 0,2. 0,3. 0,4. 0,5. 0,
6. 0 μL,点于同一硅胶 H 薄层板上,按薄层色谱分
析条件进行测定,以峰面积为纵坐标(Y),对照品量
为横坐标(X),计算回归方程为:Y = 1. 97 × 103X +
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中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol. 16,No. 5
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4. 39 × 102,r = 0. 996 8。结果表明,牛弥菜醇 A 在
1. 025 ~ 6. 150 μg 呈良好的线性关系。
2. 5 稳定性试验 精密吸取供试品溶液 3 μL(批
号 200703),点于硅胶 H 薄层板上,按薄层色谱分析
条件展开,取出晾干,显色,按薄层色谱分析条件扫
描测定,每隔 30 min 扫描测定 1 次,RSD = 1. 41%(n
= 5)。结果表明,牛弥菜醇 A 于 2 h 内稳定。
2. 6 同板精密度试验 精密吸取对照品溶液 3
μL,分别于同一硅胶 H 薄层板上点 5 个点,依法测
定其峰面积,RSD = 1. 40%(n = 5)。结果表明,同板
精密度良好。
2. 7 异板精密度试验 精密吸取对照品溶液 3
μL,分别点于 5 块不同的硅胶 H 薄层板上,依法测
定其峰面积,RSD = 1. 69% (n = 5)。结果表明,异
板精密度良好。
2. 8 加样回收率试验 称取已知含量的广西匙羹
藤药材 0. 25 g,精密称定,精密加入牛弥菜醇 A 对
照品 5. 12 mg,按供试品溶液制备方法处理,依法测
定,平均回收率为 98. 84%,RSD = 2. 02% (n = 6)。
结果表明,本方法回收率良好,结果见表 1。
表 1 回收率试验
No.
称样量
/ g
样品含
量 /mg
加入量
/mg
测得量
/mg
回收率
/%
平均回
收率 /%
RSD
/%
1
2
3
4
5
6
0. 224 6
0. 225 3
0. 225 1
0. 224 9
0. 224 4
0. 224 7
5. 26
5. 27
5. 27
5. 26
5. 25
5. 26
5. 12
5. 12
5. 12
5. 12
5. 12
5. 12
10. 28
10. 51
10. 22
10. 40
10. 24
10. 28
98. 14
102. 05
96. 76
100. 42
97. 51
98. 13
98. 84 2. 02
2. 9 重复性试验 取同一批号(200703)的样品
0. 5 g,精密称定,共 6 份,按 2. 2 项下供试品溶液制
备方法处理。分别吸取供试品溶液 2 μL,对照品溶
液 1 μL 和 3 μL,交叉点于同一块硅胶 H 薄层板上,
依法展开,显色,扫描测定,样品平均质量分数为
2. 08%,RSD 为 2. 37% (n = 6)。结果表明,方法重
复性良好。
2. 10 样品质量分数测定 取 6 个批次广西匙羹藤
药材粉末 6 份,约 0. 5 g,精密称定,按照供试品溶液
制备方法制备,吸取供试品溶液 4 μL,对照品溶液
1 μL,3 μL,交叉点于同一硅胶 H 薄层板上,展开,
显色,扫描测定。结果见表 2 和图 1,图 2。
表 2 广西匙羹藤质量分数 %
No. 质量分数 平均质量分数 RSD
200701 2. 72 2. 71 2. 74 2. 72 0. 56
200702 2. 73 2. 76 2. 71 2. 73 0. 92
200703 2. 32 2. 35 2. 34 2. 34 0. 65
200704 2. 16 2. 20 2. 19 2. 18 0. 95
200705 1. 41 1. 45 1. 42 1. 43 1. 46
200706 1. 37 1. 36 1. 34 1. 36 1. 13
3 讨论
在本文所采用的色谱条件下,匙羹藤药材在与
对照品色谱图相应的位置上显紫红色的斑点,Rf =
0. 32,斑点清晰圆整。
用 5%香草醛硫酸显色时,105 ℃加热 10 min 左
右即可,加热要注意受热均匀,用加热板加热时待斑
点出现即可关掉电源,用余热显色至斑点清晰,该试
液不稳定,须临用前配制。
牛弥菜醇 A 是匙羹藤药材降血糖的有效成分,
目前还没有文献对这方面的含量测定进行公开报
道。本文首次采用薄层扫描法测定广西匙羹藤药材
中牛弥菜醇 A 的含量。实验表明,该法操作简便,灵
敏,准确,重复性好,可为匙羹藤药材的质量控制提
供科学依据。
[参考文献]
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