全 文 ：独子藤化学成分研究
陈铭祥1， 李国成2， 魏佳纯1， 张智婷1， 黄定冬1， 王定勇1*
(1.广东药学院 药科学院，广东 广州 510006;2.中山大学附属第二医院 药剂科，广东 广州 510120)
收稿日期:2010-05-07
作者简介:陈铭祥(1983 －)，男，硕士生，从事天然药物活性成分研究。Tel:13244819583，E-mail:cmx2003030852@ 126. com
* 通信作者:王定勇(1967 －)，男，博士，教授，从事天然药物活性成分研究。Tel:13112243919，E-mail:wdingyong@ 163. com
摘要:目的 研究独子藤 Celastrus monospermus Roxb.根的化学成分。方法 用乙酸乙酯提取，依次用石油醚、三氯甲烷
和乙酸乙酯萃取，硅胶正相柱色谱及结晶法进行化学成分的分离纯化，通过理化性质和波谱分析鉴定结构。结果 从独
子藤根中分离得到 10 个化合物，鉴定了其中 8 个化合物，分别为木栓酮(1)、28-羟基木栓酮(2)、12α-羟基木栓酮(3)、
Δ5，22 -胆甾烯醇(4)、β-谷甾醇(5)、扁蒴藤素(6)、雷公藤红素(7)、胡萝卜苷(8)。结论 化合物 2，3，4，6，7，8 为首次
从本植物中分离得到，2，3，4 为首次从本属植物中分离得到。
关键词:独子藤;根;化学成分;12α-羟基木栓酮;雷公藤红素
中图分类号:R284. 1 文献标志码:A 文章编号:1001-1528(2011)04-0651-05
Chemical constituents of Celastrus monospermus
CHEN Ming-xiang1， LI Guo-cheng2， WEI Jia-chun1， ZHANG Zhi-ting1， HUANG Ding-dong1， WANG
Ding-yong1*
(1. School of Pharmacy，Guangdong Pharmaceutical College，Guangzhou 510006，China;2. Department of Pharmacy，The Second Hospital of Sun yat-
sen University，Guangzhou 510120，China)
ABSTRACT:AIM To study the chemical constituents of Celastrus monospermus Roxb. METHODS The con-
stituents were extracted with ethyl acetate，partitioned with petroleum ether，chloroform and ethyl acetate in turn，
and isolated and purified by silica gel column chromatography and crystallization，their structures were elucidated
by physico-chemical properties and spectroscopic data. RESULTS Ten compounds were isolated from this plant.
They were identified as friedelane-3-one (1)，28-hydroxyfriedelane-3-one (2)，12α-hydroxy- friedelane-3-one
(3)，3β-hydroxylcholest-5，22-dien (4)，β-sitosterol (5)，pristimerin(6)，celastrol (7)，daucosterol (8)and
other two acyclic compounds. CONCLUSION Compounds 2，3，4，6，7，8 are obtained from this plant for the
first time，and further，compounds 2，3，4 are separated from the genus respectively for the first time.
