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鹿茸草抗炎、止咳作用的初步研究



全 文 :收稿日期:2012-04-05; 修订日期:2012-09-20
基金项目:广东省教育部产学研结合项目
( No. 2010B09040212,2011 - 2013) ;
广州市白云区中药化妆品行业创新实验室,
广州市白云区科技计划重点项目( 2011 - KQ -
23; 2012 - 14) ;
广东省高校中药化妆品工程中心建设项目;
广东省教育厅科研项目( No. 2010 - 2012,GCZX
- A1007)
作者简介:乡世健( 1990-) ,男( 汉族) ,广东四会人,现为南
方医科大学中医药学院在读本科生.
* 通讯作者简介:朱红霞( 1972-) ,女( 汉族) ,山东邹平人,
现任南方医科大学中医药学院主治医师,学士学位,主要
从事临床及科研工作.
鹿茸草抗炎、止咳作用的初步研究
乡世健1,潘林燕1,王婉菱1,关杰湛1,龚韶玫1,李雪玲1,黄徳浩2,刘 强1,朱红霞1*
(1.南方医科大学中医药学院,广东 广州 510515; 2.惠州市九惠制药股份有限公司,广东 惠州 516007)
摘要:目的 初步考察鹿茸草的抗炎、止咳作用。方法 采用二甲苯致小鼠耳肿胀、角叉菜胶致小鼠足肿胀实验观察鹿茸
草的抗炎作用,采用 25%氨水引咳法观察其对小鼠的止咳作用。结果 鹿茸草水提液对角叉菜胶致小鼠足肿胀有抑制作
用,其中中剂量组作用最强( P < 0. 01) ;鹿茸草水提液对延长小鼠咳嗽潜伏期有作用,高剂量组对氨水致小鼠咳嗽次数有
显著抑制作用( P < 0. 01) 。结论 鹿茸草具有明显的抗炎和止咳等药理作用。
关键词:鹿茸草; 抗炎; 止咳; 药理作用
DOI标识:doi: 10. 3969 / j. issn. 1008-0805. 2012. 11. 027
中图分类号:R285. 5 文献标识码:B 文章编号:1008-0805( 2012) 11-2727-01
鹿茸草为玄参科(Scrophulariaceae)植物鹿茸草
Monochasma sheareri Maxim. ex Franch.的干燥全草,
别名千年艾、千重塔、瓶儿蜈蚣草、龙须草、白路箕
等,主要分布于江西、浙江、江苏、湖北等地,具有清
热解毒、祛风止痛、凉血止血等功效。用于治感冒心
中烦热、咳嗽、吐血、赤痢、便血、月经不调、风湿骨
痛、牙痛、乳痈等[1]。但是对鹿茸草的药效学进行
系统的实验研究未见报道。本文旨在研究鹿茸草的
抗炎、止咳作用,探讨其作用机理,为其临床应用及
用药安全提供理论依据。
1 材料与仪器
1. 1 动物 SPF级昆明小鼠 100 只(雄性) ,体质量
25 ~ 40 g,由南方医科大学提供,许可证号:SCXK
(粤)2006 - 0015。
1. 2 药品与试剂 鹿茸草经南方医科大学中医药学
院中药制剂教研室鉴定为 Monochasma sheareri Max-
im. ex Franch.的干燥全草。取鹿茸草适量,加 8 倍
量的水浸泡 1h,加热煮沸后调至微沸,煎提 1h,收集
水提液,再加 6 倍量的水煎提 40 min,合并两次水提
液并浓缩至 0. 8 g 生药 /ml 的浓度,冰箱保存,供实
验用。盐酸氨溴索口服溶液,江苏汉晨药业有限公
司生产,批号:H20066523,配置成 0. 0468 ml /ml,备
用。阿司匹林,拜耳医药保健有限公司,批号:
H43021814,配 制 成 0. 65 mg /ml,备 用。氨 水
