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雷公连与易混品穿心藤的显微鉴别研究



全 文 :续表 3
批号
相似度
S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10
共有模式 R
S5 0. 922 0. 85 0. 91 0. 972 1 0. 962 0. 871 0. 574 0. 51 0. 825 0. 955
S6 0. 864 0. 921 0. 924 0. 983 0. 962 1 0. 909 0. 549 0. 491 0. 802 0. 965
S7 0. 85 0. 891 0. 868 0. 922 0. 871 0. 909 1 0. 483 0. 446 0. 881 0. 931
S8 0. 543 0. 502 0. 665 0. 542 0. 574 0. 549 0. 483 1 0. 958 0. 513 0. 675
S9 0. 464 0. 468 0. 602 0. 492 0. 51 0. 491 0. 446 0. 958 1 0. 466 0. 625
S10 0. 9 0. 747 0. 874 0. 836 0. 825 0. 802 0. 881 0. 513 0. 466 1 0. 887
共有模式 R 0. 91 0. 92 0. 971 0. 972 0. 955 0. 965 0. 931 0. 675 0. 625 0. 887 1
3 讨论
采用高效液相色谱仪的二极管阵列检测器对样品的吸收波
长在 270,275,280,285,290,300 nm 进行分析,结果在 280 nm 检
测波长下,基线较稳定,色谱峰较多,信息丰富,故选择 280 nm为
检测波长。
实验以尽可能多体现酢浆草主要成分为原则,设计样品溶液
制备方法。在考察的 70%甲醇加水超声提取、甲醇超声提取、
70%甲醇加水回流、甲醇回流这 4 种供试品溶液提取制备方法
中,从色谱图上看,用 70%甲醇加水回流提取法制备的供试品溶
液指纹图谱峰形较好,分离度较高,响应峰多,且样品各峰分离良
好。对测定结果综合考虑,选定 70%甲醇加水回流提取法制备
供试品溶液。
在对供试品溶液进行 HPLC 分析时,分别以甲醇 -水、乙腈
-水、甲醇 - 0. 1%磷酸水溶液、乙腈 - 0. 1%磷酸水溶液等系统
对色谱分离过程的影响,结果显示乙腈 - 0. 1%磷酸溶液系统的
分离度高,峰形对称,基线稳定。
通过建立该指纹图谱,对 10 批药材 HPLC图谱进行比较,结
果发现,S1 ~ S7、S10 这 8 批药材 HPLC 图谱的共有峰保留时间、
相对峰面积非常吻合,与共有模式 R比较,相似度除 S10 为0. 887
外,其余的均大于 0. 90;S8、S9 共有峰保留时间、相对峰面积一
致,与共有模式相比差异较大,其相似度均低于 0. 70。由此可以
确定 S1 ~ S7、S10 这 8 批药材质量较为一致,S8、S9 两种较为一
致;这与药材来源相吻合。该指纹图谱的建立为评价酢浆草质量
提供了有效的实验依据。
参考文献:
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收稿日期:2013-11-25; 修订日期:2014-06-21
基金项目:贵州省科学技术基金( No.黔科合 J字[2011]2306 号) ;
贵州省科技计划项目( No.黔科合中药字[2011]LKZ7047 号)
作者简介:吴向莉( 1967-) ,女( 汉族) ,贵州贵阳人,贵阳中医学院药学院高
级实验师,学士学位,主要从事中药资源鉴定、教学及植物科学研究工作.
* 通讯作者简介:王祥培( 1975-) ,男(侗族) ,贵州天柱人,贵阳中医学院药
学院教授,博士学位,主要从事中药及民族药品质与资源开发研究工作.
雷公连与易混品穿心藤的显微鉴别研究
吴向莉,王祥培* ,吴红梅,徐 峰
(贵阳中医学院药学院,贵州 贵阳 550002)
摘要:目的 对天南星科同属植物雷公连与穿心藤进行显微鉴别,为建立雷公连的质量标准和药用资源开发提供一定的
科学依据,同时有利于临床区别用药。方法 徒手切片法、粉末制片法。结果 雷公连根横切面的中心导管较穿心藤数量
少、口径小;雷公连藤茎最外方维管束排列紧密并连接成环,穿心藤藤茎最外方维管束排列疏松。结论 雷公连和穿心藤
在根、藤茎、粉末的显微结构上差异较大,可作为二者鉴别特征。
关键词:雷公连; 穿心藤; 显微; 鉴别
DOI标识:doi: 10. 3969 / j. issn. 1008-0805. 2014. 10. 043
中图分类号:R282. 5 文献标识码:B 文章编号:1008-0805( 2014) 10-2416-02
雷公连 Amydrium hainanense.(Engl.). H . Li.主要分布在海
拔 550 ~ 1100 m的地区,习见于常绿阔叶林中树干上或石崖上,
适应性强。主要分布在西南、华中地区,贵州省的黔南、黔东南亦
分布[1]。雷公连,别名大医药、化恩妈、大软筋藤、九龙上调、野
红苕、青藤、下山虎、雷公药、风湿药[2],始载于《中华本草纲要》,
是我国特有的药材,雷公连有小毒,味辛、微苦、性凉,具有舒筋活
络,祛瘀止痛之功效,全草入药主要用于治疗风湿麻木、心绞痛、