KEY WORDS:Celastrus monospermus;roots;chemical constituents;12α-hydroxy-friedelane-3-one;celastrol
卫矛科植物大多具有抗肿瘤、抗菌、免疫抑制、
杀虫及细胞毒活性，是寻找天然活性产物的重要来
源［1］。独子藤 Celastrus monospermus Roxb.，别名单
子南蛇藤、大样红藤，是卫矛科南蛇藤属常绿藤本植
物，分布于广东、广西、海南、云南、贵州及印度等地，
主要生长于海拔 1 000 m 以上的森林中［2］。研究表
明独子藤中主要含有生物碱和三萜类成分，其中木
栓烷型三萜类化合物是卫矛科植物化学成分的一个
重要组成部分［3］，据报道，该类化合物具有多种生
物活性，如抗肿瘤、免疫抑制、抗溃疡、抗风湿以及抗
痢疾等活性［4-6］。本课题组一直致力于天然活性产
物的研究与开发［7-11］，为了进一步了解该植物的化
学成分，从该植物中寻找有效的活性成分，本研究对
采自广东阳春的独子藤根进行化学成分研究，从中
分离得到 10 个化合物，并用现代波谱学方法鉴定了
8 个化合物，其中化合物 7，8 为降碳醌甲基三萜类
化合物，具有抗肿瘤、抗氧化、抗炎等多种活性，并且
分别在 2006 年［12］和 2008 年［13］被证实可通过抑制
蛋白酶体活性而发挥抗肿瘤作用，是新型的蛋白酶
体抑制剂，成为目前抗肿瘤研究中的热点;化合物
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1，2，3 为木栓烷型五环三萜类化合物。还有 2 个没
鉴定结构的化合物均为脂肪族化合物(一个为脂肪
酮类，另一个为脂肪醇类)。化合物 2，3，4，6，7，
8 尚未见从本植物中分离得到的相关文献报道，化
合物 2，3，4 尚未见从本属植物中分离得到的相关
文献报道。
1 仪器和材料
XRC-6 显微熔点仪(北京泰克仪器有限公司)，
温度计未校正。Perkin-Elmer Spectrum-100 FT-IR
spectrometer(KBr 压片法)。Bruker Avance III 500
MHz Digital NMR spectrometer(瑞士 Bruker 公司)，
TMS 为内标物。Agilent 6120 型液相色谱-质谱联用
仪(电喷雾电离)。予华 SHZ-D(Ⅲ)循环水式真空
泵(巩义市英峪予华仪器厂)。RE-52CS 旋转蒸发
器(巩义市英峪予华仪器厂)。SK5200H 超声波清
洗器(上海科导超声仪器有限公司)。柱色谱硅胶
(200 ～ 300 目)为青岛海洋化工厂产品，其余试剂均
为分析纯。
独子藤根于 2008 年 9 月采自广东省阳春地区，
经广东药学院中药学院李书渊教授鉴定为独子藤
Celastrus monospermus Roxb.的根。标本存放在广东
药学院药科学院天然药物化学教研室。
2 提取与分离
2. 2 kg独子藤根干燥、粉碎后，用 12 L 乙酸乙
酯超声提取 3 次(分 5 组，每组 440 g 药材和 2. 4 L
溶剂)，滤液合并后浓缩得总浸膏 92. 7 g。浸膏分散
在 1 500 mL蒸馏水中，加少量甲醇，依次用石油醚
(60 ～ 90 ℃)、三氯甲烷、乙酸乙酯萃取，60 ℃以下
减压浓缩、回收溶剂至浸膏状，分别得石油醚萃取物
浸膏(22. 5 g)、三氯甲烷萃取物浸膏(58. 8 g)和乙
酸乙酯萃取物浸膏(7. 0 g)。
石油醚萃取物浸膏用硅胶柱色谱分离，石油醚-
乙酸乙酯(250 ∶ 1 ～ 4 ∶ 1)溶剂体系进行梯度洗脱，
每 500 mL收集 1 流份，经 TLC 跟踪检测，合并相同
流份，并经重结晶得化合物:在洗脱剂体积分数为
250 ∶ 1 部分得一脂肪酮类化合物(30 mg)，在洗脱
剂体积分数为 50 ∶ 1 部分得化合物 1(45 mg)和 4
(25 mg)，在洗脱剂体积分数为 25 ∶ 1 部分得化合物
5(20 mg)，在洗脱剂体积分数为 25 ∶ 2 部分得化合
