全 文 ：HPLC测定照山白浸膏片中金丝桃苷的含量
赵艳普
(河北省药品检验所 河北 石家庄 050011)
收稿日期:2007-02-07
作者简介:赵艳普(1965～ ),女 ,副主任药师 ,从事药品检验及药品标准研究工作 ,电话:0311-85212004×8042, 13831105956。
关键词:HPLC;照山白浸膏片;金丝桃苷
中图分类号:R927.2　　　　　文献标识码:B　　　　　文章编号:1001-1528(2008)03-0456-02
　　照山白浸膏片收载于《卫生部药品标准 》中药成方制剂
第三册 , 是照山白的单味制剂 , 具有祛风 ,散寒 , 活血 , 通络 ,
祛痰 , 止咳等功效 ,常用于妇女产后风寒身痛 、月经不调 , 痛
经 , 老年慢性气管炎等症 [ 1] 。现行质量标准中只收载了照山
白的显微鉴别及一项理化鉴别 , 无定量控制指标 , 不能有效
控制产品质量。本试验以照山白中的主要成分之一金丝桃
苷为定量指标 , 建立了用高效液相色谱法测定含量的方法 ,
取得满意结果。
1　仪器 、试药与样品
1.1　仪器　Aglient1100高效液相色谱仪(四元泵 、紫外检
测器 、自动进样器)。
1.2　对照品　金丝桃苷(中国药品生物制品检定所提供 , 批
号:111521-200303, 供含量测定用)。
1.3　试剂　甲醇 、乙腈 、四氢呋喃为色谱纯 ,水为去离子水 ,
其它试剂均为分析纯 。
1.4　样品　照山白浸膏片由承德九龙药业有限责任公司提
供。
2　方法与结果
2.1　色谱条件　色谱柱:C18柱(岛津 6.0 mm×150 mm, 5
μm);流动相:甲醇-乙腈-四氢呋喃 -0.1%磷酸溶液(1∶1
∶20∶78);检测波长∶360nm;流速:1 mL/min;柱温为室温;进
样量:10μL;在此条件下样品中金丝桃苷与其它成分分离良
好 , 保留时间适中 ,理论板数 N=9 687。
2.2　对照品溶液的制备　取金丝桃苷对照品适量 , 精密称
定 , 加 70%甲醇制成每 1 mL含 40 μg的溶液 , 即得。
2.3　供试品溶液的制备　取本品 10片 , 除去包衣 , 精密称
定 , 研细 ,取 0.2g, 精密称定 , 置具塞锥形瓶中 , 精密加入
70%甲醇溶液 25 mL, 密塞 , 称定重量 , 超声处理(功率 160
W, 频率 40kHz)30 min, 放冷 ,再称定重量 ,用 70%甲醇溶液
补足减失的重量 , 摇匀 ,滤过 , 取续滤液 , 即得。
2.4　专属性试验　以不含照山白的辅料 ,制备阴性样品 , 按
供试品溶液制备方法制备阴性对照溶液 ,精密吸取对照品溶
液 、供试品溶液及阴性对照溶液各 10 μL,注入液相色谱仪 ,
按上述色谱条件测定 , 结果阴性对照在与金丝桃苷对照品色
谱峰保留时间相应处无干扰。见图 1 ～ 3。
图 1　金丝桃苷对照品 HPLC色谱图
图 2　照山白浸膏片样品 HPLC色谱图
图 3　阴性对照 HPLC色谱图
2.5　线性关系考察　精密吸取不同量的对照品溶液 , 注入
液相色谱仪 ,测定峰面积 。以进样量(μg)为横坐标 , 峰面积
为纵坐标 , 绘制标准曲线 , 结果表明金丝桃苷在 0.088 ～
4.408 μg的范围内呈良好的线性关系 , 回归方程为:Y=
10.797+2 236.6X, r=0.999 9
2.6　稳定性试验　取同一供试品溶液于 0 h开始测定 , 以
后间隔一定时间测定 1次 ,测定峰面积 ,结果 RSD=0.49%,
表明供试品溶液至少在 24 h内稳定。
2.7　重复性试验　取同一批样品 9份 , 精密称定 , 依法制备
9份供试品溶液 , 分别测定含量 , 结果 RSD=0.42%。表明
本法重复性良好。
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2008年 3月
第 30卷　第 3期
中 成 药
ChineseTraditionalPatentMedicine
March2008
Vol.30　No.3
2.8　回收率试验　采用加样回收法。精密称取已知含量的
照山白浸膏片样品(金丝桃苷含量 4.13 mg/g)0.1 g, 共取 9
份 , 置具塞锥形瓶中 ,分别精密加入不同浓度的对照品溶液:
低浓度(0.011 02mg/mL);中等浓度(0.016 53 mg/mL);高
浓度(0.022 04mg/mL)各 25 mL, 依法测定 ,计算回收率 , 结
果平均回收率为 100.6%, RSD=0.8%(见表 1)。
表 1　 金丝桃苷回收率实验结果
取样
/g
样品含
量 /mg
对照品加
入量 /mg
测得量
/mg
回收率
/%
平均回
收率 /%
RSD
%
0.100 6 0.415 5 0.275 5 0.690 0 99.64
