全 文 :kg;酒类 1. 0 mg /kg;焙烤食品 76 mg /kg。与本实验所用剂量相
比,在正常范围内使用桉叶油是安全的。
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收稿日期:2010-05-01; 修订日期:2010-11-08
基金项目:湖南省教育厅科研项目(No. 08C629) ;
湖南省大学生研究性学习和创新性实验计划项目
作者简介:易刚强(1965-) ,男(汉族) ,湖南湘阴人,现任湖南中医药大学
药学院副教授,硕士学位,主要从事中药学教学与科研工作.
* 通讯作者简介:陈晓阳(1955-) ,女(汉族) ,湖南长沙人,现任湖南中医
药大学药学院教授,硕士学位,主要从事中药学教学与科研工作.
紫背金盘提取物抗炎镇痛作用研究
易刚强,陈晓阳* ,李云耀,蔡俊龙,王 珏,何桂霞
(湖南中医药大学药学院,湖南 长沙 410208)
摘要:目的 研究紫背金盘提取物的抗炎镇痛作用。方法 采用二甲苯致小鼠耳肿胀法和角叉菜胶致大鼠足肿胀观察紫
背金盘提取物的抗炎作用;用热板法和冰醋酸扭体法观察紫背金盘提取物对小鼠的镇痛作用。结果 紫背金盘水提液对
二甲苯致小鼠耳肿胀及角叉菜胶致大鼠足肿胀有明显抑制作用;对热板和冰醋酸扭体所致小鼠疼痛均有明显的镇痛作
用。结论 紫背金盘水提液有一定的抗炎镇痛作用。
关键词:紫背金盘; 抗炎; 消肿; 镇痛
DOI标识:doi:10. 3969 / j. issn. 1008-0805. 2011. 05. 054
中图分类号:R285. 5 文献标识码:B 文章编号:1008-0805(2011)05-1157-02
紫背金盘为唇形科植物紫背金盘 Ajugae nipponensis Makino
的全草,又名白毛夏枯草,筋骨草,具有清热解毒、凉血散瘀、消肿
止痛之功效,主要分布在我国东部、南部及西南各省,西北至秦岭
南坡;日本、朝鲜亦有分布[1 ~ 3]。现代药理研究其有收缩血管、降
血糖、降脂和降压、抗肿瘤作用。为了探讨紫背金盘药理作用,根
据该药功效与主治,我们对紫背金盘水提物和醇提物进行抗炎止
痛作用研究,为进一步研究开发紫背金盘的药理作用提供实验依
据。
1 材料与仪器
1. 1 药材 紫背金盘(由民间赤脚医生在湖南省宁乡县草地、林
地及阳坡地采集,经湖南中医药大学药学院彭菲教授鉴定)。
1. 2 动物 SD大鼠,雄性,体质量 180 ~ 220 g;昆明小鼠 18 ~ 22
g,雌雄兼用,清洁级,合格证号:SCXK(湘)2006 - 0001,由长沙市
开福区东创实验动物科技服务公司提供。实验动物环境许可证
号:SYXK(湘)2009 - 0001。实验室温度 16 ~ 21℃,湿度 45% ~
63%。
1. 3 试剂 角叉菜胶(批号:200812) ,二甲苯( ,批号:20080304
上海试剂总厂生产) ,阿司匹林肠溶片(北京舒泰神药业有限公
司,国药准字 H43021814,批号:090206) ,临用前用蒸馏水配成
10%混悬液。
1. 4 仪器 GHP - 9080 水夹套恒温培养箱(上海华岩仪器设备
有限公司) ,XSB - 1 生物显微镜(上海精密仪器仪表有限公司) ,
ZHJH - 1115 无菌操作台(长沙湘平科技发展有限公司) ,HH -
S. Z电热恒温水浴锅(郑州长城科工贸有限公司) ,YLS - Q4 耳
肿打孔器(山东省医学科学院设备站) ,PVR足趾积测量仪(山东
省医学科学院设备站)。
2 方法与结果
2. 1 药液制备 称取紫背金盘药材粉末 100 g,分 3 次加蒸馏水
300,200,100 ml,分别回流 60,40,20 min,合并滤液,浓缩,得水提
物浸膏备用。称取紫背金盘药材粉末 100 g,分 3 次加乙醇 300,
200,100 ml,分别回流 60,40,20 min,合并滤液,浓缩,得醇提物浸
膏备用。
2. 2 紫背金盘不同提取物对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响
取雄性小鼠 60 只,按体质量随机均分为 6 个不同组:模型空白
组,阿司匹林阳性对照组,紫背金盘水提物高、低剂量组,紫背金
盘醇提物高、低剂量组,每组 10 只。每组动物实验前灌胃给药,
模型空白组给予等量的生理盐水,给药各组分别给予阿司匹林,
紫背金盘水提物高、低剂量,紫背金盘醇提物高、低剂量药液,连