物 2(50 mg)和一脂肪醇类化合物(8 mg)，在洗脱剂
体积分数为 6 ∶ 1 部分得化合物 3(250 mg)和 6(100
mg)。
三氯甲烷萃取物浸膏用硅胶柱色谱分离，石油
醚-丙酮(20 ∶ 1 ～ 2 ∶ 1)溶剂体系进行梯度洗脱，每
500 mL收集 1 流份，经 TLC 跟踪检测，合并相同流
份，并经重结晶得化合物:在洗脱剂体积分数为 20
∶ 3 部分得化合物 3(45 mg)和 6(80 mg)，在洗脱剂
体积分数为 4 ∶ 1 部分得化合物 7(350 mg)，在洗脱
剂体积分数为 2 ∶ 1 部分得化合物 8(25 mg)。
3 结构鉴定
化合物 1 无色针状结晶(石油醚)，mp 230 ～
232 ℃。Liebermann-Burchard 反应阳性，ESI-MS m/
z 449. 4［M + Na］+，465. 4［M + K］+，因此其相对
分子质量为 426. 4。1H-NMR(CDCl3，500 MHz)δ:
2. 40(1H，m)，2. 26(1H，q)，2. 24(1H，q)，1. 98
(1H，m)，1. 74(1H，m)，1. 69(1H，dd)，1. 19
(3H，s)，1. 05(3H，s)，1. 01(3H，s)，1. 00(3H，
s)，0. 95(3H，s)，0. 88(3H，d)，0. 87(3H，s)，
0. 72(3H，s);13C-NMR(CDCl3，125 MHz)δ:22. 3
(C-1)，41. 5(C-2)，213. 2(C-3)，58. 2(C-4)，
42. 1(C-5)，41. 3(C-6)，18. 2(C-7)，53. 1(C-8)，
37. 5(C-9)，59. 5(C-10)，35. 6(C-11)，30. 5(C-
12)，39. 7(C-13)，38. 3(C-14)，32. 4(C-15)，36. 0
(C-16)，30. 0(C-17)，42. 8(C-18)，35. 3(C-19)，
28. 2(C-20)，32. 8(C-21)，39. 3(C-22)，6. 8(C-
23)，14. 7(C-24)，17. 9(C-25)，18. 7(C-26)，20. 3
(C-27)，32. 1(C-28)，31. 8(C-29)，35. 0(C-30)。
以上数据与文献［14］报道的木栓酮一致，故化合物
1 鉴定为木栓酮。
化合物 2 无色针状结晶(石油醚-乙酸乙酯)，
mp 275 ～ 277 ℃。Liebermann-Burchard 反应阳性，
ESI-MS m/z 443. 4［M + H］+，465. 4［M + Na］+，
481. 3［M + K］+，因此其相对分子质量为442. 4。1H-
NMR (CDCl3， 500 MHz) δ: 3. 63 (2H， s， -
CH2OH)，2. 39(1H，m)，2. 28(1H，q)，2. 25(1H，
q)，1. 96(1H，m)，1. 86(1H，m)，1. 76(1H，m)，
1. 67(1H，dd)，1. 13(3H，s)，0. 99(3H，s)，0. 98
(3H，s)，0. 91(3H，s)，0. 88(3H，d)，0. 86(3H，
s)，0. 72(3H，s);13C-NMR(CDCl3，125 MHz)δ:
22. 5(C-1)，41. 8(C-2)，213. 4(C-3)，58. 5(C-4)，
42. 1(C-5)，41. 5(C-6)，18. 5(C-7)，52. 7(C-8)，
37. 7(C-9)，59. 7(C-10)，35. 7(C-11)，30. 4(C-
12)，39. 6(C-13)，38. 4(C-14)，31. 5(C-15)，29. 4
(C-16)，35. 4(C-17)，39. 7(C-18)，34. 7(C-19)，
28. 4(C-20)，31. 6(C-21)，33. 6(C-22)，7. 1(C-
