全 文 ：《食品工业》2012 年第33卷第 6 期 52
由图5可知，当反应时间为2 h时，果胶酶已经反
应了94.8%，虽然反应3 h时可达99.3%，反应时间最
佳，但为了节约成本和提高生产效率，本试验选择2 h
作为最佳酶解时间。
图5 酶解时间对酶解反应的影响
3 结论
通过果胶酶对库尔勒香梨汁处理的试验结果表
明，最适合香梨汁中果胶酶酶解的酶制剂为Pectinex
BE XXL，酶制剂用量为120 mL/t，酶解温度35 ℃～
40 ℃，反应时间2 h，pH为5～5.5之间。
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广西莪术多糖水提醇沉工艺优化研究
戴平，黄凤香1，曾建红1*，宋波2
1.桂林医学院药学院（桂林 541004）；2.西华师范大学生命科学学院（南充 637003）
摘 要 对广西莪术多糖（CKP）的水提醇沉工艺进行优化。以CKP的提取率和含量为评价指标，采用正交设
计试验考察料液比、提取温度、提取时间三因素对水提工艺的影响；考察醇沉前药液体积比、乙醇体积分数、
醇沉时间3因素对醇沉工艺的影响。结果表明：最佳水提工艺条件为料液比1︰5，在70 ℃下水提1.5 h；最佳醇
沉工艺条件为药液体积比1︰1.3，75%的乙醇沉淀24 h。在此工艺条件下，CKP的提取率和含量分别达到3.802%
和8.556 μg/mL。
关键词 广西莪术多糖；水提醇沉工艺；优化
Extracting Optimization of Curcuam kwangsiensis Polysaccharide
Dai Ping1, Huang Feng-xiang1, Zeng Jian-hong1*, Song Bo2
1.School of Pharmaceutical, Guilin Medical University (Guilin 541004);
2. Resource and Circumstance College, West China Normal University (Nanchong 637003)
Abstract To optimize the process conditions of water-extracting and alcohol-precipitating of Curcuam kwangsiensis
polysaccharide(CKP). Using the yield of CKP and content of CKP as assessment index, three factors of water-
extracting technology were studied by orthogonal design, including the ratio of material to extracting solvent, extracting
temperature and extracting time. 3 factors of alcohol-precipitating technology were studied by orthogonal design,
including the ratio of CKP liquid to extracting solvent, concentration of ethanol and alcohol-precipitating time. Results
showed that the yield of CKP was 3.802% by the optimum process conditions of water-extracting of CKP was as
follows: ratio of material to extracting solvent was 1︰5, extracting time when the temperature kept at 70 ℃ was 1.5 h.
The content of CKP was 8.556 μg/mL by the optimum process conditions of alcohol-precipitating of CKP was ratio of
CKP liquid to extracting solvent 1︰1.3, the concentration of ethanol 75%, alcohol-precipitating time 24 h.
