全 文 ：豹皮樟总黄酮对免疫低下小鼠免疫功能的影响
胡成穆 ,陈　琳 ,李　荣 ,程文明 ,李　俊
(安徽医科大学药学院 ,安徽 合肥　230032)
收稿日期:2007-01-06,修回日期:2007-03-20
基金项目:安徽省教育厅自然科学基金资助项目(No2003kj216)
作者简介:胡成穆(1969-),女,博士生,研究方向:抗炎免疫药理学 ,
Tel:0551-5161115, E-mail:Hucmo216@sohu.com;
李　俊(1960-),男 ,博士 ,教授 ,博士生导师 ,研究方向:抗
炎免疫药理学 , Tel:0551-5161001, E-mail:Lijun@ahmu.edu.
cn
中国图书分类号:R-332;R 284.1;R 392.11;R 392.12;
R593.053;R979.11;R979.5
文献标识码:A　文章编号:1001-1978(2007)06-0804-05
摘要:目的　研究豹皮樟总黄酮(litseacoteanatotalflavone,
LCTF)对环磷酰胺(cyclophosphamide, Cy)诱导的免疫低下小
鼠免疫功能的影响。方法　以 Cy50 mg· kg-1 ip给药, 每天
1次 ,连续 2 d, 诱导小鼠免疫低下模型 , 采用碳廓清试验 、溶
血素生成试验 、二硝基氟苯(DNFB)诱导的迟发性超敏反应 ,
观察 LCTF对免疫低下小鼠非特异性免疫、体液免疫和细胞
免疫的影响。结果　碳廓清试验 , LCTF(200、 400 mg· kg-1)
组可提高 Cy致免疫低下小鼠的吞噬指数 α值和廓清指数 K
值 ,提高免疫低下小鼠巨噬细胞的吞噬功能;溶血素试验 ,
LCTF(100、200mg· kg-1)组能提高免疫低下小鼠血清 IgM和
IgG的生成 , LCTF(100、200、400 mg· kg-1)能增加免疫低下
小鼠脾细胞溶血素的产生;LCTF(200、400 mg· kg-1)组可明
显促进免疫低下小鼠 DTH反应 , LCTF(100、 200、 400 mg·
kg-1)能提升 CD4+、CD8+细胞数以及 CD4+/CD8+比值 , 并
能提高脾淋巴细胞生产 IL-2含量。结论　以上结果表明 ,
LCTF通过广泛刺激小鼠的特异性及非特异性免疫应答 ,对免
疫低下小鼠的免疫功能有良好的增强作用。
关键词:豹皮樟总黄酮;体液免疫;细胞免疫;环磷酰胺
　　豹皮樟 ,又名老鹰茶 ,系樟科木姜子属毛豺皮樟
LitseaCoreanalevel的叶 ,俗称白茶 ,分布于四川 、贵
州 、云南 、安徽等地 ,是我国南方各民族民间长期饮用
的一种植物代用茶。民间饮用表明老鹰茶具有解毒
消肿 、明目益思 、生津止渴 、解表防暑等功效[ 1] ,为药
食同源植物。老鹰茶中含有多种活性成分 ,其药理作
用仅见抗氧化实验研究 [ 2, 3] ,豹皮樟总黄酮 (litsea
coteanatotalflavone, LCTF),由本校药学院研制 ,为墨
绿色粉末 ,具有特殊香味 ,经我院天然药物化学教研
室鉴定 ,总黄酮含量 >70%。我们前期研究表明老鹰
茶具有抗炎作用[ 4] 。因炎症和免疫是一个问题的两
个方面 ,有关其对免疫系统作用的影响尚未有报道 ,
为此 ,本文采用环磷酰胺(cyclophosphamide, Cy)诱导
的免疫低下小鼠模型 ,研究 LCTF对免疫低下小鼠的
免疫功能的影响。
1　材料
1.1　动物　BALB/c小鼠 ,体重(18±2)g, ♀♂各半;
昆明种小鼠 ,体重(20 ±2)g, ♀♂各半;豚鼠 ,体重
(300±20)g, ♂。均由安徽医科大学实验动物中心提
供。
1.2药物与试剂 　豹皮樟总黄酮 ,使用时研细以
0.5%羧甲基纤维素钠制成混悬液。雷公藤多苷片
(triperygiumwilfordinepolycoride, TPT),上海复旦复
