全 文 ：短毛独活抗风湿性关节炎的药效学研究
赵　琦1 ,张军武2
(1.咸阳市卫生学校 ,陕西 咸阳 712000;2.陕西中医学院 ,陕西 咸阳 712046)
　　[摘　要]目的:研究短毛独活的抗风湿性关节炎作用 。方法:采用蛋清致大鼠足肿胀 、弗氏完全佐剂诱发
大鼠关节炎和小鼠腹腔毛细血管通透性等试验研究短毛独活的抗炎作用。结果:短毛独活中 、高剂量抑制或明
显抑制蛋清致大鼠足肿胀 、大鼠佐剂性关节炎的原发性和继发性肿胀以及小鼠腹腔毛细血管的通透性。结论:
短毛独活具有抗风湿性关节炎的作用。
　　[关键词]短毛独活;抗炎;祛风;散寒;止痛;小鼠;大鼠;蛋清
　　[中图分类号] R593.22　　　　　[文献标志码] A　　　　[文章编号] 1003-5699(2010)09-0816-03
　　短毛独活[ 1]也称毛羌 、臭独活 ,为伞形科植物短
毛独活(Heracleum moellendorffii Hance)的干燥根。全
株高达 1.5 m ,有柔毛 ,根圆锥形 ,分枝 ,茎直立 ,粗
壮 ,有棱槽 ,中空 。生长于海拔 1 200 ～ 3 200 m 间的
山谷或山坡草丛中和疏林下 ,分布于我省秦岭南北坡
和巴山地区 ,以南郑 、佛坪 、镇坪等山区多产。具有祛
风胜湿 ,散寒止痛作用 ,主治风寒湿痹 、腰膝酸痛 ,风
湿性关节炎 ,风寒头痛。为了进一步开发 ,本文对其
抗炎作用欲做进一步研究 。
1　实验材料
1.1　供试药品及试剂　供试药品:短毛独活来源于
陕西南郑 ,经鉴定为短毛独活 。先采用水蒸气蒸馏法
提取短毛独活中的挥发油 ,挥发油另器保存。药渣再
用水煎煮 3次浓缩 ,将此浓缩液与前述所得挥发油混
合即得短毛独活混合液(简称:DH ,混合液浓度为:生
药 2 g/mL)。试 剂:地 塞米 松磷 酸钠 注射 液
(09112811 , 天津药业焦作有限公司 ,含量为 1 mL:
5 mg),生理盐水 ,醋酸(分析纯),弗氏完全佐剂(美国
Sigma公司产品),伊文思蓝(上海如吉生物科技发展
有限公司)。
1.2　仪器　足跖容积测量仪(YLS-7B ,济南益延科技
发展有限公司),离心机(T GL-16G-A型 ,Anke),紫外
-可见分光光度计(UV-1102 ,上海天美科学仪器有限
公司)。
1.3　动物　昆明种小鼠(18 ～ 22)g 和 SD雄性大鼠
(150 ～ 180)g ,分别由陕西省中医药研究院和西安交
通大学医学院实验动物中心提供。
2　实验方法与结果[ 2]
2.1　对蛋清致大鼠足肿胀的影响　SD雄性大鼠 50
只 ,随机分 5组 ,对照组 ,地塞米松(0.005 g/kg)组 ,
DH 高(5.00 g/kg)、中(2.50 g/kg)、低(1.25 g/kg)剂量
组 。DH 高 、中 、低剂量组灌胃给药(1 mL/100 g 体
重),地塞米松组灌胃给予地塞米松 ,对照组灌胃相同
容量的 0.5%吐温溶液给药 20 d后 ,致炎前 1 d分别
用足跖容积测量仪测量大鼠右后足跖体积 ,末次给药
后 30 min每鼠右后足跖部皮下注射 10%鲜鸡蛋清生
理盐水溶液 0.1 mL 致炎 ,分别于致炎后 30 , 60 ,120 ,
180 ,240 min测定各鼠右肢足容积 ,观察致炎前后大
鼠足容积的变化值 ,实验数据进行组间 t 检验 ,见表
1。
表 1　DH 对蛋清致大鼠足肿胀的影响( x±s , n=10)
组　别 剂量/(g/ kg) 致炎后足肿胀度/mL
30 min 60 min 120min 180 min 240 min
对照组 - 0.72±0.23 0.68±0.20 0.33±0.26 0.38±0.17 0.21±0.12
地塞米松组 0.005 0.45±0.27■ 0.30±0.12■■ 0.24±0.11 0.20±0.12 0.21±0.14
DH 低剂量组 1.25 0.70±0.31 0.72±0.15 0.68±0.18 0.40±0.11 0.28±0.05