23)，14. 9(C-24)，18. 3(C-25)，19. 3(C-26)，19. 5
(C-27)，68. 3(C-28)，33. 1(C-29)，34. 5(C-30)。
以上数据与化合物 1 的比较，很明显具有木栓酮母
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核特征，而且是 1 个-CH2OH 代替-CH3，经查阅文献
［15］，确定化合物 2 为 28-羟基木栓酮。
化合物 3 无色针状结晶(石油醚-乙酸乙酯)，
mp 290 ～ 292 ℃。Liebermann-Burchard 反应阳性，
ESI-MS m/z 443. 4［M + H］+，465. 3 ［M + Na］+，
因此其分子量为 442. 4。1H-NMR(CDCl3，500 MHz)
δ:3. 90(1H，dd，J = 4. 5，11. 5 Hz，H-12)，2. 40
(1H，m，H-2)，2. 28(1H，q，H-2)，2. 24(1H，q，
H-4)，1. 96(1H，m，H-1)，1. 90(1H，q，H-18)，
1. 81(1H，m，H-19)，1. 75(1H，m，H-11)，1. 68
(1H，m，H-1)，1. 66(1H，m，H-6)，1. 62(1H，m，
H-19)，1. 21(3H，s，H-28)，1. 05(3H，s，H-26)，
1. 04(3H，s，H-27)，1. 02(3H，s，H-30)，0. 96
(6H，s，H-25，H-29)，0. 88(3H，d，J = 7. 0 Hz，
H-23)，0. 72(3H，s，H-24);13C-NMR(CDCl3，125
MHz)δ:22. 3(C-1)，41. 4(C-2)，212. 8(C-3)，
58. 2(C-4)，41. 9(C-5)，41. 2(C-6)，18. 1(C-7)，
52. 9(C-8)，38. 2(C-9)，59. 4(C-10)，47. 4(C-
11)，73. 1(C-12)，45. 3(C-13)，40. 4(C-14)，33. 5
(C-15)，36. 1(C-16)，30. 8(C-17)，44. 1(C-18)，
38. 7(C-19)，28. 4(C-20)，32. 6(C-21)，39. 6(C-
22)，6. 8(C-23)，14. 6(C-24)，19. 3(C-25)，20. 5
(C-26)，11. 5(C-27)，31. 8(C-28)，35. 0(C-29)，
31. 7(C-30)。以上数据与化合物 1 的比较，很明显
具有木栓酮母核特征，不同之处在于化合物 3 的 C-
12 位上连有一个-OH。HSQC 谱中显示，δH 3. 90
(1H，dd，J = 4. 5，11. 5 Hz)的氢信号与 C-12(δC
73. 1)信号相关，C-12(δC 73. 1)的化学位移是一个
很典型的连有羟基的 C的信号特征;从 HMBC谱中
也可看出这样的远程偶合:δH 3. 90(H-12)与 δC
11. 5(C-27)、δC 47. 4(C-11)、δC 45. 3(C-13)、δC
40. 4(C-14)和 δC 44. 1(C-18)相关，δC 73. 1(C-12)
与 δH 1. 04(H-27)和 δH 1. 90(H-18)相关，故可确定
羟基连在 C-12 上。根据 δH 3. 90 的偶合常数 J =
4. 5，11. 5 Hz，确定 C-12 上的 H信号与 C-11 上的 2
个 H信号分别是 aa和 ae偶合，故确定 H-12 在空间
上的位置为竖键(β构型)，因而 C-12 位上的-OH 为
α构型(eq)，因此可确定化合物 3 为 12α-羟基木栓
酮。
化合物 4 白色针状结晶(石油醚-乙酸乙酯)，
mp 161 ～ 163 ℃。 Liebermann-Burchard 反应阳
性。1H-NMR(CDCl3，500 MHz)δ:5. 35(1H，t)，