华药业有限公司生产 ,批号:030402。左旋咪唑(le-
vamisole, LMS), 南京白敬宇制药厂生产 , 批号:
021201。注射用环磷酰胺 ,上海华联制药有限公司生
产 ,批号:020608;印度墨水 ,上海长江日用粘合材料
厂产品 ,批号:981120;绵羊红细胞 ,安徽省防疫站提
供;2, 4-二硝基氟苯(2, 4-dinitrofluorobenzene),上海
试剂一厂产品 ,批号:010601;丙酮 ,国营南京化学试
剂一厂产品 ,批号:020916;FITC-CD4-Ab和 PE-CD8-
Ab,由美国 CALTAG公司提供 ,批号:LMCD0401;羊
抗鼠 IgG,华美生物制品公司产品;IL-2试剂盒 ,北京
北方生物技术研究所提供;ConA,美国 Sigma公司产
品 ,用 RPMI1640培养液配制应用浓度 ,经 0.2μm微
孔滤膜过滤除菌 ,置 -20℃冰箱保存备用。
1.3　仪器　酶标仪 MK3,合肥市科隆商贸有限公司
产品;分光光度计 722S,上海精密科学仪器有限公司
产品;电子显微镜 XDS-1B,重庆光电仪器总公司产
品;COULTZEREPICSXL-MCL流式细胞仪 , 美国
BeckmanCounter公司产品。
1.4　统计学处理　应用统计软件 SPSS10.0版进行
统计 ,结果以 x±s表示 ,组间比较采用 ANOVA分析 。
2　方法
2.1　Cy诱导免疫低下小鼠模型的制备　除正常组
外 ,用药当天每鼠 ip环磷酰胺 50 mg· kg-1 ,每天 1
次 ,连续 2d。
2.2　LCTF对免疫低下小鼠免疫器官重量的影响　
昆明种小鼠 , ♀、♂各半 ,随机分为正常组 、环磷酰胺
模型组 、LCTF(100、200、400 mg· kg-1)组及阳性药
·804· 中国药理学通报　ChinesePharmacologicalBuletin　2007 Jun;23(6):804 ～ 8
(雷公藤 60mg· kg-1 ,左旋咪唑 30mg·kg-1)组。ig
给药 ,每天 1次 ,连续 7d。正常组及环磷酰胺模型组
给予相应体积的 CMC-Na。 d7小鼠称重 ,分离脾脏
及胸腺 ,称重 , 以脾重 (mg)/体重 (10 g)和胸腺重
(mg)/体重(10g)作为脾脏和胸腺指数。
2.3　LCTF对免疫低下小鼠巨噬细胞吞噬功能影
响 [ 5] 　分组及给药方法同上。d7每鼠尾静脉注入离
心后 50%的印度墨汁(0.10 ml/10 g), 2 min(T1)和
10min(T2)后分别从眼球取血 40μl,加到 4ml0.1%
NaHCO3溶液中 ,以正常小鼠血加 NaHCO3溶液作空
白对照 ,用 722分光光度计在 600 nm波长处测 OD
值。称体重和肝脾重量 ,按公式计算碳廓清指数 K和
吞噬指数 α。
廓清指数 K=(lgA1 -lgA2)/(T2 -T1)
吞噬指数 α= 3K×体重 /(肝重 +脾重)
2.4　LCTF对免疫低下小鼠体液免疫功能的影
响 [ 6, 7]
2.4.1　LCTF对免疫低下小鼠血清中 IgM的影响　
昆明种小鼠 , ♀、♂各半 ,分组同上 。ig给药 ,每天 1
次 ,连续 7 d。d3每鼠腹腔注射 10%的 SRBC0.2 ml
致敏 。致敏后 5 d,摘除小鼠眼球取血。把收集的血
清作 800倍稀释后 ,取稀释的血清 0.5ml放入另一试
管中 ,依次加入 10% SRBC、补体 、生理盐水各 0.5
ml,空白管用生理盐水代替血清 ,混匀 ,置 37℃温箱温
育 1h,离心 (3 000r· min-1)5 min,取上清液 ,用
722分光光度计在 540nm处测 OD值。
2.4.2　LCTF对 Cy诱导免疫低下小鼠脾溶血素生成
的影响　分组及致敏同 IgM的测定 ,致敏后 5d,摘除
小鼠眼球放血后取脾。用冷的 Gey′s液制成 5×109