续给药时间 5 d(0. 2 ml /10 g)。末次给药 1 h 后,每只小鼠右耳
内外侧涂二甲苯 50 μl 致炎,左耳不涂为正常耳对照,30 min 后
脱颈处死,沿耳廓基线剪下双耳,用 YLS - Q4 耳肿打孔器冲下左
耳及右耳同一部位的圆片,立即在分析天平上称重,以两耳片重
量差作为肿胀度,进行组间差异性比较。结果见表 1。
实验结果表明,紫背金盘的水提高、低剂量能够显著抑制小
鼠因二甲苯引起的耳肿胀。
2. 3 紫背金盘不同提取物对角叉菜胶致大鼠足肿胀的影响 选
体质量 180 ~ 220 g的 SD大鼠 60 只,雄性,随机分成 6 组:模型空
白组;阿司匹林阳性对照组,紫背金盘水提物高、低剂量组、紫背
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LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2011 VOL . 22 NO. 5 时珍国医国药 2011 年第 22 卷第 5 期
金盘醇提物高、低剂量组。模型空白组给予生理盐水灌胃,其余
各组分别灌胃给予阿司匹林、紫背金盘水提物高、低剂量组、紫背
金盘醇提物高、低剂量组药液。连续灌胃 5 d,于末次给药后测量
未致炎前的各大鼠足趾容积。给药后 1 h,每只大鼠右足趾皮下
注射 1%角叉菜胶 0. 1 ml致炎,随后测量注射角叉菜胶后 1,2,3,
4,6 h的大鼠右后足趾肿胀容积,测定足趾肿胀容积。结果见表
2。
表 1 紫背金盘不同提取物对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响(珋x ± s)
mg
组别
耳片重量
右耳 左耳
肿胀度
模型空白 25. 18 ± 1. 51 16. 18 ± 1. 18 9. 00 ± 2. 12
阳性对照 20. 77 ± 1. 06 16. 47 ± 0. 81 4. 29 ± 1. 55**
紫背金盘水提物(高)22. 10 ± 0. 94 16. 79 ± 1. 27 5. 31 ± 1. 69**
紫背金盘水提物(低)24. 13 ± 1. 09 16. 86 ± 1. 00 7. 27 ± 1. 36*
紫背金盘醇提物(高)25. 07 ± 0. 89 16. 99 ± 0. 75 8. 08 ± 1. 09
紫背金盘醇提物(低)25. 70 ± 1. 09 16. 69 ± 1. 05 9. 01 ± 1. 80
与模型空白组比较,* P < 0. 05,**P < 0. 01;n = 10
实验结果表明,紫背金盘水提液低、高剂量各剂量组在给药
后 1 h可抑制角叉菜胶所致大鼠足肿胀。
2. 4 对热板法致小鼠疼痛的影响[4] 调节水浴锅,温度控制(55
± 0. 5)℃,热板需预热 10 min。筛选合格小鼠:取体质量 18 ~ 22
g雌性小鼠,每次 1 只放在热板上,小鼠自放至热板上到出现舔
后足所需时间小于 5 s或大于 30 s或跳跃者弃之不用,合格小鼠
分组,重复测其正常痛阈值,取两次正常痛阈平均值,作为该鼠给
药前痛阈值。取符合上述要求的小鼠 60 只,按体质量随机分为
6 组:模型空白组,阿司匹林阳性对照组,紫背金盘水提物高、低
剂量组,紫背金盘醇提物高、低剂量组。模型空白组每天给予生
理盐 0. 2 ml /10 g,其余各组每天分别给予紫背金盘水提物高、低
剂量组、紫背金盘醇提物高、低剂量组,连续灌胃 3 d,于末次给药
后,分别于 15 min 按前法测定痛阈值,如痛阈值超过 60 s,则停
止,测试值按 60 s计算,数据经成组 t检验。结果见表 3。
实验结果表明,紫背金盘的水提高、低剂量能够显著提高延
长热板所致小鼠的痛阈值,表明紫背金盘水提液对热板所致的小
鼠疼痛具有一定的镇痛作用。
表 2 对角叉菜胶致大鼠足跖肿胀容积的影响(珋x ± s) ml
组别 给药前容积
致炎后肿胀足容积
1 h 2 h 3 h 4 h 6 h
模型空白 1. 34 ± 0. 05 1. 76 ± 0. 11 1. 83 ± 0. 15 1. 67 ± 0. 10 1. 65 ± 0. 10 1. 61 ± 0. 10
阳性对照 1. 35 ± 0. 05 1. 61 ± 010** 1. 66 ± 0. 10** 1. 56 ± 0. 07** 1. 51 ± 0. 09** 1. 48 ± 0. 08**
