全 文 :第35卷 第4期 宁夏大学学报(自然科学版) 2014年12月
Vol.35No.4 Journal of Ningxia University(Natural Science Edition) Dec.2014
文章编号:0253-2328(2014)04-0366-04
草麻黄提取物对小菜蛾的生物活性研究
杨玉英1,2
(1.宁夏大学 图书馆,宁夏 银川 750021; 2.宁夏大学 化学化工学院,宁夏 银川 750021)
摘 要:研究草麻黄提取产物对小菜蛾生物活性的影响.结果表明,当提取液处理浓度为500g/L时,氯仿、甲醇、
乙醇、丙酮和石油醚的提取物可引起小菜蛾幼虫死亡,其死亡率分别为82%,64%,62%,48%,46%,且都随提取
物浓度的降低而减小;5种溶剂的提取物对小菜蛾的卵都具有一定的毒杀作用,作用最强的为高浓度(500g/L)的
氯仿提取物;卵的孵化率随提取物浓度的升高而显著降低,提取物对小菜蛾的初孵幼虫具有一定的杀死作用,当浓
度为500g/L时,氯仿提取物可引起90%的小菜蛾初孵幼虫的死亡.
关键词:小菜蛾;草麻黄粗提物;生物活性
分类号:(中图)TQ450.2 文献标志码:A
收稿日期:2014-08-11
基金项目:教育部科研重点基金资助项目(2051717);宁夏自然科学基金资助项目(N20501)
作者简介:杨玉英(1976—),女,实验师,主要从事农业昆虫与害虫防治研究.
有关植物次生天然产物的开发和利用,已经有
了一定的发展并积累了大量的相关知识.在古代人
们就用艾蒿茎、叶熏蚊蝇[1].植物次生产物在害虫防
治方面的应用,已经对农业经济发展起到了很大的
促进作用,但与此同时所造成的种种负面作用也不
断出现,因此开发绿色环保的植物性农药就显得迫
在眉睫[2].由于草麻黄特殊的生长环境,其能产生一
些特殊的次生化合物,比如麻黄碱和伪麻黄碱等6
种化合物,且绝大多数已经被应用到中医临床.笔
者实验考查草麻黄不同溶剂提取的产物对十字花科
重要害虫———小菜蛾生物活性进行了研究.
1 触杀实验
1.1 材料与试剂
小菜蛾(Plutella xylostella L.)4龄幼虫采自
银川市西夏区军马场专供试验的小油菜大棚.在大
棚中用软的小毛刷轻轻将4龄幼虫刷入装有干净菜
叶的培养皿中,然后带回实验室放入事先准备好的
养虫笼中继代进行饲养.每3d更换一次笼中蘸有
蜂蜜的棉花团,每2d更换一次菜叶.同时,仔细检
查更换出来的棉花团和菜叶,如果上面有已化的蛹
要轻轻挑下放在专供蛹孵化的培养皿中.
将植物材料在实验室进行清洗、沥水、烘干粉
碎过筛等处理,用配制好的试剂进行索式提取.将提
取液进行蒸发浓缩制成1g/mL的母液备用.该实
验中,C1为草麻黄甲醇提取液;C2为草麻黄乙醇提
取液;C3为草麻黄丙酮提取液;C4为草麻黄氯仿提
取液;C5为草麻黄石油醚提取液,以上均置于适合
冰温度的箱中保存供试.
1.2 实验方法
用毛细管滴药浸虫的方法对小菜蛾幼虫进行
触杀毒力的测定[3—4].选取大小基本一致的小菜蛾
3龄幼虫,放入干净的培养皿中,用毛细管吸取5种
不同溶剂提取的提取液(500,125,31.25g/L),滴加
到待试虫子上,浸渍5~6s,将残留药液处理然干
净;然后将处理过的试虫转入垫有保湿滤纸的培养
皿中继续饲喂并于处理后20h和40h后分别记录
幼虫的死亡情况,每处理10头,重复5次.设对照.
死亡率由下式计算.
死亡率=(死亡数/供试总数)×100%.