·L-1脾细胞悬液 ,每管依次加入脾细胞悬液 、0.2%
SRBC、1 ∶10豚鼠血清各 0.5 ml,另设不加补体的空
白对照。置 37℃水浴中温浴 1 h, 离心(3 000r·
min-1)5 min,取上清液。用分光光度计在波长 413
nm处测 OD值。
2.4.3　LCTF对 Cy诱导免疫低下小鼠血清中 IgG的
影响　分组同 IgM的测定 ,第 1次致敏后 d5用 10%
的 SRBC0.2ml再次致敏 ,再次免疫后 d8眼球取血。
分离血清。血清加等量 2-巯基乙醇后 37℃水浴保温
30min,随后血清作 800倍稀释。取处理后的血清
0.5ml和 5%的 SRBC0.5 ml,充分混匀 ,再加羊抗小
鼠 IgG和补体各 0.5ml,空白管以 0.5 mlNS代替血
清。置 37℃温箱温育 1 h,离心(3 000r· min-1 , 10
min),取上清液 ,用 722分光光度计在 540 nm处测
OD值 。
溶血素含量(hemolysinconcentrationHC)计算:
HCIgM=样本稀释血清的 OD值 ×稀释倍数
HCIgG=2-巯基乙醇处理样本血清的 OD值 ×稀释倍数
2.5　LCTF对二硝基氟苯 (DNFB)诱导小鼠迟发
型超敏反应(DTH)的影响[ 8, 9] 　BALB/c小鼠 , ♀、
♂各半 ,随机分为正常组 、环磷酰胺模型组 、LCTF
(100、200、400mg· kg-1)组 、阳性药(雷公藤 60 mg
·kg-1)组 。 ig给药 ,连续 9 d。 d3除对照组外 ,每
鼠腹部涂 1%二硝基氟苯(dinitrofluorobenzene, DN-
FB)丙酮麻油溶液 50μl致敏(范围 3cm×3 cm), d
2同剂量强化 1次 ,同时 ipCy50 mg· kg-1每天 1
次 ,连续 2d。致敏 5d后 ,将 1% DNFB溶液均匀涂
抹于小鼠右耳(两面)进行攻击 ,对照组同样涂耳但
未致敏。攻击 24 h,处死小鼠 ,剪下左右耳壳 ,用直
径 9 mm的打孔器打下圆耳片 ,称重 。以左右耳片
之差(■mg)为肿胀度 。
2.5.1　LCTF对 DTH小鼠 T淋巴细胞亚群的影
响[ 10] 　分组及给药方法同上。 d9小鼠放血处死取
脾 ,制备脾细胞悬液 ,加入 0.84%的氯化铵溶液 2
ml裂解红细胞 ,调脾细胞悬液浓度为(5×108 ～ 9 ·
L-1),取脾细胞悬液 10μl、PBS1ml加入离心管中 ,
1 000r· min-1离心 5 min去上清。取 FITC-CD4+
Ab和 PE-CD8+Ab各 10 μl,依次加入离心管中 ,混
匀后避光反应 30 min, 流式细胞仪测定 CD4+和
CD8+细胞数 。
2.5.2　LCTF对 DTH小鼠脾细胞 IL-2生成的影响
　分组及给药方法同上。 d9小鼠放血处死取脾 ,
用 RPMI1640制备脾细胞悬液(5×109· L-1),在
24孔培养板上 ,每孔加 0.5 ml脾细胞悬液(终浓度
为 5 ×109· L-1), 0.5 mlConA(终浓度为 5 mg·
L-1),置 37℃、5% CO2培养箱中 ,培养 24 h,离心
(2 000r/10 min),收集上清 ,用放免试剂盒按说明
书方法进行 IL-2测定。
3　结果
3.1　LCTF对免疫低下小鼠免疫器官重量的影响
　LCTFig连续 7 d,与模型组比较 , LCTF(200, 400
mg· kg-1)组可提高免疫低下小鼠的脾脏和胸腺指
数(Tab1)。
3.2　LCTF对免疫低下小鼠巨噬细胞吞噬功能的
影响　与模型组比较 , LCTF(200, 400 mg· kg-1)组
可提高 Cy致免疫低下小鼠的吞噬指数 α值和校正
指数 K值 ,提高免疫低下小鼠的巨噬细胞吞噬功能
(Tab2)。
·805·中国药理学通报　ChinesePharmacologicalBuletin　2007 Jun;23(6)
