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瑶药半边风质量标准初步研究



全 文 :收稿日期:2014-10-28; 修订日期:2015-05-04
基金项目:广西瑶族习用药材质量评价与标准研究项目(MZY2012011);
广西自然科学基金创新研究团队项目《中药新药基础研究》
(2011GXNSFF018006);
广西“2011 协同创新中心”-壮瑶药协同创新中心(桂教科研
〔2013〕20 号)
作者简介:黎 理(1985-),女(汉族),广西玉林人,广西中医药大学助教,
硕士学位,主要从事生药学研究工作.
* 通讯作者简介:朱 华(1959-),男(汉族),广西柳州人,广西中医药大
学教授,博士学位,主要从事中药品种、品质及资源开发与研究工作.
瑶药半边风质量标准初步研究
黎 理,谢凤凤,曾锦燕,朱 华*
(广西中医药大学,广西 南宁 530001)
摘要:目的 对半边风质量标准进行初步研究。方法 通过原植物鉴别、性状鉴别、显微鉴别、理化鉴别四大经典鉴别法对
半边风进行鉴别;按 2010 年版《中国药典》附录方法对半边风的水分、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物进行测定。结果 四
大鉴别均具显著特征可确定半边风药材鉴别方法,并确定其检查限量。结论 建立的方法可为半边风药材质量标准的制
定提供实验基础。
关键词:半边风; 质量标准
DOI标识:doi:10. 3969 / j. issn. 1008-0805. 2015. 07. 049
中图分类号:R282. 5 文献标识码:A 文章编号:1008-0805(2015)07-1660-02
半边风,俗名枫荷桂、半边枫荷、阴阳叶、二不怕等[1],来源
为梧桐科植物翻白叶树 Pterospermum heterophyllum Hance. 全株,
其药用始见于《岭南采药录》,《中国瑶药学》见收载。瑶医认为
其味甘、淡,性温,具祛风除湿,舒筋活络,消肿止痛功效。主治类
风湿性关节炎,风湿痹痛,骨疼,手足麻痹,半身不遂,跌打损伤
等[2]。近年来虽有生药学及化学成分等的研究报道[3],但其系
统生药学鉴别未见报道,本文通过系统生药学的鉴别研究,为其
制定质量标准制订提供依据。
1 仪器与试药
半自动轮转切片机(德国徕卡仪器公司,型号:Leica
RM2145);光学生物显微镜(德国徕卡仪器公司,型号:DM2500);
图像分析系统(德国徕卡仪器公司,型号:DM500);电子分析天
平(北京赛多利斯仪器系统有限公司,型号:BT224S);电热恒温
水浴锅(北京市医疗设备厂,型号:LSY)。薄层层析硅胶 G(化学
纯,青岛海洋化工有限公司,批号:0110520)。FAA固定液、1%番
红水溶液、1%固绿乙醇溶液、水合氯醛、稀甘油、蒸馏水均由广西
中医药大学中药鉴定学教研室提供,所用试剂为分析纯。
半边风采于广西各地,见表 1。经蔡毅教授鉴定为梧桐科植
物翻白叶树 Pterospermum heterophyllum Hance.全株。
表 1 半边风样品信息一览表
编号 采集时间 产地 /采集地点 /批号
药用
部位
样品
状态
BBF -1 2012-06-28 桂林市恭城县(野生) 全株 药材
BBF -2 2012-07-06 南宁市老虎岭水库(栽培) 全株 药材
BBF -3 2012-07-28 崇左市大新县(野生) 全株 药材
BBF -4 2012-10-20 南宁市老虎岭水库(栽培) 全株 药材
BBF -5 2012-12-28 南宁市老虎岭水库(栽培) 全株 药材
BBF -6 2013-01-06 来宾市金秀县大樟乡花炉村(野生) 全株 药材
BBF -7 2013-03-01 南宁(广西中医药大学植物园)(栽培) 枝叶 药材
BBF -8 2013-03-11 钦州市钦北区板城镇(野生) 全株 药材
BBF -9 2013-05-04 南宁市老虎岭水库(栽培) 全株 药材
BBF -10 2013-05-23 来宾市金秀县桐木镇(野生) 茎 药材
2 方法与结果
2. 1 原植物鉴别 采用原植物鉴别法,观察多产地原植物形态,
汇总其形态特征如下:
乔木。叶二形,生于幼树或萌蘖枝上的叶盾形,掌状 3 ~ 5 裂,