Keywords Curcuam kwangsiensis polysaccharide; the water-extraction and alcohol-precipitation process; optimization
工艺技术
《食品工业》2012 年第33卷第 6 期 53
广西莪术（Curcuma kwangsiensis S.G..Lee et
C.F.Liang）是《中国药典》3种基原莪术中的一种，
为姜科姜黄属植物的干燥根茎，为广西地道药材[1]。
莪术的主要有效部位为根和根茎，挥发油和多糖是莪
术的主要活性成分[2]。目前有关广西莪术的研究主要
集中于莪术挥发油药效和临床应用开发，而多糖作为
一类具有多种生物活性的物质，在免疫调节、抗氧
化、抗突变、降血脂、抗病毒等方面已显示出诱人前
景[3]。对广西莪术水提醇沉工艺进行考察，优选最佳
工艺条件，旨在为广西莪术多糖的开发及其综合利用
提供理论参考。
1 材料与设备
广西莪术样品采自广西玉林，样品采收后洗净、
切片、晒干、打碎，过20目筛，干燥器储藏备用。
样品经桂林医学院生药学教研室曾建红副教授鉴定
为姜科姜黄属植物广西莪术（Curcuam kwangsiensis
S.G.Leset C.F.Liang）的根茎。乙醇、苯酚、浓硫酸、
过氧化氢、葡萄糖、三氯乙烷、正丁醇、茚三酮均为
分析纯，水为重蒸水。
UV-2401PC紫外可见分光光度计：日本岛津；
FW177型中草药万能粉碎机：天津市泰斯特仪器有限
公司；DK-600型电热恒温水槽：上海精宏设备有限
公司；Hei-VAP型旋转蒸发仪：德国Heidolph公司；
101-1型恒温鼓风烘箱：上海市试验仪器厂制造；电
子天平：赛多利斯科学仪器北京有限公司。
2 试验方法
2.1 标准曲线的绘制
精密称取105 ℃干燥至恒重的葡萄糖标准品10.0
mg，置于100 mL容量瓶中，重蒸水溶解并稀释至刻
度，摇匀，制得浓度为0.10 mg/mL葡萄糖对照品溶
液。精密吸取对照品溶液0.2，0.4，0.6，0.8，1.0 mL
置于10 mL容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。分别
精密吸取各溶液1.0 mL，加入5%苯酚溶液1.0 mL，混
匀，迅速加浓硫酸5.0 mL，摇匀，放入－4 ℃冰箱冷
却。同步吸取1.0 mL重蒸水，加5%苯酚溶液和浓硫
酸同上平行操作制备空白对照液。在490 nm波长处测
量其吸光度[4]。以浓度（X）对吸光度（Y）进行线性
回归，得回归方程：Y =0.068 X－0.0497，r = 0.999 2
（n=5）。表明，葡萄糖在2.857～14.286 μg/mL范围
内与吸光度呈良好的线性关系。
2.2 CKP的提取
称取150 g广西莪术粉末于圆底烧瓶中，按照质量
与体积比配制成一定的料液比加入重蒸水，并放入电
热恒温水槽内，加热到一定温度，回流提取下保持一
定时间后，过滤，重复浸提三次，合并滤液，真空浓
缩至200 mL。将50 mL 30% H2O2加入浓缩液中，水浴
脱色2.5 h，颜色变为淡黄色后迅速加热，除去H2O2，
加入重蒸水将溶液定容至200 mL。采用Sevage法除蛋
白[5]后，倾析法取上清液少许，加入1mL 0.2%茚三酮
溶液，加热煮沸1 min，无紫色出现，说明大部分蛋
白质已经被除去。将纯化后的莪术多糖溶液按一定的
药液体积比分装到平底烧瓶中，再用一定浓度的乙醇
沉淀，出现大量白色沉淀后，搅匀，于-4 ℃冰箱中
静置一定的时间，可见大量的白色沉淀析出。抽虑得
到CKP。再以水—乙醇重结晶纯化2次，60 ℃烘干得
纯度较好的白色粉末状CKP。用电子天平称量所得到
CKP的质量，计算CKP的提取率。
CKP提取率=（提取CKP干粉质量/称取的广西莪
术粉末的质量）×100% （1）
精密称取纯化后的CKP 10.00 mg，置于50 mL量瓶
中，重蒸水溶解并稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶
液，按2.1步骤经过相应处理后在在490 nm波长处测量
其吸光度，计算提取率。
2.3 水提工艺正交试验
根据浸提理论[6]与实践经验，CKP的水提工艺与
料液比、提取温度、提取时间等因素密切相关。为选
择最佳水提工艺条件，本试验选用L9(34)正交表，以
CKP提取率为考察指标，因素水平见表1。
表1 水提取工艺因素水平表
水平 A液料比 B提取时间/h C提取温度/℃