Tab1　EffectsofLCTFonindexofimmuneorganin
Cy-immunosuppressedmice( x±s, n=10)
Group Dose/mg· kg-1 Indexofspleen Indexofthymus
Normal - 4.05±0.03 2.97±0.02
Model - 2.33±0.02■■ 1.39±0.03■■
LCTF 100 2.64±0.02＊ 1.72±0.04＊
200 2.71±0.03＊ 1.86±0.02＊＊
400 2.87±0.05＊ 2.20±0.03＊＊
TPT 60 1.73±0.19■■ 1.22±0.02■■
LMS 30 2.95±0.03＊＊ 2.24±0.05＊＊
　　■■P<0.01vsnormal;＊P<0.05, ＊＊P<0.01vsmodel
Tab2　EfectsofLCTFonphagocytosisofmacrophagesin
Cy-immunosuppressedmice( x±s, n=10)
Group Dose/mg· kg-1 K/×10-2 α
Normal - 4.87±0.85 6.68±0.97
Model - 2.11±0.66■■ 4.87±0.50■■
LCTF 100 3.01±0.66＊ 5.06±0.37
200 3.39±0.99＊＊ 5.45±0.40＊
400 3.57±0.44＊＊ 5.82±0.61＊＊
TPT 60 2.00±0.23■■ 4.72±0.36■■
LMS 30 3.22±0.60＊＊ 5.72±0.68＊
　　■■P<0.01, vsnormal;＊P<0.05, ＊＊P<0.01vsmodel
3.3　LCTF对免疫低下小鼠血清中 IgM、IgG水平
和脾细胞溶血素水平的影响　LCTFig连续 7d,与
模型组比较 , LCTF(100, 200mg· kg-1)可提高免疫
低下小鼠血清中 IgM和 IgG水平;LCTF(100, 200,
400mg· kg-1)可提高免疫低下小鼠脾细胞溶血素
的生成(Tab3)。
Tab3　EffectsofLCTFonhemolysinsynthesisfromserum
andsplenocyteinCy-immunosuppressedmice( x±s, n=10)
Group Dose/mg·kg-1
HCIgM
/serum
Hemolysin
/splenocyte
HCIgG
/serum
Normal - 47.97±3.83 0.33±0.05 40.92±9.25
Model - 31.49±2.94■■ 0.20±0.03■■ 28.88±4.19■■
LCTF 100 39.60±3.68＊＊ 0.30±0.04＊＊ 39.56±6.49＊＊
200 36.00±2.72＊ 0.28±0.46＊＊ 33.68±5.14＊
400 35.25±6.90 0.26±0.04＊ 30.40±3.75
TPT 60 29.47±3.47■■ 0.20±0.03■■ 27.68±3.85■■
LMS 30 41.39±8.49＊＊ 0.32±0.02＊＊ 36.64±4.23＊＊
　　■■P<0.01vsnormal;＊P<0.05 , ＊＊P<0.01vsmodel
3.4 LCTF对免疫低下小鼠 DTH反应的影响 　
LCTFig连续 9 d,与模型组比较 , LCTF(200, 400 mg
· kg-1)组可促进免疫低下小鼠 DTH反应(Tab4)。
3.5　LCTF对免疫低下 DTH小鼠 T淋巴细胞亚
群的影响　与正常组比较 , Cy模型组小鼠耳肿胀程
度明显减轻;与模型组比较 , LCTF(100, 200, 400 mg
· kg-1 )能明显提升 CD4+、 CD8+细胞数以及