基部截形而略近半圆形,上面几无毛,下面密被黄褐色星状短柔
毛;生于成长的树上的叶矩圆形至卵状矩圆形,下面密被黄褐色短
柔毛。花单生或 2 ~ 4 朵组成腋生的聚伞花序;花青白色;花瓣 5
片,倒披针形;雄蕊 15枚,退化雄蕊 5枚;子房卵圆形,5室,被长柔
毛,花柱无毛。蒴果木质,矩圆状卵形,种子具膜质翅。见图 1。
图 1 半边风原植物图
2. 2 性状鉴别 通过对多产地采集的标本,用性状鉴别法进行研
究,汇总其性状鉴别特征如下:
本品根圆柱形,常弯曲;表面黄棕色或红黄褐色,粗糙,有细
纵皱纹及线状横长皮孔。茎圆柱形;外表面棕褐色,有渔网状菱
形纹理;老茎常有灰白色斑块;切面皮部薄,淡棕色,木部黄白色,
有致密的放射状纹理及细孔;髓部小,棕黄色。叶异型(掌状 3 ~
5深裂或叶长圆形),多皱缩,纸质,背面灰白色至红棕色,密被黄
褐色茸毛。气微,味淡。见图 2。
图 2 半边风药材图
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时珍国医国药 2015 年第 26 卷第 7 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2015 VOL. 26 NO. 7
2. 3 显微鉴别 通过对多地采集的标本,用显微鉴别法进行研
究,汇总其显微鉴别特征如下:
2. 3. 1 茎的横切面特征 表皮细胞微木化(老茎外层为数列木栓
细胞),外被角质层,多见星状毛。皮层狭窄,最外侧 1 ~ 2 列细胞
内含红棕色物,可见数列厚角组织;皮层中有纤维束和分泌细胞
散在。维管束外韧型,具明显的中柱鞘纤维;韧皮部中纤维较多,
射线较宽;木质部与韧皮部近等宽,连成环状。髓部约占 1 /2,边
缘常见数个大型分泌腔,直径可达 160 μm 以上。薄壁组织中可
见分泌细胞散在,草酸钙簇晶、方晶易见。见图 3 ~ 4。
1. 星状毛 2. 表皮 3. 厚角组织 4. 皮层 5. 韧皮部 6. 草酸钙簇晶
7. 木质部 8. 髓部 9. 分泌腔 10. 分泌细胞 11. 纤维束
图 3 半边风茎横切面显微图
1. 表皮 2. 星状毛 3. 草酸钙簇晶 4. 皮层 5. 中柱鞘纤维
6. 韧皮部 7. 韧皮射线 8. 韧皮纤维 9. 木质部
图 4 半边风茎横切面显微放大图
2. 3. 2 粉末特征 粉末淡黄色。星状毛多见,常为 6 ~ 8 条分支,
长 60 ~ 120 μm。油细胞类圆形,内含油滴;直径 12 ~ 35 μm。纤
维多成束存在,亦见晶鞘纤维;直径 6 ~ 25 μm。棕色块不规则
形,直径 10 ~ 22 μm。易见草酸钙簇晶、方晶,直径 6 ~ 18 μm。
导管主要为具缘纹孔导管,亦见螺纹导管和环纹导管;直径 10 ~
90 μm。淀粉粒细小。见图 5。
2. 4 薄层色谱鉴别 对不同的提取方法、展开系统及显色剂进行
反复考察,稳定的薄层鉴别方法如下:
取本品粉末 2 g,加甲醇 30 ml,加热回流 1h,滤过,滤液蒸干,
加甲醇 2 ml使溶解,作为供试品溶液。另取半边风对照药材 2
g,同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法[4]试验,吸取上述两种
溶液各 10 μl,分别点于同一硅胶 G薄层板上,以环己烷 -氯仿 -
乙酸乙酯 -甲酸(7. 5 ∶ 1 ∶ 1 ∶ 0. 25)为展开剂,展开,取出,晾
干,喷以 10%磷钼酸试液,在 105 ℃加热至斑点显色清晰。供试
品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
见图 6。
1.非腺毛 2. 油细胞 3. 纤维 4. 草酸钙结晶
5. 棕色块 6. 导管 7. 淀粉粒 8. 表皮细胞
图 5 半边风粉末显微图
1. BBF - 1 (对照药材) 2. BBF - 2 3. BBF - 3
4. BBF - 4 5. BBF - 5 6. BBF - 6
7. BBF - 7 8. BBF - 8 9. BBF - 9
10. BBF - 10 11. BBF - 1 (对照药材)
A.蓝黑色斑点 B.蓝黑色斑点 C.蓝黑色斑
色谱条件:硅胶 G薄层自制板,
