全 文 ：9568D镰孢霉作用于死态龙血树形成血脂的研究*
江东福1* *
马
萍1
杨
靖1
王兴红1
许坤一2
黄
燕3
陈绍红3
( 1 云南大学微生物所,昆明 650091; 2云南师范大学生命科学系,昆明 650092;
3 湛江海洋大学生化实验中心 ,湛江 524088)
Formation of blood resin in abiotic Dracaena cochinchinensis inoculated with Fusarium 9568D. JIANG Dong

fu1, MA Ping1, YANG Jing 1, WANG Xinghong1 , XU Kunyi2 , HUANG Yan3 , CHEN Shaohong3 ( 1 I nstitute of
M icr obiology , Yunnan Univer sity , K unming 650091, China; 2Depar tment of L if e Sciences , Yunnan Normal
Univer sity, K unming 650092, China; 3Biochemistry Exp er imental Center of Zhanj iang Ocean University ,
Zhanj iang 524088, China) .
Chin. J . A ppl . Ecol. , 2003, 14( 3) : 477~ 478.
Fusar ium 9568D, w hich belongs to Fusar ium monilif orme, was isolated from the roo ts of Dracaena
cochinchinensis in the suburb o f Monglian, Yunnan Province of China. High act ivities of

g lucosidase and cellu

lase w ere detected in the brot h o f Fusar ium 9568D. T he strain was inoculat ed in abiotic br anch and wood of
Dracaena cochinchinensis. A fter 4~ 5 months of culture, red resin emerged in the inoculated points. UV
IR
spectrum analysis and antibiot ic assay demonstrated that this resin almost resembled the natural blood r esin.
Key words
Fusarium 9568D, Abiotic Dracaena cochinchinensis , Blood resin.
文章编号
1001- 9332( 2003) 03- 0477- 02
中图分类号
Q938. 1
文献标识码
A
* 国家自然科学基金资助项目( 39670876) .
* * 通讯联系人.
2001- 07- 11收稿, 2002- 02- 02接受.
1
引

言
剑叶 龙血树 血竭 来自 于剑 叶龙 血树 ( Dracaena
cochinchinensis )的树脂, 早年的研究[ [ 2]发现人工割伤可以促
进树脂的积累.江东福等[ 4]证实剑叶龙血树血竭的形成与真
菌相关, 用特异性真菌接种活体龙血树,激活龙血树的防御
反应,产生含植物防卫素的血竭[ 1, 3, 6] .但人们注意到野外自
然环境下一些衰老枯死的剑叶龙血树的材质上亦有血竭形
成,其与真菌的作用是否有关联? 本文采用分离自剑叶龙血
树根部的内生真菌 9568D 镰孢霉接种于剑叶龙血树材质
(经灭活处理) ,保湿培养 4~ 5 个月后,在接种部位有红色血
脂颗粒形成,经 UV、IR光谱分析及抗菌活性实验初步证实
该血脂与来自剑叶龙血树的天然血竭无本质差异.
2
材料与方法
2
1
供试材料
菌种来源于分离自云南孟连城郊树龄长达数百年以上
的剑叶龙血树 ( Dracaena cochinchinensis )根部, 模式菌株保
存于云南大学微生物研究所应用微生物室.


天然血竭为中国科学院西双版纳热带植物园药厂生产
的
雨林牌
血竭,源自天然龙血树.
2
2
酶液的制备


将 9568D 菌株接种于含 2% 龙血树木屑、8% 棉籽壳的
灭菌固体培养基上, 25
培养 5~ 6 d, 于 30
下, 加入其 3
倍体积蒸镏水并充分振荡 90 min,收集的液体为初级酶液.
2
3
接种处理
龙血树材质
预处理
接种处理
保湿培养. 取直
径约 1 cm 的离体龙血树枝条和 1 cm
2 cm 的龙血树离体
木块若干, 钻以数个深 3~ 5 mm、直径 1 mm 的小孔,经沸水
浴蒸腾 5 min 灭活后作为接种的龙血树材质. 将 9568D菌株
接种于含 5%龙血树木屑汁、2% 葡萄糖、3% 棉籽壳汁灭菌
培养液中, 25
下, 经 100 r
min- 1振荡培养 60 h 作为接种
液.处理组 1、2、3的预处理分别为酶液 0. 1%葡萄糖液和无
菌水, 接种处理皆为菌液. 对照组 4、5 分别为 0. 1% 葡萄糖
液和无菌水.
2
4
接种处理效果的观察及测定