CD4+ /CD8+比值(Tab5)。
Tab4　EfectsofLCTFondelayedtypedhypersensitivityin
Cy-immunosuppressedmice( x±s, n=10)
Group Dose/mg· kg-1 Earedema/■mg
Normal - 3.30±0.53
Model - 1.73±0.32■■
LCTF 100 2.16±0.70
200 2.95±0.59＊＊
400 3.03±0.49＊＊
TPT 60 1.74±0.25■■
　　■■P<0.01vsnormal;＊＊P<0.01vsmodel
Tab5　EfectsofLCTFonsubsetofTlymphocytein
Cy-immunosuppressedmice( x±s, n=10)
Group Dose/mg· kg-1 CD4
+/% CD8 +/% CD4 +/CD8 +
Normal - 50.55±4.35 21.63±1.29 2.35±0.30
Model - 34.35±3.25■■ 17.43±1.91■■ 1.99±0.24■■
LCTF 100 42.23±8.12＊ 18.46±2.50 2.34±0.67
200 47.65±6.20＊＊ 20.48±1.47＊＊ 2.34±0.40＊
400 48.13±5.50＊＊ 20.84±2.20＊ 2.33±0.38＊
TPT 60 39.79±2.43＊■■17.18±1.20■■ 2.33±0.21＊＊
　　■■P<0.01vsnormal;＊P<0.05, ＊＊P<0.01vsmodel
3.6　LCTF对 DTH小鼠脾细胞 IL-2生成的影响
　与模型组比较 , LCTF(200, 400 mg· kg-1)能明显
促进免疫低下小鼠脾细胞生成 IL-2水平(Tab6)。
Tab6　EfectsofLCTFonIL-2productionfromspleen
lymphocytesinCy-immunosuppressedmice( x±s, n=9)
Group Dose/mg· kg-1 IL-2/μg· L-1
Normal - 1.67±0.26
Model - 1.17±0.14■■
LCTF 100 1.40±0.29
200 1.45±0.21＊
400 1.48±0.27＊
TPT 60 1.43±0.24＊
　　■■P<0.01vsnormal;＊P<0.05vsmodel
4　讨论
Cy是一种烷化类的免疫抑制剂 ,可杀伤淋巴细
胞 ,抑制免疫反应。 Cy所致免疫低下小鼠是研究药
物免疫调节作用的动物模型 。
胸腺是 T淋巴细胞分化成熟的场所 ,脾脏的免
疫细胞以 B淋巴细胞为主 , T、B淋巴细胞分别是参
与细胞免疫和体液免疫的主要细胞 。 LCTF可使免
疫低下小鼠胸腺和脾脏指数升高 ,提示 LCTF对机
体的免疫功能可能生产某种影响。进一步研究发
现 , LCTF高 、中剂量可以明显提高免疫低下小鼠吞
噬指数 α值及廓清指数 K值 ,使其恢复接近正常水
平。小鼠碳廓清实验中所测得的廓清指数 K可反
映网状内皮系统的吞噬功能 ,吞噬指数 α则反映单
·806· 中国药理学通报　ChinesePharmacologicalBuletin　2007 Jun;23(6)
核 -巨噬细胞的吞噬能力 。单核巨噬细胞的吞噬功
能是衡量机体非特异性免疫功能的指标之一。提示
LCTF对免疫低下小鼠的非特异性免疫功能有一定
的恢复作用 。
脾细胞溶血素测定不仅反映抗体形成细胞的数
量 ,也提示合成抗体的能力 。脾细胞溶血素及血清
中循环抗体-IgM或 IgG的测定是检测体液免疫功
能的指标。 LCTF可提高免疫低下小鼠血清中及脾
细胞溶血素水平 。提示 LCTF可提高免疫低下小鼠
的体液免疫功能 。
迟发性变态反应(delayedtypehypersensitivity,
