全 文 ：高效液相色谱法测定中药滴水珠中麻黄碱的含量
葛尔宁 ,严建伟
(浙江中医学院 ,浙江 杭州 310053)
摘要: 目的 测定中药滴水珠中麻黄碱的含量。 方法 采用反相高效液相色谱法 ,以 Phenomenex ODS
柱为分析柱 ,甲醇-水 (加磷酸调 p H至 3. 5 ) ( 65∶ 35 )为流动相 ,流速: 0. 6 ml· min- 1;检测波长为 213 nm,
柱温 30℃。结果 在 20～ 100μg· ml- 1范围内 ,色谱峰面积与对照品浓度呈良好的线性关系 ,r= 0. 999;平均
回收率为: 91. 20% , R SD为: 1. 2% (n= 5)。 结论 该方法简易准确 ,重现性好 ,在本色谱条件及样品处理方
法下 ,可以准确测出滴水珠中麻黄碱的含量。
关键词:滴水珠 ;麻黄碱 ;高效液相色谱法
中图分类号: R284. 1 文献标识码: A 文章编号: 1004-2199( 2003) 06-0029-02
中药滴水珠为天南星科半夏属草本植物心叶半
夏的块茎 ,具解毒、止痛、行淤消肿的功能 ,常用于毒
蛇咬伤、胃痛、头痛、腰痛等 ,临床上又常用于对肿瘤
病人的消肿止痛 ,且效果甚佳。 本品为野生药材 ,有
关它的化学成分研究及报道甚少。据《中药志》等权
威资料记载: “其化学成分不详 ,含氨基酸、薄层层析
表明含 β -谷甾醇及 β-谷甾醇 -D、葡萄甙”。作者至今
未见有关文献有更新的报道。作者从同科植物半夏
的有关化学成分报道 ,以及鉴别资料中两者的薄层
图谱互为相似等得到启发 ,并以目前通用的高效液
相色谱仪作为分析检测工具 ,试图发现滴水珠中所
含的活性物质生物碱等成分及含量。 结果发现滴水
珠中含 0. 003 7%麻黄碱成分。
1 仪器和试药
Waters高效液相色谱仪 ,包括 510泵 , 484紫外
检测器 , 680梯度控制器。 PhenomenexODS柱 ( 250
( 4. 60 mm)。定量管 20μl。浙江大学 N2000色谱工
作站。盐酸麻黄碱对照品 (购于中国药品生物制品检
定所 ) ,乙酰胆碱对照品 (购于上海化学试剂总厂所
属上海试剂三分厂 ) ,滴水珠样品 (购于华东医药股
份有限公司中药材分公司 )。甲醇为色谱醇 ,磷酸、氢
氧化纳、乙醚、乙醇均为分析醇。
2 方法与结果
2. 1 色谱条件 Phenomenex ODS柱 ( 5μm 250
( 4. 60 mm) ;流动相: 甲醇-水 ( 65∶ 35) ,加磷酸调
pH至 3. 5;流速: 0. 6 ml· min- 1;检测波长为 213
nm ,柱温 30℃。
2. 2 样品处理 取滴水珠样品 1 g ,碾磨成粉 ,依
次加入 10% NaOH10 ml、无水乙醇 5 m l、乙醚 20
ml。置超声波中振摇 15 min后 ,离心 5 min,吸取醚
层并挥干 ,残渣用 1 ml流动相溶解后待进样。
3 线性范围
精密称取盐酸麻黄碱对照品 1 mg、 2 mg、 3mg、
4 mg、 5 mg ,置 50 ml量瓶中 ,加流动相置超声波中
振摇溶解后 ,用流动相稀释至刻度。 分别吸取 6μl
进样。记录峰面积 ,以对照品溶液浓度 (X )与其相应
峰面积 ( Y )求得回归方程和相关系数为: Y =
334 634X - 39 992, r= 0. 999,线性范围: 20～ 100
μg· ml- 1。
图 1 色谱图
A.盐酸麻黄碱对照品
B.乙酰胆碱+ 盐酸麻黄碱对照品
C.滴水珠 1.乙酰胆碱 2.盐酸麻黄碱
4 回收率及精密度测试
回收率测试 分别称取样品粉末 0. 5 g、 1. 0 g、
1. 5 g ,置三只 100 ml量瓶中 ,选择上述已稀释的对
照品溶液中的一种 ,分别加入 1 ml,放入烘箱用 50
℃烘干 ,同样品处理方法处理后进样 ,记录峰面积 ,
同时以同种相同量对照品溶液直接进样的峰面积为
—29—现代中药研究与实践 2003年第 17卷第 6期Resear ch and Practice of Chinese Medicines
DOI : 10. 13728 /j . 1673 -6427. 2003. 06. 011
对照 ,计算回收率。测得三种浓度的平均回收率为:
91. 20% , RSD为: 1. 2% (n= 5 )。
5 精密度及稳定性测试
精密吸取同一供试样品 6μl,连续进样 5次 ,测
得峰面积积分值的 RSD为 0. 37%。每隔 12 h分别
精密吸取同一供试样品 6μl进样 ,连续 5次 ,测得
峰面积积分值的 RSD为 0. 45% 。
6 重复性测试
取滴水珠样品粉末 5份 ,每份 1 g ,用样品处理
方法处理后进样 ,重复测定 5次 ,记录峰面积 ,结果
RSD为 0. 63% 。表明本法具良好重现性。
7 含量测定