(25%) ,广东光华化学厂有限公司,批号:20101130。
角叉菜胶,东京化成工业株式会社生产。
1. 3 仪器 电子天平,上海佑科仪器仪表有限公司
生产;多功能诱咳引喘仪,济南益延科技发展有限公
司生产;PV - 200 足趾容积测量仪,成都泰盟科技有限公司生产;电炉;微量注
射器;螺旋测微仪;小鼠灌胃针;烧杯;试剂瓶;棉签等。
2 方法
2. 1 抗炎实验[2] 对角叉菜胶致小鼠足肿胀的影响:取昆明小鼠 50 只,体质
量 25 ~ 40 g,随机分为 5 组,即空白对照组,鹿茸草低剂量组、中剂量组、高剂
量组和阳性对照组,每组 10 只。分别灌胃给予生理盐水、鹿茸草水煎液(低
0. 2 g /ml,中 0. 4 g /ml,高 0. 8 g /ml)、阿司匹林每 0. 2 ml /10 g。每天 1 次,连
续 3 d,各组小鼠末次给药后测量小鼠的右脚趾体积,30 min 后在每只小鼠右
后足趾皮内注射 1%角叉菜胶 0. 1 ml /只。30 min 后分别测定鼠右后足趾的
容积,计算足肿胀度。以后 1 次测量的脚趾体积减去前 1 次测量的脚趾体积
的差值作为炎症肿胀度。
2. 2 止咳实验[3] 对氨水致小鼠咳嗽的影响:取昆明小鼠 50 只,体质量 25 ~
40 g,随机分为 5 组,即空白对照组、鹿茸草低剂量组、中剂量组、高剂量组和
阳性对照组,每组 10 只。分别灌胃给予生理盐水、鹿茸草水煎液(低 0. 2 g /
ml,中 0. 4 g /ml,高 0. 8 g /ml)、盐酸氨溴索口服溶液各每 0. 2 ml /10 g。给药后
1 h,将小鼠置于诱咳引喘仪内,记录放入小鼠到小鼠发生咳嗽反应的时间即
咳嗽潜伏期,并观察 3 min内小鼠的咳嗽反应(腹肌收缩,张大嘴,有时可有咳
嗽)并记录咳嗽次数,计算止咳率。
止咳率(%)=给药组咳嗽潜伏期 /对照组咳嗽潜伏期 × 100%[4]
2. 3 耐受性研究 取昆明小鼠 30 只(♀10 只,♂20 只) ,体质量 25 ~ 40 g,随
机分为` 3 组,每组 10 只,给药前禁食不禁水 12 h,分别灌胃给予鹿茸草水提液
(1. 0 g /ml)0. 2 ml /10 g,记录小鼠死亡情况。
2. 4 统计方法 抗炎、止咳实验所有结果用 珋x ± s 表示。采用 SPSS 13. 0 统计
软件,单因素方差分析比较组间差异,以 0. 05 或 0. 01 作为显著性差异标志。
3 结果
3. 1 对角叉菜胶致小鼠足肿胀的影响 结果如表 1。结果表明,鹿茸草水提
液低剂量组在 0. 5,1,2,4 h测得足肿胀度与空白对照组相比较,在 2 h时差异
有统计学意义(P < 0. 05) ,其他时间点均无统计学意义。中剂量组从 1 h 开
始,对足肿胀有抑制作用(P < 0. 05) ,到 4 h时,作用比较明显(P < 0. 01)。而
高剂量组只有在 1 h时与空白对照组差异有统计学意义(P < 0. 05) ,其他时间
点均无统计学意义。
表 1 鹿茸草水提液致小鼠足趾肿胀的影响(珋x ± s)
组别
剂量
C /g·kg - 1
肿胀度 S /mm2
0. 5 h 1 h 2 h 4 h
生理盐水 20 0. 070 ± 0. 013 0. 074 ± 0. 009 0. 077 ± 0. 016 0. 25 ± 0. 02
阿司匹林 0. 3 0. 082 ± 0. 10 0. 034 ± 0. 012* 0. 120 ± 0. 011 0. 20 ± 0. 25