5. 15(1H，q)，5. 01(1H，m)，3. 52(1H，m)，1. 02
(3H，d)，1. 01(3H，s)，0. 85(3H，d)，0. 80(3H，
d)，0. 70(3H，s);13C-NMR(CDCl3，125 MHz)δ:
37. 3(C-1)，31. 7(C-2)，71. 8(C-3)，42. 3(C-4)，
140. 8(C-5)，121. 7(C-6)，31. 9(C-7)，31. 9(C-
8)，50. 2(C-9)，36. 5(C-10)，19. 4(C-11)，39. 7
(C-12)，42. 2(C-13)，56. 9(C-14)，24. 4(C-15)，
28. 9(C-16)，55. 9(C-17)，12. 3(C-18)，19. 0(C-
19)，40. 5(C-20)，21. 2(C-21)，138. 3(C-22)，
129. 3(C-23)，51. 2(C-24)，21. 1(C-25)，25. 4(C-
26)，12. 1(C-27)。以上数据与文献［16］报道一
致，故确定化合物 4 为 Δ5，22-胆甾烯醇。
化合物 5 白色针状结晶(石油醚-乙酸乙酯)，
mp 139 ～ 140 ℃。 Liebermann-Burchard 反应阳
性。1H-NMR(CDCl3，500 MHz)δ:5. 35(1H，t)，
3. 51(1H，m)，1. 01(3H，s)，0. 92(3H，d)，0. 85
(3H，t)，0. 83(3H，d)，0. 81(3H，d)，0. 68(3H，
s)。以上数据与文献［17］报道的 β-谷甾醇一致，同
时，与 β-谷甾醇对照品共薄层，在 3 种溶剂系统中两
化合物的薄层行为一致，混合熔点不下降，故确定化
合物 5 为 β-谷甾醇(β-sitosterol)。
化合物 6 橙红色针状结晶(石油醚-乙酸乙
酯)，mp 219 ～ 220 ℃。1H-NMR(500 MHz，CDCl3)
δ:7. 02(1H，d，J = 7. 1 Hz，H-6)，6. 52(1H，s，H-
1)，6. 34(1H，d，J = 7. 1 Hz，H-7)，6. 96(1H，
brs，-OH)，3. 52(3H，s，H-31)，2. 23(3H，s，H-
23)，1. 45(3H，s，H-25)，1. 25(3H，s，H-26)，
1. 17(3H，s，H-30)，1. 08(3H，s，H-28)，0. 52
(3H，s，H-27);13C-NMR(125 MHz，CDCl3)δ:
119. 5(C-1)，178. 2(C-2)，146. 0(C-3)，117. 2(C-
4)，127. 4(C-5)，134. 2(C-6)，118. 1(C-7)，170. 3
(C-8)，43. 0(C-9)，164. 8(C-10)，33. 5(C-11)，
29. 6(C-12)，39. 4(C-13)，45. 0(C-14)，28. 6(C-
15)，36. 4(C-16)，30. 5(C-17)，44. 3(C-18)，30. 9
(C-19)，40. 4(C-20)，29. 9(C-21)，34. 8(C-22)，
10. 2(C-23)，38. 2(C-25)，21. 6(C-26)，18. 3(C-
27)，31. 6(C-28)，178. 7(C-29)，32. 7(C-30)，
51. 5(C-31)。以上数据与文献［18］报道的扁蒴藤
素一致，故确定化合物 6 为扁蒴藤素(pristimerin)。
化合物 7 红色针状结晶(乙酸乙酯-丙酮)，mp
202 ～ 204 ℃。1H-NMR(500 MHz，CDCl3)δ:7. 06
(1H，dd，J = 7. 0，1. 0 Hz，H-6)，6. 49(1H，d，J =
1. 0 Hz，H-1)，6. 32(1H，d，J = 7. 0 Hz，H-7)，
2. 20(3H，s，H-23)，1. 42(3H，s，H-25)，1. 27
(3H，s，H-26)，1. 26(3H，s，H-30)，1. 08(3H，s，
