全 文 ：第 7 卷 第 4 期
1 9 9 4年 1 2月
黑 龙 江 八 一 农 垦 大 学 学 报
J o u r n a l o f H A F L R U
7 ( 4 )
: 2 5 、 2 6
D e e
。
19 9 4
石刁柏 、 珍珠梅 、 柳叶绣线菊
腋芽茎段的离体培养
萤雅茹 王瑞库 王丽艳
摘要 研 究了石 刁柏 、 珍珠梅柳叶 绮线菊的腋芽茎组织培养为成林的方法 , 得 出在主要含有
B A 的M S 的培养基中 , 离体茎段的每个腋芽都形 成 1 ” 3 个无根苗 , 且可以重 复繁位 , 苗植
入 附加生长素的 1 / ZM S培养基中可 以 生根 , 继 而形成完整的再生植株的结果 。
关健词 石 刁柏 珍珠梅 柳叶 绮线菊 掖芽茎段培养 再生植株
中 图分类号 Q 9 4 4 . 6
近年来以组织培养为手段的植物生物技术的发展极为迅速 。它在作物育种上 、 次生物质的
生产上 , 特别是在珍贵品种的保持上及观赏植物的萦殖等方面都取得很大的进展 。植物组织按
养不但在探讨遗传理论上是个重要手段 , 而且在实际的应用上也表现出且大的经济效益。 我
国在水稻 、 花卉等植物上的研究成果较多 。 但在其他植物上则处于起步阶段 , 有些领域尚属
空白。 石刁柏有食用和药用价值 , 是国内外市场上的紧俏商品。 珍珠梅 、 柳叶绣线菊两种植
物都有重要的观赏价值 , 珍珠梅还有强烈的杀菌作用 , 是净化环境的优良树种 。 石刁柏雌雄
异株 , 种子后代易发生分离 ,近年来人们致力于石 刁柏的组织培养 , 虽然有成功的实例1[ ,幻 ,
但 尚需更多的基础研究 。 珍珠梅 、 柳叶绣线菊的组织培养国内外尚未见报道 。 为此我们对上
述 三种植物进行组织培养研究具有更重要 的理论和实践意义 。
1 材料与方法
采用石 刁柏 、 珍珠梅 、 柳叶绣线菊等成株幼嫩带腋芽的茎段和石 刁柏种子实生苗的带腋
芽的茎段 。 三种植物都利用基本培养基 M S , 生根时采用基本培养基 1 / 2 M S , 再 加 上蔗
糖 15 9 / L 、 琼脂 9 9 / L 及各种激素 , 所配组合见表 1一表 4 。 幼嫩的茎段取回 后 , 自来
水洗去表面泥土 , 浸入 7 0 m L / L 的酒精中消毒 6 m i n , 再用升汞消毒 n m i n , 然后用无菌
水清洗 3 ~ 4 次 , 切下带叶芽的茎段 , 接种到分化培养基上 , 每瓶接种 5 块 。 石刁柏的种子
扁于实生苗 , 不易萌发 , 故在接种前先用 1 9 / L 的K M n O .水溶液处理 6 赶 ,再 用7加 。 L /
L 的酒精浸种 5 m i n , 再用 1 9 / L的升汞水溶液浸种 12 m i n , 用无蔺水清统 3 ~ 4 次 , 最
后植入 1 / ZM S + 蔗糖 15 9 / L 的培养基中生长 , 成苗后取腋芽的茎段利用分化 培 养 基培
养。 培养温度是 ( 2 6士 2 ) ℃ , 每日光照 z 4 h 。
1 9 9 4年一。 l e 2 5 收稿
黑 龙 江 八 一 农 垦 大 学 学 报 1 9 9 4年
2 试验结果
2
.
1 石刁柏的组织培养
带有腋芽的茎段培养 6 ~ 10 d 之后 , 从形态 学的下端出现愈伤组织 , 腋芽上开始抽茎 ,
最多者一个腋芽可长 2 ~ 3 个幼茎 , 30 d后当苗 长到 5 ~ 6 c m高时 ,就充满了 10 o m L 的培养
瓶 。 基本培养基中添加各种激素的组合生长情况详见表 1 。 从表 l 中可见 B A o . 1和 B A O . 1 +
N A A O
.