DTH)是由 T细胞介导的细胞免疫。机体正常的免
疫应答有赖于 T淋巴细胞的调节作用 ,尤其是辅助
性(Th)和抑制性(Ts)T细胞的相互制约和调节有
关 。在病理状态下 ,这两种 T细胞之间的制约和平
衡失调 ,可导致机体免疫功能紊乱。
T淋巴细胞亚群在各种临床疾病如自身免疫性
疾病 、免疫缺陷性疾病 、变态反应性疾病 、再障性贫
血 、病毒感染 ,尤其是恶性肿瘤都有明显的异常改
变 。T细胞亚群的检测分析作为判断细胞免疫功能
的一项重要指标。通过检测肿瘤病人 T淋巴细胞
亚群的异常变化 ,了解机体的免疫动态及疾病的机
制 ,指导临床治疗和使用免疫调节剂及其它药物治
疗肿瘤病人 ,以调节其免疫功能 ,增强机体抗肿瘤能
力都有极其重要意义 。
LCTF能明显增强 Cy诱导免疫低下小鼠的
DTH反应 , 使其恢复接近正常水平;提高 CD4+、
CD8+细胞数 ,使 CD4+ /CD8+细胞比值上升 ,调节
Th/Ts比例 ,提高免疫低下小鼠的细胞免疫功能。 T
细胞可能是 LCTF免疫调节作用的重要的靶细胞之
一 。
IL-2是 T淋巴细胞增殖分化所不可缺少的细胞
因子 , IL-2能刺激 T淋巴细胞由细胞周期的 G1期向
S期过渡 ,并且对淋巴细胞 、单核巨噬细胞 、NK细胞
的功能具有调节作用 ,促进抗体和细胞因子产生 ,在
免疫系统中具有重要作用 [ 11] 。 IL-2还是细胞免疫
效应细胞 CTL细胞发育成功能性 CTL的极为重要
的细胞因子 [ 12] 。LCTF能提高免疫低下小鼠脾淋巴
细胞生成 IL-2的含量 ,这可能是其调节机体免疫能
力的机制之一 ,其作用和机制还有待进一步研究。
综上所述 , LCTF对免疫功能低下小鼠的非特异
性免疫 、体液免疫和细胞免疫功能具有一定的增强
作用 ,为 LCTF用于肿瘤 、艾滋病等疾病的临床应用
提供了一定的理论依据 , LCTF详细的作用机制有待
进一步研究 。
参考文献:
[ 1] 　卢晓黎 ,雷　鸣 ,周建华 ,等.四川石棉老鹰茶资源现状及开发
[ J] .食品科学 , 2001, 22(11):102-3.
[ 1] 　LuXL, LeiM, ZhouJH, etal.Theprospectandthepresentre-
soursesituationoftheShimianeagletea[ J] .FoodSci, 2001, 22
(11):102-3.
[ 2] 　叶　辉 ,郁建平.老鹰茶中 3种黄酮类物质抗脂质过氧化作用
初探 [ J] .中药材 , 2004, 27(2):113-5.
[ 2] 　YeH, YuJP.Thepreliminarystudiesonantioxidationofthree
kindsofflavoniodsfromLitseacoreana[ J] .JChinMedMater,
2004, 27(2):113-5.
[ 3] 　叶　辉 ,郁建平 , 王建光.老鹰茶提取物抗氧化作用的研究
[ J] .时珍国医国药, 2004, 15(4):198-200.
[ 3] 　YeH, YuJP, WangJG.TheStudiesonantioxidationofextrac-
tivesfromLitseacorean[ J].LishizhenMedMaterRes, 2004, 15
(4):198-200.
[ 4] 　陈　琳 ,胡成穆 ,程文明 ,等.豹皮樟总黄酮抗炎作用及部分机
制研究 [ J] .安徽医科大学学报 , 2004, 39(6):439-42.
[ 4] 　ChenL, HuCM, ChengWM, etal.Studyonanti-inflammatory
efectsoftotalflavonoidsofLitseacoreanaLeve.Var[ J] .ActaUniv
MedAnhui, 2004, 39(6):439-42.