H-28)，0. 57(3H，s，H-27)。13 C-NMR(125 MHz，
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CDCl3)δ:120. 5(C-1)，178. 3(C-2)，120. 3(C-
3)，127. 5(C-4)，147. 0(C-5)，135. 3(C-6)，118. 2
(C-7)，165. 0(C-8)，39. 9(C-9)，172. 6(C-10)，
28. 7(C-11)，29. 3(C-12)，39. 3(C-13)，43. 0(C-
14)，29. 5(C-15)，32. 4(C-16)，45. 3(C-17)，44. 3
(C-18)，33. 8(C-19)，31. 1(C-20)，34. 4(C-21)，
36. 3(C-22)，10. 5(C-23)，38. 4(C-25)，21. 5(C-
26)，18. 7(C-27)，31. 5(C-28)，182. 5(C-29)，
30. 7(C-30)。以上数据与文献［19］报道的雷公藤
红素一致，故确定化合物 7 为雷公藤红素(celas-
trol)。
化合物 8 白色粉末(石油醚-乙酸乙酯)，mp
296 ～ 298 ℃。不溶于石油醚，微溶于氯仿、乙酸乙
酯、乙醇、甲醇，溶于热甲醇、热乙醇;Liebermann-
Burchard反应阳性，Molish 反应阳性;10%硫酸乙醇
溶液喷雾在 110 ℃烘烤显紫红色;与胡萝卜苷对照
品共薄层，比移值一致，混合熔点不下降，故确定该
化合物为胡萝卜苷(daucosterol)。
另外 2 个脂肪族化合物，在多种溶剂系统展开
下，以碘蒸气为显色剂，它们的薄层行为均为一个斑
点。熔点分别为 80 ～ 81℃和 103 ～ 104℃，熔程均在
1 ℃以内，进一步确定它们均为单一化合物。其中，
mp 103 ～ 104 ℃的，IR(KBr，cm －1):2 917，2 849，
1 707，1 472，1 463，729，719，由此推断该化合物
为脂肪酮类化合物。mp 80 ～ 81 ℃的，IR(KBr，
cm －1):3 306，2 955，2 916，2 849，1 471，1 378，
718，由此推断该化合物为脂肪醇类化合物。
4 结果与讨论
4. 1 独子藤是卫矛科南蛇藤属植物，本研究从该植
物中分离了 10 个化合物，3 个木栓烷型三萜类，2 个
降碳醌甲基三萜类，3 个甾体类和 2 个脂肪族类。
木栓烷型三萜是五环三萜类化合物中的一个重要家
族，已有不少文献报道该类化合物具有多种药理活
性，如抗肿瘤、免疫抑制、抗溃疡、抗风湿以及抗痢疾
等药理活性，因而该类化合物一直是各国学者的研
究的热点对象。
4. 2 本研究从独子藤分离得到的 2 个降碳醌甲基
三萜化合物扁蒴藤素和雷公藤红素具有抗肿瘤、抗
氧化、抗炎等多种活性，并且分别在 2006 年和 2008
年被证实可通过抑制蛋白酶体活性而发挥抗肿瘤作
用，是新型的蛋白酶体抑制剂，成为目前抗肿瘤研究
中的热点。
4. 3 目前国内外对独子藤这种植物的化学成分、药
理活性的研究较少，从本研究结果看来，这种植物富
含三萜类成分，且这些成分大多具有显著的药理活
性，因而具有研究和开发潜力的，会成为天然活性产
物的重要来源的。本研究也为开发和利用该植物资
源提供借鉴和参考。
参考文献:
［1］ Sun Cuirong，Hu Hejiao，Xu Runsheng，et al. A new friedelane
type triterpene from Euonymus hederaceus［J］. Molecules，2009，
14:2650-2655.
［2］ 中国科学院中国植物志编辑委员会. 中国植物志(第 45 卷第
3 分册).［M］. 北京:科学出版社，1999，126.
［3］ 刘锡葵，吴大刚. 独籽藤中木栓烷三萜化学成分［J］. 中草
药，1993，24(8):395-397.