生产厂家:青岛海洋化工厂,批号:20110726
规格:10 cm × 20 cm
圆点状点样,点样量:10 μl;温度:30 ℃;相对湿度:56 RH%
展开剂:环己烷 -氯仿 -乙酸乙酯 -甲酸(7. 5∶ 1∶ 1∶ 0. 25)
显色剂:10%磷钼酸
图 6 半边风样品 TLC图
2. 5 检查
2. 5. 1 水分 照水分测定法[4]测定,10 批半边风水分测定结果
为 6. 13% ~ 12. 85%(见表 2)。初步拟定半边风水分含量不得超
过 15. 0%。
2. 5. 2 总灰分 照灰分测定法[4]测定,10 批半边风总灰分测定
结果为 1. 40% ~ 8. 94%(见表 2)。初步拟定半边风总灰分含量
不得超过 5. 0%。
2. 5. 3 酸不溶性灰分 照灰分测定法[4]测定,10 批半边风酸不
溶性灰分测定结果为 0. 07% ~ 0. 76%(见表 2)。初步拟定半边
风酸不溶性灰分含量不得超过 1. 0%。
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LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2015 VOL. 26 NO. 7 时珍国医国药 2015 年第 26 卷第 7 期
2. 5. 4 浸出物 照醇溶性浸出物测定法项下的热浸法[4]测定,用
70%乙醇作溶剂,10批半边风醇溶性浸出物测定结果为 3. 55% ~
17. 12%(见表 2)。初步拟定半边风浸出物含量不得少于 8. 0%。
表 2 半边风水分、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物测定结果 %
编号 水分 总灰分 酸不溶性灰分 浸出物
BBF -1 9. 59 1. 53 0. 19 10. 09
BBF -2 9. 41 4. 12 0. 29 10. 68
BBF -3 8. 97 3. 63 0. 41 14. 79
BBF -4 10. 04 3. 76 0. 28 10. 37
BBF -5 6. 13 3. 86 0. 32 12. 05
BBF -6 6. 23 2. 75 0. 40 17. 12
BBF -7 8. 66 8. 94 0. 61 14. 41
BBF -8 10. 45 2. 82 0. 06 16. 60
BBF -9 10. 73 2. 92 0. 76 8. 00
BBF -10 12. 85 1. 40 0. 07 3. 55
n =3
3 小结
半边风的鉴别特征为①乔木。叶二形,有叶盾形和叶矩圆形
至卵状矩圆形,下面密被黄褐色短柔毛。聚伞花序。蒴果木质,
种子具膜质翅。②药材根圆柱形,粗糙。茎圆柱形,表面有渔网
状菱形纹理;切面木部黄白色,有致密的放射状纹理及细孔;叶异
型,纸质。气微,味淡。③茎横切面,表皮细胞微木化,多见星状
毛。皮层狭窄,可见红棕色物。维管束外韧型,中柱鞘纤维明显,
射线较宽。髓部边缘常见数个大型分泌腔。皮层、韧皮部有纤维
束散在;薄壁组织中可见分泌细胞散在,草酸钙簇晶、方晶易见。
粉末中有星状毛、油细胞、晶鞘纤维、棕色块、草酸钙簇晶、方晶
等。④粉末用甲醇提取,点样,以环己烷 -氯仿 -乙酸乙酯 -甲
酸(7. 5:1:1:0. 25)展开,喷以 10%磷钼酸试液,在 105 ℃加热至
斑点显色清晰。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置
上,显相同颜色的斑点。⑤水分含量初步拟定不得超过 15. 0%;
总灰分含量不得超过 5. 0%,酸不溶性灰分含量不得超过 1. 0%;
用 70%乙醇作溶剂,热浸法,浸出物含量不得少于 8. 0%。
通过对多产地的样品进行观察,原植物鉴别、性状鉴别、显微
鉴别、薄层色谱鉴别均特征明显、稳定,可作为半边风的鉴别依据;
水分、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物测定初步确定各限量及含量
测定,为半边风药材质量标准的进一步提高、完善提供实验基础。
参考文献:
[1] 国家中医药管理局《中华本草》编写委员会. 中华本草(第五册)
[M].上海:上海科技出社,1999:389.