0.101 2 0.418 0 0.275 5 0.696 8 101.20
0.100 6 0.415 5 0.275 5 0.695 2 101.52
0.101 5 0.419 2 0.413 25 0.836 1 100.88
0.101 2 0.418 0 0.413 25 0.835 1 100.93 100.6 0.8
0.101 1 0.417 5 0.413 25 0.829 6 99.72
0.100 3 0.414 2 0.551 0.962 5 99.51
0.101 4 0.418 8 0.551 0.976 9 101.29
0.101 0.417 1 0.551 0.970 9 100.51
2.9　耐用性试验　分别采用不同牌号的色谱柱:1.SHI-
MADZUVP-ODS(150L×6.0), 2.CAPCELLPAKC
18
(4.6mm
×150mm, 5 μm), 3.WatersC18(4.6 mm×150 mm, 5μm)对
同一批样品进行测定 ,均能达到分离完全 ,且含量测定结果
基本一致。表明该方法有良好的耐用性(见表 2)。
表 2　 耐用性实验结果
色谱柱 含量 /mg/片 RSD/%
1 2.03
2 2.03 1.1
3 1.99
2.10　样品测定　照山白浸膏片样品 3批(批号:20040405、
20040407、20040409),依法测定(见表 3)。
表 3　 样品测定结果
批号 20040405 20040407 20040409
含量 /mg/片 2.11 2.12 2.03
3　讨论
3.1　检测波长的选择　以流动相作溶剂 , 在 200 ～ 400 nm
波长范围内测定了金丝桃苷对照品的紫外光谱图 , 结果在
257 nm和 360 nm波长处有最大吸收 ,确定 360nm为测定波
长。
3.2　提取溶剂的选择　取本品 , 分别以甲醇 、乙醇 、 70%甲
醇 、60%甲醇 、 40%甲醇作为提取溶剂 , 依法测定 , 结果以
70%甲醇溶液和以 60%甲醇溶液做提取溶剂结果相近 , 因
60%甲醇过滤速度较慢 , 最后选定 70%甲醇溶液作为提取
溶剂。
3.3　流动相的选择　参照文献 [ 2 ～ 4] ,曾尝试用甲醇 -0.5%
磷酸(45∶55, 用三乙胺调 pH值至 3.0), 乙腈 -0.5%磷酸
(三乙胺调 pH值至 3.0)(15∶85)等溶剂系统作流动相 , 结
果均不理想 ,经摸索筛选采用本实验所用色谱条件最佳 , 样
品的分离效果较好 ,保留时间适中。
3.4　提取方法的选择　取本品 , 分别采用超声处理 20, 30,
40 min和浸泡过夜后超声处理 30 min制备供试品溶液 , 测
定其含量 ,结果表明超声处理 30 min即可提取完全。
参考文献:
[ 1] 　中华人民共和国卫生部药品标准.中药成方制剂第三册 [ S] ,
1991:191.
[ 2] 　许乾丽 ,熊慧林 ,茅向军.黔产 3种金丝桃属植物药中金丝桃
苷的含量测定 [ J] .药物分析杂志 , 2003, 23(6):414-417.
[ 3] 　王怀冲 ,范国荣 ,何　莉.贯叶连翘提取物中金丝桃苷的 HPLC
测定 [ J] .中国医药杂志 , 2006, 37(2):119-120.
[ 4] 　中国药典 2005年版一部 [ S] .2005:22-23.
胃康灵胶囊质量标准的研究
刘军玲 , 　黄丽丹
(安徽省药品检验所 安徽 合肥 230000)
收稿日期:2007-02-12
作者简介:刘军玲(1973～ ),女 ,硕士 ,主管药师 ,从事药品检验 ,质量标准及其复核 ,电话:13856096742。
关键词:HPLC;TLC;胃康灵胶囊;芍药苷
中图分类号:R927.2　　　　　文献标识码:B　　　　　文章编号:1001-1528(2008)03-0457-02
　　胃康灵胶囊由白芍 , 三七 、甘草 、延胡索 、茯苓等 8味中
药组成的复方制剂 , 具有柔肝和胃 , 散瘀止血 , 缓急止痛 , 去
腐生新的功效 , 临床常用于急性胃炎 、胃溃疡。糜烂性胃炎
等病症。现有国家标准 [ 2]对甘草 、延胡索 、三七 3味中药进
行了鉴别 ,同时采用稀乙醇超声提取 HPLC法测定了白芍中
芍药苷的含量 ,本实验在现有的标准和相关文献的基础上 ,
经反复验证 ,对白芍的提取方法进行了改进 , 避免了杂质干
扰且专属性强 、灵敏度高 、重现性好;同时对 TLC鉴别项的
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2008年 3月
第 30卷　第 3期
中 成 药
ChineseTraditionalPatentMedicine
March2008
Vol.30　No.3