DH 中剂量组 2.50 0.53±0.15■ 0.48±0.23 0.30±0.09 0.32±0.20 0.24±0.11
DH 高剂量组 5.00 0.47±0.12■■ 0.49±0.14■ 0.28±0.15 0.24±0.16 0.19±0.08
　　注:与对照组比 , ■P<0.05, ■■P<0.01。
·816·　　　　　　2010年 9月第 30卷第 9期　Jilin Journal of Traditional Chinese Medicine　2010 Vol.30 No.9　　
DOI :10.13463/j.cnki.j l zyy.2010.09.034
　　与对照组比 ,地塞米松组在致炎 30 min时有显
著性差异 ,致炎 60 min时有非常显著性差异;DH 低
剂量组在各时间点均无显著性差异;DH中剂量组和
DH 高剂量组分别在致炎 30 min 、60 min时有显著性
差异 ,其中 DH 高剂量组在致炎 30 min时有非常显著
性差异 。DH 中 、高剂量组对蛋清对大鼠足肿胀有一
定的抑制作用。
2.2　对大鼠佐剂性关节炎(AA)的影响　SD雄性大
鼠随机分为 6 组:生理盐水组 , 模型组 , 地塞米松
(0.005 g/kg)组 ,DH低 、中 、高剂量组。模型组给予生
理盐水 ,各组给药容量相等 。于注射佐剂前1 h ,各组
大鼠灌胃 1次 ,并于注射佐剂致炎后第 3 ,6 , 12 , 18 ,
24 h各测大鼠足跖容积 1次 ,计算其足跖肿胀度。判
断药物对佐剂性关节炎大鼠原发性病变的影响 。于
致炎后第 10 d开始 ,各组大鼠继续灌胃给药 ,1次/d ,
连续 16 d ,在第 10 ,14 ,18 ,22 ,26 d各测大鼠足跖容积
1次 ,计算其足跖肿胀度。判断药物对佐剂性关节炎
大鼠继发性病变的影响。实验数据进行组间 t 检验 。
见表 2 ,表 3。
表 2　DH 对大鼠佐剂性关节炎原发性反应的影响( x±s , n=10)
组　别 剂量/(g/ kg) 致炎后足肿胀度/mL
3 h 6 h 12 h 18 h 24 h
生理盐水组 - 0.10±0.02■■ 0.12±0.05■■ 0.08±0.03■■ 0.11±0.05■■ 0.07±0.03■■
模型组 - 0.89±0.08 0.75±0.15 1.05±0.23 1.15±0.10 1.14±0.18
地塞米松组 0.005 0.45±0.02■■ 0.48±0.07■■ 0.51±0.02■■ 0.64±0.10■■ 0.68±0.11■■
DH 低剂量组 1.25 0.80±0.28 0.81±0.25 0.93±0.17 1.02±0.14 0.90±0.32
DH 中剂量组 2.50 0.75±0.25 0.78±0.25 0.80±0.15■ 1.08±0.18 0.82±0.28■■
DH 高剂量组 5.00 0.70±0.30 0.72±0.18 0.75±0.22■■ 0.90±0.09■■ 0.77±0.07■■
　　注:与模型比 , ■P<0.05, ■■P<0.01。
表 3　DH 对大鼠佐剂性关节炎继发性肿胀的影响( x±s , n=10)
组　别 剂量/(g/ kg) 致炎后足肿胀度/mL
10 d 14 d 18 d 22 d 26 d
生理盐水组 - 0.12±0.08■■ 0.07±0.03■■ 0.09±0.07■■ 0.10±0.02■■ 0.08±0.03■■
模型组 - 0.80±0.15 0.89±0.20 1.12±0.23 1.10±0.18 0.95±0.04
地塞米松组 0.005 0.43±0.18■■ 0.50±0.02■■ 0.45±0.16■■ 0.60±0.15■■ 0.58±0.08■■
DH 低剂量组 1.25 0.73±0.15 0.69±0.28 0.88±0.32 0.80±0.29■ 0.78±0.22■