[2] 广西壮族自治区食品药品监督管理局编.瑶族习用药材质量评价
与标准研究[M].南京:广西科学技术出版社,2014.
[3] 林 华.半枫荷药材质量标准的规范化研究[D]. 广州中医药大
学,2008.
[4] 国家药典委员会.中国药典,一部[S].北京:中国医药科技出版社,
2010:附录 VIB,IXH,IXK,XA.
收稿日期:2014-10-20; 修订日期:2015-04-08
基金项目:云南省教育厅科学研究基金课题(No. 2012Y064)
作者简介:吴 梅(1975-),女(汉族),云南宾州人,云南中医学院中药学
院讲师,硕士学位,主要从事中药鉴定研究工作.
* 通讯作者简介:薛咏梅(1978-),女(彝族),云南红河人,云南中医学院
中药学院高级实验师,硕士学位,主要从事中药学与分析化学研究工作.
傣药铁刀木叶的生药学研究
吴 梅,马 莎,李文春,薛咏梅*
(云南中医学院 中药学院,云南 昆明 650500)
摘要:目的 建立傣药铁刀木叶的鉴定方法。方法 采用生药学(包括基源鉴别、性状鉴别及显微鉴别)的方法。结果 描
述了药材性状特征、横切面及粉末显微特征。结论 实验结果可为铁刀木叶的鉴别、质量标准的制定提供理论依据。
关键词:傣药; 铁刀木叶; 生药学鉴定
DOI标识:doi:10. 3969 / j. issn. 1008-0805. 2015. 07. 050
中图分类号:R282. 6 文献标识码:B 文章编号:1008-0805(2015)07-1662-02
铁刀木叶为豆科决明属植物铁刀木 Cassia siamea Lam.的干
燥小叶,傣语“摆习列”,为傣医药传统使用的民族药物,《中华本
草》(傣药卷)载:味苦、性寒,入水、风塔,具有祛风除湿、消肿止
痛、杀虫止痒等功效[1]。徐燃等[2]对铁刀木进行了生药学研究,
但其中有关叶的研究内容尚不完备。为了建立铁刀木(叶)准
确、全面的鉴别方法,为其质量标准的制定提供依据,故进一步完
善了其生药学研究。
1 材料与仪器
药材采自云南省红河县,经云南中医学院药用植物教研室杨礼
攀副教授鉴定为豆科植物铁刀木 Cassia siamea Lam.的干燥小叶。
Nikon Eclipse 80i型生物数码摄影显微镜、莱卡 RM2235 轮
转切片机、DHP - 360 型电热恒温干燥箱。
2 方法
2. 1 性状鉴别 采用感官观察干燥叶片的性状特征。显微组织
结构研究:制备永久石蜡切片,在显微镜下观察其组织结构特征,
辅以徒手切片。石蜡切片的制备采用浸泡在 F. A. A. 固定液中
的材料,切取叶片中部过主脉长约 0. 5cm 的正方形叶片,按常规
方法脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、展片、脱蜡,采用番红、固绿染
色,最后封片,制成永久装片。
2. 2 显微粉末特征研究 将干燥的叶片粉碎至 60 目,常规制片,
置显微镜下观察其细胞、后含物等特征。显微常数测定:分别测
定 20 组,再计算出平均值。
2. 2. 1 气孔指数测定 用镊子撕取叶片的上下表皮,制透化片。
镜下数气孔及表皮细胞的数目。
2. 2. 2 脉岛数测定 切取 2mm ×2mm的叶片,浸泡在次氯酸钠溶
液中至变白,用蒸馏水冲洗干净,整体封片,镜下数脉岛的数目。
2. 2. 3 栅表比测定 在粉末片中对 4 个相邻表皮细胞下的栅栏
细胞进行计数,再计算出一个表皮细胞下的平均栅栏细胞数。
3 结果
3. 1 性状鉴别 呈长椭圆形或椭圆形,长 3 ~ 8cm,宽 1. 5 ~ 2. 8
cm。先端圆钝,常微凹,有短尖,基部近圆形,全缘。上表面绿褐
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