［4］ Wang Kuiwu，Zhang Hong，Pan Yuanjiang，et al. Novel triterpe-
noids from Microtropis triflora with antitumor activities［J］. Helv
Chim Acta，2007，90:277-281.
［5］ Hiroshi N，Hideyo S，Teruhisa H，et al. Antitumor triterpenes of
Maytenus diversifolia［J］. Phytochemistry，1986，25(2):479-
485.
［6］ Mauro L G O，Lucienir P D，Gracia D F S，et al. 3-Oxo-12α-
hydroxyfriedelane from Maytenus gonoclada:structure elucidation
by 1H and 13C chemical shift assignments and 2D-NMR spectros-
copy［J］. Magn Reson Chem，2007，45:895-898.
［7］ Wang Dingyong，Li Guocheng，Feng Yujing，et al. Two new
oleanane triterpene glycosides from Gymnema inodorum［J］. J
Chem Res，2008，November:655-657.
［8］ Chen Mingxiang，Wang Dingyong，Feng Yujing，et al. A new
anthraquinone from the root of Rumex japonicus［J］. Chin J Chin
Mat Med，2009，17:2194-2196.
［9］ Wang Dingyong，Liu Engui，Feng Yujing. A new diarylheptanoid
from the bark of Myrica rubra(Ⅱ)［J］. Chin Chem Lett，2008，
19:547-549.
［10］ Wang Dingyong，Liu Engui. A new diarylheptanoid from the bark
of Myrica rubra［J］. Nat Prod Res，2008，22:292-295.
［11］ Wang Dingyong，Liao Huawei，Li Xiaomeng. A new anthraqui-
none from Rheum franzenbachii［J］. Indian J Heterocy Ch，2006，
15:367-370.
［12］ Yang Huanjie，Chen Di，Cui Qiuzhi，et al. Celastrol，a triter-
pene extracted from the Chinese“Thunder of God Vine，”is a po-
tent proteasome inhibitor and suppresses human prostate cancer
growth in nude mice［J］. Cancer Res，2006，66(9):4758-
4765.
［13］ Yang Huanjie，Landis-Piwowar K R，Lu Dayan，et al. Pristime-
rin induces apoptosis by targeting the proteasome in prostate canc-
er cells［J］. J Cell Biochem，2008，103:234-244.
［14］ Vincent C，Ange B，Serge R，et al. Composition and chemical
variability of the triterpene fraction of dichloromethane extracts of
456
2011 年 4 月
第 33 卷 第 4 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
April 2011
Vol. 33 No. 4
cork(Quercus suber L.)［J］. Ind Crops Prod，2002，15:15-22.
［15］ Erasmienne T N，Rene S F，Silvere N，et al. Endodesmiadiol，a
friedelane triterpenoid，and other antiplasmodial compounds from
Endodesmia calophylloides［J］. Chem Pharm Bull，2008，56
(3):374-377.
［16］ Yin Shuaiwen，Shi Yanping，Li Xiaoming，et al. Chemical con-
stituents of Chondria crassicaulis［J］. Nat Prod Res Dev，2007，
19:944-947.
［17］ Zhang Zhengfu，Bian Baolin. Studies on the chemical constitu-
ents in roots of Jasminum sambac(Ⅱ) ［J］. Nat Prod Res Dev，
2007，19:237-239.
［18］ 蒋 毅，李 鹤，罗思奇，等. 南蛇藤活性成分的研究［J］.
中草药，1996，27(2):73-74.
［19］ 王奎武. 三种卫矛科药用植物的化学成分研究［D］. 浙江:
浙江大学，2006.