1.3 结果与分析
室内触杀活性测定表明,草麻黄的5种溶剂提
取物均对小菜蛾3龄幼虫有一定的触杀活性.24h
第4期 杨玉英:草麻黄提取物对小菜蛾的生物活性研究
时,在500g/L高浓度处理下,其触杀活性由大到小
为C4,C1,C2,C3,C5,幼虫死亡率分别为82%,64%,
62%,48%,46%.在125g/L浓度处理下,触杀活性
由大到小为C4=C1,C2,C3,C5,幼虫死亡率分别为
52%,52%,50%,28%,26%.在31.25g/L浓度处理
下,触杀活性由大到小为C4,C1,C2,C3,幼虫死亡率
分别为22%,16%,14%,10%,8%.随着时间的推移
各个浓度处理下的幼虫死亡率呈上升趋势(表1).
表1 5种草麻黄提取物对小菜蛾3龄幼虫的触杀活性(n=5)
样品
死亡率/%
500g/L
24h 48h
125g/L
24h 48h
31.25g/L
24h 48h
C1 64b 86a 52a 76a 16a 20b
C2 62b 84a 50a 70a 14bc 22ab
C3 48c 58a 28a 42a 8cd 16bc
C4 82a 90a 50a 80a 22a 28a
C5 46c 62a 26a 38a 8cd 14bc
CK 5.492d 9.16c 5.492c 9.16c 5.492d 9.16c
注:表中数据为5次的平均值;英文字母表示在95%水平上的显著差异.
草麻黄干粉不同溶剂的索氏提取物对小菜蛾3
龄幼虫均具有一定的触杀活性,其中每个浓度处理
下都是C4 的触杀活性为最强,而且触杀活性随提取
物浓度的升高而增强(表2).24h时,在31.25g/L
浓度处理下,各个提取物的触杀活性与对照没有显
著性差异;在125g/L浓度处理下,各提取物的触杀
活性由大到小为C4=C1,C2,C3,C5,幼虫死亡率分
别为52%,52%,50%,28%,26%;在500g/L高浓
度处理下,其触杀活性由大到小依然C4,C1,C2,C3,
C5,幼虫死亡率分别为 82%,64%,62%,48%,
46%,与对照幼虫死亡率有明显的差异.触杀活性不
仅随着溶液浓度的升高而增强,同时也随时间的推
移而有所增强.
1.4 结果与讨论
用500g/L C3 处理过的试虫,在刚开始的
3~5min,虫体僵直、几乎不动,经过10~15s时,试虫
开始缓慢爬行,但动作极不协调,而在稍低的浓度处理
下此种反应稍弱.用500g/L C4处理过的试虫,由先表
现出活跃、兴奋状态然后逐渐行动迟缓以至于无力取
食而死亡.说明昆虫的致死作用与通常杀虫药物的触
杀毒理作用完全不同,杀虫机制有待进一步研究.
2 草麻黄提取物对小菜蛾卵的毒杀
2.1 材料与方法
杯栽甘蓝苗放入产卵笼中,接入大量的小菜蛾
成虫,待其产卵24h后将菜杯移出,从菜苗上摘取
带有 大 量 虫 卵 的 叶 片,供 试.供 试 药 剂 的 制
备同1.1.
2.2 实验方法
将带有虫卵的叶片浸入药液浸渍10s,取出后
用吸水纸将多余药液吸去,平放在垫有保湿滤纸的
培养皿中,用湿棉球包住叶柄保湿,用保鲜膜将培养
皿封口并用昆虫针扎孔,置入25℃、相对湿度为
70%~80%的培养箱内,让其自然发育.当经过处理
的卵发育到即将孵化时,重新换入新鲜的小白菜叶
片,供孵化的幼虫取食,每12h记录卵孵化数和未
孵化数,并且每天检查记录基本发育到2龄的幼虫
数,如果有将其转移到另外的容器中.按下列公式计
算卵的孵化率和幼虫死亡率,用50%丙酮溶液作
为对照.
卵孵化率=(已孵化卵数/供试总卵数)×100%,
幼虫死亡率=(已孵化卵数-2龄末幼虫存活
数)/已孵化卵数×100%.
2.3 结果与分析
5种草麻黄提取物都能抑制小菜蛾卵的孵化
率,而且浓度越高对卵的孵化率h的影响越显著.
通过与对照比较,经C5 处理后,小菜蛾卵的孵化
率与对照差异不明显,其他溶剂提取物尤其是C4
杀卵活性最显著(图1).各提取物处理下卵的孵化
率以及它们之间在95%水平上的差异显著性
见表3.