05 这两个组合容易使腋芽分化 , 苗的诱 导率分别达到 72 肠和 60 肠 , 每个茎段 腋 芽 的
苗数分别是 1 . 2和 1 . 6个 , 苗的长势健壮 。 而B A I . o的苗诱导率是 5 肠 , B A I . o + N A A O. 05
的苗诱导率虽然达 62 肠 , 但萌生的腋芽呈蒜头形 , 且幼茎短粗 , 苗的长势 很 弱 , 明显不 正
常 。 B A 2 . 0 + I A A o . 5和 B A 4 . 。+ IA A O . 5 两处理不但苗的诱导率低且长势极弱 。 上 述 结果
表明高浓度的B A对芽的分化不利 , 起抑制苗生长的作用 。 将含有几个节的伸长的幼 苗 切成
1 c m小段 , 并将带有腋芽的茎段转接到 B A O . 1或 B A o . 1 + N A A o . 05 两种培养基中继续扩 大
繁殖 , 如此重复 , 在短期内获得大量的无根菌 。 再将无根菌移到表 2 内所示的各种生根的培
养基中 , 发现 IB A o . 5 + L H l o o对石刁柏生根效果最好 , 15 d 后就可以生根 , 20 d后 根长 达
1 ~ 2
c m , 且生根率达 20 肠 , 这样就 由原来带腋芽的茎段培养为成株 , 继 而可 以转 入 工 厂
化生产 。
2
.
2 珍珠梅的组织培养
珍珠梅的掖芽茎段接种后 15 d , 腋芽开始生 长 , 30 d左右分化出带有几个节的无根 苗 ,
平均每一孩芽可成为 1株苗 , 在强光下芽的分化率较高 , 苗的长势强 。 从表 3 中可见 : B A
0
.
1千 N A A O . 05 处理的苗诱导率最高 , 达到 40 肠 , 有的苗可长 14 片叶子 。 B A 2 . 0 + I A A O . 5
表 1 石 刁柏腋芽茎段培养的激素试验
激素组合 m g / L 苗数 / 茎段 无根苗 % 长势
B A g
.
1 1
.
2 夕2
B A 1 1
.
0 5 5
B A Q
.
1笼一 N A A O. 0 5 1 . 6 6 0
B A I
.
0+ N A A ,
.
0 5 1
.
0 6 2
B A2
.
0
一卜 I A A O . 5 1 . 1 4 j
B A 4
.
0十 I A A 3 . 5 1 . 1 3 8
汪 十 , +极壮苗 料壮苗 + 弱苗
表 2
激素组合 m g / L
三种植物组培幼苗的生根率 ( 肠 )
石刁柏 珍珠梅 柳叶绣线菊
IB A O
.
5+ L H 1 0
IB A O
.
5 + 刀 A 0 . 2 十 L H 10 0
N A A ,
.
5斗 K T O. 1
20181
处理的苗诱导率达巧肠 , 有的苗可长 8 片叶子 。苗的长势强 ,都为壮苗 。 而B A 2 . 0 + I A A O . 5和
B A 4
. 。 + I A A o . 5两个组合虽然苗的诱导率不低 , 但苗的长势不佳 , 表现为弱苗 ,这一点与石 刁
第 7卷第 4 期 董雅茹等 : 石刁柏 、 珍珠梅 、 柳叶绣线菊腋芽茎段的离体培养 25
柏的表现不同 。 再把幼苗腋芽的茎段植入 B A O. 1 + N A A O. 05 的新鲜培养基中 , 又能产生无根
苗 , 但这种再生苗生长较为缓慢 。 选择长势好的苗移到表 2 中各种生根培养基中 , 30 d后可
生根 , 其中BI A o . 5 + B A O . 2+ L H 10 处理的苗生根率较高达 5 肠 , 其次是 I B A o . 5 + L H 10
苗的生根率达 4 肠 , 最差 的是N A A O . 5 + K OJ . 1 , 苗的生根率为 1 肠 。
表 3 珍珠梅腋芽茎段培养的激素试验
激素组合 m g / L 苗数 / 茎段 无根苗% 长势
B A j
.
1 1 1 5
B A O
.
1+ N A A O
.
0 5 1 40
B 2A
.
0+ I A A O
.
5 1 3 3
B A 4
.
0+ I A A g
.
5 1 3 4
2
.
3 柳叶绣线菊的组织培养
将柳叶绣线菊的腋芽茎段接种在表 4 的各种培养基上约 2 d0 后 , 逐渐开始萌动 , 并 随之
形成小苗 。 各种培养基上成苗诱导率在 35 d之后出现明显的差别 , 其中B A O. 1和 K J O . 1两 种
培养基上出苗较早 , 有 3 片叶 , 长势也好 , B A o . 1处理苗的诱导率达到 23 肠 , 为壮苗 , K J
0
.
1 处理苗的诱导率达 38 肠 , 也为壮苗 。 其它处理有的苗的诱导率低 , 有的表现为弱 苗 。 在
B A O
.
1和 K J o . 1两种培养基上可以再次形成无根苗 。 当把无根苗移到生根培养基的各处理上
时 , 经 巧一 30 d可以生根 , 其中 IB A o . 5 + B A O. 2 + L H 10 处理的苗的生根率达 13 帕 , 其 它
处理表现较低 。
表 4 柳叶绣线菊腋芽茎段的激素试验
激素组合 m g / L 苗数 / 茎段 无根苗% 长势
B A O
.