[ 5] 　王凤山 ,袁勤生 ,程艳娜.口服猪脾来源免疫抑制组分对小鼠
免疫功能的影响 [ J].中国药学杂志 , 2000, 35(5):305-8.
[ 5] 　WangFS, YuanQS, ChengYN.Efectsofimmunosuppressive
componentderivedfromporcinespleenonimmunefunctionsin
mice[ J].ChinPharmJ, 2000, 35(5):305-8.
[ 6] 　齐春会 ,付艳荣 ,张永祥 ,等.六味地黄多糖 CA4-3对小鼠 B细
胞功能的作用 [ J] .中国药理学通报 , 2001, 17(4):469-73.
[ 6] 　QiCH, FuYR, ZhangYX, etal.EfectofCA4-3, theacidpoly-
saccharidesisolatedfromliuweidihuangdecoction, onthefunction
ofBlymphocytesinmice[J] .ChinPharmacolBul, 2001, 17(4)
:469-73.
[ 7] 　沈玉先 ,魏　伟 , 徐叔云.体液免疫功能测定 [ M] //徐叔云 ,卞
如濂 ,陈　修.药理实验方法学 , 3版.北京:人民卫生出版社 ,
2002:1433-8.
[ 7] 　XuSY, BianRL, ChenXChiefEd.Themethodologyofpharma-
cologicalexperiment[ M] , 3thed, Beijing:People′sSanitation
Press, 2002:1433-8.
[ 8] 　魏　伟 ,沈玉先 , 徐叔云.迟发性超敏反应模型 [ M] //见:徐叔
云 ,卞如濂 ,陈　修.药理实验方法学.3版.北京:人民卫生出
版社 , 2002:1423-5.
[ 8] 　XuSY, BianRL, ChenXChiefEd.Themethodologyofpharma-
cologicalexperiment[ M].3thed.Beijing:People′sSanitation
Press, 2002:1423-5.
[ 9] 　葛金芳 ,李　俊 ,胡成穆 ,等.枇杷叶三萜酸的免疫调节作用研
究 [ J] .中国药理学通报 , 2006, 22(10):1194-8.
[ 9] 　GeJF, LiJ, HuCM, etal.Immunoregulatoryactionsoftriter-
peneacidsloquatleaf(TAL)[ J] .ChinPharmacolBul, 2006, 22
(10):1194-8.
[ 10] 魏文青 ,丛建波 ,先　宏 ,等.海藻硫酸多糖对小鼠免疫功能的
调节作用 [ J] .中国新药杂志 , 2001, 10(9):671-5.
·807·中国药理学通报　ChinesePharmacologicalBuletin　2007 Jun;23(6)
猕猴桃根抗肿瘤作用研究
楼丽君 1 ,吕定量1 ,胡增仁 1 ,钟松阳 1 ,唐卫东2 ,徐永平 2
(浙江省衢州市人民医院 , 浙江 衢州　324000;2.中科院上海药物研究所 , 上海　201203)
中国图书分类号:R282.71;R284.1;R329.24;R730.52;
R979.1
文献标识码:A　文章编号:1001-1978(2006)06-0808-04
摘要:目的　评价猕猴桃根提取物的体外 、内抗肿瘤活性。
方法　猕猴桃根活性成分的分离 、纯化采用传统的天然产物
化学方法 , 猕猴桃根先用甲醇回流提取 , 然后用乙酸乙酯 、氯
仿 、正丁醇萃取。不同组分对体外培养的肿瘤细胞增殖的作
用采用磺酰罗丹明 B方法;猕猴桃根的体内抗肿瘤作用采用
小鼠肿瘤和人肿瘤裸小鼠移植瘤模型评价。结果　氯仿提
取物对肿瘤细胞增殖抑制作用最强 ,甲醇提取物次之。 体内
实验证实氯仿提取物有效地抑制小鼠肝癌模型和人肝癌裸
收稿日期:2007-01-25,修回日期:2007-03-08
基金项目:浙江省衢州市科委自然基金资助项目(No20041998)
作者简介:楼丽君(1964-), 女 , 副主任药师 , 研究方向:临床药理
学 ,通讯作者 , Tel:0570-3055197, E-mail:ljqz@yahoo.