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宁夏大学学报(自然科学版) 第35卷
表2 草麻黄提取物对小菜蛾3龄幼虫的触杀活性(n=5)
样品 ρ/(g·L
-1)
死亡率/%
24h
平均死
亡率/%
5%水平上
的显著性
48h
平均死
亡率/%
5%水平上
的显著性
C1
500 64 a 86 a
125 52 b 76 a
31.25 16 c 20 b
CK1 6 c 10 b
C2
500 62 a 84 a
125 50 b 70 b
31.25 14 c 22 c
CK2 5.18 c 8.38 d
C3
500 48 a 58 a
125 28 b 42 b
31.25 10 c 16 c
CK3 5.64 c 9 c
C4
500 82 a 90 a
125 52 b 80 b
31.25 22 c 28 c
CK4 6.82 d 8.82 d
C5
500 46 a 60.7 a
125 26 b 38 b
31.25 8 c 14 c
CK5 3.82 c 9.6 c
注:数据为5次的平均值.
图1 草麻黄不同溶剂提取物对小菜蛾卵孵化率的影响
500g/L C4 对小菜蛾初孵幼虫的毒性最强,死
亡率高达90%,250g/L的C4 处理的效果次之,但
初孵幼虫的死亡率仅仅为30%左右,C1,C2,C3 尽
管也有减少初孵幼虫存活的作用,但是幼虫死亡率
都很低,不到25%(表4).
2.4 讨论
草麻黄5种不同极性溶剂提取物对小菜蛾卵
具有毒杀作用,并且对初孵幼虫也有一定的杀死作
用.可能是由于浸渍了提取物后,卵壳表面可能黏附
有一定的提取物活性成分,卵的外面形成一层提取
物膜,卵得不到充足的气体交换,卵的发育受阻.草
麻黄这些活性成分应该有针对性地结合在中草药生
产中,这样可以充分提高草麻黄的利用率.
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第4期 杨玉英:草麻黄提取物对小菜蛾的生物活性研究
表3 草麻黄不同溶剂提取物对小菜蛾卵孵化率的影响(n=3)
样品 ρ/(g·L
-1) h/% 5%显著水平
A4
500 10.53 i
250 22.93 h
125 23.23 h
62.5 66.57 g
31.25 89.00 c
A1 500 75.23 f
A1 250 80.30 e
A2 500 74.53 f
A2 250 79.87 e
A3 500 81.20 e
A3 250 84.10 d
A5 500 95.50 b
A5 250 84.10 d
CK 98.50 a
注:表中数据为3次的平均值.
表4 草麻黄提取物对小菜蛾1龄幼虫的影响(n=3)
处理 ρ/(g·L
-1) 1龄幼虫死亡率/%
C1
500 24.4c
250 18.5e
C2
500 21.8d
250 15.5fg
C3
500 17.2ef
250 11.6h
C5
500 8.3i
250 3.7j
C4
500 90.3a
250 30.1b
125 13.7gh
62.5 9.4i
31.25 3.9j
CK 0.88k
注:表中数据为3次的平均值,英文字母表示在95%水平
上的显著差异.
参考文献:
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Study on Biological Activity of Ephedra Sinica Extractive on Plutela Xylostela
Yang Yuying1,2
(1.Ningxia University Library,Yinchuan 750021,China;
2.School of Chemistry and Chemical Engineering,Ningxia University,Yinchuan 750021,China)
Abstract:This article is about the study of ephedra sinica extractive’s effect on the biological activity of
plutela xylostela.The result shows that when the extracting concentration reaches 500g/L,the
extractives of chloroform,methyl alcohol,ethylalcohol,acetone,and petroleum ether can cause the death
of plutela xylostela’s larva,and the death rate of which is 82%,64%,62%,48%,46%respectively,
decreasing as the dropping of extractives’concentration;the extractives of these five solvents have a
certain toxic action on the spawn of plutela xylostela,the maximum of which is high concentration
(500g/L)chloroform extractive;the hatching rate of spawn decreases obviously as the raising of
extractive concentration,the extractive has a certain of kiling effect on the early larvae of plutela
xylostela,when the concentration reaches 500g/L,the extractives of chloroform can cause the death of
90%plutela xylostela’s early larvae.
Key words:plutela xylostela;crude extract of ephedra sinica;biological activity
(责任编辑、校对 高继红)
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