DH 中剂量组 2.50 0.68±0.14 0.59±0.21■■ 0.72±0.21■■ 0.66±0.14■■ 0.64±0.17■■
DH 高剂量组 5.00 0.65±0.07■■ 0.52±0.19■■ 0.68±0.17■■ 0.52±0.20■■ 0.56±0.16■■
　　注:与模型组比 , ■P<0.05, ■■P<0.01。
　　与生理盐水组比 ,模型组肿胀有非常显著性差
异;与模型组比 ,地塞米松组有非常显著性差异。在
原发性反应中 18 h后右侧足跖肿胀达到最高峰 , DH
中剂量组在致炎后 12 h对大鼠足肿胀有显著抑制作
用 ,DH 高剂量组与模型组比较从 12 h始有非常显著
性差异。
与生理盐水组比 ,模型组大鼠继发性足肿胀有非
常显著性差异;与模型组比 ,地塞米松组对抑制大鼠
继发性足肿胀有非常显著性差异 。DH 中 、高剂量组
分别在14 d 、10 d对大鼠继发性足肿胀有非常显著的
抑制作用 ,而DH低剂量组在 22 d始与模型组比有显
著性差异 。
2.3　对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响　小鼠随
机分为 5组:生理盐水组 ,地塞米松组(0.005 g/kg),
DH 低剂量 、中剂量 、高剂量组。各组灌胃给药 ,1次/d ,
连续 7 d ,末次给药 30 min后 ,尾静注1%伊文思蓝生
理盐水溶液 0.1mL/10 g随即灌胃0.6%醋酸0.2 mL/
只致炎 。20 min后脱臼处死小鼠 ,灌胃注入生理盐水
5 mL ,轻揉小鼠腹部 ,使腹腔内染料充分溶于生理盐
水中并混合均匀 ,吸取腹腔洗液约 3 mL ,加生理盐水
至 6 mL ,在3 000 r/min离心15 min ,取上清液 590 nm
比色 ,测定吸光度值。见表 4。
表4　DH 对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响( x±s)
组　别 n 剂量/(g/ kg) 腹腔所透出的染料吸收度值
生理盐水组 10 - 0.61±0.057　　
地塞米松组 10 0.005 0.38±0.038■■
DH 低剂量组 10 1.250 0.58±0.071　　
DH 中剂量组 10 2.500 0.55±0.056■　
DH 高剂量组 10 5.000 0.47±0.092■■
　　注:与生理盐水组比 , ■P <0.05 , ■■P <0.01。
与生理盐水组比 ,地塞米松组和 DH 高剂量组能
非常显著抑制小鼠腹腔毛细血管通透性;DH 中剂量组
能显著抑制小鼠腹腔毛细血管通透性;DH小剂量组则
对小鼠腹腔毛细血管通透性无明显抑制作用。
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3　讨论
关节炎的共同特征是进行性发展的慢性炎症过
程。至于风湿性关节炎的病因迄今尚未明了。治疗
风湿性关节炎药物的主要药效学试验包括抗炎试验
和镇痛试验。其中镇痛试验已报道的较多 ,主要是采
用经典的醋酸扭体法和热板法。本文主要是从抗炎
这一角度切入 ,通过采用蛋清致大鼠足肿胀 、弗氏完
全佐剂诱发大鼠关节炎的原发性反应和继发性肿胀
试验以及小鼠腹腔毛细血管通透性等试验研究其抗
炎作用 。结果表明短毛独活具有较好的抗炎作用。
但是 ,风湿性关节炎的发生和发展过程较为复杂 ,人
与动物的关节又有一定的差异 ,某些炎症又与免疫反
应互相关联 ,这也给药物的研究带来新的挑战 。如果
再从对 COX-2 的选择性抑制作用方面加以考虑的
话 ,将有助于短毛独活抗炎机制的探索。[ 3-4]
参考文献:
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[ 4] 申宝山 , 李玉环.中药熏洗治疗类风湿性关节炎[ J] .山西
中医 , 2008 , 21(1):33.