com.cn
小鼠移植瘤模型的生长 , 抑制率大概在 38.0%。 结论　猕
猴桃根提取物有一定的抗肿瘤作用;其活性成分主要存在
于极性较小的组分。
关键词:猕猴桃根;抗肿瘤;中药药理
　　猕猴桃根(民间又叫藤梨根), 为猕猴桃科植物
猕猴桃的根或根皮 ,具有清热解毒 、活血消肿 、祛风
利湿的作用[ 1, 2] 。我国南方地区尤其在浙江衢州 、
金华 、温州 、杭州等地 ,民间广泛应用猕猴桃根治疗
胃癌 ,肺癌 ,鼻咽癌 ,肝癌 ,结肠癌等。虽然猕猴桃根
民间应用较多 ,但目前国内 、外对猕猴桃根开展系统
的抗肿瘤作用研究较少 ,并且相当粗浅 。邹益友
等[ 3]发现猕猴桃根乙酸乙酯提取物对体外原代培
养的白血病 、结肠癌肿瘤细胞增殖有抑制作用;但他
[ 10] WeiW Q, CongJB, XianH, etal.Theefectofpolysaccharides
fromseaweed(SPS)onregulatingtheimmunefunctioninmice
[ J] .ChinJNewDrugs, 2001, 10(9):671-5.
[ 11] NelsonBH.IL-2, regulatoryTcels, andtolerance[J] .JImmunol,
2004, 172(7):3983-8.
[ 12] ThezeJ, AlzariPM, BertoglioJ.Interleukin-2anditsreceptors:re-
centadvancesandnewimmunologicalfunctions.ImmunolToday,
1996, 17(10):481-6.
Immunomodulatorypropertyoftotalflavonoidsfrom
Litseacoreanaleveileonimmunosuppressivemice
HUCheng-mu, CHENLin, LIRong, CHENGWen-ming, LIJun
(SchoolofPharmacy, AnhuiMedicalUniversity, Hefei　230032, China)
Abstract:Aim　Tostudytheimmunomodulatoryac-
tivityoftotalflavonoidsofLitseaCoreanaLeveile
(LCTF)oncyclophosphamide(CY)-inducedimmuno-
suppressivemice.Methods　CY(50 mg·kg-1)was
administeredbyintraperitoneal(ip)injectionfor2 con-
secutivedaystoinduceimmunosuppressivemodel.
Carbonclearance, quantitativehemolysisandDNFB-
induceddelayed-typehypersensitivity(DTH)wereap-
pliedtoasayefectsofLCTFonnonspecificimmuni-
ty, humoralimmunityandcelularimmunity.Results
　Incarbonclearancetest, theclearanceindex(K)
andvaluesofphagocyticindex(α)wereelevatedby
LCTF(200and400 mg·kg-1), indicatingthephag-
ocytosisofmacrophageswasenhancedinimmunosup-
pressivemice.Inquantitativehemolysis, productionsof
IgMandIgGinserumandhemolysininsplenocytes
wereenhancedinimmunosuppressivemicebyLCTF
(100and200mg· kg-1).LCTF(200 and400 mg·
kg-1)obviouslyincreasedDTHreactivityinimmuno-
suppressivemice.LCTFnotonlyincreasedpercentages
ofTcelsexpressingCD4+ andCD8+, butalsoen-
hancedtheratioofthetwosubsetofTlymphocyte, and
LCTF(200 and400 mg· kg-1)couldalsoimprove
IL-2productionofspleenlymphocytes.Conclusion　
LCTFshowedsignificantimmunomodulatoryproperty
onimmunosuppressivemicethroughspecificandnon-
specificimmunity.
Keywords:litseacoreanaleveile;humoralimmunity;
celularimmunity;cyclophosphamide
·808· 中国药理学通报　ChinesePharmacologicalBulletin　2007Jun;23(6):808 ～ 11