1 1︰5 1.0 70
2 1︰10 1.5 80
3 1︰15 2.0 90
2.4 醇沉工艺正交试验
醇沉工艺与醇沉前药液体积比、乙醇体积分数、
醇沉时间等因素有密切关系。为选择最佳醇沉工艺条
件， 本试验选用L9(34)正交表，以CKP的含量为考察
指标，因素水平见表2。
表2 醇沉工艺因素水平表
水平 A醇沉时间/h B乙醇体积分数/% C药液体积比
1 12 65 1︰1.1
2 24 75 1︰1.3
3 48 85 1︰1.5
3 试验结果
3.1 水提工艺试验结果
水提工艺以CKP提取率为考察指标进行了9次正
交试验，有关数据及极差、方差分析结果见表3。
由表3方差分析结果可知，液料比（A）、提
取时间（B）、提取温度（C）对CKP提取率影响明
显，经方差分析均有显著性差异（p<0.05）。各因
*通讯作者
工艺技术
《食品工业》2012 年第33卷第 6 期 54
素对CKP提取率影响主次为A>B>C，水提最佳工艺为
A1B2C1，即液料比为1︰5，提取温度为70 ℃，每次提
取1.5 h。
表3 水提工艺L9(34)正交试验安排及结果（n=2）
试验号 A B C D空白 提取率/%
1 1 1 1 1 3.52
2 1 2 2 2 4.02
3 1 3 3 3 3.73
4 2 1 2 3 2.61
5 2 2 3 1 3.73
6 2 3 1 2 3.18
7 3 1 3 2 1.84
8 3 2 1 3 2.92
9 3 3 2 1 1.84
K1 11.27 7.97 9.62 9.09
K2 9.52 10.67 8.47 9.04
K3 6.60 8.75 9.30 9.26
R 1.56 0.90 0.38 0.07
3.2 醇沉工艺试验结果
醇沉工艺以CKP含量为考察指标进行了9次正交
试验，有关数据及极差、方差分析结果见表4。
表4 醇沉工艺L9(34)正交试验安排及结果（n=2）
试验号 A B C D空白 CKP含量/(μg·mL-1)
1 1 1 1 1 4.824
2 1 2 2 2 7.267
3 1 3 3 3 7.206
4 2 1 2 3 7.318
5 2 2 3 1 7.761
6 2 3 1 2 5.839
7 3 1 3 2 6.912
8 3 2 1 3 5.721
9 3 3 2 1 7.388
K1 19.30 19.05 16.38 19.97
K2 20.92 20.75 21.97 20.02
K3 20.02 20.43 21.88 20.25
R 0.54 0.56 1.86 0.09
由表4方差分析结果可知，醇沉时间（A）、乙
醇体积分数（B）、料液比（C）对CKP含量影响明
显，经方差分析均有显著性差异（p<0.05）。各因
素对CKP含量影响主次为C>B>A，水提最佳工艺为
A2B2C2，即乙醇体积分数为75%，药液体积比1︰1.3，
醇沉24 h。
3.3 最佳工艺验证
按优选水提工艺进行了3次验证试验，即按液料
比1︰5加科重蒸水，70 ℃回流加热提取1.5 h，水提工
艺中CKP提取率分别为3.734%，3.697%，3.974%，平
均3.802%，RSD＝3.96%。在上述验证性试验的基础
上，进一步对醇沉工艺进行了3次验证试验，即：将
纯化后的CKP溶液按1︰1.3的药液体积比置于平底烧瓶
中，用体积分数为75%的乙醇沉淀，出现大量白色沉
淀后，搅匀，于-4 ℃冰箱中静置24 h。将供试品溶液
在490 nm处测定吸光度，按标准曲线计算CKP含量，
醇沉工艺中CKP含量分别为8.329 μg/mL，8.329 μg/
mL，8.839 μg/mL，平均8.556 μg/mL，RSD＝3.03%。
说明优选水提醇沉工艺稳定合理可行。
4 结论
本研究采用水提醇沉法提取CKP，以CKP提取率
和含量为考察指标，通过正交试验得出影响水提醇沉
效果诸因素的主次关系依次是液料比>提取温度>提取
时间，药液体积比>乙醇体积分数>醇沉时间。根据正
交试验得出最佳工艺条件为料液比1︰5、在70 ℃下水
提1.5 h，药液体积比1︰1.3，75%的乙醇沉淀24 h。据
此工艺条件进行提取和醇沉可使CKP提取率和含量分
别达到3.802%和8.556 μg/mL。正交试验优选的水提
醇沉工艺条件经验证，CKP提取率和所测得的含量稳
定，工艺方法合理可行，为下一步深入研究和开发利
用提供了依据。
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