鹿茸草(低) 4 0. 052 ± 0. 010 0. 048 ± 0. 011 0. 030 ± 0. 010* 0. 22 ± 0. 02
鹿茸草(中) 8 0. 047 ± 0. 010 0. 037 ± 0. 009* 0. 032 ± 0. 017* 0. 16 ± 0. 021**
鹿茸草(高) 16 0. 049 ± 0. 009 0. 033 ± 0. 013* 0. 046 ± 0. 016 0. 21 ± 0. 02
与空白对照组比较,* P < 0. 05,**P < 0. 01
3. 2 对氨水致小鼠咳嗽的影响 结果如表 2。与生理盐水组比较,阳性对照
组与鹿茸草高剂量组均能减少氨水致小鼠咳嗽的次数,差异有统计学意义(P
< 0. 01)。低、中、高剂量组对延长咳嗽潜伏期均有作用,但低、高剂量组与空
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LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2012 VOL . 23 NO. 11 时珍国医国药 2012 年第 23 卷第 11 期
白对照组作用较明显,差异有统计学意义(P < 0. 05)。
表 2 鹿茸草水提液对氨水致小鼠咳嗽的影响(珋x ± s)
组别
剂量
/g·kg - 1
咳嗽潜伏期
/ s
咳嗽次数
止咳率
(%)
生理盐水 20 49. 700 ± 7. 578 6. 500 ± 1. 057 -
阳性对照 0. 022 46. 125 ± 12. 955 2. 875 ± 1. 420** 92. 81
鹿茸草(低) 4 66. 700 ± 5. 976* 5. 400 ± 0. 968 134. 21
鹿茸草(中) 8 55. 100 ± 6. 153 4. 800 ± 0. 249 110. 87
鹿茸草(高) 16 66. 500 ± 8. 998* 2. 900 ± 0. 566** 133. 8
与空白对照组相比,* P < 0. 05,**P < 0. 01
3. 3 耐受性研究 观察 30 只小鼠灌胃给予鹿茸草水提液(1. 0
g /ml)后的行为,1 只小鼠死亡,其余小鼠无明显反应,表明小鼠
对鹿茸草水提液无耐受性作用。
4 讨论
鹿茸草具有清热解毒、祛风止痛、凉血止血等功效,民间常用
于治感冒心中烦热、咳嗽、吐血、赤痢、便血、月经不调、风湿骨痛、
牙痛、乳痈等。文献上有记载鹿茸草的三种剂型即糖浆剂、水浸
膏片、醇浸膏片用于治疗慢性气管炎;而且《湖南药物志》中记载
鹿茸草四钱,水煎兑冰糖服治疗咳嗽。本研究以此为基础,从鹿
茸草对小鼠抗炎止咳作用方面进行药理学研究,为临床应用提
供实验依据。
实验结果表明,鹿茸草对角叉菜胶所致的小鼠足肿胀有明显
的抑制作用,对 25%氨水所致的咳嗽亦有显著作用,而且无耐受
性作用,为临床应用提供了依据。但鹿茸草是何种成分通过何种
途径发挥抗炎止咳作用,尚待进一步研究。
参考文献:
[1] 苏新医学院.中药大辞典,下册,第 1 版[M].上海:上海科学技术
出版社,1977:2242.
[2] 周效思,周 凯.威灵仙水提取液的镇痛抗炎作用研究[J]. 中国
医药导报,2009,4(11) :39.
[3] 张文风,梁茂新.人参“止咳化痰”药理实验研究[J]. 世界科学技
术(中医药现代化) ,2009,5(11) :716.
[4] 王立为,刘新民,余世春,等.枇杷叶抗炎和止咳作用研究[J].中
草药,2004,35(2) :174.