　作者简介:赵　琦(1978-), 女 , 硕士 , 讲师。 研究方向:中
药药理抗衰老机理及新药研究。
(收稿日期:2010-07-09)
(上接第 812页)
研究显示肺通透性增加所致肺水肿是 ALI早期主要
的病理改变 ,临床常见的致病因素如细菌 、内毒素和
微栓子等都导致肺血管通透性增加从而引起肺泡中
充满富含蛋白质的水肿液 ,因此 ,肺通透性水肿己成
为ALI 的一个标志[ 2] 。
TGF-β家族是一类结构上相关具有激素活性的
多肽 ,是一种多功能的细胞因子[ 3] 。体外实验已经证
实TGF-β1能直接增加内皮单细胞层的通透性[ 4] ,对
动物活体内肺水肿的诱导起关键作用。同时 ,TGF-β1
能减少血管内皮细胞内谷胱甘肽含量而增加其通透
性 ,导致大量的红细胞和炎性细胞进入肺泡腔 ,释放
大量炎症介质 ,导致肺泡炎并破坏肺泡结构[ 5] 。
肺属脏 ,大肠属腑。肺居上 ,大肠居下。中医学
认为本病是由肺壅肠阻所致。邪毒壅肺 ,肺失宣降 ,
则津停成痰 ,或由邪热灼津成痰;痰热阻肺 ,故肺气壅
塞。若热毒壅盛 ,灼伤肺络 ,则可见痰中带血或咯血;
甚则痰热闭窍 ,出现烦燥 、神昏等 。因肺与大肠相表
里 ,痰热阻肺 ,肺气不降 ,必然影响大肠传导 ,致腑实
热结 。而腑气不通 ,又迫使浊气上逆 ,加重肺气壅塞 ,
其结果必为肺壅肠闭 ,肺壅则喘 ,肠闭则满。故本方
应治以通腑除满 、清肺平喘。因燥实内结 ,浊气不通 ,
故以苦寒之大黄为君 ,攻下热结 ,荡涤肠胃积滞。然
燥实内结较甚 ,单用大黄难以攻下 ,故臣以枳实 ,既可
破气除痞 ,消积导滞 ,加强君药通腑之效 ,又可下气开
痞 ,消痰散结。方中又以厚朴下气平喘 、黄芩清肺热 、
杏仁止咳平喘 ,共为佐药 ,使气可下 、热可清 、咳可止 、
喘可平;同时厚朴下气除满 ,杏仁润肠通便 ,配合大
黄 、枳实以加强通腑除满作用;甘草甘缓补中 ,调和诸
药 ,同时缓和大黄 、枳实通腑导滞之猛效 。
本实验给予通腑汤后肺组织损伤明显降低 ,表现
为炎性细胞浸润及肺间质水肿明显减轻。通过直接
观察肺组织中TGF-β1含量证实了通腑汤能降低肺组
织中 TGF-β1的含量 ,以中 、高剂量组效果较好 ,提示
通腑汤可能通过降低 ALI 大鼠肺组织中 TGF-β1 的含
量从而减轻其引起的肺水肿 ,在一定程度上缓解 ALI
病变的发生及发展。但通腑汤调节 TGF-β1的确切分
子生物学机制还有待于进一步深入研究 。
参考文献:
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[ 4] Pittet JF , Griffiths MJ , Geiser T , et al.TGF-β is a critical mediator
of acute lung injury[ J] .J Clin Invest , 2001 , 107:1537-1544.
[ 5] Pittet JF , Griffiths MJ , Geiser T , et al.TGF-β is a critical mediator
of acute lung injur[ J] .J Clin Invest , 2001 , 107(12):1537-1544.
　作者简介:李竹英(1968-), 女 , 医学博士 , 博士后 , 副主任
医师。研究方向:中西医结合防治呼吸系统疾病。
(收稿日期:2010-06-22)
·818·　　　　　　2010年 9月第 30卷第 9期　Jilin Journal of Traditional Chinese Medicine　2010 Vol.30 No.9