全 文 ：二谷
关于生殖细胞有丝分裂的研究 , 历来是植
物胚胎学所关心的问题 .
以前的研究大多采用常规的细胞 核 染 色
法 , 如醋酸洋红 、 卡宝品红 、 苏木精 、 孚尔根
及吉姆萨氏染色等 , 其灵敏度均不高 , 后两种
染色法的操作程序也烦琐 , 尤为重要的是有丝
分裂相皆不很清楚 , 影响观察效果 . 其主要原
因是花粉粒壁厚 , 花粉管内部空间狭窄 . 针对
这些间题 , 近年来不少研究者开始把眼光转向
灸光显微术 . 1 9 8 8 年 , 杨弘远 应 用 H Oe hc st
3 3 2 5 8 荧光染色术结合冬青油透明术显示 了多
种植物的花粉细胞核 ` 1 , . 在迄今文献中 , 有关
植物生殖细胞有丝分裂的荧光显微术研究尚不
多见 .
最近 , 笔者应用新型 D N A 专一高效荧光
染料 D A P I ( 4 ’ , 6 一 d i o m i n d i n o 一 2 一 P h e n y l i n d -
砚 。 ) 荧光显微术对若干种植物花粉粒或花粉管
中生殖细胞分裂成精子的核行为进行 了较详细
的研究 , 清楚地观察到有丝分裂的各分裂相 .
封三左下 图显示二胞型花粉材料葱莲人工萌发
的花粉管中生殖细胞有丝分裂的中期染色体向
两极移动 .
试验程序是 : 花粉在适宜人工萌发培养液
中萌发~ 定期取样~ 卡诺或 F P A 固定液固 定
, 缓冲液洗涤 、 D A P I染液浸染 , 缓冲液洗涤
、 荧光镜检 .
研究花粉粒中生殖细胞的有丝分裂尚需冬
青油透明 〔” , 甘油封片亦会改善效果 , 研究花
粉管中生殖细胞的有丝分裂则可省去冬青油透
明步骤 .
本文报道的方法为观察生殖细胞的有丝分
裂及其他核行为研究提供了快速 、 简便 、 灵敏
的有效检测术 .
承蒙导师杨 弘远教授精 心 指 导 , 谨致 谢
`忱 .
低温预处理对葱莲
生殖细胞分裂的影响
[ 1〕杨弘远 , 《 植物学报 一 , 3 9 ( 29 5 5 ) 2 4 2
[ 2 ]莫永胜 , ` 生命的化学一 , 9 ( 1 9 5 9 ) 2 7
( 1 0 9 0年 1 0月 2 0日收到 )
1 5 8
·
莫永胜 李仕琼
(武汉大学 )
迄今关于细胞分裂的研究工作 , 大多集中
在有丝分裂方而 , 无丝分裂的研究相对较薄弱 .
在被子植物生殖细 fa)J 方面 , 陆文梁曾发现
小麦花粉生殖细胞在低温下进行劈裂式的无丝
分裂【1 , . 小麦是三胞型花粉材料 , 生殖细胞的
分裂能直接受到低温的影响 . 对于 二 胞 型 花
粉 , 迄今尚未见到有关的研究报道 . 本文简要
报道我们在二胞型花粉中取得的初步结果 .
试验材料是石蒜科的葱莲 ( Z eP h y r on t he 、
;ca
l .id 成? ( L i i z d j . ) H e r b . ) .
在开花盛期将带花柄的花朵切下置 于 4 ℃
冰箱低温处理 ,适时取花粉于含 15 %蔗糖的 B K
培养基中 25 ℃人工萌发 . 定期取 样 , 卡 诺 固
定和 D A P I (不含碳酸的 B K i s s , 1 . 0户g D A P I ,
S e r v a ) 染 色 以 后 , 置 之 于 o l y : 、 i P u s N E W
V A N O X A H B S
一
51 4 型万能显微镜下明 视 野
与荧光显微装置 ( U 激发 )观察与摄影 .
结果发现 , 低温预处理的花粉人工萌发成
花粉管后 , 生殖细胞有两种分裂方式 : 有丝分
裂和无丝分裂 , 后者出现的频率较低 . 有丝分
裂具典型的染色体 , 各时期的分裂相清晰可辨 ,
无丝分裂则看不到染色体 , 其分裂方式很可能
是缴裂 (封三右下图 ) , 这和小麦中的劈裂 〔 1 ,似
有不同 . 随着低温预处理的时间延长 , 无丝分
裂的频率明显增高 , 而且 , 部分生殖细胞发生
多次无丝分裂 , 形成的精子有时继续进行无丝
分裂 , 核分裂有均等和不均等方式 , 还见到微
核的产生 . 在未经低温预处理的相应对照中尚
未见到无丝分裂 〔召’ . 这似乎表明低温预处理的
作用是诱导了无丝分裂 的产生 .
承蒙杨 弘远教授精心赐教 , 谨致谢忱 .
[ 1 ] 陆文梁 , `科学通报 , , 1 2 ( 1 98 1 ) 7 5 3
[ 2 1 莫永胜 , 一自然杂志 , , 15 ( 1 99 2 ) 15 7
( 10 9 1年 i l J了2 7 日收到 )
15 卷 2 期 确多 索 春