骨折及跌打损伤等疾病。本课题组曾对雷公连进行显微鉴
别[3],在研究中发现雷公连与同科同属植物穿心藤 Amydrium
hainanense (Ting et Wu ex H. Li et al.)H . Li的外部形态特征极
为相似 。穿心藤又叫穿孔藤、九十九窿、穿心风,分布我国西南、
华中、东南。穿心藤味甘、涩,性平,具有清热解毒、消肿止痛、祛
风除湿的功效,全草入药可治疗胃炎、胃溃疡、胆囊炎、鹤膝风、骨
髓炎[4]等病。由此可见,雷公连和穿心藤在性味、功效及治疗病
证上差异很大,但由于二者外部形态特征相似,在临床运用时极
易混淆,导致中毒或延误病情,目前对于二者的鉴别未见研究报
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时珍国医国药 2014 年第 25 卷第 10 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2014 VOL. 25 NO. 10
道,不利于准确的识别这两种亲缘关系相近的药材。因此,探索
两种药材显微鉴别特征上的差异,以期为其临床的准确应用提供
科学依据具有十分重要的意义。
1 仪器与材料
1. 1 仪器与试剂 仪器 Nikon E100 型生物显微镜(日本尼康股
份有限公司);贺德 GZX - GF10 电热恒温鼓风干燥箱(上海贺德
实验设备有限公司);RRH -100 型万能高速粉碎机(欧凯莱芙实
业公司)。试剂:氯化锌碘液、间苯三酚、浓盐酸 、苏丹Ⅲ、水合氯
醛、稀甘油。
1. 2 材料 雷公连药材采自贵州凯里,经王祥培教授鉴定为天南
星科植物雷公连 Amydrium hainanense(Engl.)H. Li. 的新鲜或干
燥藤茎。穿心藤药材采自广西兴秀,经吴向莉高级实验师鉴定为
穿心藤 Amydrium hainanense (Ting et Wu ex H. Li et al.)H . Li
的新鲜或干燥藤茎。
2 方法与结果
2. 1 雷公连和穿心藤性状特征鉴别 雷公连附生藤本,茎较细
弱,粗 3 ~ 5cm,干时褐色,具纵条纹,腹面密生肉质气根,叶片革
质,镰状披针形,基部宽楔形至近圆形,长 13 ~ 23cm,宽 5 ~ 8cm。
叶柄长 8 ~ 15cm,具槽,基部扩大。穿心藤藤本茎圆柱形,叶柄基
部抱茎。叶片绿色,纸质,卵形披针形,镰状披针形,基部圆形或
浅心形,叶柄长 6 ~ 12cm,叶长 9 ~ 15cm,宽 3 ~ 7cm,叶片沿中肋
有圆形或卵形穿孔或无穿孔,孔长 4 ~ 6 cm,宽 1. 54 cm。
2. 2 雷公连和穿心藤根、藤茎的横切面显微特征 取新鲜植株
雷公连、穿心藤根洗尽放入盛有水的烧杯(作标记)中浸泡 2 h,
然后截取两种材料的主根上部 1 /3 处(约 4mm2 的材料)作徒手
横切片,将所切取薄片分别置于盛有水的培养皿(作标记)。用
镊子选取最薄的雷公连和穿心藤根切片分别放在备好的载玻片
(作标记)上,滴加氯化锌碘液制成临时装片镜检;另外将分别放
有两种材料的载玻片上滴加苏丹Ⅲ制成临时装片镜检。用同样
的方法将雷公连和穿心藤的藤茎制成临时装片镜检对比(见
表 1、图 1 ~ 2)。
2. 3 雷公连和穿心藤叶横切面显微特征 取雷公连和穿心藤新
鲜叶片洗净,用刀片分别截取主脉部位带叶片面积约 4mm2 的材
料,做叶徒手横切片,将所切薄片分别置于盛有水的培养皿(作
标记),用镊子选取最薄的切片分别放在备好的载玻片(作标记)
上,先后滴加浓盐酸、间本三酚试液,制成临时装片镜检对比雷公
连和穿心藤叶。
图 1 雷公连和穿心藤根横切面详图
2. 4 雷公连和穿心藤粉末显微特征 用镊子夹取雷公连和穿心
藤粉末少许,分别放在两块载玻片(作标记),滴加水和氯醛试液
作透化处理,稍后加稀甘油封片镜检对比(见表 1、图 3)。
图 2 雷公连和穿心藤藤茎横切面详图
图 3 雷公连和穿心藤植株粉末图
表 1 雷公连和穿心藤根、藤茎、粉末显微特征对比
药材 根横切面 茎横切面 粉末
雷公连 维管束排列不规则
;根中心导管 1 ~ 3 个,口径约 0. 5
~ 1 ㎜;内皮层不明显
维管束最外方排列紧密连成环;中
柱维管束排列紧 有石细胞
;非腺毛为单细胞
穿心藤 维管束排列规则
;根中心导管 5 ~ 6 个,口径约 1 ~ 3
㎜;内皮层明显
维管束最外方排列 疏松 ;中柱维
管束排列疏 无石细胞
;非腺毛为单细胞多细胞
3 讨论
文献报道[3]未涉及雷公连根横切面显微特征,只叙述雷公连
茎横切面皮层有小型外韧型叶迹维管束;中柱维管束外韧型较
大,含大型导管 1 ~ 2 个。将维管束略成 3 ~ 4 环,最外环维管束
鞘纤维发达,几连成环并木化;叶横切面有 7 个呈辐射状排列的
外韧型维管束,上下表皮均见厚角组织;粉末中含有淀粉粒、草酸
钙针晶等特征作为雷公连的鉴别依据[3]。
本文对同科同属植物穿心藤进行鉴别比较,发现穿心藤藤茎
横切面皮层同样有小型外韧型叶迹维管束;叶横切面显微结构差
别不大,故本文就不作对比。雷公连和穿心藤主要在根横切面和
藤茎横切面的中柱部位区别较大,表现在导管的数量、口径、维管
束排列情况;粉末中非腺毛和石细胞亦有差异,本文明确了雷公
连和穿心藤的鉴别要点,为两种药材的准确用药及资源开发利用
提供科学依据。
参考文献:
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