PHPLC法分离纯化金莲花中荭草苷和牡荆苷
颜 娟1，2， 曲彩红2， 田嘉铭2， 王书华2* ， 安 芳2
(1.河北北方学院附属第一医院，河北 张家口 075029;2.河北北方学院实验中心，河北 张家口 075029)
收稿日期:2010-05-11
基金项目:河北省张家口市科技局(0711046D-9);河北省教育厅科学研究计划项目(2008101)
作者简介:颜 娟(1984 －)，女，硕士生，从事药物代谢动力学研究。Tel:15369318124，E-mail:zhengmd520@ 126. com
* 通信作者:王书华，教授，从事中药有效成分的提取与分离研究。Tel:18931316022，E-mail:shwang1988@ yahoo. com. cn
摘要:目的 建立从金莲花中分离纯化荭草苷和牡荆苷的制备高效液相色谱(PHPLC)方法。方法 采用 AB-8 大孔树
脂，乙酸乙酯萃取，PHPLC方法对金莲花提取液中荭草苷和牡荆苷进行分离纯化。结果 运用薄层色谱法(TLC)定性、
高效液相色谱法(HPLC)定量分析，所得荭草苷和牡荆苷的纯度分别为 98. 8%和 98. 9%。结论 本方法简便，产品纯度高。
关键词:PHPLC;分离纯化;荭草苷;牡荆苷
中图分类号:R284. 2 文献标志码:A 文章编号:1001-1528(2011)04-0655-04
金莲花是毛茛科植物金莲花 Trollius chinensis
Bunge的干燥花及花蕾，主要产于我国西南、西北、
华北、东北及台湾等省区，为民间常用中药，有清热
解毒，消肿明目的功效［1］。荭草苷和牡荆苷属黄酮
碳苷类［2］，为金莲花中主要药效成分，具有抗氧化、
抗癌、抗病毒的药理活性［3-5］，牡荆苷还有抗癌、降
压、抗炎和解痉等作用。对于金莲花药材和其制剂
多以测定荭草苷和牡荆苷控制其质量［6］。
目前关于荭草苷和牡荆苷提取分离方法主要有
聚酰胺柱层析［7］，硅胶柱层析系统分离［8］和高速逆
流分离［9］等。上述单体分离方法步骤繁琐，制备量
低，本实验中金莲花总黄酮提取物经大孔树脂初步
分离后，乙酸乙酯萃取，再采用制备高效液相色谱法
进行单体分离。制备高效液相色谱法进样量大，出
峰时间短，所收集的样品纯度高，并采用 HPLC 随时
检测所收集馏分中成分。因此，本实验对金莲花中荭
草苷和牡荆苷的纯化及单体制备有着重要的意义。
1 仪器与试剂
1. 1 仪器 Agilent 1100 高效液相色谱仪(美国)，
Agilent Preparative HPLC(美国)，GR-202 型十万分
之一电子天平(日本)，HQ-60 型旋涡混合器(北方
同正生物技术发展公司)，高速冷冻离心机(Sig-
ma)，真空冷冻干燥机(Thermo)，电热恒温水槽(上
海精宏实验设备有限公司)，玻璃层析柱(2. 5 cm ×
20 cm)。
1. 2 药品与试剂 野生金莲花采自河北省张家口
坝上地区，经河北北方学院中医学院中药教研室马
淑兰教授鉴定为金莲花 Trollius chinensis Bunge。
乙酸乙酯、丙酮、无水乙醇、三氯甲烷、冰醋酸、
磷酸等为分析纯;薄层色谱硅胶。荭草苷、牡荆苷标
准品(中国药品生物制品鉴定所)，乙腈和甲醇为色
谱纯，所用水为三蒸水(实验中心自制)，羧甲基纤
维素钠(CMC-Na)，AB-8 大孔树脂(天津海光化工
有限公司)。
2 方法
2. 1 金莲花总黄酮的提取［10］ 称取粉碎干燥的金
莲花 50. 0 g，丙酮回流提取 2 次，每次 0. 5 h，滤渣干
燥后，60%乙醇浸泡过夜，回流提取 2 次，每次 1 h，
合并提取液，过滤，减压浓缩至无醇味，浓缩液
10 000 r /min离心，收集上清液，备用。
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