分别于接种后保湿培养 3~ 5 个月, 观察处理组和对照
组红色血脂的形成情况. 红色血脂的乙醇提取物分别以 DU

7 Backman紫外分光光度计和 FTS
40/ HP5890 色谱/红外联
用仪测定,并以天然血竭样品作对照. 抗菌谱测定按圆滤纸
片法[ 5] .
3
结果与分析
3
1
9568D 镰孢霉接种后的作用效果


9568D 镰孢霉接种于剑叶龙血树材质后, 保湿培养 10
~ 15 d 即可观察到在接种部位颜色变红,继续培养 4~ 5 个
月在红色区域有大小不等的血脂颗粒出现, 而对照组却无此
现象. 试验结果也证明,在不同的预处理下, 血脂的形成量有
差别, 以酶液预处理的效果最佳.
3
2
光谱分析


由图 1、2 可知,血脂与天然剑叶龙血树血竭的乙醇提取
物的光谱分析证明两者的谱形十分相似 .
应 用 生 态 学 报
2003 年 3 月
第 14 卷
第 3 期






























CHINESE JOURNAL OF APPLIED ECOLOGY, Mar. 2003, 14( 3)
477~ 478
图 1
血脂和天然血竭的红外光谱
Fig. 1 IR spectrum of tw o resins.

.天然血竭样品 Natural dragon
s blood;
.血脂样品 Tested resin.
下同 T he same below .
图 2
血脂和天然血竭的紫外光谱
Fig. 2 UV spect rum of two resins.
表 1
龙血树材质上血脂形成情况
Table 1 Resin
formation on abiotic Dracaena cochinchinensis
处
理
T reatment
培养时间
Culture
t im e
( d)
血脂形成量
Amount of resin( mm)
枝条
Branch
木块
Wood
酶液+ 菌液 120 0. 3~ 0. 5 0. 2~ 0. 3
Broth + inoculation
0. 1%葡萄糖+ 菌液 120 0. 2~ 0. 3 0. 2
Glucose+ inoculation
无菌水+ 菌液 140 - -
Sterile water+ inoculation
0. 1%葡萄糖液对照组 150 - -
0. 1% glucose cont rol
无菌水对照 150 - -
S terile w ater cont rol
3
3
血脂的抗菌谱


由表 2 可见,两种提取物的抗真菌活性相一致.
4
讨

论


初步实验证明, 9568D镰孢霉作用于无生物活性的剑叶
龙血树材质可促成血脂的形成和积累,该血脂与天然剑叶龙
表 2
血脂和天然血竭提取物的抗菌谱测定结果
Table 2 Antibiotic specrum of blood resin and dragon
s blood
试验菌
Tested
st rain
抑菌圈直径( mm)
Diameter of inhibitory zone
血脂
Resin
天然血竭
Natural resin
金黄色葡萄球菌 12. 0 15. 0
Stap hlococcu s aureus
大肠杆菌 - -
Escheri chia coli .
黄曲霉 - -
Asp ergil lus f lavu s
烟曲霉 - -
Asp ergil lus f umigatus
黑曲霉 - -
Asp ergil lus niger
微紫青霉 15. 0 13. 0
Penicil lium j an thinellum
串珠镰孢霉 9568D 12. 0 13. 0
F usarium monil if orme 9568D
三隔镰孢霉 11. 5 11. 5
F usarium tricinctum
粉红头孢霉 15. 0 12. 0
Cophalospor ium
土生交链孢霉 - -
Al ter nar ia h umicola
土色侧孢霉 - -
Sperotri chum geochraum
枝孢嗜果疮 18. 0 21. 0
Cladospor ium carpop hilum
出芽短梗霉 11. 0 11. 0
Aur aobasidium pul lu lans
血树血竭无本质差异. 经灭活处理的龙血树材质已丧失了对
微生物侵染的防御反应能力(产生植物防卫素) , 故在 9568D
镰孢菌接种部位产生的血脂显然不是植物防卫素血脂,但它
与天然植物防卫素血竭的组成和抗菌谱却极为相似. 在对
9568D镰孢霉的形态观察中发现, 其小分生孢子仅见诸于龙
血树茎杆材料诱导培养基, 说明该菌在一定程度上对剑叶龙
血树具适应性, 是否由于与剑叶龙血树的共生使该菌具备了
与寄主相似的代谢机能, 从而产生相似的代谢产物还有待进
一步研究.
参考文献
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作者简介
江东福, 男, 1939 年生,研究员, 主要从事应用微生物研究, 发表论文 50 余篇. E
mail: wx ihong@sina. com
478 应
用
生
态
学
报

















14卷