收稿日期:2012-03-30; 修订日期:2012-09-03
基金项目:宁夏回族自治区自然科学基金( No. NZ1029)
作者简介:孙 波( 1974-) ,女( 汉族) ,宁夏银川人,现任宁夏大学生命科
学学院副教授,硕士学位,主要从事植物有效成分提取及抗氧化活性研究
工作.
枸杞中类胡萝卜素提取
工艺的优化及其抗氧化活性研究
孙 波,王 娟,马润琴,马春兰,高丁梅
(宁夏大学生命科学学院,宁夏 银川 750021)
摘要:目的 对枸杞中类胡萝卜素类成分进行了提取方法、提取溶剂及正交实验等系统性研究,并测定枸杞中类胡萝卜素
清除 DPPH的能力。方法 以 β -胡萝卜素为对照品,采用正交实验方法研究了溶剂比例、提取时间、提取次数、固液比等
对枸杞中类胡萝卜素提取得率的影响。以清除 DPPH自由基为指标测定了枸杞中类胡萝卜素的清除自由基能力。结果
最佳提取工艺为:水浴加热回流 50℃提取 3 次,每次 1 h,提取溶剂为石油醚∶ 丙酮( 7∶ 3) 。枸杞中类胡萝卜素对 DPPH
的清除率 IC50值为 37. 2μg /ml。结论 优化了枸杞中类胡萝卜素的提取工艺,枸杞中的类胡萝卜素具有较好的抗氧化能
力。
关键词:枸杞; β -胡萝卜素; 正交实验; 抗氧化活性
DOI标识:doi: 10. 3969 / j. issn. 1008-0805. 2012. 11. 028
中图分类号:R285. 5 文献标识码:A 文章编号:1008-0805( 2012) 11-2728-02
Extraction Optimization and Antioxidant Activity for Carotenoid in Lycium barbarum L.
SUN Bo,WANG Juan,MA Run-qin,MA Chun-lan,GAO Ding-mei
( College of Life Science,Ningxia University,Yinchuan,Ningxia,750021,China)
Abstract: Objective To optimize the extraction and to determine the antioxidant activity for carotenoid in Lycium barbarum L.
Methods With β - carotene as a reference,orthogonal experiment was designed from the reflux with temperature,heating time,ex-
tracting times and the ratio of gardenia to liquor. Results Carotenoid concentration in Lycium barbarum L. was extracted the high-
est when the water bath calefaction reflux extracting three times,heat time 3 hours,petroleum ether - acetone ( 7: 3) ,heating tem-
perature 50℃ . Conclusion The inhibitory rate of DPPH scavenging activity( IC50 = 37. 2μg /ml) was analyzed for carotenoid in
Lycium barbarum L.
Key words: Lycium barbarum L. ; Carotenoid; Orthogonal experiment; Antioxidant activity
枸杞 Lycium Barbarum L.属茄科落叶小灌木,枸杞子是它的
浆果,是我国传统的名贵中药材,营养价值高,具有抗癌保肝、生
精益气、治虚安神、补肾养血、明目祛风、益寿延年等功效[1]。目
前国内学者多侧重于研究枸杞中枸杞多糖的含量及药理作用,一
些厂家也有提取枸杞中的枸杞多糖为保健品,提取完多糖的废料
通常做饲料处理,而忽略了枸杞中富含丰富的类胡萝卜素类成
分。由于枸杞多糖是水溶性物质,类胡萝卜素是脂溶性成分,因
此在提取多糖的同时提取类胡萝卜素类活性成分,则可变废为
宝[2]。本文采用单因素实验和正交实验优化枸杞中类胡萝卜素
的提取工艺,并以清除 DPPH为指标测定枸杞中类胡萝卜素的抗
氧化能力,以期为枸杞中类胡萝卜素成分的进一步开发提供依
据。
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时珍国医国药 2012 年第 23 卷第 11 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2012 VOL. 23 NO. 11