精密吸取 2. 2中待检样品 6μl进样 ,测得峰面
积积分值与标准曲线比较 ,结果测得滴水珠样品中
所含麻黄碱为: 0. 003 7% , (n= 5)。
8 讨论
8. 1 滴水珠在临床上的应用日见增多 ,且效果颇
佳。但有关它的化学成分研究及报道甚少 ,本文采用
HPLC法对滴水珠中的麻黄碱含量进行了测定 ,从
样品图谱中可见麻黄碱的特征峰明显。 这可为滴水
珠药材的质量控制提供依据。
8. 2 测定波长的选择 经紫外扫描测定 ,盐酸麻黄
碱在 213 nm处有最大的吸收光谱 ,故选 213 nm作
为测定波长。
8. 3 在同一体系下对样品中的乙酰胆碱含量作了
测试。取含量为 10 mg· ml- 1的乙酰胆碱标样与上
述 3种盐酸麻黄碱标样以 1∶ 1混合 ,分别精密吸取
各混合液 6μl进样。记录乙酰胆碱的峰面积 ,以标
样溶液浓度 ( W )与其相应峰面积 ( Z)求得回归方程
和相关系数为: Z= 334 634W— 39 992, r= 0. 999,
样品中的 2峰与乙酰胆碱标样的出峰时间吻合 ,可
认为是胆碱类生物碱。经测定 ,含量为 0. 025% 。
参考文献
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出版社 , 1998. 4187.
[2 ] 胡家炽 ,何志强 ,黄钦鸣 . HPLC测定中成药大活络丸中微量麻
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[ 3 ] 金 晓 ,王 杉 ,张长久 .尿中麻黄碱类药物的 HPLC定量分
析 .药学学报 , 1994, 29( 5): 375. (收稿日期: 2003-09-23)
Determination of Ephedrine in Pinell ia cordata N. E. Brown by HPLC
GE Er-ning , N IAN Jian-w ei
( Analy tical Testing Center , Zhejiang Co lleg e of Tradi tional Chinese Medicine,
Hang zhou 310053, China )
Abstract: Objective To establish a HPLC method for th e determina tion of ephedrine in Pinel lia
cordata N. E. Brow n.Method The HPLC was conducted on a Phenomenex ODS C18 column ( 5μm, 250
mm× 4. 6 mm ) wi th methanol-w ater so lution ( 65∶ 35 ) ( adjusted to pH 3. 5 wi th phosphoric acid ) as
mobile phase, flow rate 0. 6 ml· min- 1 , The detectiv e w aveleng th w as 213 nm and co lumn temperature at
30℃ . Result The peak areas show ed a good correlation wi th concentra tion a t the range o f 20～ 100μg·
ml
- 1 , r= 0. 999; The average recovery w as 91. 20% , RSD= 1. 2% (n= 5) . Conclusion The method w as
simple, accura te and reproducible. Under this experimental condi tion, the ephedrine in Pinel lia cordata N.
E. Brow n w as separated very w el l and determined accurately.
Key words: Pinel lia cordata N. E. Brow n; ephedrine; HPLC
·信息·
未取得 GM P证书的药厂明年 7月 1日起一律停产
国家食品药品监督管理局发出通告 ,自 2004年 7月 1日起 ,凡未取得相应剂型或类别《药品 GMP证
书》的药品制剂和原料药生产企业 (或车间 ) ,一律停止生产。
这份通告说 , 2004年 6月 30日以前生产的合格药品 ,在其规定的有效期内 ,经所在地省、自治区、直辖
市食品药品监督管理局 (药品监督管理局 )核准后 ,可继续销售使用。
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