1
B A ,
.
1+ N A A O
.
0 5
B A 2
.
0 + I A A O
.
S
B A 4
.
0+ I A A ,
.
3
1 2 3 + +
K T O1、 二 U一 占 ” 1 J O 十 +
. . . . . . . . . . . . . . . .
井基太培养基 1 / Z M S
3 结果与讨论
3
.
1 三种植物都可以利用带有腋芽的茎段在基本培养基 M S中加入不同激素 的培养基上
形成无根苗 , 但无根苗的诱导率因加入的激素的种类和剂量不同而异 。 其中石 刁柏以B A o . 1
和 B A O . 1+ N A A O. 05 两种组合效果最好 , 珍珠梅以 B A O. 1 + N A A O . 05 组合 为 最好 , 柳 叶
绣线菊以 K J o . 1为最好 。可见必须因植物不同而筛选不同的激素种类和用量 , 方可 诱导出更
多的无根苗 , 这是组织培养的关键一环 。
3
.
2 腋芽茎段所产生的苗的生根率因激素的种类和剂量不同也表现很大的差异 。 其中石
刁柏苗的生长率以 I B A o . 5 + L H 1 0 为好 , 珍珠梅苗的生根率以 I B A O . 5 + L H 10 和 I B A O . 5
+ B A o
.
2 + L H 10 。为好 , 柳叶绣线菊苗的生根率以 I B A o . 5 + B A o . 2+ L H 10 0为好 。
摄 龙 江 八 一 农 垦 大 学 学 报 1 9 9 4年
3
.
3 三种植物茎段上腋芽所形成的苗都可 以在适宜的培养基上重复再生 , 这为扩大繁殖
或生产的工厂化提供有利条件 。
3
、
4 三种植物组织培养的共同特点是在低浓度的 B A 上生长良好 , 而在高浓度的 B A 上生
长却受到抑制 。 在根的诱导中以生长素与 1洲H配 合的 效果显著 。 L H对生根有极好的促进作
用 。 作为组织培养的材料常用叶片 , 优点是量大 , 取材方便 , 但不如腋芽易培养 。 芽是未来新
个体的原基 , 因而成苗快 , _巨在适应的条件下 能 形 成 丛生芽 , 繁殖系数高 , 是植物组织培
养不可多得的好材料 。
参 考 文 献
马风橱 , 部春慧 , 张巧 绒 . 石 刁柏 (芦笋 ) 腋芽的离体培养 . 植物生理学通讯 , 1 9 9 1 ,
2了 ( 3 ) : 2 0 7 ” 20 8
表华玲 . 霄倍体石 刁柏的组织培养和快速繁技 , 植物生理学通讯 , 19 93 , 29 ( 2 ) : 1 02
奚元 令 。 植物幼胞的全能性与细胞分化 , 遗传学报 , 1 9 7 8 , 5 ( 2) : 16 5、 17 0
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5 t e w a r d , 已 t a l , 1 9 , ]: B o t G a z 1 3 2 : 6 5~ 7 0
2a45
I N V I T R O C U L T U R E O F A S P A R A G U S O F F IC IN A L I S L
.
SO R B A R I A SO B IF O L IA A
.
B r A N D S P IR A E A
S A L IC IF O L IA L A X IL L A R Y B U D S T E M S E C T I O N
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A B S T R A C T
:
T h e m : t h o d o f p l a n t s t h a t a s p a r a g u s o f f i e i n a l i s L
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S o r b a r i a
s o b i f o l i a A
.
B r a n d s p i r a e a s a l i e i f o l i a L
. a x i l l a r y b u d
s t e m s e e t o n w a s
e u l t u r e d
。
E v e r了 a x i l l a r y b u d s t e m s e e t i o n i n v i t r o h a d t a k a n l一 3
r o o t l e s s P l a n t l e t s i n t h e e u l t u r e m e d i u : n t il a t m a i n l J e o n t a i n e d M S o f
B A a n d i t s m i g h t r e P e a t e d P r o P a g a t i o n
.
W h
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i n e u l t u r e m e d i u m a d d e d g r o , t h h o r m o n o f l / ZM S
, t h e p l a n t l e t s h a d
t a k e n r o o t s
.
T h e r e b y i t h a d b e e o
, n e e o m p l e t e r e g e n e r a t o d p l a n t s
.
K e y w o r d s
:
A s p a r a g u s o f f i e i n a l i s I
J .
S o r b a r i a s o b i f o l i a A
.
B r ; s p i r a e a
s a l i c i f o l i a L ; A x i l l a r y b u d s t e m s e e t i o n e u l t u r e
,
R e g e n e r a t e d p l a n t