紫背金盘水提物(高) 1. 36 ± 0. 07 1. 62 ± 0. 12* 1. 71 ± 0. 11* 1. 58 ± 0. 07* 1. 52 ± 0. 06** 1. 48 ± 0. 05**
紫背金盘水提物(低) 1. 41 ± 0. 10 1. 65 ± 0. 07* 1. 72 ± 0. 06* 1. 62 ± 0. 07 1. 58 ± 0. 07 1. 53 ± 0. 04*
紫背金盘醇提物(高) 1. 39 ± 0. 10 1. 79 ± 0. 17 1. 86 ± 0. 10 1. 66 ± 0. 09 1. 61 ± 0. 09 1. 56 ± 0. 08
紫背金盘醇提物(低) 1. 42 ± 0. 08 1. 79 ± 0. 12 1. 82 ± 0. 14 1. 76 ± 0. 11 1. 70 ± 0. 14 1. 58 ± 0. 11
与模型空白组比较,* P < 0. 05,**P < 0. 01;n = 10
表 3 对小鼠热板法镇痛实验的影响(珋x ± s)
组别 剂量 V /ml 给药前痛阈值 t / s
给药后不同时间痛阈值 t / s
15 min 30 min 60 min
模型空白 0. 4 19. 28 ± 4. 31 21. 64 ± 5. 36 18. 95 ± 3. 08 20. 4 ± 12. 32
阳性对照 0. 4 17. 90 ± 4. 53 27. 67 ± 4. 09* 25. 03 ± 9. 83* 27. 83 ± 2. 45**
紫背金盘水提物(高) 0. 4 17. 67 ± 6. 57 28. 81 ± 5. 66** 27. 11 ± 3. 97** 28. 33 ± 5. 34**
紫背金盘水提物(低) 0. 4 17. 09 ± 5. 97 26. 48 ± 4. 00* 24. 32 ± 4. 04* 25. 28 ± 5. 07*
紫背金盘醇提物(高) 0. 4 20. 58 ± 5. 81 21. 33 ± 8. 21 16. 08 ± 5. 25 19. 43 ± 4. 26
紫背金盘醇提物(低) 0. 4 20. 36 ± 3. 82 21. 52 ± 3. 22 17. 96 ± 4. 56 19. 74 ± 8. 08
与模型空白组比较,* P < 0. 05,**P < 0. 01;n = 10
2. 5 对冰醋酸致小鼠疼痛的影响[5] 取小鼠 60 只,雌雄各半,体
质量 18 ~ 22 g,随机均分为 6 个不同组,每组 10 只:模型空白组,
阿司匹林阳性对照组,紫背金盘水提物高、低剂量组,紫背金盘醇
提物高、低剂量组。模型空白组每天给予生理盐 0. 2 ml /10 g,其
余各组每天分别给予阿司匹林阳性药、紫背金盘水提物高、低剂
量、紫背金盘醇提物高、低剂量组,连续灌胃 3 d。于末次给药后
30 min后,每只小鼠腹腔注射 0. 6%冰醋酸 0. 2 ml /10 g,观察 10
min内扭体次数及扭体潜伏期,进行组间 t检验。结果见表 4。
表 4 紫背金盘提取物对扭体法小鼠的镇痛作用(珋x ± s)
组别 潜伏期 t / s 扭体次数
模型空白 261. 50 ± 51. 24 33. 00 ± 4. 59
阳性对照 317. 70 ± 43. 30** 22. 40 ± 3. 98**
紫背金盘水提物(高) 302. 80 ± 9. 84* 26. 00 ± 6. 18**
紫背金盘水提物(低) 283. 89 ± 24. 02 28. 50 ± 3. 78*
紫背金盘醇提物(高) 243. 00 ± 32. 55 33. 70 ± 4. 30
紫背金盘醇提物(低) 254. 60 ± 37. 50 35. 50 ± 5. 30
与模型空白组比较,**P < 0. 01,* P < 0. 05;n = 10
实验结果表明,紫背金盘的水提高、低剂量能够显著延长冰
醋酸所致的小鼠扭体时间和扭体次数,表明紫背金盘具有一定的
镇痛作用。
3 讨论
现代研究表明紫背金盘具有杀虫作用[6]。本实验应用两种
实验性炎症模型和两种镇痛实验模型,进行了紫背金盘的主要药
效学实验。结果显示紫背金盘水提物具有较好的抗炎镇痛作用。
本实验结果为其临床应用提供了实验依据。
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